和培章

(河南宏力醫(yī)院，河南長垣 453400)

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·臨床研究·

尿液陽性標(biāo)本的細(xì)菌分布及藥物敏感性分析

和培章

(河南宏力醫(yī)院，河南長垣 453400)

摘要:目的分析該院尿培養(yǎng)陽性標(biāo)本的細(xì)菌分布及耐藥狀況，為臨床合理選擇抗菌藥物提供依據(jù)。方法收集2013年1月至2014年3月該院734例住院和門診患者的送檢尿培養(yǎng)標(biāo)本進(jìn)行分離培養(yǎng)，分析陽性標(biāo)本的病原菌分布及藥物敏感性。結(jié)果共分離病原菌448株，其中革蘭陰性菌357株、革蘭陽性菌77株，真菌14株，分別占79.7%、17.2%和3.1%。主要病原菌為大腸埃希菌(259株，占57.8%)、肺炎克雷伯菌肺炎亞種(49株，占10.9%)、糞腸球菌(36株，占8.0%)、屎腸球菌(25株，占5.6%)。病原菌的耐藥性差異較大，表現(xiàn)為不同程度的耐藥。主要革蘭陰性菌對碳青霉烯類抗菌藥物敏感性較高，其次是阿米卡星和青霉素類的哌拉西林/他唑巴坦；主要革蘭陽性菌對萬古霉素、替考拉寧、利奈唑烷敏感性較高。結(jié)論該院引起泌尿系統(tǒng)感染的病原菌主要是大腸埃希菌，該菌對頭孢唑林、氨芐西林、哌拉西林、環(huán)丙沙星、左氧氟沙星、慶大霉素、復(fù)方磺胺甲噁唑敏感性較低，故不建議經(jīng)驗性使用上述抗菌藥物。

關(guān)鍵詞:尿培養(yǎng)；細(xì)菌分布；敏感性

泌尿系統(tǒng)感染是醫(yī)院感染最常見的疾病，根據(jù)基礎(chǔ)疾病分為單純性尿路感染和復(fù)雜性尿路感染，根據(jù)感染部位不同又可以分為上、下尿路感染。大量研究報道，泌尿系感染在醫(yī)院感染中僅次于呼吸道感染，排名第2位[1-4]。近年來，隨著廣譜抗菌藥物的大量應(yīng)用，由細(xì)菌引起的尿路感染耐藥譜也逐漸改變，并且出現(xiàn)多重耐藥菌株，給臨床診治帶來了巨大困難，中段尿定量培養(yǎng)為尿路感染的診斷提供了重要依據(jù)。

1材料與方法

1.1標(biāo)本來源收集2013年1月至2014年3月本院734例住院和門診患者的送檢尿培養(yǎng)標(biāo)本，男345例，女389例，平均年齡(53.26±17.56)歲，剔除同一患者多次送檢相同部位標(biāo)本，只記第1次陽性結(jié)果進(jìn)行分析。

1.2儀器與試劑PhoenixTM100全自動微生物鑒定系統(tǒng)及細(xì)菌鑒定藥敏板為美國BD公司產(chǎn)品；真菌鑒定為珠海迪爾生物科技有限公司產(chǎn)品；質(zhì)控菌株為金黃色葡萄球菌ATCC25923、大腸埃希菌ATCC25922和銅綠假單胞菌ATCC27853，均來自河南省臨床檢驗中心。

1.3方法

1.3.1尿培養(yǎng)對于疑似尿路感染的患者，根據(jù)《全國臨床檢驗操作規(guī)程》(第3版)要求[5]，取清潔中段尿，采用1 μL接種環(huán)進(jìn)行定量接種。

1.3.2細(xì)菌鑒定及藥敏試驗革蘭陰性菌大于105CFU/mL或革蘭陽性菌大于104CFU/mL時進(jìn)行細(xì)菌鑒定及藥敏試驗，采用PhoenixTM100全自動微生物鑒定系統(tǒng)及細(xì)菌鑒定藥敏板。判斷標(biāo)準(zhǔn)參照美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(CLSI)2012年版的規(guī)定。

1.3.3超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)檢測按CLSI推薦的紙片擴(kuò)散法(K-B法)進(jìn)行篩選，并根據(jù)PhoenixTM100全自動微生物鑒定系統(tǒng)最小抑菌濃度(MIC)進(jìn)行判斷。

1.4統(tǒng)計學(xué)處理采用北京智方科技有限公司LIS統(tǒng)計軟件和WHONET5.4軟件聯(lián)合進(jìn)行耐藥性分析，剔除同一患者相同部位的重復(fù)分離菌株。

2結(jié)果

2.1病原菌分布734份送檢標(biāo)本共分離出病原菌448株，陽性率為61.0%，其中革蘭陰性菌357株(占79.7%)，革蘭陽性菌77株(占17.2%)，真菌14株(占3.1%)。主要病原菌為大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌肺炎亞種、糞腸球菌、屎腸球菌等。其中大腸埃希菌共259株，產(chǎn)ESBLs菌179株(占69.1%)；肺炎克雷伯菌肺炎亞種49株，產(chǎn)ESBLs菌29株(占59.2%) 。 448份尿培養(yǎng)陽性標(biāo)本病原菌分布，見表1。

表1　　448份尿培養(yǎng)陽性標(biāo)本病原菌分布

續(xù)表1　　448份尿培養(yǎng)陽性標(biāo)本病原菌分布

2.2細(xì)菌藥物敏感性最常見的泌尿系統(tǒng)感染病原菌為大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、糞腸球菌及屎腸球菌，分析其對常用抗菌藥物的耐藥性，見表2、3(見《國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志》網(wǎng)站主頁“論文附件”)。

3討論

ESBLs由質(zhì)粒介導(dǎo)，目前按其編碼基因的類型將ESBLs分為4類，臨床較為多見的是TEM和SHV型兩種酶。采用PhoenixTM100全自動細(xì)菌分析系統(tǒng)及其細(xì)菌鑒定藥敏板可檢測絕大多數(shù)來源于TEM及SHV的ESBLs，其對產(chǎn)ESBLs細(xì)菌的檢出靈敏度達(dá)99%、特異度達(dá)100%，優(yōu)于雙紙片協(xié)同法[6]。采用PhoenixTM100全自動細(xì)菌分析系統(tǒng)檢測產(chǎn)ESBLs菌株，方法簡便、結(jié)果準(zhǔn)確，在測出ESBLs的同時還可以對多種抗菌藥物進(jìn)行耐藥性分析。

ESBLs可水解青霉素類，第1、2、3代頭孢菌素類，以及單環(huán)類抗菌藥物，能被克拉維酸等酶抑制劑抑制[7-9]。自1983年德國報道從重癥監(jiān)護(hù)室(ICU)患者臨床標(biāo)本分離出產(chǎn)ESBLs菌株以來，主要腸桿菌科細(xì)菌的產(chǎn)ESBLs菌株不斷被發(fā)現(xiàn)[10-14]。國內(nèi)外專家一致認(rèn)為，廣譜頭孢菌素類尤其是第3代頭孢菌素的廣泛使用產(chǎn)生的選擇性壓力是導(dǎo)致產(chǎn)ESBLs革蘭陰性菌增加的主要原因。近年來，隨著β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物的廣泛應(yīng)用，產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌的檢出率也在逐年上升。本組數(shù)據(jù)顯示，本院2013年1月至2014年3月住院和門診患者共分離出大腸埃希菌259株，其中產(chǎn)ESBLs菌179株，占69.1%；肺炎克雷伯菌肺炎亞種49株，其中產(chǎn)ESBLs菌29株，占59.2%，與國內(nèi)相關(guān)報道相差較大[15]，這可能與本地區(qū)的醫(yī)生用藥習(xí)慣有一定關(guān)系。非產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌肺炎亞種對常用抗菌藥物均表現(xiàn)較高的敏感性，而產(chǎn)ESBLs菌株對幾乎所有青霉素類、頭孢菌素類(氨曲南)、氨基糖苷類、喹諾酮類抗菌藥物表現(xiàn)出較低的敏感性(均小于50%)，并且對慶大霉素、環(huán)丙沙星、左氧氟沙星呈現(xiàn)較嚴(yán)重的交叉耐藥，這可能是由于攜帶ESBLs的質(zhì)?？赏瑫r攜帶對氨基糖苷類和喹諾酮類等多種抗菌藥物耐藥的基因。美羅培南、亞胺培南、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦的敏感性較高(均大于50%)，但出現(xiàn)1株耐碳青霉烯類抗菌藥物的產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌肺炎亞種(改良Hodge試驗檢測)，應(yīng)引起高度重視。糞腸球菌和屎腸球菌僅對萬古霉素、替考拉寧、利奈唑烷的敏感性較高(均大于70%),而臨床經(jīng)驗性治療選擇的喹諾酮類抗菌藥物表現(xiàn)出高度耐藥性。因此，泌尿系統(tǒng)感染無論是革蘭陰性菌還是革蘭陽性菌，將喹諾酮類抗菌藥物作為臨床治療尿路感染的一線藥物已不太合適。

綜上所述，臨床尿路感染的主要病原菌是大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌肺炎亞種和腸球菌。革蘭陰性菌中產(chǎn)ESBLs菌株的檢出率較高，因此需要進(jìn)行常規(guī)監(jiān)測，分析產(chǎn)ESBLs菌株的檢出率和耐藥性。革蘭陽性菌中，腸球菌只對糖肽類抗菌藥物和利奈唑烷的敏感性較高，對其他抗菌藥物都處于耐藥狀態(tài)。因此，對于尿路感染的患者，應(yīng)及時做尿培養(yǎng)，根據(jù)藥敏結(jié)果合理選擇抗菌藥物，以免延誤病情，造成嚴(yán)重的多重耐藥和交叉感染。

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(收稿日期：2015-11-21)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.05.031

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)05-0652-03