趙　威,田　笑,趙麗菲,李美言,邱廣斌

(中國(guó)人民解放軍第二〇二醫(yī)院檢驗(yàn)科，遼寧沈陽(yáng) 110003)

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·臨床研究·

西門子ADVIA 2120i全自動(dòng)五分類血細(xì)胞分析儀性能驗(yàn)證及評(píng)價(jià)

趙威,田笑,趙麗菲,李美言,邱廣斌△

(中國(guó)人民解放軍第二〇二醫(yī)院檢驗(yàn)科，遼寧沈陽(yáng) 110003)

摘要:目的對(duì)校準(zhǔn)后的西門子ADVIA 2120i全自動(dòng)五分類血細(xì)胞分析儀進(jìn)行方法學(xué)性能驗(yàn)證。方法對(duì)西門子ADVIA 2120i全自動(dòng)五分類血細(xì)胞分析儀分別進(jìn)行不精密度、正確度、攜帶污染率、臨床可報(bào)告范圍、儀器模式間比對(duì)、生物參考區(qū)間及儀器分類與人工分類比對(duì)等性能指標(biāo)的驗(yàn)證。結(jié)果該儀器不精密度、可比性、線性范圍、臨床可報(bào)告范圍、攜帶污染率、生物參考區(qū)間、不同進(jìn)樣模式間比對(duì)、儀器分類與手工分類比對(duì)等指標(biāo)均通過(guò)驗(yàn)證。結(jié)論該儀器性能良好，可用于臨床標(biāo)本的檢測(cè)，是一種較理想的全血細(xì)胞分析儀。

關(guān)鍵詞:全血細(xì)胞分析儀；準(zhǔn)確度；精密度；攜帶污染率

醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可的專用準(zhǔn)則國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化組織(ISO)15189《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力的專用要求》提出申請(qǐng)認(rèn)可的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對(duì)設(shè)備、檢測(cè)系統(tǒng)或方法的主要分析性能進(jìn)行驗(yàn)證，證實(shí)其能夠達(dá)到臨床檢測(cè)所要求的標(biāo)準(zhǔn)[1]。本實(shí)驗(yàn)室參考國(guó)際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)、美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(CLSI)的相關(guān)性能評(píng)價(jià)文件，以一般健康人群或一般住院患者的乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝血為研究對(duì)象[2]，對(duì)德國(guó)西門子公司的ADVIA 2120i全自動(dòng)五分類血細(xì)胞分析儀進(jìn)行性能評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1材料與方法

1.1標(biāo)本來(lái)源采集EDTA-K2抗凝新鮮全血，標(biāo)本采集操作按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》(第3版)[3]進(jìn)行。

1.2儀器與試劑(1)驗(yàn)證儀器及參比儀器：驗(yàn)證儀器為德國(guó)西門子公司的ADVIA 2120i全自動(dòng)五分類血細(xì)胞分析儀，參比儀器為本實(shí)驗(yàn)室相同型號(hào)的五分類全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀。(2)試劑：德國(guó)西門子公司原裝配套試劑。精密度驗(yàn)證采用美國(guó)Bio-Rad公司的質(zhì)控品。

1.3方法驗(yàn)證指標(biāo)包括：不精密度、可比性、線性范圍、臨床可報(bào)告范圍、攜帶污染率、生物參考區(qū)間、不同進(jìn)樣模式間比對(duì)、儀器分類與手工分類比對(duì)。所有試驗(yàn)均在6 h內(nèi)完成檢測(cè)，操作方法參照儀器操作說(shuō)明書進(jìn)行。

1.3.1不精密度[4]按照CLSI的EP15-A2文件要求，使用Bio-Rad全血高、中、低3個(gè)水平質(zhì)控品(以L、N、H表示)，按照本室《ADVIA 2120i血液分析儀標(biāo)準(zhǔn)操作程序》，混勻后每天連續(xù)進(jìn)行4次測(cè)定，連續(xù)測(cè)定5 d，計(jì)算批內(nèi)不精密度和總不精密度，以變異系數(shù)(CV)表示。判定標(biāo)準(zhǔn)：白細(xì)胞(WBC)、紅細(xì)胞(RBC)、血紅蛋白(Hb)、血細(xì)胞比容(Hct)、紅細(xì)胞平均體積(MCV)、紅細(xì)胞平均血紅蛋白量(MCH)、紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度(MCHC)及血小板(PLT)結(jié)果應(yīng)符合WS/T 406-2012精密度評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，CV小于或等于各指標(biāo)精密度評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)判為合格。各檢測(cè)指標(biāo)精密度評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，見表1。

1.3.2正確度[5]本科室的參比儀器參加了原衛(wèi)生部的室間質(zhì)評(píng)活動(dòng)，成績(jī)合格。因其檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性可以進(jìn)行傳遞。驗(yàn)證儀器的正確度可以通過(guò)系統(tǒng)間的比對(duì)來(lái)實(shí)現(xiàn)，用臨床標(biāo)本進(jìn)行偏倚評(píng)估。驗(yàn)證方案：選取20份當(dāng)日采集的、濃度分布狀況比較具有代表性的患者血液標(biāo)本，同時(shí)在參比儀器和驗(yàn)證儀器上進(jìn)行檢測(cè)，同一標(biāo)本在兩檢測(cè)系統(tǒng)之間的檢測(cè)時(shí)間之差不超過(guò)4 h。偏倚=︱驗(yàn)證儀器值-參比儀器值︱/參比儀器值×100%。WBC≤2.0×109/L和WBC>2.0×109/L的正確度驗(yàn)證判定標(biāo)準(zhǔn)分別為10.0%、7.5%；PLT≤40×109/L和PLT>40×109/L的正確度驗(yàn)證判定標(biāo)準(zhǔn)分別為15.0%、12.5%；RBC的正確度驗(yàn)證判定標(biāo)準(zhǔn)為3.0%；Hb 、Hct、MCV、MCH、MCHC、PLT的正確度驗(yàn)證判定標(biāo)準(zhǔn)均為3.5%。評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)：偏倚小于或等于各指標(biāo)正確度驗(yàn)證判定標(biāo)準(zhǔn)為符合，80%及以上的偏倚符合相應(yīng)判定標(biāo)準(zhǔn)即為驗(yàn)證通過(guò)。

表1　　各檢測(cè)指標(biāo)精密度評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)(%)

1.3.3線性范圍[6]驗(yàn)證方法：由于血液標(biāo)本的特殊性，對(duì)全血的要求，以及選取高值和低值標(biāo)本的不可混合性，本試驗(yàn)選取1份接近預(yù)期上限的高值全血標(biāo)本，與儀器自帶的稀釋液進(jìn)行混合配制，分別按100%、80%、60%、40%、20%、10%(當(dāng)需要時(shí))、5%(當(dāng)需要時(shí))的比例進(jìn)行稀釋，每個(gè)稀釋度測(cè)定1次。將實(shí)測(cè)值與理論值作比較(偏離應(yīng)小于10%)，計(jì)算Y=aX+b，驗(yàn)證線性范圍。判定標(biāo)準(zhǔn)：a值在1±0.05范圍內(nèi)，相關(guān)系數(shù)r≥0.975或r2≥0.95為可接受。

1.3.4攜帶污染率[7]驗(yàn)證方案：取高濃度血液標(biāo)本，混合均勻后連續(xù)測(cè)定3次，測(cè)定值分別為H1、H2、H3；再取低濃度血液標(biāo)本，連續(xù)測(cè)定3次，測(cè)定值分別為L(zhǎng)1、L2、L3。按以下公式計(jì)算攜帶污染率：攜帶污染率=(L1-L3)/(H3-L3)×100%。評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)：WBC≤3.0%，RBC≤2.0%、Hb≤2.0%、PLT≤4.0%即合格。

1.3.5生物參考區(qū)間驗(yàn)證方案：選取20例健康人血標(biāo)本，男10例，女10例，年齡23～70歲，計(jì)算各檢測(cè)項(xiàng)目95%分位數(shù)的結(jié)果。合格率(R)=測(cè)定結(jié)果在參考區(qū)間范圍內(nèi)的例數(shù)/總測(cè)定例數(shù)，R≥95%即合格。

1.3.6不同進(jìn)樣模式間比對(duì)驗(yàn)證方法：比對(duì)參數(shù)包括WBC、RBC、Hb、Hct、MCV、PLT 6個(gè)參數(shù)。比對(duì)過(guò)程：每個(gè)項(xiàng)目選擇至少5份濃度分布比較具有代表性的患者血液標(biāo)本，在相同檢測(cè)系統(tǒng)不同進(jìn)樣模式各檢測(cè)2次，計(jì)算其均值的偏倚：偏倚=︱自動(dòng)進(jìn)樣模式檢測(cè)均值-手動(dòng)進(jìn)樣模式檢測(cè)均值︱/手動(dòng)進(jìn)樣模式檢測(cè)均值×100%。偏倚判定標(biāo)準(zhǔn)：WBC≤5%、RBC≤2%、Hb≤2%、Hct≤3%、MCV≤3%、PLT≤7%，80%及以上的標(biāo)本滿足以上判定標(biāo)準(zhǔn)，即為該項(xiàng)目合格。

1.3.7儀器分類與手工分類比對(duì)驗(yàn)證方法：選取20份儀器分類未見明顯異常報(bào)警的患者新鮮血液標(biāo)本，每份標(biāo)本均分別用于參考方法和儀器法檢測(cè)，其中參考方法為人工染色顯微鏡分析，每份標(biāo)本推兩張血涂片(A片和B片)，由兩位資深檢驗(yàn)人員對(duì)每張血涂片分析200個(gè)細(xì)胞。其中1位使用血涂片A，另1位使用B片，每份標(biāo)本的人工分類結(jié)果取平均值。判定標(biāo)準(zhǔn)：將儀器法測(cè)量結(jié)果與人工分析的結(jié)果比較，計(jì)算兩種方法的偏倚，偏倚=|儀器測(cè)定值-顯微鏡計(jì)數(shù)值|/顯微鏡計(jì)數(shù)值×100%。判定標(biāo)準(zhǔn)：中性粒細(xì)胞(Net)百分比偏倚小于或等于11.2%、淋巴細(xì)胞(Lym)百分比偏倚小于或等于11.2%、單核細(xì)胞(Mon)百分比偏倚小于或等于14.0%、嗜酸性粒細(xì)胞(EOS)百分比小于或等于18.6%，80%及以上標(biāo)本在生物學(xué)變異允許范圍內(nèi)即可。

1.4質(zhì)量控制儀器按說(shuō)明書要求安裝、調(diào)試后，用西門子公司提供的校準(zhǔn)品校準(zhǔn)該儀器。性能驗(yàn)證期間每次開機(jī)預(yù)熱至少30 min，待系統(tǒng)穩(wěn)定后進(jìn)行標(biāo)本測(cè)試。

2結(jié)果

2.1不精密度批內(nèi)不精密度及總不精密度結(jié)果，見表2。

表2　　批內(nèi)不精密度及總不精密度結(jié)果(%)

續(xù)表2　　批內(nèi)不精密度及總不精密度結(jié)果(%)

2.2正確度驗(yàn)證儀器與參比儀器在WBC、RBC、Hb、Hct、MCV、MCH、MCHC、PLT各項(xiàng)指標(biāo)的偏倚均小于判定標(biāo)準(zhǔn)，RBC、Hb、MCHC的合格率均為100%，MCH、PLT的合格率均為95%，WBC、MCV的合格率均為90%，Hct的合格率為85%，驗(yàn)證通過(guò)。

2.3線性范圍WBC≤2.0×109/L和WBC>2.0×109/L時(shí)線性方程中a值分別為0.989 7、1.005 3，r2分別為0.999 8、0.999 5；RBC、Hb、Hct的線性方程中a值分別為0.992 1、0.997 1、0.999 0，r2分別為0.999 7、0.999 9、0.997 1；PLT≤40×109/L和PLT>40×109/L時(shí)線性方程中a值分別為1.019 3、1.003 9，r2分別為0.999 3、0.998 6；均符合判定標(biāo)準(zhǔn)。線性范圍試驗(yàn)結(jié)果，見表3(見《國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志》網(wǎng)站主頁(yè)“論文附件”)。實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證及廠家標(biāo)注的線性范圍，見表4。

表4　　儀器線性范圍

2.4可報(bào)告范圍根據(jù)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的標(biāo)本并結(jié)合臨床要求，其線性范圍可以滿足臨床的需求，因此可報(bào)告范圍即為線性范圍。WBC、PLT、RBC、Hct、Hb大于或小于表4中的范圍時(shí)，可用手工法或涂片染色鏡檢驗(yàn)證，以鏡檢結(jié)果報(bào)告或以大于或小于線性值報(bào)告。

2.5攜帶污染率WBC、RBC、Hb及PLT的攜帶污染率分別為0.11%、0.75%、1.00%、0.2%，均在要求范圍內(nèi)，驗(yàn)證通過(guò)。見表5(見《國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志》網(wǎng)站主頁(yè)“論文附件”)。

2.6生物參考區(qū)間除Lym百分比的R為95%，其余檢測(cè)項(xiàng)目的R均為100%，各項(xiàng)目R均符合要求，生物參考區(qū)間驗(yàn)證通過(guò)。生物參考區(qū)間驗(yàn)證結(jié)果，見表6(見《國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志》網(wǎng)站主頁(yè)“論文附件”)。

2.7不同進(jìn)樣模式間比對(duì)WBC、RBC、Hb、Hct、MCV、PLT的合格率均為100%。該儀器自動(dòng)模式與手動(dòng)模式測(cè)量結(jié)果偏倚小于允許誤差，驗(yàn)證通過(guò)。

2.8儀器分類與手工分類比對(duì)Net百分比、Lym百分比、Mon百分比、EOS百分比的合格率分別為95%、80%、90%、90%。儀器法測(cè)量結(jié)果與人工分析的結(jié)果比較，兩種方法的偏倚小于判斷標(biāo)準(zhǔn)，驗(yàn)證通過(guò)。

3討論

本科室通過(guò)對(duì)西門子ADVIA 2120i全自動(dòng)五分類血細(xì)胞分析儀的不精密度、正確度、攜帶污染率、臨床可報(bào)告范圍、儀器模式間比對(duì)、生物參考區(qū)間及儀器分類與人工分類比對(duì)等性能指標(biāo)進(jìn)行驗(yàn)證，得出以下結(jié)論：(1)該儀器精密度高、重復(fù)性好，本次精密度驗(yàn)證試驗(yàn)血常規(guī)各項(xiàng)指標(biāo)的批內(nèi)不精密度和總不精密度均符合評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，精密度良好。(2)本檢測(cè)系統(tǒng)室間質(zhì)評(píng)成績(jī)合格。(3)攜帶污染率小，各項(xiàng)攜帶污染率均符合儀器的性能要求。(4)各檢測(cè)指標(biāo)的線性試驗(yàn)結(jié)果表明，檢測(cè)系統(tǒng)具有良好的線性，a值均在1.00±0.05范圍內(nèi)，r2≥0.95，符合要求，各指標(biāo)線性范圍有效。(5)儀器自動(dòng)模式與手動(dòng)模式之間比對(duì)結(jié)果符合要求，驗(yàn)證通過(guò)。(6)檢測(cè)系統(tǒng)結(jié)果均至少有95%數(shù)據(jù)分布在現(xiàn)行生物參考區(qū)間內(nèi)，驗(yàn)證通過(guò)。(7)儀器分類與人工分類比對(duì)結(jié)果符合要求，驗(yàn)證通過(guò)。

綜上所述，本室西門子ADVIA 2120i全自動(dòng)五分類血細(xì)胞分析儀通過(guò)了對(duì)不精密度、可比性、線性范圍、臨床可報(bào)告范圍、攜帶污染率、生物參考區(qū)間、不同進(jìn)樣模式間比對(duì)、儀器分類與手工分類比對(duì)等性能指標(biāo)的驗(yàn)證，性能良好，可用于臨床標(biāo)本的檢測(cè)。

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(收稿日期：2015-10-26)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.05.047

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1673-4130(2016)05-0681-03

通訊作者△，E-mail：13309882153@163.com。