王寶維　隋　麗　岳　斌　葛文華　張名愛　張開磊　賈玉輝　史雪萍

(青島農(nóng)業(yè)大學優(yōu)質(zhì)水禽研究所，國家水禽產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系營養(yǎng)與飼料功能研究室，青島266109)

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發(fā)酵葡萄籽粕對5～12周齡五龍鵝消化生理、免疫器官指數(shù)和抗氧化指標的影響

王寶維隋麗岳斌葛文華張名愛張開磊賈玉輝史雪萍

(青島農(nóng)業(yè)大學優(yōu)質(zhì)水禽研究所，國家水禽產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系營養(yǎng)與飼料功能研究室，青島266109)

摘要：本試驗旨在研究飼糧中不同水平發(fā)酵葡萄籽粕對5～12周齡五龍鵝消化生理、免疫器官指數(shù)和血清抗氧化指標的影響，以確定發(fā)酵葡萄籽粕使用效果和適宜添加水平。選用5周齡五龍鵝288只，隨機分為6個組，每個組6個重復，每個重復8只鵝(公母各占1/2)。對照組(Ⅰ組)飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗組在基礎(chǔ)飼糧中分別添加2%(Ⅱ組)、4%(Ⅲ組)、6%(Ⅳ組)、8%(Ⅴ組)、10%(Ⅵ組)的發(fā)酵葡萄籽粕。試驗期8周。結(jié)果表明：1)與對照組相比，Ⅴ組十二指腸和空腸中淀粉酶、胰蛋白酶、胰脂肪酶及胰腺中淀粉酶、胰蛋白酶活性極顯著提高(P<0.01)，Ⅳ組胰腺中胰脂肪酶活性極顯著提高(P<0.01)，Ⅴ組胃蛋白酶活性顯著提高(P<0.05)。2)與對照組相比，Ⅳ組腸道中大腸桿菌數(shù)量顯著降低(P<0.05)，Ⅴ組腸道中乳酸桿菌數(shù)量顯著提高(P<0.05)，Ⅳ、Ⅴ組之間差異不顯著(P>0.05)。3)與對照組相比，Ⅳ組腸絨毛高度顯著提高(P<0.05)，Ⅳ組肌層厚度顯著提高(P<0.05)，Ⅴ組隱窩深度極顯著降低(P<0.01)。4)各組免疫器官指數(shù)差異不顯著(P>0.05)。與對照組相比，Ⅴ組血清總抗氧化能力極顯著提高(P<0.01)；Ⅳ組血清丙二醛含量極顯著降低(P<0.01)，Ⅴ組血清總超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶活性極顯著提高(P<0.01)。由此可見，發(fā)酵葡萄籽粕能顯著提高5～12周齡五龍鵝消化酶活性，優(yōu)化腸道組織結(jié)構(gòu)，提高鵝的抗氧化能力，對免疫器官指數(shù)沒有影響。建議飼糧中發(fā)酵葡萄籽粕適宜添加水平為6%～8%。

關(guān)鍵詞：發(fā)酵葡萄籽粕；鵝；消化生理；免疫器官指數(shù)；抗氧化指標

葡萄籽粕是由葡萄酒廠下腳料壓榨葡萄籽油的副產(chǎn)品構(gòu)成。葡萄籽粕通過微生物發(fā)酵解決其抗營養(yǎng)因子及過量木質(zhì)素問題。益生菌作為重要綠色飼料添加劑，能夠改善宿主腸道內(nèi)環(huán)境，調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)平衡和誘導宿主腸道免疫反應，替代抗生素，增強抗氧化能力。將發(fā)酵葡萄籽粕應用于飼料中，對于減少閑置資源、開發(fā)新型飼料資源具有重要經(jīng)濟價值和社會意義。好氧益生菌如芽孢桿菌等進入動物胃腸道后耗氧，能夠抑制有害菌，減少腸道疾病，提高機體抗病能力，研究表明，益生菌能降低機體內(nèi)大腸桿菌的數(shù)量，提高腸道內(nèi)乳酸桿菌的數(shù)量[1-5]。益生菌能促進動物機體的消化酶分泌，加強物質(zhì)代謝，尤其是芽孢桿菌，枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌具有較強的蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶活性[6-7]。王洪瑞[8]研究表明，豆粕組合發(fā)酵物能夠顯著提高仔豬十二指腸、空腸和回腸內(nèi)容物的蛋白酶活性，并能明顯提高仔豬結(jié)腸內(nèi)乳酸菌與大腸桿菌比值。邱良偉[9]研究表明，發(fā)酵棉粕能夠提高肉仔雞絨毛高度，降低隱窩深度，有效優(yōu)化腸道結(jié)構(gòu)，提高腸道消化吸收能力，并且能夠顯著提高免疫器官指數(shù)。葡萄籽粕中含有大量的多酚類物質(zhì)，多酚類物質(zhì)中原花青素(OPC)為主要物質(zhì)，具有超強抗氧化能力，是維生素E的50倍，是維生素C的20倍，它能清除體內(nèi)過多的自由基，其抗氧化能力已得到國際公認[10]。邊玲等[11]研究表明，葡萄籽原花青素可增強機體組織抗氧化酶系統(tǒng)的活性，從而增強抗氧化能力，減少過氧化脂質(zhì)的生成。張樂樂[12]研究表明，葡萄籽油能夠提高小白鼠的肝臟、腎臟器官谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物酶的活性，具有一定抗氧化作用。朱立國[13]研究表明，微生物發(fā)酵生產(chǎn)的飼料中的有益菌能夠調(diào)節(jié)肉鴨體內(nèi)的微生態(tài)平衡，增強肉鴨的抗病能力。迄今為止，國內(nèi)外關(guān)于葡萄籽粕對于人和動物的抗氧化功能、發(fā)酵飼料對動物消化生理影響已經(jīng)進行了研究，但發(fā)酵葡萄籽粕對鵝消化酶活性、腸道微生物、消化器官及組織結(jié)構(gòu)、抗氧化功能的影響的研究仍處于空白。本試驗以5～12周齡五龍鵝為試驗對象，通過研究不同水平發(fā)酵葡萄籽粕對鵝消化生理、腸道微生物、免疫器官指數(shù)與抗氧化指標的影響，以確定鵝對發(fā)酵葡萄籽粕利用效果與最適宜添加水平，豐富葡萄籽粕飼料營養(yǎng)價值數(shù)據(jù)庫，為開發(fā)利用葡萄籽粕飼料資源和指導養(yǎng)鵝生產(chǎn)提供理論依據(jù)。

1材料與方法

1.1試驗材料

葡萄籽粕粗纖維(CF)含量50.81%，粗蛋白質(zhì)(CP)含量11.52%，鈣含量0.55%，磷含量0.22%，市場選購。發(fā)酵葡萄籽粕由本實驗室發(fā)酵制備，由草酸青霉(F67)、枯草芽孢桿菌、釀酒酵母菌和乳酸菌復合發(fā)酵葡萄籽粕(葡萄籽粕+輔料)制成；其產(chǎn)品營養(yǎng)成分為：CF含量35.99%，CP含量8.35%，鈣含量0.59%，總磷含量0.49%，小肽(1 000 u以下)含量1.78%，經(jīng)毒理學試驗證明該產(chǎn)品安全無毒。試驗鵝由國家水禽產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系示范基地萊陽天森豁眼鵝繁育中心提供。

1.2試驗設(shè)計

選擇5周齡健康、體重均勻一致的五龍鵝288只，采用隨機分配編號法，隨機分為6個組，每組6個重復，每個重復8只(公母各占1/2)。Ⅰ組為對照組，飼喂基礎(chǔ)飼糧；試驗組在基礎(chǔ)飼糧中分別添加2%(Ⅱ組)、4%(Ⅲ組)、6%(Ⅳ組)、8%(Ⅴ組)、10%(Ⅵ組)的發(fā)酵葡萄籽粕。試驗期為8周。

1.3試驗飼糧

基礎(chǔ)飼糧參照NRC《家禽營養(yǎng)需要量》(1994年版)設(shè)計。同時每組飼糧營養(yǎng)水平按照能量、CP、鈣、磷等一致的原則來設(shè)計，試驗飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

1.4飼養(yǎng)管理

試驗前對鵝舍進行全面消毒；全期采取舍飼，地面厚墊料分欄飼養(yǎng)；試驗鵝自由飲水和采食；少添勤喂；注意經(jīng)常觀察鵝群的生長狀況。

1.5樣品采集與處理

12周齡初，從每個重復隨機抽取2只鵝(公母各占1/2)，共計72只，飼養(yǎng)試驗結(jié)束時，翅靜脈采血10 mL，3 000 r/min離心15 min制得血清樣品。屠宰放血處死后，迅速剖開腹腔，立即結(jié)扎腸道各部分的分界，取盲腸于滅菌的離心管中，-40 ℃冷凍保存。摘取全部消化道，分離腺胃、十二指腸、胰腺、空腸，用液氮速凍，并轉(zhuǎn)至-20 ℃的冰箱內(nèi)保存?zhèn)溆?。取其胸腺、脾臟、法氏囊，用濾紙吸取多余水分和血液，剔去多余組織、脂肪，稱重。

腺胃內(nèi)容物上清液的制備：腺胃室溫下解凍，將采集的內(nèi)容物樣品用4 ℃的去離子水按其重量10倍體積稀釋，低溫勻漿后離心15 min(3 000 r/min)得上清液分裝-20 ℃冰箱中保存待用。

胰腺上清液的制備：胰腺解凍后從頭、體、尾3個部位采取胰腺樣品，用其重量10倍體積的4 ℃去離子水稀釋，低溫下研碎并4 ℃離心20 min(3 000 r/min)得上清液分裝-20 ℃冰箱中保存待用。

十二指腸、空腸內(nèi)容物上清液的制備：置室溫下的小腸在完全解凍前沿腸管縱向剪開，樣品均用10倍體積的4 ℃去離子水稀釋。稀釋液勻漿45 s(1 200 r/min)，勻漿玻璃管外設(shè)冰浴。4 ℃下離心15 min(3 000 r/min)得上清液分裝-20 ℃冰箱中保存待用。

1.6消化酶活性指標測定

胃蛋白酶(腺胃)、胰蛋白酶(胰腺、十二指腸、空腸)、淀粉酶(胰腺、十二指腸、空腸)、胰脂肪酶(胰腺、十二指腸、空腸)的活性，試劑盒購自南京建成生物工程研究所，具體測定方法參照說明書進行。

表1　試驗飼糧組成及營養(yǎng)水平(風干基礎(chǔ))

1)多維素和微量元素為每千克飼糧提供The multivitamin and trace elements provided the following per kg of diets：煙酸 nicotinic acid 65 mg，泛酸 pantothenate 15 mg，葉酸 folic acid 0.5 mg，VD3200 IU，VA 1 500 mg，VB12.2 mg，VB25.0 mg，VB62 mg，VE 12.5 mg，VK31.5 mg，生物素 biotin 0.2 mg，膽堿 choline 1 000 mg，F(xiàn)e 85 mg，Zn 80 mg，Mn 80 mg，I 0.42 mg，Se 0.3 mg，Co 2.5 mg，Cu 6 mg。

2)營養(yǎng)水平為計算值。Nutrient levels were calculated values.

1.7腸道微生物測定

取室溫解凍后盲腸1 g內(nèi)容物于盛有9 mL滅菌稀釋液的滅菌試管中，用漩渦振蕩器混勻，制成10-1稀釋液，用微量移液槍準確吸取該稀釋液1 mL于盛有9 mL事先滅菌的稀釋液試管中，用旋渦振蕩器振蕩1～2 min，制成10-2稀釋液，依次進行10-5～10-3倍稀釋。每個稀釋度各3滴分別接種于相應的培養(yǎng)基上，每個梯度設(shè)2個重復，其中大腸桿菌采用伊紅美藍瓊脂培養(yǎng)基(EMB培養(yǎng)基)，雙歧桿菌采用雙歧桿菌選擇性培養(yǎng)基(BBL培養(yǎng)基)，乳酸桿菌采用乳酸細菌培養(yǎng)基(MRS培養(yǎng)基)，其中大腸桿菌37 ℃有氧培養(yǎng)24 h后進行菌落計數(shù)，乳酸桿菌和雙歧桿菌35 ℃厭氧培養(yǎng)48 h。以30～300個菌落的稀釋度作為計數(shù)用。細菌數(shù)量采用平板菌落計數(shù)法進行統(tǒng)計，按公式(每克腸道內(nèi)容物中細菌數(shù)量=菌落數(shù)×滴數(shù)×稀釋倍數(shù))計算出每克內(nèi)容物中的細菌數(shù)量，最后以每克腸道內(nèi)容物中細菌個數(shù)的對數(shù)值[lg(CFU/g)]表示。

1.8抗氧化指標測定

血清總抗氧化能力(T-AOC)、總超氧化物歧化酶(T-SOD)活性、GSH-Px活性和丙二醛(MDA)含量均用試劑盒測定，試劑盒購自南京建成生物工程研究所，具體測定方法參照說明書進行。

1.9統(tǒng)計分析

用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析。顯著性檢驗采用LSD法多重比較，試驗數(shù)據(jù)以“平均值±標準差”表示。P<0.05和P<0.01分別為差異顯著和極顯著水平。

2結(jié)果與分析

2.1飼糧中不同水平發(fā)酵葡萄籽粕對鵝消化酶活性的影響

由表2可知，Ⅴ組的十二指腸中淀粉酶、胰蛋白酶、胰脂肪酶活性最高，極顯著高于對照組(P<0.01)，Ⅳ、Ⅴ組之間胰蛋白酶活性差異不顯著(P>0.05)；Ⅴ組的空腸中淀粉酶、胰蛋白酶、胰脂肪酶活性最高，極顯著高于對照組(P<0.01)，Ⅳ、Ⅴ組之間淀粉酶、胰脂肪酶活性差異不顯著(P>0.05)；Ⅴ組的胰腺中淀粉酶、胰蛋白酶活性最高，極顯著高于對照組(P<0.01)，Ⅳ組的胰腺中胰脂肪酶活性最高，極顯著高于對照組(P<0.01)，Ⅳ、Ⅴ組之間淀粉酶、胰脂肪酶活性差異不顯著(P>0.05)；Ⅴ組的胃蛋白酶活性最高，顯著高于對照組(P<0.05)。

以上結(jié)果表明，發(fā)酵葡萄籽粕的添加可以顯著或極顯著提高十二指腸、胰腺、空腸中消化酶的活性，提高胃蛋白酶的活性，當發(fā)酵葡萄籽粕的添加水平為6%～8%時消化酶活性最高。

表2　飼糧中不同發(fā)酵葡萄籽粕水平對鵝消化酶活性的影響

同列數(shù)據(jù)肩標相同小寫字母或無字母表示差異不顯著(P>0.05)，相鄰小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，相間小寫字母表示差異極顯著(P<0.01)。表3、表6同。

In the same column, values with the same small or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05), while with adjacent small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), and with alternate small letter superscripts mean significant difference (P<0.01). The same as Table 3 and Table 6.

2.2飼糧中不同水平發(fā)酵葡萄籽粕對鵝腸道菌群平衡的影響

由表3可知，Ⅳ組的大腸桿菌數(shù)量最少，與對照組相比差異顯著(P<0.05)，Ⅳ、Ⅴ組之間差異不顯著(P>0.05)；Ⅴ組的乳酸菌數(shù)量最多，與對照組相比差異顯著(P<0.05)，Ⅳ、Ⅴ組之間差異不顯著(P>0.05)；Ⅴ組的雙歧桿菌數(shù)量最多，各組間差異不顯著(P>0.05)。

以上結(jié)果表明，發(fā)酵葡萄籽粕能夠明顯降低鵝盲腸中的大腸桿菌數(shù)量，增加盲腸中的乳酸桿菌、雙歧桿菌的數(shù)量，當發(fā)酵葡萄籽粕添加水平為6%～8%時腸道有益菌群比例提高。

表3　飼糧中不同水平發(fā)酵葡萄籽粕對鵝盲腸菌群平衡的影響

2.3飼糧中不同水平發(fā)酵葡萄籽粕對鵝空腸組織結(jié)構(gòu)的影響

由表4可知，Ⅳ組的腸絨毛高度最大，與對照組相比差異顯著(P<0.05)，與Ⅲ、Ⅴ組差異不顯著(P>0.05)；Ⅳ組的肌層厚度最厚，與對照組相比差異顯著(P<0.05)，與Ⅲ組差異不顯著(P>0.05)；

Ⅴ組的隱窩深度最淺，與對照組相比差異極顯著(P<0.01)。

以上結(jié)果表明，發(fā)酵葡萄籽粕能夠優(yōu)化腸道結(jié)構(gòu)，當發(fā)酵葡萄籽粕添加水平為6%～8%時腸道組織發(fā)育最快。

表4　飼糧中不同水平發(fā)酵葡萄籽粕對鵝空腸組織結(jié)構(gòu)的影響

同行數(shù)據(jù)肩標相同小寫字母或無字母表示差異不顯著(P>0.05)，相鄰小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，相間小寫字母表示差異極顯著(P<0.01)。表5同。

In the same row, values with the same small or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05), while with adjacent small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), and with alternate small letter superscripts mean significant difference (P<0.01). The same as Table 5.

2.4飼糧中不同水平發(fā)酵葡萄籽粕對鵝免疫器官指數(shù)的影響

由表5可知，Ⅳ組的胸腺指數(shù)最大，各組間差異不顯著(P>0.05)；Ⅳ、Ⅴ組的脾臟指數(shù)最大，各組間差異不顯著(P>0.05)；Ⅳ組的法氏囊指數(shù)最大，各組間差異不顯著(P>0.05)。

以上結(jié)果表明，發(fā)酵葡萄籽粕能夠影響鵝的免疫器官發(fā)育，當發(fā)酵葡萄籽粕的添加水平為6%～8%時免疫器官指數(shù)最高。

2.5飼糧中不同水平發(fā)酵葡萄籽粕對鵝血清抗氧化指標的影響

由表6可知，Ⅴ組的血清T-AOC最高，與對照組相比差異極顯著(P<0.01)；Ⅳ組的血清MDA含量最少，與對照組相比差異極顯著(P<0.01)，Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ組之間差異不顯著(P>0.05)；Ⅴ組血清T-SOD、GSH-Px活性最高，與對照組相比差異極顯著(P<0.01)；Ⅳ、Ⅴ組之間差異不顯著(P>0.05)。

以上結(jié)果表明，發(fā)酵葡萄籽粕能夠提高鵝的抗氧化能力，當發(fā)酵葡萄籽粕添加水平為6%～8%時機體抗氧化指標最高。

表5　飼糧中不同水平發(fā)酵葡萄籽粕對鵝免疫器官指數(shù)的影響

表6　飼糧中不同水平發(fā)酵葡萄籽粕對鵝血清抗氧化指標的影響

3討論

3.1飼糧中不同水平發(fā)酵葡萄籽粕對鵝消化酶活性的影響

熊峰[14]研究表明，納豆芽孢桿菌制劑能顯著提高21、42日齡肉雞十二指腸和空腸內(nèi)淀粉酶﹑胰蛋白酶活性。劉濟[15]研究表明，飼喂發(fā)酵豆粕能夠顯著提高愛拔益加肉雞的十二指腸、空腸中胰蛋白酶和脂肪酶活性。胡永娜等[16]研究表明，發(fā)酵菜籽粕顯著提高了21和42日齡肉仔雞十二指腸、空腸、回腸和盲腸中蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性。楊維仁等[17]研究表明，哺乳期仔豬飼糧中添加4%植物小肽顯著提高斷奶仔豬胰臟中胃蛋白酶、十二指腸中脂肪酶和淀粉酶活性。郭元晟等[18]研究表明，飼糧中添加適量乳酸菌能夠提高肉雞空腸和胰腺組織淀粉酶活性，空腸和回腸胰蛋白酶活性及十二指腸糜蛋白酶活性也有顯著的增強效果。湯江武等[19]試驗證實，芽孢能在愛拔益加肉雞腸道內(nèi)萌發(fā)并停留超過72 h，并對提高腸道內(nèi)消化酶活性和改善菌落結(jié)構(gòu)發(fā)揮作用。本試驗結(jié)果表明，發(fā)酵葡萄籽粕添加水平為6%～8%，可以顯著提高十二指腸、胰腺、空腸中消化酶的活性，提高胃蛋白酶的活性，此結(jié)果與上述研究結(jié)果一致。

3.2飼糧中不同水平發(fā)酵葡萄籽粕對鵝腸道菌群平衡的影響

熊峰[14]研究表明，納豆芽孢桿菌制劑能顯著減少21、42日齡肉雞回腸﹑盲腸內(nèi)大腸桿菌和沙門氏菌數(shù)量，增加乳酸桿菌數(shù)量。Guerra等[20]也報道了乳酸菌可以有效的抑制腸道中大腸桿菌的生長繁殖。Juven等[21]和Reid等[22]研究發(fā)現(xiàn)，乳酸桿菌產(chǎn)生的細菌素有抑制沙門氏菌、大腸桿菌、志賀氏菌的作用。黃其永[23]研究表明，灌服德氏乳桿菌提高了仔豬的絨毛高度和隱窩深度。馬治宇等[24]研究表明，單獨在飼糧中添加乳酸菌菌粉能顯著抑制大腸埃希菌的繁殖，促進乳酸菌、雙歧桿菌的增殖，效果顯著。乳酸菌菌粉和菌液能夠顯著促進盲腸和回腸絨毛的生長，使腸壁的厚度增加；乳酸菌殘液和滅活菌液效果不顯著。胡順珍等[25]研究表明，復合微生態(tài)制劑及其輔佐劑的添加能在一定條件下降低肉雞盲腸大腸桿菌數(shù)量。本試驗結(jié)果表明，發(fā)酵葡萄籽粕6%～8%添加水平可以顯著減少盲腸中大腸桿菌的數(shù)量，顯著增加乳酸菌的數(shù)量，增加雙歧桿菌的數(shù)量，此結(jié)果與上述研究結(jié)果一致。

3.3飼糧中不同水平發(fā)酵葡萄籽粕對鵝免疫器官指數(shù)和血清抗氧化指標的影響

葡萄籽粕本身所含有的豐富的維生素E，還有原花青素都具有抗氧化功能，用來發(fā)酵葡萄籽粕的混合菌種，也能夠產(chǎn)生抗氧化物質(zhì)。劉濟[15]研究表明，飼喂發(fā)酵豆粕能促進愛拔益肉雞免疫器官的生長發(fā)育，顯著提高胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)、法氏囊指數(shù)。胡永娜等[16]研究表明，發(fā)酵菜籽粕組顯著提高了21、42日齡肉仔雞的脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)。胡順珍等[25]研究表明，復合微生態(tài)制劑及其輔佐劑的添加能顯著提高肉雞血清T-AOC。張愛忠等[26]研究表明，適量添加酵母培養(yǎng)物(yeast culture,YC)可以顯著降低試驗期絨山羊血清MDA含量，提高血清GSH-Px的活性，顯著提高血清T-SOD的活性和各組機體T-AOC；李銀平等[10]研究表明，應用原花青素可使血清MDA含量降低，且應用劑量越大，降低幅度越大。微生物發(fā)酵產(chǎn)生小肽，小肽參與機體免疫調(diào)節(jié)，提高其免疫機能[27]。祝平[28]研究表明，哺乳期補飼植物小肽能夠刺激斷奶仔豬腸道發(fā)育，使斷奶仔豬腸道絨毛高度增加，隱窩深度變淺，陳生龍[29]研究表明，斷奶仔豬的飼糧中添加適量活性飼料酵母粉能增強斷奶仔豬的免疫功能。本試驗結(jié)果表明，發(fā)酵葡萄籽粕添加水平為6%～8%可以顯著提高鵝抗氧化能力，此結(jié)果與上述研究結(jié)果一致，但對其免疫器官指數(shù)沒有影響。

4結(jié)論

① 飼糧中添加適宜水平發(fā)酵葡萄籽粕顯著提高十二指腸、胰腺、空腸中消化酶的活性，提高胃蛋白酶的活性。

② 飼糧中添加適宜水平發(fā)酵葡萄籽粕顯著減少盲腸中大腸桿菌的數(shù)量，增加乳酸桿菌、雙歧桿菌的數(shù)量，提高腸絨毛高度、肌層厚度，使隱窩深度變淺，優(yōu)化腸道組織結(jié)構(gòu)。

③ 飼糧中添加適宜水平發(fā)酵葡萄籽粕能夠提高鵝的胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)、法氏囊指數(shù)，但不明顯；顯著提高鵝的血清T-AOC及T-SOD、GSH-Px活性，減少血清MDA含量。

④ 建議鵝飼糧中發(fā)酵葡萄籽粕添加適宜水平為6%～8%。

參考文獻：

[1]蘇紹輝.益生菌在動物生產(chǎn)中的應用與發(fā)展趨勢[J].安徽農(nóng)學通報,2007,13(3):116-117,121.

[2]周淑蘭,曹國文,戴榮國,等.混合芽孢桿菌對肉用仔雞生產(chǎn)性能和盲腸微生物菌群的影響試驗[J].甘肅畜牧獸醫(yī),2007,37(6):23-26.

[3]李玲,楊桂芹.益生菌和異麥芽寡糖對肉仔雞盲腸菌群及生產(chǎn)性能的影響[J].中國畜牧雜志,2008,44(1):32-34.

[4]蘇勇,姚文,黃瑞華,等.芽孢乳桿菌S1對斷奶前后仔豬腸道乳酸菌、大腸桿菌和揮發(fā)性脂肪酸含量變化的影響[J].福建農(nóng)林大學學報:自然科學版,2006,35(1):73-76.

[5]FULLER R,GIBSON G R.Modification of the intestinal microflora using probiotics and prebiotics[J].Scandinavian Journal of Gastroenterology,1997,32:28-31.

[6]唐志剛,錢巧玲,侯曉瑩,等.益生菌的作用機理及其在肉雞和蛋雞中的應用[J].家畜生態(tài)學報,2010,31(2):5-8.

[7]陳麗艷,白鳳珍,程立軍.芽孢桿菌對肉仔雞蛋白質(zhì)代謝的影響[J].內(nèi)蒙古民族大學學報:自然科學版,2005,20(1):86-88.

[8]王洪瑞.豆粕發(fā)酵工藝改進及發(fā)酵物對仔豬生長性能的影響[D].碩士學位論文.泰安:山東農(nóng)業(yè)大學,2012.

[9]邱良偉.發(fā)酵對棉粕營養(yǎng)特性及其在肉雞中的應用研究[D].碩士學位論文.合肥:安徽農(nóng)業(yè)大學,2012.

[10]李銀平,薛雪萍,袁春龍,等.葡萄籽成分與營養(yǎng)評價[J].食品與發(fā)酵工業(yè),2006,32(12):108-113.

[11]邊玲,范培紅.葡萄籽提取物的化學成分及藥理活性研究概況[J].食品與藥品,2005,7(4A):20-22.

[12]張樂樂.葡萄籽在動物營養(yǎng)中的研究進展[J].飼料工業(yè),2009,30(19):46-48.

[13]朱立國.肉鴨微生物發(fā)酵飼料的工藝研究及應用[D].碩士學位論文.西安:西北大學,2007.

[14]熊峰.大豆低聚糖和納豆芽孢桿菌制劑及其組合對肉雞生產(chǎn)性能、腸道消化酶及菌群平衡的影響[D].碩士學位論文.烏魯木齊:新疆農(nóng)業(yè)大學,2008.

[15]劉濟.發(fā)酵豆粕對AA肉雞生長性能、免疫功能及其消化酶的影響[D].碩士學位論文.湛江:廣東海洋大學,2012.

[16]胡永娜,王之盛,李愛科.固態(tài)發(fā)酵菜籽粕對肉仔雞生長性能、免疫功能及消化酶活性的影響[J].動物營養(yǎng)學報,2012,24(7):1293-1301.

[17]楊維仁,祝平,楊在賓,等.哺乳期使用植物小肽對斷奶仔豬消化酶活性、免疫功能及消化道酸度的影響[J].中國糧油學報,2008,23(2):136-141.

[18]郭元晟,閆素梅,張和平,等.發(fā)酵乳酸桿菌對肉雞胰腺和小腸消化酶活性及營養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響[J].動物營養(yǎng)學報,2011,23(7):1225-1232.

[19]湯江武,孫宏,姚曉紅,等.芽孢桿菌在肉雞腸道內(nèi)的分布及對腸道菌群、消化酶活性的影響[J].浙江大學學報:農(nóng)業(yè)與生命科學版,2011,37(3):319-325.

[20]GUERRA N P,BERNRDEZ P F,MéNDEZ J,et al.Production of four potentially probiotic lactic acid bacteria and their evaluation as feed additives for weaned piglets[J].Animal Feed Science and Technology,2007,134(1/2):89-107.

[21]JUVEN B J,MEINERSMANN R J,STERN N J.Antagonistic effects of lactobacilli and pediococci to control intestinal colonization by human enteropathogens in live poultry[J].Journal of Applied Bacteriology,1991,70(2):95-103.

[22]REID G,MCGROARTY J A,ANGOTTI R,et al.Lactobacillusinhibitor production againstEscherichiacoliand coaggregation ability with uropathogens[J].Canadian Journal of Microbiology,1988,34(3):344-351.

[23]黃其永.德氏乳桿菌對哺乳仔豬消化器官及消化酶活性的影響研究[D].碩士學位論文.長沙:湖南農(nóng)業(yè)大學,2013.

[24]馬治宇,趙獻軍,張曉慶,等.乳酸菌及其培養(yǎng)液對肉雞盲腸菌群的影響[J].西北農(nóng)業(yè)學報,2008,17(3):33-36.

[25]胡順珍,張建梅,謝全喜,等.復合微生態(tài)制劑對肉雞生產(chǎn)性能、腸道菌群、抗氧化指標和免疫功能的影響[J].動物營養(yǎng)學報,2012,24(2):334-341.

[26]張愛忠,盧德勛,姜寧,等.酵母培養(yǎng)物對絨山羊機體抗氧化能力的影響[J].動物營養(yǎng)學報,2010,22(3):781-786.

[27]張呈軍,李建鑫.小肽的營養(yǎng)及其在畜禽生產(chǎn)上的應用[J].安徽農(nóng)業(yè)科學,2006,34(13):3072-3074.

[28]祝平.植物小肽對斷奶仔豬生產(chǎn)性能影響及其機理的研究[D].碩士學位論文.泰安:山東農(nóng)業(yè)大學,2007.

[29]陳生龍.活酵母對斷奶仔豬生產(chǎn)性能、免疫功能和腸道微生物區(qū)系的影響[D].碩士學位論文.福州:福建農(nóng)林大學,2009.

Author, WANG Baowei, professor, E-mail: wangbw@qau.edu.cn

(責任編輯武海龍)

Effects of Zymotic Grape Seed Meal on Digestive Physiology,Immune Organ Indices and Antioxidant Indices ofWulongGeese Aged from 5 to 12 Weeks

WANG BaoweiSUI LiYUE BinGE WenhuaZHANG Ming’ai ZHANG KaileiJIA YuhuiSHI Xueping

(Institute of High Quality Waterfowl, Qingdao Agricultural University, Nutrition and Feed Laboratory of China Agriculture Research System, Qingdao 266109, China)

Abstract:This experiment was conducted to study the effects of dietary different zymotic grape seed meal levels on digestive physiology, immune organ indices and serum antioxidant indices of Wulong geese aged from 5 to 12 weeks, to find the appropriate supplemental level of the zymotic grape seed meal and its feed effect. A total of 288 five-week-old Wulong geese were randomly divided into 6 groups with 6 replicates per group and 8 geese per replicate (half male and half female). Geese in the control group (group Ⅰ) were fed a basal diet, and the others were fed the basal diet supplemented with 2% (group Ⅱ), 4% (group Ⅲ), 6% (group Ⅳ), 8% (group Ⅴ), 10% (group Ⅵ) zymotic grape seed meal, respectively. The experiment lasted for 8 weeks. The results showed as follows: 1) compared with the control group, the activities of amylase, trypsin, lipase in duodenum and jejunum in group Ⅴ were significantly increased (P<0.01), the activities of amylase and trypsin in pancreas in group Ⅴ were significantly increased (P<0.01); the activity of lipase in pancreas in group Ⅳ was significantly increased (P<0.01); the activity of pepsin in group Ⅴ was significantly increased (P<0.05). 2) Compared with the control group, the number of Escherichia coli in intestinal tract in group Ⅳ was significantly decreased (P<0.05), the number of Lactobacillus in intestinal tract in group Ⅴ was significantly increased (P<0.05), but there were no significant differences between group Ⅳ and group Ⅴ (P>0.05). 3) Compared with the control group, the intestinal villus height in group Ⅳ was significantly increased (P<0.05); the thickness of muscle in group Ⅳ was significantly increased (P<0.05); the crypt depth in group Ⅴ was significantly decreased (P<0.01). 4) There were no significant differences on immune organ indices among all groups (P>0.05). Compared with the control group, the serum total antioxidant capacity in group Ⅴ was significantly increased (P<0.01); the serum malonaldehyde content in group Ⅳ was significantly decreased (P<0.01), the activities of total superoxide dismutase and glutathione peroxidase in serum in group Ⅴ were significantly increased (P<0.01). In conclusion, zymotic grape seed meal can improve digestive enzyme activity, optimize the structure of intestinal tissue, improve antioxidant function of Wulong geese aged from 5 to 12 weeks, and has no effect on immune organ index, and the dietary appropriate supplemental level is 6% to 8%.[Chinese Journal of Animal Nutrition, 2016, 28(1)：163-171]

Key words:zymotic grape seed meal; geese; digestive physiology; immune organ indices; antioxidant indices

中圖分類號：S835

文獻標識碼：A

文章編號：1006-267X(2016)01-0163-09

作者簡介：王寶維(1959—)，男，山東榮成人，教授，碩士生導師，研究方向為動物營養(yǎng)與保健。E-mail: wangbw@qau.edu.cn

基金項目：國家水禽產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系專項基金(CARS-43-11)；山東省良種工程(2014LZ19)

收稿日期：2015-07-08

doi：10.3969/j.issn.1006-267x.2016.01.022