趙立香，邵國麗（吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院制藥工程學(xué)院，吉林吉林132101）

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番石榴葉提取物促進(jìn)金銀花抗炎作用的試驗(yàn)

趙立香，邵國麗
（吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院制藥工程學(xué)院，吉林吉林132101）

摘要：為了探討番石榴葉提取物對金銀花提取液抗炎作用的影響，采用水醇提取和水提取工藝分別制備番石榴葉和金銀花提取液，用二甲苯致小鼠耳腫脹法，建立小鼠耳炎模型，并觀察對大鼠棉球肉芽腫增生的影響。結(jié)果表明，番石榴葉提取物能促進(jìn)金銀花提取液的抗炎作用，隨著番石榴葉劑量增加，抗炎作用隨之增強(qiáng)。

關(guān)鍵詞：金銀花；番石榴葉；抗炎作用

由于許多合成藥物具有較強(qiáng)的毒副反應(yīng)，人們越來越重視從天然藥物中開發(fā)抗炎藥物。一些中藥活性成分如苷類、生物堿類、黃酮類、萜類、揮發(fā)油等都具有很好的抗炎作用[1]。

金銀花為中獸醫(yī)常用藥物，應(yīng)用歷史悠久，自古被譽(yù)為清熱解毒的良藥，其所含的很多化學(xué)成分均具有較強(qiáng)的抗菌作用。另外還可增強(qiáng)免疫力、抗早孕、護(hù)肝、抗腫瘤、消炎、解熱、止血（凝血）、抑制腸道吸收膽固醇等，其臨床用途非常廣泛。

番石榴葉[2]，為桃金娘科植物番石榴的葉，葉中含有豐富的黃酮類化合物、酚類化合物、多糖、無機(jī)元素、揮發(fā)油、皂苷及齊墩果酸與熊果酸等多種功能成分[3]，可收斂止瀉；番石榴葉提取物的抗炎[4]、止痛作用源于提取物中的揮發(fā)性成分。近年來國內(nèi)外對番石榴葉的研究仍漸深入，對其研究越來越重視。

對中藥聯(lián)合抗炎研究較少，番石榴葉功能很多，具有抗炎作用，應(yīng)用前景廣闊。金銀花的抗炎作用已被證明，但番石榴葉與之聯(lián)合抗炎仍沒有結(jié)論，因此，期待在本次研究中能有突破的進(jìn)展。

1　材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和藥品健康昆明系小鼠50只（BALB/c小鼠，SPF級，6～8周齡，體重18±2 g，雄性），由吉林醫(yī)藥學(xué)院提供。

健康大鼠50只（SD，雄性，30日齡），由吉林大學(xué)提供。

金銀花、番石榴葉，購自吉林市中藥店，生理鹽水、蒸餾水、二甲苯、水合氯醛（吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院實(shí)驗(yàn)室提供），磺胺粉，購自吉林市獸藥店。

1.2器材塑料試劑盒，購自吉林市超市；6 mm打孔器（國產(chǎn)）；電子天平CP114（奧豪斯儀器，上海有限公司制造）；數(shù)顯式電熱恒溫水浴鍋（上海躍進(jìn)醫(yī)療器械廠）；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（BUCHI，鄭州長城科工貿(mào)有限公司）；干燥箱（DHG-9035A電熱鼓風(fēng)干燥箱，上海源長實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備廠）；灌胃針等（吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院實(shí)驗(yàn)室提供）。

1.3方法

1.3.1金銀花提取液的制備色澤潔白的金銀花100 g，并清洗干凈備用。切碎片清洗后的金銀花加水充分浸潤。浸提、過濾將處理好的金銀花放入鍋中加水（1∶5）熬煮，熬制小碎片用手指稍用力可捏爛，40 min，將熬好的料液過濾，濾液濃縮至100 mL，既得濃度1 g/1 mL金銀花浸提液[5]。

1.3.2番石榴葉提取物的制備將番石榴干燥粉碎后的樣品10 g置砂鍋中，加蒸餾水200 mL，浸泡2 h后，用文火煮30 min，過濾，離心取上清液，殘?jiān)偌?00 mL水煮20 min，合并濾液，加熱濃縮至10 mL（1 g/mL），使?jié)舛葹? g/mL，將浸提液高壓（121℃，20 min）滅菌后，再將浸提液經(jīng)微孔濾膜（0.22 μm）除菌后，在4℃下進(jìn)行保存?zhèn)溆谩?.3.3小鼠抗炎模型的建立及觀察將體質(zhì)健康的昆明系小鼠50只（BALB/c小鼠，SPF級，6～8周齡，體重18±2 g，雄性）隨機(jī)分為空白對照組、金銀花分別與高、中、低番石榴葉劑量組和金銀花劑量對照組，每組10只[6]?？瞻讓φ战M用生理鹽水灌胃，金銀花劑量對照組按86 g/kg制備好的金銀花水煎液灌胃。其余3組分別用86 g/kg（86 g/kg）金銀花水煎液和1.8 g/kg，0.6 g/kg，0.3 g/kg（1 g/1 mL）制備好的高、中、低番石榴葉提取物混勻后灌胃。各組每天給藥1次，連續(xù)給藥4 d。最后1次給藥1 h后，將二甲苯0.02 mL均勻涂在小鼠右耳前、后兩面，致炎。致炎后1 h將小鼠脫頸椎處死[7-8]，用6 mm直徑打孔器在小鼠左右耳相同部位打下耳片，用電子天平稱重。記錄左右耳片質(zhì)量，計(jì)算腫脹度。

公式：腫脹度＝右耳重量-左耳重量

抑制率%＝（空白對照組平均值-給藥組平均值）/空白對照組平均值）×100%

1.3.4大鼠棉球肉芽腫增生的影響取30日齡雄性SD大鼠50只，分組同1.2.3，取脫脂棉制成體積大小一致的棉球（10±1）mg，高壓滅菌后，置37℃干燥備用。大鼠用7%水合氯醛淺麻醉鼠，將其仰臥，無菌剪毛后于下腹部正中皮膚切開長約1 cm的切口，左右雙側(cè)腹股溝皮下植入10 mg無菌干燥棉球各一粒?？p合切口，瘡口處灑上磺胺粉，以防感染。在大鼠醒后灌胃給藥，空白對照組用生理鹽水灌胃，金銀花劑量對照組按86 g/ kg制備好的金銀花水煎液灌胃。其余3組分別用62 g/kg（86 g/kg）金銀花水煎液和1.8 g/kg，0.6 g/ kg，0.3 g/kg制備好的高、中、低番石榴葉提取物混勻后灌胃。以后每天灌胃1次，連續(xù)7 d，第8天頸椎脫臼處死大鼠，將棉球連同周圍結(jié)締組織一起取出，剔除脂肪組織，稱濕重。然后置60℃烘干12 h，稱得干重。減去原棉球凈重，即為肉芽腫凈重。按mg/100 g體重表示，計(jì)算抑制率（%）。進(jìn)行組間比較[9]。

肉芽腫凈濕重＝（棉球肉芽腫總濕重-原棉球凈重）/大鼠體重×100；肉芽腫凈干重＝（棉球肉芽腫總干重-原棉球凈重）/大鼠體重×100；濕重抑制率（%）＝（溶劑對照組肉芽腫凈濕重-給藥組肉芽腫凈濕重）/溶劑對照組肉芽腫凈濕重×100%；干重抑制率（%）＝（溶劑對照組肉芽腫凈干重-給藥組肉芽腫凈干重）/溶劑對照組肉芽腫凈干重× 100%。

2　結(jié)果

2.1金銀花與不同劑量的番石榴葉對小鼠耳腫脹度的影響通過表1可見，各組小鼠的耳腫脹情況分別為9.85±2.31 mg、5.43±2.62 mg、32±2.31 mg、5.30±2.41 mg、5.28±2.29 mg；抑制率分別為44.9%、44.6%、46.2%、46.4%。

表1　金銀花與不同劑量的番石榴葉對小鼠耳腫脹度的影響

2.2金銀花與不同劑量的番石榴葉對大鼠棉球肉芽腫增生的影響通過表2可見，各組大鼠的濕重抑制率分別為6.56%、11.4%.14.8%、21.3%和干重抑制率分別為13.6%、18.1%、27.2%、31.8%，試驗(yàn)組與對照組比較差異極顯著（P＜0.01），試驗(yàn)組間差異也顯著（P＜0.05）。

3　討論與小結(jié)

通過小鼠耳腫脹和大鼠棉球肉芽腫增生試驗(yàn)可見，金銀花提取液、金銀花提取液和番石榴葉提取物混合各組均有不同程度的抗炎作用，空白對照組、金銀花劑量組、金銀花與低劑量番石榴葉組、金銀花與中劑量番石榴葉組、金銀花與高劑量番石榴葉組，各組小鼠的耳腫脹抑制率分別為44.9%、44.6%、46.2%、46.4%。各組大鼠的濕重抑制率分別為6.56%、11.4%.14.8%、21.3%和干重抑制率分別為13.6%、18.1%、27.2%、31.8%，小鼠耳腫脹試驗(yàn)組與對照組比較差異極顯著（P＜0.01），試驗(yàn)組間差異不顯著（P＞0.05）；大鼠棉球肉芽腫增生試驗(yàn)，試驗(yàn)組與對照組差異極顯著（P＜0.01），組間差異也顯著（P＜0.05）。試驗(yàn)表明，番石榴葉提取物對金銀花提取液的抗炎作用效果有一定的促進(jìn)作用。也可能存在著藥物對不同組織的抗炎效果存在差異性，需要下一步進(jìn)行深入的研究。

表2　金銀花與不同劑量的番石榴葉對大鼠棉球肉芽腫增生的影響

參考文獻(xiàn)：

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Guava leaf extract promotes thestudy of liquid anti- inflammatory effects of extracting honeysuckle

ZHAO Li-xiang，SHAO Guo-li
（College of Pharmaceutical engineering，Jilin College of Agricultural Science and Technology，Jilin 132101，China）

Abstract：In order to investigate the effect of guava leaf extract on the anti-inflammatory activity of extract of Floss Lonicerae，we adopted a water alcohol extraction and water extraction process to prepare guava leaf and honeysuckle flower extract .And then we used the extracts to study the effect on xylene induced ear edema in mouse model by observing the influence on rat granuloma hyperplasia induced by cotton ball.The results showed that guava leaf extract promoted the anti-inflammatory effect of honeysuckle extract，and with the increase of the dose of guava leaf，the anti-inflammatory effect increased，and the inhibition rate reached.

Key words：Honeysuckle；Guava leaf；Anti inflammatory effect

作者簡介：趙立香（1976-），女，講師，博士，從事動(dòng)物藥理學(xué)教學(xué)，E-mail：zhaolixiang123@tom.com

收稿日期：2014-09-04

中圖分類號：R 282

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號：0529- 6005（2016）01- 0072- 03