鄭霞林 張玉靜 王艷路 董子舒 胡大星 陸溫

摘要：【目的】研究玉米鐵甲蟲成蟲消化系統(tǒng)，為深入探索該蟲消化生理、殺蟲劑作用機理和研發(fā)新型藥劑提供參考依據(jù)?！痉椒ā炕隗w視鏡和透射電鏡，采用解剖法和組織切片法，研究玉米鐵甲蟲成蟲消化系統(tǒng)結(jié)構(gòu)?！窘Y(jié)果】玉米鐵甲蟲成蟲消化系統(tǒng)分為明顯的前、中、后腸3部分。嗉囊和前胃較發(fā)達。中腸前端較粗，后端較細。馬氏管共有6條。中腸組織由外向內(nèi)可分為縱肌、環(huán)肌、腸壁細胞層、底膜和內(nèi)膜；后腸中的直腸組織可分為縱肌、環(huán)肌和直腸墊細胞層。馬氏管內(nèi)可見8～14個管壁細胞的細胞核?！窘Y(jié)論】玉米鐵甲蟲成蟲消化系統(tǒng)結(jié)構(gòu)的特異性可能是其對寄主植物和環(huán)境適應(yīng)性的結(jié)果。

關(guān)鍵詞： 玉米鐵甲蟲；消化器官；組織形態(tài)

中圖分類號： Q964 文獻標志碼：A 文章編號：2095-1191（2016）02-0223-04

0 引言

【研究意義】玉米鐵甲蟲（Dactylispa setifera Chapuis）屬鞘翅目（Coleoptera）鐵甲科（Hispidae），是玉米上的一種重要食葉害蟲。在廣西西部和西南部，由于高溫干燥的氣候條件，玉米鐵甲蟲在百色市（劉忠調(diào)，1965；韋群花和黃世希，2000）、大新縣（陸文和李秋玲，1978）、天峨縣（韋海燕等，2006）、鳳山縣（賀春久和陸世鵬，2007）、崇左市（藍妮春和羅玉青，2008）、河池市（陸美生和陸燕，2008）和平果縣（覃素能和周進喜，2014）等地區(qū)域性暴發(fā)為害，嚴重時發(fā)生面積達6.42×104 ha（蘭雪瓊，2007），嚴重威脅玉米的安全生產(chǎn)及農(nóng)民的經(jīng)濟收入。對玉米鐵甲蟲成蟲消化系統(tǒng)進行研究，不僅可以為深入探索該蟲消化生理和殺蟲劑作用機理打下基礎(chǔ)，還可為研發(fā)新型藥劑提供參考依據(jù)，具有重要的理論及實用價值?！厩叭搜芯窟M展】目前，針對玉米鐵甲蟲的研究主要集中在生物生態(tài)學(xué)特性（孫恢鴻，1959；陸溫和張永強，1989，1991；張永強和陸溫，1990；陸溫等，2001，2003）、發(fā)生規(guī)律及防治（顧曉光和姚旭，1985；梁海孫和吳善業(yè)，1989；李品清等，1990；牙韓昂等，1992；秦昌文等，2003）方面。研究發(fā)現(xiàn)該蟲在廣西一年發(fā)生兩代，以成蟲在玉米地附近背風(fēng)向陽處的雜草中越冬，越冬期間溫度適宜時還會活動取食（孫恢鴻，1959）。自然變溫條件下，玉米鐵甲蟲各蟲態(tài)的發(fā)育起點溫度分別為：卵（12.58±0.81）℃，幼蟲（13.19±0.54）℃，蛹（18.99±0.30）℃，卵至成蟲羽化期（15.11±0.34）℃；有效積溫分別為：卵86.74 ℃·d，幼蟲202.63 ℃·d，蛹73.21 ℃·d，卵至成蟲羽化期362.66 ℃·d（陸溫和張永強，1991）。單株玉米每增加1粒卵，產(chǎn)量損失率為0.26%；在3750～4500 kg/ha生產(chǎn)水平下玉米鐵甲蟲的防治指標為20～25粒卵/株（陸溫等，2003）。針對其防治，顧曉光和姚旭（1985）提倡以農(nóng)業(yè)防治為主，生物防治為輔，化學(xué)防治作為應(yīng)急措施展開綜合防控?！颈狙芯壳腥朦c】玉米鐵甲蟲應(yīng)急防控的化學(xué)藥劑雖然較多，但還需加大有針對性的低毒、高效、無污染藥劑研發(fā)力度，目前對玉米鐵甲蟲消化系統(tǒng)方面的研究尚無報道，這正是研究該蟲消化生理、殺蟲劑作用機理及研發(fā)新型藥劑的前提?！緮M解決的關(guān)鍵問題】基于體視鏡和透射電鏡，采用解剖法和組織切片法研究玉米鐵甲蟲成蟲消化系統(tǒng)，以期弄清其消化系統(tǒng)結(jié)構(gòu)，為深入探索該蟲消化生理、殺蟲劑作用機理和研發(fā)新型藥劑提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1. 1 試驗材料

供試蟲源：于2015年5月在廣西武鳴縣兩江鎮(zhèn)玉米地（東經(jīng)108°21′44″，北緯23°32′75″）采集玉米鐵甲蟲成蟲，帶回實驗室后置于透明塑料盒（R=15.0 cm，H=7.5 cm）中，在室溫下繼續(xù)用新鮮玉米葉片飼養(yǎng)備用。

儀器設(shè)備：解剖針、蠟盤（自制）、解剖剪、手術(shù)刀、鑷子、徠卡體視顯微鏡（M205C， Leica microsystems， Germany）、透射電鏡（TECNA1G2 20S-TWIN， Philips Electronics， Nederland）。

1. 2 試驗方法

1. 2. 1 消化道及馬氏管構(gòu)造的解剖觀察 將玉米鐵甲蟲成蟲置于盛水蠟盤中，用解剖針固定。在徠卡M205C型體視顯微鏡下用解剖剪和手術(shù)刀沿背中線剪開成蟲胸腹部。用鑷子撐開胸腹部兩側(cè)后用解剖針固定，逐步剔除體內(nèi)脂肪顆粒、肌肉及氣管等，僅保留完整的消化系統(tǒng)。拍攝消化系統(tǒng)結(jié)構(gòu)后用軟件（Leica Application Suite Version 4.6.0， Leica microsystems， Germany）測量該蟲消化系統(tǒng)中各組織結(jié)構(gòu)的長寬。

1. 2. 2 消化道及馬氏管組織形態(tài)觀察 將解剖出的中腸、后腸和馬氏管用20 mL 2.5%戊二醛溶液固定數(shù)小時，緩沖液沖洗3次，餓酸固定數(shù)小時后，乙醇梯度脫水，包埋、切片、染色，在透射電鏡下觀察其橫切面并拍攝照片。

2 結(jié)果與分析

2. 1 玉米鐵甲蟲成蟲消化道結(jié)構(gòu)

玉米鐵甲蟲成蟲消化道分為明顯的前、中、后腸3部分（圖1）。前腸半透明，偏淡黃，前端與口器相連接部位為咽，其后一段細小的管狀物為食道，長0.8±0.3 mm，直徑0.2±0.1 mm。食道后部膨大的部分為嗉囊，長1.2±0.3 mm，直徑0.5±0.2 mm。嗉囊后部與中腸連接處的彭大部分為前胃，長0.5±0.2 mm，直徑0.4±0.1 mm。中腸半透明，乳白色，長4.4±0.6 mm。中腸前段較粗，長2.3±0.5 mm，直徑0.3±0.1 mm，向后變細，但變細部分大小較一致，長1.9±0.6 mm，直徑0.3±0.2 mm。后腸分為回腸、結(jié)腸和直腸3部分，回腸和直腸膨大，乳白色，其長分別為0.6±0.2和1.9±0.6 mm，直徑分別為0.2±0.1和0.3±0.2 mm；結(jié)腸縊縮，偏淡綠色，長0.5±0.1 mm，直徑0.3±0.1 mm。

2. 2 玉米鐵甲蟲成蟲馬氏管結(jié)構(gòu)

馬氏管由6條細長、半透明、末端封閉的管狀組成，直徑約0.06 mm。前2條馬氏管分別單獨開口于中后腸交界處兩側(cè)；后4條均著生于中后腸交界處一側(cè)，由2條基管分支而成。基管長約0.15 mm，直徑約0.075 mm，兩側(cè)基管在中部匯合。馬氏管的走向極不規(guī)則，可分布至中腸前端及食道后端。分布在一側(cè)的4條馬氏管常附著在前后腸表面（圖2）。

2. 3 玉米鐵甲蟲成蟲消化器官的組織形態(tài)

中腸組織由外向內(nèi)可分為縱肌、環(huán)肌、腸壁細胞層底膜和內(nèi)膜。腸壁細胞呈柱形，長0.0264～0.0330 mm，寬0.0132～0.0198 mm，內(nèi)緣不規(guī)則。腸壁細胞的細胞核大而明顯，約占細胞體積的1/4～1/3。再生細胞亦較明顯。環(huán)肌較薄，不發(fā)達（圖3-A）。

后腸的直腸組織由外向內(nèi)可分為縱肌、環(huán)肌和直腸墊細胞層。環(huán)肌較發(fā)達，直腸墊細胞層呈不規(guī)則狀，直腸墊6個（圖3-B）。馬氏管橫切面可明顯觀察到8～14個管壁細胞的細胞核，馬氏管外包裹一層很薄的底膜（圖3-C）。

3 討論

地球上的昆蟲種類數(shù)量眾多，為了在復(fù)雜的環(huán)境下生存，不同種類昆蟲口器也隨之發(fā)生了較大變化，因此可通過消化道的形態(tài)和生理學(xué)了解不同口器類型昆蟲的食性及其與寄主間的適應(yīng)性進化。如快速大量取食的植食性昆蟲消化道通常較寬短，且具有強大的肌肉組織和明顯抵御侵蝕的保護措施（中腸部位無表皮內(nèi)層）。本研究發(fā)現(xiàn)玉米鐵甲蟲成蟲嗉囊和前胃較短，但具發(fā)達的肌肉。從消化生理的角度分析，植食性昆蟲需要取食更多的食物，因為植物葉片的營養(yǎng)價值較低。與此同時，較短的消化道未能提供足夠的儲存空間，因為食物可以隨時獲取。至于嗉囊和前胃具發(fā)達肌肉可能與玉米鐵甲蟲取食較硬食物有關(guān)，因為發(fā)達肌肉便于提供足夠的動力磨碎食物。

觀察發(fā)現(xiàn)，玉米鐵甲蟲中腸前段較粗，向后逐漸趨細。從消化生理的角度，推測由于食物主要含有糖類和蛋白質(zhì)聚合體，基于消化酶的酶促反應(yīng)可降解這些聚合體，進一步通過該腸道的特殊結(jié)構(gòu)，減緩固體食物在中腸的流動速度，有效促進消化酶與食物充分混合降解，便于吸收。玉米鐵甲蟲圍食膜表面光滑致密，無小孔和縫隙，僅允許小分子通過，可能是為進一步阻止病原菌、食物顆粒和他感化合物（如單寧酸）等進入，因為如果圍食膜遭到破壞，利用營養(yǎng)的能力就會下降，其生長發(fā)育將會受到抑制（Lehane， 1997）。

后腸腸壁較中腸薄，可能是為了更利于水分和養(yǎng)分的吸收（Gillott， 1995）。玉米鐵甲蟲成蟲的馬氏管共有6根，前2根開口于中腸上，后4根在基部匯合一起，與葉甲科小螢葉甲屬（Galerucella）極為相似（北京農(nóng)業(yè)大學(xué)，1981），提示葉甲科與鐵甲科在系統(tǒng)進化上有較近的親緣關(guān)系。另外，馬氏管部分附著于后腸上，更有利于回收水分，調(diào)節(jié)體內(nèi)滲透壓，以適應(yīng)高溫干燥的氣候環(huán)境。

本研究結(jié)果提示，玉米鐵甲蟲成蟲消化系統(tǒng)具備較強消化和吸收營養(yǎng)的能力，可能是其與寄主和環(huán)境相適應(yīng)的結(jié)果。根據(jù)其消化和吸收營養(yǎng)物質(zhì)的方式，認為下一步仍需重點研發(fā)高效、低毒和無殘留的胃毒型藥劑。

4 結(jié)論

玉米鐵甲蟲成蟲消化系統(tǒng)結(jié)構(gòu)的特異性可能是其對寄主植物和環(huán)境適應(yīng)性進化的結(jié)果。

參考文獻：

北京農(nóng)業(yè)大學(xué). 1981. 昆蟲學(xué)通論（下）[M]. 北京：農(nóng)業(yè)出版社：445-506.

Beijing Agricultural University. 1981. An Outline of Entomology （Vol. 2）[M]. Beijing： Agricultural Press： 445-506.

顧曉光，姚旭. 1985. 玉米鐵甲蟲發(fā)生規(guī)律及防治研究[J]. 貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)，（6）： 39-42.

Gu X G， Yao X. 1985. Occurrence regularity and control in Dactylispa setifera Chapuis[J]. Guizhou Agricultural Science， （6）： 39-42.

賀春久，陸世鵬. 2007. 2006年鳳山縣砦牙鄉(xiāng)玉米鐵甲蟲發(fā)生嚴重[J]. 廣西植保，20（3）： 39.

He C J， Lu S P. 2007. Outbreak of Dactylispa setifera Chapuis at Biya town of Fengshan County in 2006[J]. Guangxi Plant Protection， 20（3）： 39.

藍妮春，羅玉青. 2008. 近年崇左市玉米鐵甲蟲發(fā)生特點與防治對策[J]. 廣西植保，21（1）： 32-34.

Lan N C， Luo Y Q. 2008. Occurrence features and control strategy of management of Dactylispa setifera Chapuis in Chongzuo City[J]. Guangxi Plant Protection， 21（1）： 32-34.

蘭雪瓊. 2007. 玉米鐵甲蟲近年在廣西的發(fā)生演變態(tài)勢及相關(guān)因子分析[J]. 中國植保導(dǎo)刊，27（5）： 18-19.

Lan X Q. 2007. Occurrence of Dactylispa setifera Chapuis in Guangxi and its related factor analysis in recent years[J]. China Plant Protection， 27（5）： 18-19.

李品清，農(nóng)恒科，農(nóng)文興，陳桂新. 1990. 幾種農(nóng)藥防治玉米鐵甲蟲試驗[J]. 廣西植保，（1）： 16-17.

Li P Q， Nong H K， Nong W X， Chen G X. 1990. Control effects of some insecticides on Dactylispa setifera Chapuis [J]. Guangxi Plant Protection，（1）： 16-17.

梁海孫，吳善業(yè). 1989. 氰戊菊酯、殺蟲雙防治玉米鐵甲蟲試驗初報[J]. 廣西植保，（1）： 35.

Liang H S， Wu S Y. 1989. Control effect of fenvalerate and dimehypo on Dactylispa setifera Chapuis[J]. Guangxi Plant Protection，（1）： 35.

劉忠調(diào). 1965. 百色地區(qū)玉米鐵甲蟲的初步觀察[J]. 廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)，（5）： 49-50.

Liu Z D. 1965. Preliminary observation on Dactylispa setifera Chapuis in Baise， Guangxi[J]. Guangxi Agricultural Science， （5）： 49-50.

陸美生，陸燕. 2008. 2007年河池市玉米鐵甲蟲偏重發(fā)生原因分析及防治[J]. 廣西農(nóng)學(xué)報，23（5）： 48-50.

Lu M S， Lu Y. 2008. The reason analysis and control for Dactylisa setifera serious occurrence at Hechi City in 2007 [J]. Journal of Guangxi Agriculture， 23（5）： 48-50.

陸溫，張永強，黃崇科. 2003. 玉米鐵甲蟲的防治指標研究[J]. 廣西農(nóng)業(yè)生物科學(xué)，22（1）： 29-31.

Lu W， Zhang Y Q， Huang C K. 2003. Study on the economic threshold of Dactylispa setifera[J]. Journal of Guangxi Agricultural and Biological Science， 22（1）： 29-31.

陸溫，張永強，黃崇科. 2001. 玉米鐵甲蟲自然種群生命表的初步研究[J]. 廣西農(nóng)業(yè)生物科學(xué)，20（2）： 98-101.

Lu W， Zhang Y Q， Huang C K. 2001. Study on the life table of nature population of Dactylispa setifera[J]. Journal of Guangxi Agricultural and Biological Science， 20（2）： 98-101.

陸溫，張永強. 1991. 玉米鐵甲蟲對溫度反應(yīng)的初步研究[J]. 西南農(nóng)業(yè)學(xué)報，4（2）： 85-90.

Lu W， Zhang Y Q. 1991. Effect of temperature on beetle Dactylispa setifera[J]. Southwest China Journal of Agricultural Science， 4（2）： 85-90.

陸溫，張永強. 1989. 玉米鐵甲蟲生物學(xué)和生態(tài)學(xué)研究[J]. 廣西植保，（1）： 33-34.

Lu W， Zhang Y Q. 1989. Biology and ecology of Dactylispa setifera Chapuis[J]. Guangxi Plant Protection，（1）： 33-34.

陸文，李秋玲. 1978. 大新縣玉米鐵甲蟲的發(fā)生及防治調(diào)查[J]. 廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)，（2）： 37-41.

Lu W， Li Q L. 1978. Investigation on occurrence and control of Dactylispa setifera Chapuis in Daxin， Guangxi[J]. Guangxi Agricultural Science，（2）： 37-41.

秦昌文，覃保榮，胡明鈺. 2003. 廣西玉米鐵甲蟲發(fā)生為害規(guī)律及其防治技術(shù)應(yīng)用[J]. 廣西植保，16（1）： 21-22.

Qin C W， Qin B R， Hu M Y. 2003. Investigation on occurrence regularity of Dactylispa setifera Chapuis and its control technique in Guagnxi[J]. Guangxi Plant Protection， 16（1）： 21-22.

覃素能，周進喜. 2014. 平果縣玉米鐵甲蟲發(fā)生情況及防治對策[J]. 廣西植保，27（4）： 37-39.

Qin S N， Zhou J X. 2014. Occurrence and control of Dactylispa setifera Chapuis in Pingguo County[J]. Guangxi Plant Protection， 27（4）： 37-39.

孫恢鴻. 1959. 桂西南玉米鐵甲蟲初步研究[J]. 昆蟲知識，（5）：148-150.

Sun H H. 1959. Preliminary study on Dactylispa setifera Chapuis in Southwest Guangxi[J]. Chinese Bulletin of Entomology， （5）：148-150.

韋海燕，韋發(fā)才，楊再豪，莫生華，羅美云. 2006. 天峨縣玉米鐵甲蟲的發(fā)生與防治[J]. 廣西植保，19（3）： 25-27.

Wei H Y， Wei F C， Yang Z H， Mo S H， Luo M Y. 2006. Occurrence and control of Dactylispa setifera Chapuis in Tiane County， Guangxi[J]. Guangxi Plant Protection， 19（3）： 25-27.

韋群花，黃世希. 2000. 百色地區(qū)玉米鐵甲蟲大發(fā)生[J]. 中國植保導(dǎo)刊，20（3）： 42.

Wei Q H， Huang S X. 2000. Outbreak of Dactylispa setifera Chapuis in Baise， Guangxi[J]. China Plant Protection， 20（3）： 42.

牙韓昂，石吉朝，劉祚勇. 1992. 98%巴丹原粉不同施藥方式對玉米鐵甲蟲幼蟲防治試驗[J]. 廣西植保，（1）： 39.

Ya H A， Shi J C， Liu Z Y. 1992. Different application methods of cartap for Dactylispa setifera Chapuis larvae[J]. Guangxi Plant Protection，（1）： 39.

張永強，陸溫. 1990. 玉米鐵甲蟲生物學(xué)特性研究[J]. 西南農(nóng)業(yè)學(xué)報，3（2）： 63-67.

Zhang Y Q， Lu W. 1990. Study on the biological characteristics of Dactylispa setifera[J]. Southwest China Journal of Agricultural Science， 3（2）： 63-67.

Gillott C. 1995. Entomology[M]. New York： Plenum Press.

Lehane M J. 1997. Peritrophic matrix structure and function[J]. Annual Review of Entomology， 42（42）： 525-550.

（責(zé)任編輯 麻小燕）