張景華

(河北省任丘市華北石油二部醫(yī)院外科，河北任丘 062552)

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·臨床研究·

p53和Ki-67表達(dá)在乳腺癌中的臨床意義

張景華

(河北省任丘市華北石油二部醫(yī)院外科，河北任丘 062552)

摘要:目的分析p53、Ki-67在乳腺癌組織中的表達(dá)，并探討其與臨床病理特征間的關(guān)系。方法采用免疫組織化學(xué)染色(SP法)檢測58份乳腺癌組織標(biāo)本中p53、Ki-67的表達(dá)情況，并結(jié)合臨床資料進(jìn)行分析。結(jié)果p53表達(dá)陽性率為60.3%，與患者年齡、絕經(jīng)與否無明顯相關(guān)性(P>0.05)，而與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和TNM分期有相關(guān)性(P<0.05)；Ki-67表達(dá)的陽性率為53.4%，與患者年齡、絕經(jīng)與否、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無明顯相關(guān)性(P>0.05)，而與TNM腫瘤分期有相關(guān)性(P<0.05)。結(jié)論p53、Ki-67陽性表達(dá)在乳腺癌組織中具有重要的臨床意義，與乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。

關(guān)鍵詞:乳腺癌；p53；Ki-67；免疫組織化學(xué)

乳腺癌是危害女性健康和生命的主要惡性腫瘤之一，隨著年齡的增長，乳腺癌的發(fā)病率呈明顯上升[1-3]。腫瘤組織抗原Ki-67的高表達(dá)反映了細(xì)胞增殖活躍，而p53抑癌基因是生物體內(nèi)一種抑制細(xì)胞轉(zhuǎn)變癌細(xì)胞的基因。本研究將對乳腺癌組織、增生的乳腺組織和正常的乳腺組織中p53、 Ki-67的表達(dá)進(jìn)行檢測，以探討p53、 Ki-67在乳腺癌發(fā)生、發(fā)展中的作用，并為乳腺癌的預(yù)防、診斷和治療提供一定的理論依據(jù)。

1材料與方法

1.1標(biāo)本來源58份散發(fā)性乳腺癌組織標(biāo)本均取自本院住院患者，患者年齡小于或等于50歲36例，大于50歲22例；絕經(jīng)40例，未絕經(jīng)18例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移24例，無轉(zhuǎn)移34例；TNM腫瘤分期Ⅰ～Ⅱ期30例，Ⅲ～Ⅳ期28例。分期術(shù)后即刻取新鮮組織于-80 ℃保存，全部病理標(biāo)本均在術(shù)后經(jīng)病理科醫(yī)生復(fù)核，并確定腫瘤組織學(xué)類型。

1.2方法

1.2.1Ki-67與p53的檢測對乳腺癌和非癌組織標(biāo)本做免疫組化處理。所有病理標(biāo)本均經(jīng)10% 中性甲醛溶液固定，石蠟包埋，做連續(xù)切片4張，厚度4 μm，其中1張做常規(guī)蘇木精-伊紅(HE)染色，用作組織形態(tài)學(xué)對照和復(fù)核診斷。進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色(SP法)，鼠抗人單克隆Ki-67和p53及SP法免疫組化試劑均購自福州邁新生物科技開發(fā)公司。嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行相關(guān)操作。用已知p53、Ki-67陽性切片作陽性對照，磷酸鹽緩沖液(PBS)代替一抗作陰性對照。檸檬酸緩沖液高溫高壓修復(fù)，二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色，蘇木精復(fù)染。

1.2.2結(jié)果判定p53和Ki-67陽性蛋白表達(dá)定位于細(xì)胞核，呈棕黃色顆粒狀。三者均采用裴小娟等[4]參照文獻(xiàn)的標(biāo)準(zhǔn)計(jì)分。(1)按強(qiáng)度計(jì)分：未著色為0分，淡黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分；(2)按陽性細(xì)胞百分比計(jì)分：陰性為0分，陽性細(xì)胞百分比小于25%為1分；25%～<50%為2分，50%～75%為3分。每張切片均隨機(jī)觀察5個高倍視野，結(jié)果將兩項(xiàng)得分相乘，0分判為陰性，≤2分判為弱陽陰性，≥3分判為陽性。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,計(jì)數(shù)資料以例數(shù)或百分率比較，采用χ2檢驗(yàn)進(jìn)行比較分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1p53與Ki-67在乳腺癌組織中的表達(dá)情況p53、Ki-67蛋白表達(dá)定位于細(xì)胞核，58份乳腺癌組織標(biāo)本中，p53呈陽性表達(dá)35份(60.3%)，Ki-67呈陽性表達(dá)31份(53.4%)。見圖1～4(見《國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志》網(wǎng)站主頁“論文附件”)。

2.2p53、Ki-67表達(dá)與乳腺癌臨床病理特征的關(guān)系在乳腺癌組織中，p53的表達(dá)與患者年齡、絕經(jīng)與否無明顯相關(guān)性(P>0.05)，而與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和TNM分期有相關(guān)性(P<0.05)；Ki-67的表達(dá)與患者年齡、絕經(jīng)與否、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無明顯相關(guān)性(P>0.05)，而與TNM腫瘤分期有相關(guān)性(P<0.05)。見表1。

表1　　p53、Ki-67表達(dá)與乳腺癌臨床病理特征的關(guān)系

續(xù)表1　　p53、Ki-67表達(dá)與乳腺癌臨床病理特征的關(guān)系

3討論

乳腺癌是一種嚴(yán)重威脅女性健康的疾病，雖然目前乳腺腫瘤的早期診斷仍然是一個亟待解決的問題。許多腫瘤在明確診斷后現(xiàn)有的治療手段難以發(fā)揮作用,所以早期診斷、早期治療仍然是十分重要的防治原則。筆者探討了p53、Ki6在不同臨床特征的乳腺癌組織中的表達(dá)情況，為臨床診斷和治療提供了有價值的信息。

p53基因是經(jīng)典的抑癌基因，它能夠?qū)?xì)胞分裂與增殖起負(fù)調(diào)控作用[5-8]。p53基因分為野生型和突變型，p53基因突變會喪失抑制癌變的功能，抑制其他野生型p53基因的作用而使腫瘤發(fā)展并轉(zhuǎn)移，被認(rèn)為是細(xì)胞發(fā)生癌變的標(biāo)志[9-11]。此外，野生型p53蛋白不穩(wěn)定且不易檢測，而突變型p53蛋白穩(wěn)定且易于檢測[12-13]。已有研究證實(shí)，突變型p53蛋白在乳腺癌中的陽性率為20%～60%[14]。在本研究中，p53蛋白的陽性率為60.3%，與之相近。并且分析乳腺癌臨床病理特征與p53表達(dá)的關(guān)系發(fā)現(xiàn)，p53的表達(dá)與患者年齡、絕經(jīng)與否無明顯相關(guān)性，而與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和TNM分期有明顯相關(guān)性，這與趙善琳等[15]的研究結(jié)果一致。但也有研究認(rèn)為，p53陽性與年齡相關(guān)[16]，分析認(rèn)為這可能與本研究樣本量偏低有一定的關(guān)系。

Ki-67是細(xì)胞增殖中表達(dá)的一種核抗原，存在于細(xì)胞周期中除G0期的其他階段，M期達(dá)到高峰，細(xì)胞分裂末期和后期迅速下降，能夠有效地反映細(xì)胞的增殖狀況[17-18]。有研究證實(shí)，Ki-67的表達(dá)與乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展具有明顯的相關(guān)性，也被認(rèn)為是乳腺癌診斷和預(yù)后的一個重要標(biāo)志[19]。本研究發(fā)現(xiàn)，Ki-67表達(dá)的陽性率為53.4%，與國內(nèi)相關(guān)研究結(jié)果相近[20]。本文研究發(fā)現(xiàn)，Ki-67的表達(dá)與患者年齡、絕經(jīng)與否、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無明顯相關(guān)性，而與TNM腫瘤分期有明顯相關(guān)性，這與魯亮等[21]的研究結(jié)果一致，也說明Ki-67主要反映乳腺癌的增殖情況，而與是否在特定的區(qū)域沒有關(guān)系。

綜上所述，乳腺癌組織中p53、Ki-67的表達(dá)與乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，在乳腺癌患者的臨床治療中有相當(dāng)重要的意義，在以后的研究中，將進(jìn)一步關(guān)注p53、Ki-67在乳腺癌患者預(yù)后和療效監(jiān)測方面的臨床意義，為乳腺癌患者的診斷和治療提供更多有價值的信息。

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(收稿日期：2015-12-02)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.05.034

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)05-0658-02