董效文（山西農(nóng)業(yè)大學，山西 030801）

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淺析平基槭葉內(nèi)生物活性含量動態(tài)變化

董效文
（山西農(nóng)業(yè)大學，山西 030801）

摘要：本文以6年生平基槭苗木為試材，對其葉內(nèi)生物活性(黃酮、綠原酸、葉綠素、Vc)物質(zhì)含量進行年動態(tài)變化研究。結(jié)果表明：平基槭在年生長發(fā)育過程中，黃酮和葉綠素的含量變化呈“M”狀。黃酮含量變化分別出現(xiàn)在6月和8月，而8月達到全年最高值；葉綠素兩個高峰卻分別出現(xiàn)在6月和9月，6月為全年最高值。綠原酸、Vc含量變化分別是在6月和7月達到全年的最高值，都呈現(xiàn)先升后降的拋物線形。

關(guān)鍵詞：平基槭；黃酮；綠原素；葉綠素；VC

平基槭[1]是槭樹科槭樹屬的落葉喬木，在我國東北、黃河及長江流域省區(qū)大量種植，它在綠化、天然林保護、防風固沙等方面應(yīng)用廣泛。近年來，由于它的葉內(nèi)含多種生物活性成分極具有食用、藥用價值，越來越受到人們的關(guān)注和重視。本試驗通過對其葉內(nèi)黃酮、綠原酸、葉綠素、Vc含量進行年動態(tài)變化的研究，探索其各指標含量的變化，為平基槭葉更好地開發(fā)提供理論依據(jù)。

1　材料和方法

1.1試驗材料

選6年生平基槭苗木于2015年4—10月，在山西省榆次市林業(yè)局苗圃進行取樣測定，每月取樣1次，摘取植株中上部葉片，用無離子水沖凈，濾紙吸干葉面水分后置冰箱待測。

1.2測定方法

1.2.1黃酮含量測定[1-3]

取各處理5～8個葉片恒溫烘干，研碎過篩，稱0.30 g，用70％ C2H5OH 10 mL水?。?0～75 ℃）浸提6 h，70％ C2H5OH定容，放1 mL于容量瓶，再加70％ C2H5OH 4 mL，和0.3 mLNaNO2溶液混勻放置5 min，加0.3 mL Al（NO3）3溶液置6 min后，再加NaOH 2 mL搖勻，用70％ C2H5OH定容置10 min，在500 nm條件下比色，標準曲線法得黃酮含量。

1.2.2綠原酸含量測定[4]

稱樣品0.30 g，用95％ C2H5OH 10 mL在水?。?0～75 ℃）浸提6 h，放入容量瓶，再用95％ C2H5OH定容，放3 mL于容量瓶，再用C2H5OH（95％）定容，在324 nm條件下進行比色測定，標準曲線得綠原酸含量。

1.2.3葉綠素含量測定[5]

取0.05 g葉片，研碎放具塞試管中，加95％ C2H5OH 10 mL浸泡，避光至葉變白，取上清液在663 nm、645 nm條件下測吸光度。

1.2.4Vc含量測定[6-7]

（1） 取標準抗壞血酸溶液2 mL加8 mL 2％草酸，用DCIP（2,6-二氯吲哚酚鈉）溶液滴定至終點，根據(jù)已知抗壞血酸和DCIP用量，計算滴定度即1 mL DCIP相當于抗壞血酸的mg數(shù)。計算公式如下：

W=（V-V1）×T×b×100/B×a

W為100 g樣品中含抗壞血酸的mg數(shù)；V1為滴定空白用DCIP mL數(shù)；V為滴定樣品用DCIP mL數(shù)；T為滴定度；B為測定用樣品液mL數(shù)；b為樣品液V總；a為樣品g數(shù)。

（2） 取切碎葉片0.5 g，加少許草酸研勻放入容量瓶，加ZnSO41 mL，再加1 mL K4[Fe（CN）6]，最后用H2C2O4定容過濾。取10 mL過濾液放三角瓶中，用標定好的DCIP鹽溶液滴定，至桃紅色15 s不褪色即可，記下用量。取H2C2O410 mL，用DCIP作空白滴定。

2　結(jié)果與分析

2.1平基槭葉內(nèi)生理指標的年動態(tài)變化

2.1.1平基槭葉內(nèi)黃酮、綠原酸含量的變化

圖1中顯示， 從4月10日到6月10日，黃酮含量增長很快，達到第1個小高峰，為5.113％， 7月黃酮含量略有下降， 到8月10日達到第2個高峰，也是全年最高值，為5.998％，隨后至10月含量下降為3.893％，總體變化為“M”狀；而綠原酸含量變化不同于黃酮，它由生長初期的2.197％，到6月達最高峰，綠原酸含量為4.402％，總體表現(xiàn)先上升后下降的趨勢，到10月時，綠原酸含量為2.336％，但還是比4月10日的高0.139個百分點。

圖1　平基槭葉片內(nèi)黃酮、綠原酸含量年變化

從表1可看出：6月和8月對黃酮含量影響最大，而4月影響最小。經(jīng)方差分析和多重比較，可知4月與5、6、7、8、9、10月；5月與6、7、8、9月存在極顯著差異，6、7月分別與8、9、10月存在極顯著差異，8月與9、10月存在極顯著差異。

6月對綠原酸含量影響最大，9、10月分別與其它各時期間存在極顯著差異，而9月與10月之間不存在差異。所以從不同時期黃酮、綠原酸含量差異顯著性可知，它們和生長時期有關(guān)。

表1　不同月份平基槭葉內(nèi)黃酮、綠原酸的含量比較?。ǎィ?/p>

2.1.2平基槭葉內(nèi)葉綠素、Vc含量的變化

由圖2可知， 4—5月葉綠素含量增加緩慢，5—6月急劇上升達4.327 mg?g-1，6月后開始下降，到8月又開始上升，至9月達到第2次高峰達3.991 mg?g-1，之后又急速下降。由圖3可知，生長前期從4月開始Vc含量急劇上升，至7月達到全年最高，含量達最大值657.02 mg?（100 g）-1，之后開始緩慢下降，10月至低谷103.56 mg?（100 g）-1。

圖2　平基槭葉內(nèi)葉綠素含量年變化

圖3　平基槭葉內(nèi)VC含量

表4　不同月份平基槭葉內(nèi)葉綠素、Vc含量的比較

由表4可知，6月與9月葉綠素含量影響最大，10月含量達到最低， 6月與4、5、7、8、10月存在極顯著差異，10月與5、6、7、9月存在極顯著差異，9 與10月存在極顯著差異；平基槭葉Vc含量6、7、8含量最高，6、7、8月分別與4、5、9、10月之間存極顯著差異，6、7、8月之間差異不顯著，4、5、9、10月之間差異也不顯著，由上表數(shù)據(jù)可以看出，平基槭葉內(nèi)的葉綠素和Vc含量與生長時期有很大關(guān)系。

3　討論與結(jié)論

結(jié)果顯示:（1）黃酮和葉綠素的含量變化呈“M”狀，黃酮含量變化在6月達到一個小高峰，7月稍有下降，然后在8月達到全年最高值；而葉綠素兩個高峰卻分別出現(xiàn)在6月和9月。綠原酸含量變化在6月達到全年的最高值，Vc含量7月達到峰值，兩者都呈現(xiàn)先上升后下降的拋物線形。（2）在平基槭的整個生長發(fā)育過程中，6月和8月對其葉內(nèi)黃酮含量的影響最大，4月對黃酮含量的影響最小，且于8月達到最高，含量高達6.109％；而6月綠原酸含量達到最高，含量高達3.963％；葉綠素含量6月達到最大，含量高達4.327 mg?g-1；Vc含量7月達到全年最高，含量高達657.02mg?（100 g）-1。

試驗表明,不論是出現(xiàn)一個還是兩個峰值，可以認為它們含量變化與生長時期有密切關(guān)系，6—8月是速生期，葉片發(fā)育成熟，水分養(yǎng)分供應(yīng)充足，樹勢旺盛，生物合成的有效成分保持在較高水平；之后硬化期樹木生長減緩，相應(yīng)合成有效成分的底物也在減少，所以8月以后黃酮、綠原酸、葉綠素和VC含量基本上呈現(xiàn)下降趨勢。

參 考 文 獻

[1] 牛春山.陜西樹木志[M].北京:中國林業(yè)出版社，1990：728.

[2] 莊向平，虞杏英,楊更生,等.銀杏葉中黃酮含量的測定和提取方法[J].中草藥，1992，23（3）：122-124.

[3] 關(guān)紅菱，劉先林，龔堅，等.不同季節(jié)銀杏葉中總黃酮的測定[J].中草藥，1995，26（8）：445.

[4] 陳秀珍.銀杏葉不同生長期總黃酮的含量測定（簡報）[J].廣西植物，1988，8（4）：363-364.

[5] 王蘭珍，馬希漢，王姝清,等.元寶楓葉有效成分動態(tài)變化的研究[J]. 西北林學院學報，1997，12（4）：68-71.

[6] 李合生.植物生理生化實驗原理和技術(shù)[M].北京：高等教育出版社，1999：134.

[7] 喬富廉.植物生理學實驗分析測定技術(shù)[M].北京：中國農(nóng)業(yè)科學技術(shù)出版社，2002：90-91.

作者簡介：董效文（1992-），男，內(nèi)蒙古自治區(qū)扎蘭屯市人，主要從事森林培育工作。E-mail：guoaihua@163.com

收稿日期：2015-11-02

文章編號：1002-0659（2016）01-0004-03

中圖分類號：S718.43

文獻標識碼：A