蔣湘輝　駱小年　金廣?！±罹磦ァ⒘x新　楊培民　張　?。ㄟ|寧省淡水水產(chǎn)科學研究院，遼寧省水生動物病害防治重點實驗室，遼陽111000）

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蔣湘輝駱小年?金廣海李敬偉劉義新楊培民張健
（遼寧省淡水水產(chǎn)科學研究院，遼寧省水生動物病害防治重點實驗室，遼陽111000）

摘要:為探討不同蛋白質和脂肪水平飼料對拉氏幼魚生長、體成分和免疫力的影響，以魚粉和豆粕為蛋白質源，以豆油為脂肪源，配制蛋白質水平分別為23%、28%、33%、38%，脂肪水平分別為5%、8%、11%的12種半精制飼料，飼喂初始均重為（27.60±0.13）g的拉氏幼魚。每種飼料投喂3個網(wǎng)箱（重復），每個網(wǎng)箱放養(yǎng)30尾試驗魚，進行60 d的養(yǎng)殖試驗。結果表明：飼料蛋白質水平對拉氏幼魚的增重率（WGR）、特定生長率（SGR）、蛋白質效率（PER）和飼料系數(shù)（FCR）有顯著影響（P＜0.05），飼料脂肪水平對拉氏幼魚的PER和FCR有顯著影響（P＜0.05），但飼料蛋白質和脂肪水平對各生長性能指標無顯著的交互作用（P＞0.05）。23%和28%蛋白質組的WGR和SGR顯著高于33%和38%蛋白質組（P＜0.05），8%脂肪組的FCR顯著低于11%脂肪組（P＜0.05），與5%脂肪組差異不顯著（P＞0.05）。隨著飼料中蛋白質水平的升高，全魚粗蛋白質、粗脂肪和粗灰分含量都呈現(xiàn)出先升高后降低的趨勢，在蛋白質水平為28%時達到最高值，而全魚水分含量不受飼料蛋白質水平的影響（P＞0.05）。隨著飼料中脂肪水平的升高，全魚粗脂肪含量呈現(xiàn)升高的趨勢，但8%和11%脂肪組差異不顯著（P＞0.05）。嗜水氣單胞菌攻毒48 h后，低、中蛋白質組（23%和28%蛋白質組）的存活率高于高蛋白質組（33%和38%蛋白質組），低脂肪組（5%脂肪組）的存活率高于其他2個脂肪組（8%和11%組）。綜合以上研究結果得出，拉氏幼魚飼料的適宜蛋能比為23.67～26.03 mg/ kJ，蛋白質水平為23%～28%，脂肪水平為5%～8%。

關鍵詞:拉氏幼魚；蛋白質；脂肪；生長；體成分；免疫力

1　材料與方法

1.1試驗池塘

1.2試驗魚及馴化

選取健康、無傷病、體長與體重基本一致［平均體重（27. 60±0. 13）g，平均體長（11. 60± 0.09）cm］的拉氏幼魚1 080尾，隨機放入36個網(wǎng)箱內，每個網(wǎng)箱放養(yǎng)30尾。將36個網(wǎng)箱隨機分為12個組，每組3個重復（網(wǎng)箱）。試驗魚在網(wǎng)箱中馴化1周，每天06：30、10：30、14：30和18：30各投喂飼料1次。

1.3試驗飼料

試驗設4個蛋白質水平，分別為23%、28%、33%、38%，每個蛋白質水平下設3個脂肪水平，分別為5%、8%、11%。以魚粉和豆粕為蛋白質源，豆油為脂肪源，糊精為糖源，共配制12種試驗飼料。試驗飼料的總糖含量在25%左右，蛋能比在18.71～31.30 mg/ kJ范圍內（以微晶纖維素作為調節(jié)物質，不計算在內），用小型環(huán)模飼料機制粒，粒徑為2.0 cm。

表1　試驗飼料組成及營養(yǎng)水平（干物質基礎）Table 1 Composition and nutrient levels of experimental diets（DM basis）　%

1.4飼養(yǎng)管理

試驗水源來自鐵嶺縣青年水庫，試驗期間水溫（23±4）℃，pH在7.6左右。每個網(wǎng)箱放1個氣石，24 h充氧。養(yǎng)殖水體透明度在20～30 cm，氨氮（NH3-N）濃度＜0.4 mg/ L，每天投喂4次，分別在06：30、10：30、14：30和18：30，根據(jù)剩余殘餌量及體重變化來調整投喂量，每隔15 d測定1次體重，投喂量為平均體重的5%，飼養(yǎng)時間為60 d。

1.5攻毒試驗

在試驗結束后，每組挑選25尾魚進行攻毒試驗。病原菌采用的是嗜水氣單胞菌（Aeromonas hydrophila），由遼寧省水生動物病害防治重點實驗室提供，將2次活化后的嗜水氣單胞菌用無菌生理鹽水稀釋，通過預試驗確定選用的濃度約為1× 107CFU/ mL。試驗魚按每100 g體重腹腔注射菌液1.0 mL進行攻毒，注射后將試驗魚放入塑料水槽中，水體24 h連續(xù)充氧，觀察魚體死亡情況并統(tǒng)計。

1.6測定指標

1.6.1生長指標測定

特定生長率（SGR，%/ d）＝100×（lnWt-lnW0）/ d；

增重率（WGR，%）＝100×（Wt-W0）/ W0；

蛋白質效率（PER，%）＝（Wt-W0）/（F×CP）；

存活率（SR，%）＝100×Nt/ N0；

飼料系數(shù)（FCR）＝F/（Wt-W0）。

式中：Wt為終末體重（g）；W0為初始體重（g）；d為飼養(yǎng)天數(shù)（d）；Nt為終末尾數(shù)；N0為初始尾數(shù)；F為投飼量（g）；CP為飼料中粗蛋白質含量（%）。

1.6.2魚體及飼料樣品營養(yǎng)成分測定

樣品中水分、粗灰分、粗蛋白質、粗脂肪含量分別采用恒溫干燥法、馬福爐（550℃）灼燒法、凱氏定氮法和索氏抽提法測定；總糖含量的測定采用3，5 -二硝基水楊酸法；微機量熱儀測定總能［13-14］。

1.7數(shù)據(jù)處理與分析

試驗數(shù)據(jù)用平均值±標準誤（mean±SE）表示。4個蛋白質水平和3個脂肪水平數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0軟件進行雙因素方差分析，4個蛋白質水平之間的數(shù)據(jù)和3個脂肪水平之間的數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0軟件進行單因素方差分析，SNK檢驗和Duncan氏法多重比較組間差異，P＜0.05表示差異顯著［15］。

2　結果與分析

表2　攝食不同蛋白質和脂肪水平飼料的拉氏?幼魚的生長性能Table 2 Growth performance of juvenile Phoxinus lagowskii fed the diets containing various protein and lipid levels（n＝3）

表3　攝食不同蛋白質和脂肪水平飼料的拉氏?幼魚的體成分（濕重基礎）Table 3 Body composition of juvenile Phoxinus lagowskii fed the diets containing various protein and lipid levels（wet weight basis，n＝3）　%

續(xù)表3　

3　討　論

蛋白質和脂肪是魚類飼料組成定量的最重要的基礎參數(shù)，飼料中的蛋白質能給動物機體提供必需的氨基酸，飼料中的脂肪能給動物生長提供必需的脂肪酸，使體內的脂溶性維生素更好地被吸收利用［16］，合適的蛋白質和脂肪水平對于魚類的生長起到至關重要的作用［17］。拉氏屬于雜食性鯉科魚類，有關該魚人工配合飼料的營養(yǎng)水平還沒有學者專門進行研究。如果在實際生產(chǎn)中蛋白質水平過高，會導致部分蛋白質源被浪費，從而污染水質和提高飼料成本；如果蛋白質水平過低，容易造成拉氏在養(yǎng)殖過程中營養(yǎng)素攝入不均衡。同樣，飼料中脂肪水平過高或者過低也會影響拉氏的生長。因此，研究拉氏的適宜蛋白質和脂肪需求量具有重要意義。

目前，魚類飼料中適宜蛋能比差異較大，主要是由魚的種類、年齡、天氣、水溫環(huán)境、食性、飼料蛋白質源的質量、非蛋白質能源質量以及計算總能時所采用生理數(shù)值的不同而導致的［18-20］。

在本試驗中，隨著飼料中蛋白質水平的升高，試驗魚的特定生長率和蛋白質效率出現(xiàn)先升高后降低的趨勢，魚類的最大生長并未發(fā)生在最高蛋白質水平組，而是在較低的蛋白質水平組，這與Samantaray等［21］的研究結果相一致，這說明此時飼料中的蛋白質和能量達到了平衡狀態(tài)。另外，通過試驗數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)，在適宜蛋白質水平（28%）下，適當增加飼料中脂肪水平可以提高拉氏幼魚的特定生長率與飼料的蛋白質效率，說明飼料中的脂肪起到了節(jié)約蛋白質的作用，這與Ai等［22］的研究結果相似。在本試驗中，當?shù)澳鼙葹?3.67～26.03 mg/ kJ，蛋白質水平為23%～28%，脂肪水平為5%～8%時，拉氏幼魚的特定生長率和蛋白質效率達到最大值，且飼料系數(shù)達到了最小值，這一研究結果與張萍等［23］在鯽魚上所得結論相似，說明食性相同的同科魚類對營養(yǎng)需求相近。有學者研究發(fā)現(xiàn)，飼料中蛋白質和脂肪水平對魚類的存活率沒有顯著影響［24-25］，這與本試驗結果一致。

魚體蛋白質含量的增加可作為魚類生長的一個最重要的標志。本試驗結果表明，全魚粗蛋白質含量從低蛋白質組（23%蛋白質組）出現(xiàn)穩(wěn)步上升，在中蛋白質組（28%蛋白質組）達到了最大值，之后在高蛋白質組（33%、38%）開始降低，初步分析可能是拉氏幼魚只有在合適的蛋能比范圍內才能獲得最大的生長，飼料中過高水平的蛋白質沒有被機體利用合成魚體蛋白質，反而會被當做能量消耗掉，這和Samantaray等［21］在鱧魚（Channa striata）上以及溫小波等［26］在中華鱘（Acipenser sinensis）上的研究結果相似。本試驗所得數(shù)據(jù)還顯示，在中低蛋白質水平（23%～28%）下，隨著飼料中脂肪水平的升高，全魚粗脂肪含量有升高的趨勢；但是在高蛋白質水平（33%～38%）下，隨著飼料脂肪水平的升高，全魚粗脂肪含量則無升高的趨勢。分析原因，作者認為當拉氏幼魚對蛋白質需求得不到滿足或超出其生長需求量的時候，非蛋白質能源（脂肪、糖類等）不能代替蛋白質來提高生長，這與Peres等［27］、Company等［28］在歐洲鱸（Dicentrarchus labrax）上以及劉永堅等［29］在紅姑魚（Sciaenops ovellatus）上所得結果一致。

嗜水氣單胞菌廣泛分布于自然界的各種水體中，是多種水生動物的原發(fā)性致病菌，為條件致病菌，是典型的人、獸、魚共患病原菌。嗜水氣單胞菌在水溫14.0～40.5℃范圍內都可繁殖，且毒性很強，通常作為致病菌進行攻毒試驗［30-31］，試驗動物的存活率可以綜合反映該動物的免疫力［32］。本試驗發(fā)現(xiàn)，在拉氏幼魚注射嗜水氣單胞菌后12 h，不同程度出現(xiàn)了典型的出血癥狀，在24 h后達到死亡的高峰，這與徐磊等［33］的研究結果相一致。攻毒48 h后，低、中蛋白質組（23%和28%蛋白質組）的存活率高于高蛋白質組（33%和38%蛋白質組），低脂肪組（5%脂肪組）的存活率高于其他2個脂肪組（8%和11%組）。蔡春芳等［34］研究發(fā)現(xiàn)，體脂含量的增加與免疫力下降有一定的相關性，這與本試驗結果相一致。

4　結　論

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（責任編輯菅景穎）

Effects of Different Protein and Lipid Level Diets on Growth，Body Composition and Immunity of Juvenile Phoxinus lagowskii

JIANG Xianghui LUO Xiaonian?JIN Guanghai LI Jingwei LIU Yixin YANG Peimin ZHANG Jian
（Freshwater Fisheries Research Academy of Liaoning Province，Liaoning Key Laboratory for Prevention and Treatment of Aquatic Animal Diseases，Liaoyang 111000，China）

Abstract：To evaluate the effects of different protein and lipid level diets on growth，body composition and immunity of juvenile Phoxinus lagowskii，twelve practical diets were formulated to contain 23%，28%，33%，38%of protein supplied with fish meal and soybean meal，and 5%，8%，11%of lipid supplied with soybean oil，respectively. Each diet was fed to 3 net cages for 60 d，and each net cage had 30 juvenile Phoxinus lagowskii with an initial average body weight of（27.60±0.13）g. The results showed that protein level significantly affected weight gain rate（WGR），special growth rate（SGR），protein efficiency ratio（PER）and feed conversion rate（FCR）（P＜0.05），and lipid level significantly affected PER and FCR（P＜0.05）. No significant interactions between dietary protein and lipid levels existed for growth performance indices（P＞0.05）. The WGR and SGR of fish in 23%and 28%protein groups were significantly higher than those in 33%and 38%groups（P＜0.05）；whereas，the FCR of fish in 8%lipid group was significantly lower than that in 11% lipid group（P＜0.05），but there was no significant difference between 8%and 5%lipid groups（P＞0.05）. With the increase of protein level，the crude protein，crude lipid and ash contents of whole body were firstly increased and then depressed，and the highest values of them were found when protein level was 28%. While moisture content of whole body was not significantly affected by dietary protein level（P＞0.05）. With the increase of lipid level，the crude lipid content of whole body showed an increasing trend，but no significant difference was found between 8%and 11%lipid groups（P＞0.05）. The survival rate in low and middle protein groups（23%and 28%protein groups）was higher than that in high protein groups（33%and 38%protein groups）at 48 h after injecting Aeromonas hydrophila（P＜0.05）. The survival rate in low lipid group（5%lipid group）was higher than that in other 2 groups（8%and 11%lipid groups）at 48 h after injecting Aeromonas hydrophila. In conclusion，the overall results in this study suggest that diet containing 23%to 28%protein and 5%to 8%lipid with a protein to energy ratio of 23.67 to 26.03 mg/ kJ is suitable for juvenile Phoxinus lagowskii.［Chinese Journal of Animal Nutrition，2016，28（3）：864-871］

Key words：juvenile Phoxinus lagowskii；protein；lipid；growth；body composition；immunity

Corresponding author?，professor，E-mail：luo2989_cn@sina.com

通信作者:?駱小年，研究員，E-mail：luo2989_cn@sina.com

作者簡介:蔣湘輝（1981—），女，遼寧朝陽人，工程師，碩士，研究方向為動物營養(yǎng)與飼料科學。E-mail：jiangxianghui@sohu.com

基金項目:遼寧省農業(yè)攻關及產(chǎn)業(yè)化項目——漁業(yè)新品種引進、開發(fā)（2015103049）；漁業(yè)新品種選育與健康養(yǎng)殖技術（2011203003）

收稿日期:2015-09-09

doi：10.3969/ j.issn.1006-267x.2016.03.028

中圖分類號:S963

文獻標識碼:A

文章編號:1006-267X（2016）03-0864-08