宋培勇，曾燕玲，任秘坊，朱流紅，潘恒乙（遵義師范學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院，貴州遵義563002）

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常山等中藥浸提物復(fù)方對
雞柔嫩艾美耳球蟲病的治療試驗

宋培勇，曾燕玲，任秘坊，朱流紅，潘恒乙
（遵義師范學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院，貴州遵義563002）

摘要：為了觀察中藥常山等浸提物與黃芪粗多糖組方對雞球蟲病的治療效果，用廣州大麻雛雞對人工感染雞柔嫩艾美耳球蟲進(jìn)行分組試驗，結(jié)果顯示，常山高（150 mg）、中（100 mg）、低（50 mg）劑量組的抗球蟲指數(shù)（ACI）分別為131.2、183.9、169.8，中劑量組和低劑量組分別達(dá)到了高效和中效；高劑量組可能由于常山浸提物過量產(chǎn)生了生長抑制等副作用致使ACI反而降低。試驗表明，適量的中藥常山等浸提物與黃芪粗多糖組方用于防治雞球蟲病是可行的，有望研發(fā)成一種新的抗球蟲制劑。

關(guān)鍵詞：常山浸提物；黃芪粗多糖；雞人工感染；柔嫩艾美耳球蟲；抗球蟲指數(shù)

雞球蟲病是由艾美耳屬球蟲感染雞腸道上皮細(xì)胞引起的一種常見寄生蟲性群發(fā)病，其發(fā)病率為50%～70%，死亡率達(dá)20%～30%，嚴(yán)重時高達(dá)80%。由于其較高的發(fā)病率和死亡率、阻礙生長、降低飼料報酬等往往給養(yǎng)雞業(yè)造成重創(chuàng)。隨著抗雞球蟲病抗生素和化學(xué)合成藥的長期大量使用，耐藥和藥殘問題日益突出。于是人們把目光投向了免疫預(yù)防和中草藥防治雞球蟲病。中草藥防治雞球蟲病，毒副作用小，藥殘輕，不易產(chǎn)生耐藥性，可增強(qiáng)機(jī)體免疫力，促進(jìn)機(jī)體生長等[1-2]；具有價廉、有效、安全等優(yōu)點(diǎn)。但用中草藥防治雞球蟲病，目前多是用中草藥經(jīng)簡單粉碎進(jìn)行組方，在實際應(yīng)用中常常會面臨拌藥量大、適口性差、藥效組分難以透出等問題。Zhang D F等[3]用常山提取物拌料觀察對人工感染雞柔嫩艾美耳球蟲病的治療效果，結(jié)果表明，20 mg/kg飼料的常山提取物加量在提高增重，減少出血、盲腸病變和卵囊排放方面，與對照組相比效果顯著。張浩男等[4]用常山提取物與西藥聯(lián)用觀察對雞球蟲病的療效，結(jié)果表明，常山提取物分別與西藥妥曲珠利、馬杜拉霉素、磺胺喹惡啉聯(lián)合用藥的抗球蟲病效果顯著，抗球蟲指數(shù)（ACI）達(dá)到高效和中效。郭志廷等[5]用常山提取物與雞球蟲散（一種中藥復(fù)方制劑）、地克珠利進(jìn)行抗柔嫩艾美耳球蟲病療效對比研究，發(fā)現(xiàn)ACI均達(dá)到中效水平。本試驗主要探討用常山、青蒿、白頭翁、地榆提取物和黃芪粗多糖組方對人工感染雞柔嫩艾美耳球蟲病的治療效果，以期為抗球蟲中草藥新制劑的研發(fā)奠定基礎(chǔ)。

1　材料與方法

1.1雞柔嫩艾美耳球蟲孢子化卵囊，由華南農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院翁亞彪先生惠贈。

1.2中藥常山從毗鄰學(xué)校的三閣公園采集、曬干，青蒿、地榆、白頭翁和黃芪等從藥店或藥材批發(fā)市場購買，粉碎過篩（80目）。常山、青蒿、地榆、白頭翁用乙醇/水浸提，取浸提液先減壓濃縮，再真空冷凍干燥得各粗提取物。黃芪粗多糖的提取參考孫瑞敏等[6]（2005）的方法。

1.3廣州大麻雞苗從本地二級經(jīng)銷商處購買，飼料用玉米、豆粕等自配（不含任何抗球蟲藥物）。1.4孢子化卵囊的制備孢子化卵囊使用前經(jīng)雛雞復(fù)壯1次，回收，再次孢子化后使用，接種劑量為80 000枚/只，經(jīng)口滴服。

1.5試驗藥物藥物由常山、青蒿、地榆和白頭翁提取物和黃芪粗多糖組成，拌料服用。

1.6試驗分組1日齡雛雞100只，預(yù)飼期2周，從中挑選體重相近的雛雞75只隨機(jī)分成（A、B、C、D、E）5組，每組15只：A組不攻蟲不投藥組（陰性對照組），B組攻蟲不投藥組（陽性對照組），C組攻蟲高常山劑量組（含常山提取物150 mg），D組攻蟲中常山劑量組（含常山提取物100 mg），E組攻蟲低常山劑量組（含常山提取物50 mg）。試驗期7 d，試驗開始和結(jié)束時逐只稱重，其間觀察雞只精神、飲食和糞便情況，最后1 d全群剖殺。

1.7藥效評價以抗球蟲指數(shù)ACI為標(biāo)準(zhǔn)判定其抗球蟲效果：ACI＜120為無效；ACI＝120～160為低效；ACI＝160～180為中效；ACI＞180為高效。

ACI計算公式：ACI＝（相對增重率＋存活率）× 100-（病變值＋卵囊值）

相對增重率＝試驗組平均增重率/健康對照組平均增重率×100%

病變值＝每組平均病變記分×10

盲腸病變評分標(biāo)準(zhǔn)[7]：盲腸正常無卵囊為0分；有卵囊，盲腸黏膜增厚，有少量散在性出血為1分；有卵囊，盲腸黏膜增厚，有明顯血液或血液內(nèi)容物為2分；有卵囊，盲腸黏膜增厚，有大量血凝塊或血樣腸芯為3分；有卵囊，盲腸外觀呈醬色，明顯腫脹，內(nèi)容物血樣為4分；因球蟲感染死亡也算4分。

卵囊值的計算方法[8]：即感染后7 d雞的O.P. G值與不給藥組雞的O.P.G值的比值小于1%時，卵囊值為0；在1%～25%時，卵囊值為5；在25%～50%時，卵囊值為10；在50%～75%時，卵囊值為20；在75%～100%時，卵囊值為40。

2　結(jié)果與討論

2.1臨床癥狀攻蟲后從第3天起雞只陸續(xù)出現(xiàn)精神沉郁，羽毛蓬亂，采食減少，到第4天除陰性對照組外，其余各組出現(xiàn)血糞，以陽性對照組血糞較多而嚴(yán)重。

2.2剖檢病變陰性對照組雞所有臟器未見異常，陽性對照組和試驗組雞均出現(xiàn)不同程度盲腸腫脹、腸腔出血、腸道見血性內(nèi)容物或瘀血塊等病變，但投藥各組病變較輕；其他臟器亦未見明顯異常。

2.3常山等提取物和黃芪粗多糖組方的抗球蟲效果根據(jù)相對增重率、存活率、病變值和卵囊值等計算出抗球蟲指數(shù)（ACI），結(jié)果表明，高、中、低常山劑量組的ACI分別為131.2、183.9和169.8，判斷其療效為低效、高效和中效（見表1）。中、低常山劑量組表現(xiàn)出較好的增重效果，所以ACI較高，抗球蟲效果達(dá)到高效和中效；而高常山劑量組可能由于常山提取物過量帶來的毒副作用，生長明顯受到抑制，致使ACI降低，抗球蟲效果反而變差。

表1　常山等提取物和黃芪粗多糖組方的抗球蟲效果

3　結(jié)論

據(jù)估計全世界每年因雞球蟲病造成的經(jīng)濟(jì)損失超過30億美元[9-10]，僅中國每年因雞球蟲病造成的經(jīng)濟(jì)損失就高達(dá)3～6千萬美元[11]。面對球蟲病給養(yǎng)雞業(yè)帶來的重創(chuàng)，高效無公害抗球蟲藥物的研發(fā)迫在眉睫。鑒于目前球蟲對抗生素和

化學(xué)合成藥已廣泛產(chǎn)生耐藥性，新藥研發(fā)越來越困難，而公共衛(wèi)生事業(yè)對食品藥殘又高度關(guān)注，現(xiàn)行的雞球蟲活苗免疫效果還不盡人意[12]，用中草藥防治雞球蟲病不失為一種比較好的選擇。筆者用常山、白頭翁、青蒿、地榆提取物和黃芪多糖組方，原因在于常山含常山堿、異常山堿等抗球蟲活性物質(zhì)；青蒿含青蒿素等抗瘧成分，而球蟲和瘧原蟲同屬原生動物；白頭翁味苦、性寒，有清熱解毒、涼血止痢等功效；地榆涼血、止血；而黃芪多糖有增強(qiáng)機(jī)體免疫力的作用。所以用以上諸藥組方，能達(dá)到較好的抗球蟲效果。試驗也表明，在臨床上用中草藥常山或其提取物組方治療雞球蟲病時，適量的常山等提取物和黃芪粗多糖組方用治療雞球蟲病是有效可行的。

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Experiment of Anti- coccidiosis Infected Artifitially by Eimeriatenellawith Extracts of Chinese Medicinal Herb Changshan（DichroafebrifugaLour）etc

SONG Pei-yong，ZENG Yan-ling，REN Mi-fang，ZHU Liu-hong，PAN Heng-yi
（School of Life Science，Zunyi Normal College，Zunyi 563002，China）

Abstract：In order to investigate the curative effect of the extracts of Changshan . and the crude astragalus polysaccharide （cAPS）against avian coccidiosis，we performed artificial infection test with Eimeria tenella sporulated oocysts in Guangzhou Dama chickens.The results showed that the anticoccidial index（ACI）of high（150 mg），median（100 mg）and low（50 mg）dose of Changshan extract were 131.2，183.9，and 169.8，respectively.The effects of median and low dose groups were up to high and medium anticoccidial levels，respectively . However，the ACI of high dose group lower compared to the medium and low doses . These data proved that it is feasible to utilize the of appropriate dose of extracts of Changshan and cAPS to control avian coccidiosis.

Key words：extract of Dichroa febrifuga；crude astragalus polysaccharide；artificial infection to chickens；Eimeria tenel?la；anticoccidial index

作者簡介：宋培勇（1966-），男，教授，碩士，主要研究雞病防治及微生物資源與分子生態(tài)，E-mail：py66song@126.com

基金項目：遵義市科技局聯(lián)合基金項目“抗雞球蟲病中草藥配方是篩選及劑型比較研究”（遵市科合社字[2008]25號）

收稿日期：2014-06-18

中圖分類號：S852.72+3

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號：0529- 6005（2016）01- 0070- 02