李新新，李貴新，黃琰，傅玲，欒可峰，王文浩

(1 濰坊醫(yī)學(xué)院，山東濰坊261000；2濰坊醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院)

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胃癌組織中CD133和ALDH1表達(dá)變化及意義

李新新1，李貴新2，黃琰2，傅玲2，欒可峰1，王文浩2

(1 濰坊醫(yī)學(xué)院，山東濰坊261000；2濰坊醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院)

摘要：目的觀察胃癌組織中腫瘤干細(xì)胞標(biāo)志物CD133和乙醛脫氫酶1(ALDH1)的表達(dá)變化，并探討其臨床意義。方法采用免疫組化法檢測(cè)117例原發(fā)胃癌患者胃癌組織及癌旁組織中的CD133和ALDH1，并分析其與臨床病理參數(shù)、預(yù)后的關(guān)系。結(jié)果CD133、ALDH1在胃癌組織中陽性表達(dá)率分別為33.33%、49.57%，癌旁組織均陰性，P均<0.01。CD133表達(dá)與胃癌組織分化程度、臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P均<0.05)，ALDH1表達(dá)與胃癌浸潤(rùn)深度、組織分化程度、臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P均<0.05)。CD133、ALDH1陽性表達(dá)者5年生存率均高于陰性者(P均<0.05)。Cox回歸多因素分析顯示，CD133、ALDH1陽性表達(dá)是影響患者生存的獨(dú)立預(yù)后因素。結(jié)論胃癌組織中CD133、ALDH1表達(dá)增高，在胃癌發(fā)生、發(fā)展及及預(yù)后中起重要作用。

關(guān)鍵詞：胃癌；腫瘤干細(xì)胞；CD133蛋白；乙醛脫氫酶1

我國(guó)是胃癌高發(fā)國(guó)家，胃癌處于惡性腫瘤死亡原因的第3位。腫瘤干細(xì)胞(CSCs)可能是具有成瘤能力的腫瘤起始細(xì)胞，CD133與ALDH1是其篩選及鑒定的標(biāo)志物[1～8]，但在胃癌中的研究相對(duì)較少。2007年5月～2015年6月，我們觀察了胃癌組織中CD133、ALDH1的表達(dá)變化，并探討其臨床意義。

1材料與方法

1.1臨床資料收集2007年5月～2009年5月在濰坊醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院行胃癌根治術(shù)并有完整臨床資料的117例初治患者，術(shù)前均未行任何抗腫瘤治療。其中男58例，女59例；年齡31～80歲，平均53.4歲；經(jīng)病理確診均為腺癌;組織分化程度：高分化40例，中分化39例，低分化38例；臨床分期：Ⅰ期31例，Ⅱ期28例，Ⅲ期27例，Ⅳ期31例；腫瘤直徑≤5 cm 52例，>5 cm 65例；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移77例。隨訪時(shí)間截止2015年5月，隨訪時(shí)間5～71個(gè)月，平均31.97個(gè)月。每例手術(shù)標(biāo)本離體后5 min內(nèi)切取癌灶中心非壞死部分及距癌灶5 cm 外正常胃組織，置于甲醛液中固定,石蠟包埋切片。

1.2CD133與ALDH1檢測(cè)方法采用免疫組化法，按試劑盒說明書操作。CD133、ALDH1單克隆抗體分別購(gòu)自Milrenyi Biotec與Epitomics公司，抗體修復(fù)液購(gòu)自康為世紀(jì)公司，免疫組化試劑盒購(gòu)自Dako公司。CD133主要表達(dá)于細(xì)胞膜上，ALDH1主要表達(dá)于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，陽性表現(xiàn)均為棕褐色、棕黃色或淺黃色著色。在每張組織片中隨機(jī)選取4個(gè)高倍視野，每個(gè)視野觀察500個(gè)細(xì)胞，計(jì)數(shù)陽性細(xì)胞率，≥10%為陽性表達(dá)[9]。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)數(shù)資料用χ2檢驗(yàn)，相關(guān)性采用Spearman相關(guān)分析，生存分析采用Kaplan-Meier法和Log-rank檢驗(yàn)，采用Cox回歸模型進(jìn)行預(yù)后因素分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1胃癌及癌旁組織中CD133與ALDH1表達(dá)比較CD133、ALDH1在胃癌組織陽性表達(dá)率分別為33.33%(39/117)、49.57%(58/117)，癌旁組織均陰性表達(dá)，P均<0.01。

2.2CD133、ALDH1表達(dá)與胃癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系見表1。

2.3胃癌組織中CD133與ALDH1表達(dá)的關(guān)系胃癌組織中CD133、ALDH1表達(dá)無相關(guān)性(r=0.133，P=0.153)。

2.4CD133、ALDH1與生存預(yù)后的關(guān)系胃癌5年生存率CD133、ALDH1陽性者分別為2.56%、17.24%，均低于陰性者的41.03%、38.98%，P均<0.05；Cox回歸多因素分析顯示，CD133(RR=0.407，P=0.012)及ALDH1(RR=0.422,P=0.024)的表達(dá)是影響胃癌患者生存的獨(dú)立預(yù)后因素。

表1　CD133、ALDH1表達(dá)與胃癌臨床病理病理因素的關(guān)系

3討論

CSCs與腫瘤的耐藥、復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移存在著密切關(guān)系[10]，幾乎所有實(shí)體瘤中均存在CSCs[11,12]。CD133是一個(gè)具有5次跨膜結(jié)構(gòu)的單鏈糖蛋白，可能是一種通過酪氨酸殘基磷酸化作用而發(fā)揮級(jí)聯(lián)效應(yīng)的生長(zhǎng)因子受體。Ishigami 等[13]發(fā)現(xiàn)，胃癌干細(xì)胞高表達(dá)CD133，且胃癌組織浸潤(rùn)深度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與CD133表達(dá)有關(guān)。ALDH1是主要存在于細(xì)胞質(zhì)中的一種催化細(xì)胞內(nèi)乙醛氧化為乙酸的酶，參與正常組織和腫瘤組織的基因表達(dá)，是細(xì)胞分裂增殖及分化的必需物質(zhì)。Levi等[14]研究發(fā)現(xiàn)，ALDH1在造血和神經(jīng)系統(tǒng)的干細(xì)胞中高表達(dá)，可作為表面標(biāo)志物對(duì)CSCs進(jìn)行分選。

本研結(jié)果顯示，胃癌組織中CD133、ALDH1高表達(dá),而癌旁正常組織中則均為陰性表達(dá)，這對(duì)胃癌的診斷具有推動(dòng)作用。同時(shí)，胃癌組織中CD133陽性表達(dá)率越高，組織分化程度越低、臨床分期越高，越易發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移；ALDH1陽性表達(dá)率越高，腫瘤浸潤(rùn)越深、組織分化程度越低、臨床分期越高、越易發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，腫瘤的惡性程度越高。并且，CD133、ALDH1陽性表達(dá)者生存率低、預(yù)后差，以此我們可以評(píng)估患者的遠(yuǎn)期生存狀況。但我們并未發(fā)現(xiàn) CD133與ALDH1在胃癌組織中的陽性表達(dá)存在關(guān)系，但兩者仍可獨(dú)立作為胃癌CSCs的標(biāo)志物，為胃癌發(fā)病機(jī)制及診療的研究奠定基礎(chǔ)。

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(收稿日期：2015-08-24)

中圖分類號(hào)：R735.2

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B

文章編號(hào)：1002-266X(2016)10-0042-02

doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2016.10.017

通信作者：李貴新(E-mail： liguixin@wfmc.edu.cn)

基金項(xiàng)目：濰坊醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院科技創(chuàng)新基金資助項(xiàng)目(K11TS1105)。