趙婷怡,潘曉賦,陳小勇,楊君興

(1.中國(guó)科學(xué)院昆明動(dòng)物研究所遺傳資源與進(jìn)化國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，昆明　650223；

2.中國(guó)科學(xué)院研究生院，北京　100049))

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滇池金線(xiàn)鲃、西疇金線(xiàn)鲃及其雜交F1代抵抗小瓜蟲(chóng)與車(chē)輪蟲(chóng)能力的探究

趙婷怡1,2,潘曉賦1,陳小勇1,楊君興1

(1.中國(guó)科學(xué)院昆明動(dòng)物研究所遺傳資源與進(jìn)化國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，昆明650223；

2.中國(guó)科學(xué)院研究生院，北京100049))

摘要：用小瓜蟲(chóng)(Ichthyophthirius multifiliis)和車(chē)輪蟲(chóng)(Trichodina spp.)對(duì)滇池金線(xiàn)鲃(Sinocyclocheilus grahami)和西疇金線(xiàn)鲃(S.xichouensis)及其雜交F1代分別進(jìn)行了兩次人工感染實(shí)驗(yàn)。18月齡的雜交F1代、滇池金線(xiàn)鲃(Sinocyclocheilus grahami)和西疇金線(xiàn)鲃(S.xichouensis)感染小瓜蟲(chóng)后平均死亡率分別為(50.00±11)%、(56.70±23)%、(80.0±18)%。經(jīng)方差檢驗(yàn)雜交F1代死亡率顯著低于父本西疇金線(xiàn)鲃。6月齡雜交F1代、滇池金線(xiàn)鲃、西疇金線(xiàn)鲃感染車(chē)輪蟲(chóng)后的平均死亡率分別為(40.56±13)%、(56.11±5)%、(42.78±13)%。經(jīng)方差檢驗(yàn)雜交F1代死亡率顯著低于母本滇池金線(xiàn)鲃。在感染小瓜蟲(chóng)和車(chē)輪蟲(chóng)后，三種魚(yú)的死亡量均呈現(xiàn)激增后又顯著回落的趨勢(shì)，死亡高峰在第4天至第7天。本次感染實(shí)驗(yàn)的小瓜蟲(chóng)和車(chē)輪蟲(chóng)主要分布于病魚(yú)體表：軀干分布最多57%～79%，其次為鰭12%～28%，頭部分布較少4%～15%。與本研究中車(chē)輪蟲(chóng)幾乎于鰓絲無(wú)分布(0%～3%)不同，有大約10%～20%的小瓜蟲(chóng)分布于鰓絲上。

關(guān)鍵詞：雜交；滇池金線(xiàn)鲃(Sinocyclocheilus grahami)；西疇金線(xiàn)鲃(S.xichouensis)；小瓜蟲(chóng)(Ichthyophthirius multifiliis)；車(chē)輪蟲(chóng)(Trichodina spp.)

滇池金線(xiàn)鲃(Sinocyclocheilusgrahami)隸屬于鯉形目(Cypriniformes)鯉科(Cyprinidae)鲃亞科(Barbinae)金線(xiàn)鲃屬(Sinocyclocheilus)，是滇池流域的特有種[1]，國(guó)家II級(jí)保護(hù)動(dòng)物，且被列入《中國(guó)瀕危動(dòng)物紅皮書(shū)(魚(yú)類(lèi))》[2]。西疇金線(xiàn)鲃(S.xichouensis)是新近描述的第一種采自紅河水系的金線(xiàn)鲃屬魚(yú)類(lèi)新種[3]。以往對(duì)金線(xiàn)鲃屬魚(yú)類(lèi)的研究主要以分類(lèi)學(xué)為主，向傳統(tǒng)分類(lèi)和系統(tǒng)進(jìn)化兩個(gè)方向發(fā)展[4]。近年來(lái)，對(duì)金線(xiàn)鲃屬魚(yú)類(lèi)的研究逐漸擴(kuò)大到保護(hù)生物學(xué)、生態(tài)學(xué)、生理學(xué)以及水產(chǎn)養(yǎng)殖技術(shù)研究等方面。

小瓜蟲(chóng)(Ichthyophthiriusmultifiliis)是一種主要寄生在魚(yú)類(lèi)的皮膚、鰭、鰓、頭、口腔及眼等部位的寄生蟲(chóng)，治療困難，可導(dǎo)致魚(yú)類(lèi)67.9%～80.2%的死亡率[5]，對(duì)漁業(yè)養(yǎng)殖有很大危害，所以一直是國(guó)內(nèi)外魚(yú)病專(zhuān)家研究的熱點(diǎn)。目前研究?jī)?nèi)容集中于小瓜蟲(chóng)形態(tài)分類(lèi)、病原學(xué)、病理學(xué)、免疫學(xué)以及防治方法等[6-7]，研究對(duì)象多集中于常見(jiàn)經(jīng)濟(jì)魚(yú)類(lèi)或觀(guān)賞魚(yú)類(lèi)[8]。車(chē)輪蟲(chóng)(Trichodinaspp.)是一類(lèi)常見(jiàn)寄生/共棲生緣毛類(lèi)纖毛蟲(chóng)原生動(dòng)物，寄生在多種淡水水生動(dòng)物鰓和皮膚上，主要危害苗種，嚴(yán)重感染時(shí)可引起苗種47.3%～70.8%的死亡率[9]。對(duì)車(chē)輪蟲(chóng)的研究國(guó)內(nèi)外也有很多報(bào)道，研究?jī)?nèi)容多為車(chē)輪蟲(chóng)的形態(tài)分類(lèi)[10-12]或是車(chē)輪蟲(chóng)對(duì)經(jīng)濟(jì)魚(yú)類(lèi)的感染及危害[9]。

目前，雖然對(duì)金線(xiàn)鲃屬的研究已從分類(lèi)學(xué)逐步擴(kuò)大，但是在人工養(yǎng)殖環(huán)境下對(duì)常見(jiàn)寄生蟲(chóng)病抗病力的基礎(chǔ)研究尚未見(jiàn)報(bào)道。且專(zhuān)門(mén)利用小瓜蟲(chóng)和車(chē)輪蟲(chóng)人工感染經(jīng)馴化的云南土著魚(yú)類(lèi)，并對(duì)其抗病力進(jìn)行比較的研究也未見(jiàn)報(bào)道，所以本研究選用小瓜蟲(chóng)和車(chē)輪蟲(chóng)這兩種養(yǎng)殖魚(yú)塘常見(jiàn)魚(yú)類(lèi)寄生蟲(chóng)來(lái)人工感染滇池金線(xiàn)鲃和西疇金線(xiàn)鲃及其雜交F1代，以探究三者在小水體養(yǎng)殖條件下的抗病能力。

1材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)魚(yú)的準(zhǔn)備

滇池金線(xiàn)鲃母本和西疇金線(xiàn)鲃父本及其雜交F1代系在中國(guó)科學(xué)院昆明動(dòng)物研究所珍稀魚(yú)類(lèi)保育研究基地養(yǎng)殖獲得。小瓜蟲(chóng)感染實(shí)驗(yàn)用魚(yú)為18月齡，車(chē)輪蟲(chóng)感染實(shí)驗(yàn)用魚(yú)為6月齡，均健康、體型正常，無(wú)小瓜蟲(chóng)、車(chē)輪蟲(chóng)病史。實(shí)驗(yàn)前均分別暫養(yǎng)于水族缸里72 h，使其適應(yīng)缸養(yǎng)環(huán)境。

為了能在同一個(gè)實(shí)驗(yàn)缸里將體型和花色上相似的18月齡的雜交F1代，滇池金線(xiàn)鲃和西疇金線(xiàn)鲃區(qū)分開(kāi)，實(shí)驗(yàn)前使用Visible Implant Elastomer Color (Northwest Marine Technology 公司生產(chǎn))對(duì)三者進(jìn)行標(biāo)記：雜交F1為代右側(cè)眼睛下方，滇池金線(xiàn)鲃為左側(cè)眼睛下方，西疇金線(xiàn)鲃為頭頂。

1.2實(shí)驗(yàn)方法

小瓜蟲(chóng)的感染方法：在測(cè)量并記錄了實(shí)驗(yàn)個(gè)體的全長(zhǎng)(Total Length,TL)與體重(Weight,W)后，參考文獻(xiàn)[13]將病魚(yú)和健康魚(yú)同缸養(yǎng)殖進(jìn)行小瓜蟲(chóng)感染實(shí)驗(yàn)的方法，把自然感染小瓜蟲(chóng)的病魚(yú)(滇池金線(xiàn)鲃，TL：(74.07±6.02) mm，W：(4.4±0.82) g)與18月齡健康實(shí)驗(yàn)魚(yú)(雜交F1代、滇池金線(xiàn)鲃和西疇金線(xiàn)鲃)共同養(yǎng)殖于規(guī)格為60 cm×60 cm×40 cm水族缸中，待感染30 h后將病魚(yú)撈出開(kāi)始觀(guān)察并記錄數(shù)據(jù)。實(shí)驗(yàn)組共三個(gè)缸，每個(gè)水族缸包含雜交F1代(TL：(83.55±1.69) mm，W：(6.51±0.36) g)、滇池金線(xiàn)鲃(TL：(84.06±3.41) mm，W：(6.98±0.83) g)、西疇金線(xiàn)鲃(TL：(81.23±4.51) mm，W：(5.76±0.82) g)各5條。空白對(duì)照一個(gè)缸，含有健康的未感染小瓜蟲(chóng)的雜交F1代(TL：(80.53±1.39) mm，W：(5.96±0.26) g)，滇池金線(xiàn)鲃(TL：(83.32±4.51) mm，W：(6.93±0.62) g)和西疇金線(xiàn)鲃(TL：(82.47±1.65) mm，W：(6.62±0.26) g) 各5條。

車(chē)輪蟲(chóng)的獲得及感染方法：在研究基地發(fā)生車(chē)輪蟲(chóng)病的魚(yú)塘里采集到攜帶有車(chē)輪蟲(chóng)的病魚(yú)若干(滇池金線(xiàn)鲃，TL：(72.8±2.68) mm，W：(2.76±0.49) g)，刮取其攜帶車(chē)輪蟲(chóng)的體液放入事先準(zhǔn)備好的三個(gè)容積為2 L的大燒杯中，于顯微鏡下檢驗(yàn)車(chē)輪蟲(chóng)密度大約為4.01×105個(gè)/L，隨后分別放入6月齡雜交F1代(TL：(29.93±0.88) mm，W：(0.32±0.04) g)、滇池金線(xiàn)鲃(TL：(29.15±1.05) mm，W：(0.24±0.12) g)和西疇金線(xiàn)鲃(TL：(29.67±1.34) mm，W：(0.25±0.08) g)幼魚(yú)進(jìn)行感染，感染時(shí)間為1 h。然后將三種幼魚(yú)連同大燒杯中的水一同放入9個(gè)規(guī)格為25 cm×40 cm×25 cm的水族缸里。每種魚(yú)設(shè)三個(gè)平行實(shí)驗(yàn)，每個(gè)實(shí)驗(yàn)缸含有30條幼魚(yú)。在另外三個(gè)同規(guī)格的水族缸里分別放入30條健康的雜交F1代(TL：(30.33±0.58) mm，W：(0.34±0.03) g)，滇池金線(xiàn)鲃(TL：(28.75±1.25) mm，W：(0.23±0.02) g)和西疇金線(xiàn)鲃(TL：(29.34±1.44) mm，W：(0.24±0.03) g)幼魚(yú)作為空白對(duì)照。

小瓜蟲(chóng)感染實(shí)驗(yàn)和車(chē)輪蟲(chóng)感染實(shí)驗(yàn)均以同樣的方法進(jìn)行了兩次。實(shí)驗(yàn)期間使用增氧機(jī)泵氧，經(jīng)YSIDO200溶解氧測(cè)量?jī)x(美國(guó)維賽儀器公司)檢測(cè)平均溶氧量為(6.85±0.37) mg/L，水溫控制在20.3～21.5 ℃。

1.3數(shù)據(jù)收集

記錄每天感染小瓜蟲(chóng)和車(chē)輪蟲(chóng)的實(shí)驗(yàn)個(gè)體的死亡數(shù)量。使用解剖針刮取軀干體表，頭部(包括眼、鼻、口等部位)的體液，并使用手術(shù)剪剪取魚(yú)鰭(尾鰭、背鰭、胸鰭、臀鰭、腹鰭)和鰓絲制作壓片在Stemi2000-C顯微鏡下計(jì)數(shù)小瓜蟲(chóng)數(shù)量，并拍照(物鏡5×目鏡10×)，在OlympusCX21顯微鏡下觀(guān)察計(jì)數(shù)車(chē)輪蟲(chóng)數(shù)量(物鏡4×目鏡10×)并拍照(物鏡100×目鏡10×)。

1.4數(shù)據(jù)處理

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)使用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理分析，使用Sigma Plot 10.0作圖。

2結(jié)果

2.1感染小瓜蟲(chóng)和車(chē)輪蟲(chóng)后病魚(yú)的死亡率

雜交F1代感染小瓜蟲(chóng)后死亡率(Mortality Rate,MR)最低，西疇金線(xiàn)鲃死亡率最高(表1)。經(jīng)方差分析，雜交F1代與滇池金線(xiàn)鲃的死亡率差異不顯著(P>0.05)，與西疇金線(xiàn)鲃的死亡率相比差異顯著(P<0.05)。滇池金線(xiàn)鲃的死亡率與西疇金線(xiàn)鲃的死亡率相比差異顯著(P<0.05)。車(chē)輪蟲(chóng)感染實(shí)驗(yàn)中雜交F1代的死亡率最低，滇池金線(xiàn)鲃死亡率最高。經(jīng)方差分析，雜交F1代與西疇金線(xiàn)鲃的死亡率差異不顯著(P>0.05)，與滇池金線(xiàn)鲃的死亡率相比差異顯著(P<0.05)。滇池金線(xiàn)鲃的死亡率與西疇金線(xiàn)鲃的死亡率相比差異顯著(P<0.05)。

表1　感染小瓜蟲(chóng)和車(chē)輪蟲(chóng)的雜交F1代，滇池金線(xiàn)鲃，西疇金線(xiàn)鲃的死亡率

注：表中同列數(shù)字右上角具有相同字母的代表方差檢驗(yàn)差異不顯著(P>0.05)，具有不同字母的表示差異顯著(P<0.05)

在小瓜蟲(chóng)染病實(shí)驗(yàn)中觀(guān)察到雜交F1代，滇池金線(xiàn)鲃以及西疇金線(xiàn)鲃不同的染病速度：西疇金線(xiàn)鲃2 d內(nèi)出現(xiàn)明顯病癥(體表粘液增多，游動(dòng)困難，時(shí)常浮頭等)，第四天即達(dá)到死亡高峰期，雜交F1代和滇池金線(xiàn)鲃第四天出現(xiàn)明顯病癥，約第七天才達(dá)到死亡高峰期(圖1a，b)。再加上經(jīng)方差檢驗(yàn)雜交F1代的死亡率顯著低于西疇金線(xiàn)鲃，綜合不同的染病速率和死亡率可以說(shuō)18月齡的雜交F1代對(duì)小瓜蟲(chóng)的耐受性明顯優(yōu)于其父本。在感染車(chē)輪蟲(chóng)的實(shí)驗(yàn)中則可看出6月齡的雜交F1代對(duì)車(chē)輪蟲(chóng)的耐受力則明顯優(yōu)于其母本。

2.2感染小瓜蟲(chóng)和車(chē)輪蟲(chóng)后病魚(yú)的死亡規(guī)律

兩次實(shí)驗(yàn)結(jié)果均表明(圖1)在感染小瓜蟲(chóng)和車(chē)輪蟲(chóng)后，個(gè)體死亡量均呈現(xiàn)激增后又明顯回落的趨勢(shì)。個(gè)體死亡量于感染小瓜蟲(chóng)后第五到第七天達(dá)到高峰，西疇金線(xiàn)鲃的死亡高峰期稍提前于雜交F1代和滇池金線(xiàn)鲃(圖1a，b)。感染車(chē)輪蟲(chóng)的個(gè)體死亡量在感染后第四天達(dá)到高峰(圖1c，d)。

2.3小瓜蟲(chóng)和車(chē)輪蟲(chóng)在魚(yú)體的分布

如圖2(a)、(b)可以看到病魚(yú)體表粘液以及鰓絲上都已經(jīng)有成熟小瓜蟲(chóng)存在，圖2(c)為從病魚(yú)體表采集到的車(chē)輪蟲(chóng)。如圖3(a)、(b)所示，小瓜蟲(chóng)和車(chē)輪蟲(chóng)多分布于三種魚(yú)類(lèi)的體表，分布情況大致相似的部位是：分布數(shù)量最多的軀干(57%～79%)，其次為鰭(12%～28%)，頭部分布較少(4%～15%)。二者于鰓絲的分布差異較大，車(chē)輪蟲(chóng)在三種魚(yú)鰓絲的分布百分比為0%～3%，實(shí)際上在顯微鏡下只有極少數(shù)個(gè)體的鰓絲上可以觀(guān)察到1～3個(gè)車(chē)輪蟲(chóng)分布。而小瓜蟲(chóng)于鰓絲的分布比例則達(dá)到10%～20%。

圖1　感染小瓜蟲(chóng)和車(chē)輪蟲(chóng)后雜交F1代，滇池金線(xiàn)鲃，西疇金線(xiàn)鲃的死亡趨勢(shì)

圖2　顯微鏡下的小瓜蟲(chóng)和車(chē)輪蟲(chóng)

圖3　車(chē)輪蟲(chóng)和小瓜蟲(chóng)在魚(yú)體的分布

3討論

3.1小瓜蟲(chóng)寄生部位及對(duì)魚(yú)類(lèi)的危害

本研究與倪達(dá)書(shū)等[13]對(duì)小瓜蟲(chóng)寄生部位的研究結(jié)果相似，小瓜蟲(chóng)多寄生于魚(yú)類(lèi)體表以及鰭條等運(yùn)動(dòng)較多的部位；一部分寄生在鰓上的蟲(chóng)體，多數(shù)靠近出鰓靜脈一邊的組織中，這可能與小瓜蟲(chóng)的好氧習(xí)性有關(guān)[13]。寄生在鰓絲上的小瓜蟲(chóng)對(duì)魚(yú)類(lèi)的呼吸造成嚴(yán)重的阻礙，是造成魚(yú)類(lèi)死亡率較高的原因之一。

小瓜蟲(chóng)病是水產(chǎn)養(yǎng)殖上的一大頑癥，水溫15～25 ℃時(shí)，是小瓜蟲(chóng)流行的高峰期，因?yàn)樵撍疁貐^(qū)間最適宜小瓜蟲(chóng)繁殖。本研究中體長(zhǎng)范圍為8～9 cm的雜交F1代、滇池金線(xiàn)鲃和西疇金線(xiàn)鲃的死亡率都較高，但是其中雜交F1代和滇池金線(xiàn)鲃的死亡率低于鮭魚(yú)(SalmoSalar)感染小瓜蟲(chóng)后的死亡率(平均60%～70%)[14]。滇池金線(xiàn)鲃、西疇金線(xiàn)鲃及其雜交F1代死亡率均低于體長(zhǎng)為7～10 cm感染小瓜蟲(chóng)的革胡子鲇(Clariasgariepinus)在兩到三天內(nèi)80%～90%的死亡率[8]。另?yè)?jù)報(bào)道小瓜蟲(chóng)對(duì)烏鱧(體長(zhǎng)7～10 cm)的感染率只有30%～40%，并且當(dāng)感染率達(dá)到100%時(shí)也只有少數(shù)個(gè)體死亡[15]。而小瓜蟲(chóng)對(duì)草魚(yú)(Ctenopharyngodonidellus)(體長(zhǎng)10.4～12.8 cm)感染率僅為3%[16]。革胡子鲇體表光滑無(wú)鱗，鮭魚(yú)、烏鱧和雜交F1代，滇池金線(xiàn)鲃、西疇金線(xiàn)鲃體表均具有細(xì)小的鱗片(側(cè)線(xiàn)鱗數(shù)60以上)，而草魚(yú)則具有較大的鱗片(側(cè)線(xiàn)鱗數(shù)39～44)[1]，可見(jiàn)鱗片對(duì)小瓜蟲(chóng)起到了一定抵御作用，光滑無(wú)鱗或者鱗片細(xì)小的魚(yú)類(lèi)更易被小瓜蟲(chóng)侵襲，死亡率也較高。另外雜交F1代(側(cè)線(xiàn)鱗數(shù)58～62)死亡率低于滇池金線(xiàn)鲃(側(cè)線(xiàn)鱗數(shù)61～69)[1]并顯著低于西疇金線(xiàn)鲃(側(cè)線(xiàn)鱗數(shù)74～88)[3]，也支持這一結(jié)論。

3.2車(chē)輪蟲(chóng)寄生部位及對(duì)魚(yú)類(lèi)的危害

車(chē)輪蟲(chóng)種類(lèi)繁多，形態(tài)各異，生活習(xí)性以及寄生部位因種而異。本研究觀(guān)察到的車(chē)輪蟲(chóng)主要分布于魚(yú)類(lèi)體表和鰭條，鰓絲上幾乎未見(jiàn)分布，這與Obiekezie等[17]研究的多寄生于寄主的鰓上，鮮少在鰭條上和體表分布的車(chē)輪蟲(chóng)(Trichodinamaritinkae)很不相同。扇貝外寄生車(chē)輪蟲(chóng)(Trichodinajadranica)在鰻魚(yú)身上的分布以皮膚上居多，魚(yú)鰭上次之[18]，這個(gè)與本研究觀(guān)察到的相似。但是在鰻魚(yú)的鰓上同時(shí)發(fā)現(xiàn)有占10%左右的分布，這說(shuō)明扇貝外寄生車(chē)輪蟲(chóng)既可寄生體表也可侵襲鰓絲。據(jù)國(guó)內(nèi)的研究報(bào)道，侵襲鰓瓣的有卵形車(chē)輪蟲(chóng)、微小車(chē)輪蟲(chóng)、球形車(chē)輪蟲(chóng)及眉溪小車(chē)輪蟲(chóng)等，主要在皮膚寄生的有顯著車(chē)輪蟲(chóng)、粗棘杜氏車(chē)輪蟲(chóng)、中華杜氏車(chē)輪蟲(chóng)[19]。至于車(chē)輪蟲(chóng)繁多的種類(lèi)和形態(tài)影響其生活習(xí)性以及寄生部位的機(jī)制是什么，有待在今后的研究中進(jìn)一步考證。

車(chē)輪蟲(chóng)是水產(chǎn)養(yǎng)殖中的一大疾患，需要特別關(guān)注并加以防范。在養(yǎng)殖場(chǎng)的仔稚魚(yú)很容易受到車(chē)輪蟲(chóng)的侵襲[17,20]，而且人工孵化的仔稚魚(yú)比起野外捕獲后又放養(yǎng)到魚(yú)池養(yǎng)殖的仔稚魚(yú)更容易感染車(chē)輪蟲(chóng)，死亡率也更高[21]。這與池塘管理不善致使幼魚(yú)營(yíng)養(yǎng)不良或者野外捕獲的幼魚(yú)入塘后產(chǎn)生的應(yīng)激反應(yīng)等因素而導(dǎo)致仔稚魚(yú)抵抗力下降，車(chē)輪蟲(chóng)更容易侵襲仔稚魚(yú)鰓絲有關(guān)[18]。另外僅僅寄生于體表的車(chē)輪蟲(chóng)對(duì)幼魚(yú)危害也較大，遭到主要寄生在體表皮膚上的顯著車(chē)輪蟲(chóng)侵襲的草魚(yú)、鯪(Cirrhinamolitorella)、鰱、鳙的夏花魚(yú)種死亡率可達(dá)到70%左右[9]。在一般情況下，魚(yú)體表上寄生個(gè)別車(chē)輪蟲(chóng)不會(huì)導(dǎo)致魚(yú)死亡，但是一旦有大量車(chē)輪蟲(chóng)侵襲魚(yú)體時(shí)，就有可能造成較大的死亡率[22]，這是因?yàn)檐?chē)輪蟲(chóng)侵襲幼魚(yú)后，幼魚(yú)抵抗力下降，容易遭受外界環(huán)境壓力的二次傷害。車(chē)輪蟲(chóng)的侵襲不僅使幼魚(yú)皮膚受到刺激后分泌大量粘液影響其活動(dòng)，還會(huì)造成體表皮膚組織損傷；車(chē)輪蟲(chóng)侵入魚(yú)鰓，造成魚(yú)鰓分泌大量粘液，影響其呼吸對(duì)其發(fā)育生長(zhǎng)造成不利，這些都更加容易使魚(yú)體損傷部位受到細(xì)菌和霉菌感染而增加其死亡率[23]。在受到大量車(chē)輪蟲(chóng)侵襲的線(xiàn)鱧(Ophicephalusstriatus)的幼魚(yú)中(全長(zhǎng)3.5 cm左右)流行性潰瘍綜合征(Epizootic Ulcerative Syndrome,EUS)更容易傳播和感染，且導(dǎo)致死亡率大幅度增加[24]。不僅如此，幼魚(yú)在受到車(chē)輪蟲(chóng)侵?jǐn)_后如果還存在其他如養(yǎng)殖過(guò)程中不當(dāng)移動(dòng)、裝卸、養(yǎng)殖密度過(guò)大、水里氨含量較高、溶氧量較低、幼魚(yú)營(yíng)養(yǎng)不良等不利因素均會(huì)造成較高死亡率[22]。所以對(duì)仔稚魚(yú)的危害程度不僅和車(chē)輪蟲(chóng)造成的直接傷害有關(guān)(如侵襲鰓絲阻礙魚(yú)類(lèi)正常呼吸，大量車(chē)輪蟲(chóng)不停運(yùn)動(dòng)對(duì)幼魚(yú)體表造成損傷等)，還和車(chē)輪蟲(chóng)對(duì)魚(yú)類(lèi)造成的間接傷害有很大關(guān)系。而本研究中受到相同車(chē)輪蟲(chóng)侵襲的幼魚(yú)死亡率卻不相同，這可能是因?yàn)橛佐~(yú)自身對(duì)外界環(huán)境的二次傷害的抵抗力不同的反應(yīng)。雜交F1代的死亡率均低于母本和父本，并顯著低于母本滇池金線(xiàn)鲃的死亡率，說(shuō)明雜交F1代在受到車(chē)輪蟲(chóng)侵?jǐn)_后有較好的耐受力。

3.3小瓜蟲(chóng)和車(chē)輪蟲(chóng)生活周期與病魚(yú)死亡規(guī)律的關(guān)系

小瓜蟲(chóng)從形成胞囊開(kāi)始至幼蟲(chóng)破囊而出，一般須經(jīng)過(guò)23～25 h，幼蟲(chóng)破囊24 h內(nèi)感染率最高[13]；車(chē)輪蟲(chóng)無(wú)性繁殖以24 h為一周期[25]。從本研究結(jié)果來(lái)看，感染小瓜蟲(chóng)后最初3 d內(nèi)沒(méi)有魚(yú)死亡，感染車(chē)輪蟲(chóng)后最初2 d內(nèi)只有兩到三條幼魚(yú)死亡，說(shuō)明這段時(shí)間內(nèi)還沒(méi)有大量蟲(chóng)體侵襲寄主，蟲(chóng)體處于繁殖階段，當(dāng)繁殖達(dá)到一定數(shù)量的蟲(chóng)體侵襲寄主后奪取宿主營(yíng)養(yǎng)逐漸發(fā)育至成熟，到第4天左右寄主死亡量才達(dá)到高峰，這與小瓜蟲(chóng)和車(chē)輪蟲(chóng)的生活周期相吻合。之后死亡量逐漸回落，這可能是因?yàn)榧闹鞔罅克劳龊?，寄主資源缺乏，寄生蟲(chóng)之間競(jìng)爭(zhēng)增大，蟲(chóng)體開(kāi)始死亡，危害也逐漸減少。與池塘養(yǎng)殖的情況相似，小瓜蟲(chóng)和車(chē)輪蟲(chóng)常在仔稚魚(yú)下塘后一周內(nèi)爆發(fā)式的發(fā)生，對(duì)養(yǎng)殖魚(yú)類(lèi)造成較大危害，但不同的是，在大塘養(yǎng)殖中死亡量高峰期不止一兩天，特別是養(yǎng)殖密度過(guò)大時(shí)，所以在魚(yú)苗下塘前用硫酸銅或生石灰對(duì)池塘進(jìn)行徹底的消毒處理尤顯重要。

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(責(zé)任編輯：張瀟峮)

Resistibility of Sinocyclocheilus grahami,S.xichouensis and their hybrid F1 to Ichthyophthirius multifiliis and Trichodina spp.

ZHAO Ting-yi1,2,PAN Xiao-fu1,CHEN Xiao-yong1,YANG Jun-xing1

(1.StateKeyLaboratoryofGeneticResourcesandEvolution,KunmingInstituteofZoology,ChineseAcademyofSciences,Kunming650223China;2.UniversityofChineseAcademyofSciences,Beijing100049,China)

Abstract：Sinocyclocheilus grahami, S.xichouensis and their hybrid F1 (S.grahami ♀×S.xichouensis♂) were infected twice by Ichthyophthirius multifiliis and Trichodina spp.artificially to conduct a investigation of their resistibility.The mean mortality rate of one and half a year′s hybrid F1, S.grahami and S.xichouensis which infected by I.multifiliis was (50.00±11)%,(56.70±23)%,(80.0±18)% respectively.The mortality rate of hybrid F1 was significantly lower than that of S.xichouensis by analysis of variance (P<0.05),it showed that the resistibility of hybrid F1 was obviously higher than its male parent.The mean mortality rate of half of a year′s hybrid F1, S.grahami and S.xichouensis which infected by Trichodina spp.was (40.56±13)%,(56.11±05)%,(42.78±13)% respectively.As a result of analysis of variance, mortality rate of hybrid F1 was significantly lower than that of S.grahami ,it showed that resistibility of hybrid F1 was higher than its female parent apparently.Hybrid F1, S.grahami and S.xichouensis showed the similar tendency in mortality,it rose significantly in the first 3 days and reached the top during the 4(th) to 7(th) day,and then had a gradual fall,finally it dropped to 0. Trichodina spp. which was used to infect fish in this experiment appear mainly on skin of body surface:there are about 57%～79% on trunk,12%～28% on fins and fewer on head 4%～15%.There are 10%～20% I.multifiliis which was found on gills,different with I.multifiliis there are rarely Trichodina spp.be found on gills in this research 0%～3%.

Key words：hyprid;Sinocyclocheilus grahami; S.xichouensis; Ichthyophthirius multifiliis; Trichodina spp.

中圖分類(lèi)號(hào)：S941.5

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1000-6907-(2016)02-0033-07

作者簡(jiǎn)介：第一趙婷怡(1988-)，女，碩士研究生，專(zhuān)業(yè)方向?yàn)闈竦厣锏倪M(jìn)化與保護(hù)。E-mail:ginsheery@126.com.通訊作者：陳小勇。E-mail:chenxy@mail.kiz.ac.cn;楊君興。E-mail:yangjx@mail.kiz.ac.cn

收稿日期：2014-05-14；

修訂日期：2015-12-10

資助項(xiàng)目：中國(guó)科學(xué)院昆明動(dòng)物研究所“一三五”重大專(zhuān)項(xiàng)；云南省應(yīng)用基礎(chǔ)研究面上項(xiàng)目(2012FB183)；中國(guó)科學(xué)院西部之光(292006312D11033)；云南省社會(huì)發(fā)展科技計(jì)劃(2012CA014)