林志謙

(福建省泉州市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，福建泉州 362000)

2014年泉州市原種畜禽場(chǎng)重點(diǎn)疫病本底調(diào)查情況

林志謙

(福建省泉州市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，福建泉州 362000)

為切實(shí)掌握泉州市原種畜禽場(chǎng)重點(diǎn)疫病情況，2014年4～9月，我中心采用問(wèn)卷調(diào)查、現(xiàn)場(chǎng)走訪、采集樣品檢測(cè)等方式，對(duì)1個(gè)原種雞場(chǎng)、1個(gè)原種鴨場(chǎng)(1個(gè)場(chǎng)掛3塊牌子)、5個(gè)原種豬場(chǎng)、1個(gè)大型奶牛企業(yè)開(kāi)展重點(diǎn)疫病本底調(diào)查。本次調(diào)查共采集各類樣品1616份(其中雞血清228份、雞棉拭子228份、雞蛋蛋清216份，鴨棉拭子290份，豬血清250份、對(duì)應(yīng)豬扁桃體250份、病料樣品54份，奶牛50頭及對(duì)應(yīng)奶牛血清50份)，樣品累計(jì)檢測(cè)5066份次。結(jié)果表明:原種雞場(chǎng)方面，高致病性禽流感H5亞型、禽流感H7亞型、雞新城疫病原核酸陽(yáng)性率均為0%；高致病性禽流感H5亞型、雞新城疫免疫抗體合格率分別為98.96%.97.92%，禽白血病ALV-AB抗體、ALV-J抗體、禽白血病P27抗原，陽(yáng)性率分別為45.61%、61.84%、6.94%，雞白痢抗體陽(yáng)性率28.51%，說(shuō)明該場(chǎng)禽白血病和雞白痢的感染較普遍；原種鴨場(chǎng)方面，高致病性禽流感H5亞型、禽流感H7亞型、鴨瘟病原核酸陽(yáng)性率均為0%。原種豬場(chǎng)方面，對(duì)豬偽狂犬病、豬繁殖與呼吸障礙綜合征、高致病性豬藍(lán)耳病、豬瘟、豬口蹄疫等5個(gè)病種進(jìn)行抗體和病原檢測(cè)，豬偽狂犬病gB免疫抗體合格率98.4%，gE抗體陽(yáng)性率19.6%，豬繁殖與呼吸障礙綜合征免疫抗體合格率86.4%，O型口蹄疫抗體免疫合格率76.4%，豬瘟抗體免疫合格率90.8%，組織樣品豬偽狂犬病核酸陽(yáng)性率11.1%，扁桃體樣品豬繁殖與呼吸障礙綜合征、高致病性豬藍(lán)耳病、豬瘟、豬口蹄疫核酸陽(yáng)性率均為0%，說(shuō)明我市個(gè)別原種豬場(chǎng)中存在豬偽狂犬病病毒感染的情況。奶牛企業(yè)方面，布魯氏茵病及結(jié)核病陽(yáng)性率均為0%。本次調(diào)查為我市首次，其結(jié)果為今后我市制定種畜禽重點(diǎn)疫病凈化實(shí)施工作方案，進(jìn)一步有針對(duì)性對(duì)原種畜禽場(chǎng)開(kāi)展動(dòng)物疫病凈化工作提供了參考依據(jù)。

種畜禽場(chǎng)；疫??；調(diào)查

為貫徹落實(shí)《福建省中長(zhǎng)期動(dòng)物疫病防治規(guī)劃（2012—2020年）》相關(guān)目標(biāo)和要求，切實(shí)掌握泉州市原種畜禽場(chǎng)重點(diǎn)疫病情況，探索適合我市實(shí)際的疫病凈化技術(shù)路線，提高原種畜禽場(chǎng)疫病綜合防治能力和核心競(jìng)爭(zhēng)力，促進(jìn)畜牧業(yè)健康發(fā)展，維護(hù)公共衛(wèi)生安全。2014年4～9月對(duì)我市取得省級(jí)《種畜禽生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)許可證》的1個(gè)原種雞場(chǎng)、1個(gè)原種鴨場(chǎng)（1個(gè)場(chǎng)掛3塊牌子）、5個(gè)原種豬場(chǎng)、1個(gè)大型奶牛企業(yè)開(kāi)展重點(diǎn)疫病本底調(diào)查。開(kāi)展重點(diǎn)疫病本底調(diào)查工作為我市首次，為今后進(jìn)一步推進(jìn)原種畜禽場(chǎng)逐場(chǎng)逐病種凈化做好前期準(zhǔn)備工作[1]。本次調(diào)查工作采用現(xiàn)場(chǎng)問(wèn)卷調(diào)查、采集血清樣品和扁桃體樣品進(jìn)行檢測(cè)等方式進(jìn)行。調(diào)查結(jié)果如下：

1 材料和方法

1.1 樣品采集

本次調(diào)查共采集各類樣品1616份（其雞血清228份、雞棉拭子228份、雞蛋蛋清216份，鴨棉拭子290份，豬血清250份、對(duì)應(yīng)豬扁桃體250份、病料樣品54份，奶牛50頭及對(duì)應(yīng)奶牛血清50份）。根據(jù)省廳文件要求，原種雞場(chǎng)調(diào)查高致病性禽流感、雞新城疫、沙門(mén)氏菌病、禽白血病等4種疫?。辉N鴨場(chǎng)調(diào)查鴨瘟；原種豬場(chǎng)調(diào)查豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征、高致病性豬繁殖與呼吸綜合征、豬偽狂犬病等4種疫??；奶牛企業(yè)調(diào)查布魯氏菌病、奶牛結(jié)核病2種疫病。本次調(diào)查采取現(xiàn)場(chǎng)問(wèn)卷調(diào)查和采樣檢測(cè)相結(jié)合的方式進(jìn)行。對(duì)每個(gè)被調(diào)查的養(yǎng)殖場(chǎng)填寫(xiě)1份《現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查表》，并按要求采集樣品進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。

1.2 主要儀器和檢測(cè)試劑

1.2.1 主要儀器：全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀（Tecan）、全自動(dòng)洗板機(jī)（Thermo）、組織勻漿機(jī)（Qiagen）、全自動(dòng)核酸提取儀（Thermo）、生物安全柜（Baker）、生物安全柜（Thermo）、熒光PCR儀（ABI step-one）等。

1.2.2 檢測(cè)試劑：血清學(xué)檢測(cè)采用，豬偽狂犬病、豬瘟、豬繁殖與呼吸障礙綜合征通用型檢測(cè)試劑盒購(gòu)自美國(guó)IDEXX公司；O型口蹄疫試劑盒購(gòu)自韓國(guó)金諾公司。病原學(xué)檢測(cè)采用，豬各病種病原和鴨瘟檢測(cè)試劑盒均購(gòu)自北京生科尚儀科技有限公司；高致病性禽流感H5亞型、禽流感H7亞型、新城疫病毒檢測(cè)試劑盒子均購(gòu)自匹基公司，等。

1.3 方法

高致病性禽流感H5亞型抗體、禽流感H7亞型抗體、雞新城疫抗體采用血凝和血凝抵制試驗(yàn)法；雞白痢抗體采用平板凝集試驗(yàn)法；豬瘟抗體、O型口蹄疫抗體、豬繁殖與呼吸道綜合征抗體、豬偽狂犬病gB和gE抗體、禽白血病抗體及P27抗原均采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法（ELISA法）；病原核酸采用熒光PCR法或熒光RTPCR法，等。

2 結(jié)果與分析

2.1 血清學(xué)檢測(cè)

2.1.1 雞血清/蛋清樣品 高致病性禽流感H5亞型免疫抗體檢測(cè)血清樣品96份，合格數(shù)95份，合格率98.96%；新城疫免疫抗體檢測(cè)血清樣品96份，合格數(shù)94份，合格率97.92%；禽白血病ALVAB抗體檢測(cè)血清樣品228份，陽(yáng)性數(shù)104份，陽(yáng)性率45.61%；禽白血病ALV-J抗體檢測(cè)血清樣品228份，陽(yáng)性數(shù)141份，陽(yáng)性率61.84%；禽白血病P27抗原檢測(cè)蛋清樣品216份，陽(yáng)性數(shù)15份，陽(yáng)性率6.94%；雞白痢抗體檢測(cè)血清樣品228份，陽(yáng)性數(shù)65份，陽(yáng)性率28.51%。（見(jiàn)表1 原種雞場(chǎng)采樣血清學(xué)/蛋清檢測(cè)情況表）

表1 原種雞場(chǎng)采樣血清學(xué)/蛋清檢測(cè)情況表

2.1.2 豬血清樣品 采集A、B、C、D、E、F，5個(gè)原種場(chǎng)豬血清樣品250份豬進(jìn)行檢測(cè)（見(jiàn)表2 原種豬場(chǎng)采樣數(shù)量表），總體結(jié)果如下：豬偽狂犬gB抗體合格數(shù)246份，合格率98.4%；豬偽狂犬gE抗體陽(yáng)性數(shù)49份，陽(yáng)性率19.6%；豬繁殖與呼吸障礙綜合征抗體合格數(shù)216份，合格率86.4%；結(jié)合各個(gè)原種豬場(chǎng)的免疫背景，E場(chǎng)豬繁殖與呼吸障礙綜合征抗體合格率比較低僅為62%，其他4個(gè)場(chǎng)豬繁殖與呼吸障礙綜合征抗體合格率都處于比較高的狀態(tài)，能夠較好保護(hù)豬群；豬瘟抗體合格數(shù)227份，合格率90.8%；O型口蹄疫抗體合格數(shù)191份，合格率76.4%。從單個(gè)場(chǎng)來(lái)看，豬偽狂犬gB抗體、豬瘟5個(gè)場(chǎng)都處于很好的水平；B場(chǎng)豬偽狂犬gE抗體陽(yáng)性率高達(dá)94%，預(yù)警該場(chǎng)豬偽狂犬野毒處于非常危險(xiǎn)的狀態(tài)；D場(chǎng)有2份樣品陽(yáng)性，陽(yáng)性率4%，表明該場(chǎng)也有可能存在豬偽狂犬野毒感染的情況；D場(chǎng)、E場(chǎng)O型口蹄疫抗體均達(dá)不到國(guó)家規(guī)定的群體抗體合格率70% 的要求，特別是E場(chǎng)合格率僅為24%，建議進(jìn)行加強(qiáng)免疫口蹄疫疫苗并加大檢測(cè)數(shù)量。（見(jiàn)表3 原種豬場(chǎng)重點(diǎn)動(dòng)物疫病抗體檢測(cè)情況表）

從種豬群體結(jié)構(gòu)看，豬偽狂犬病gE抗體陽(yáng)性率為19.6%，其中生產(chǎn)母豬陽(yáng)性率為18.67%，后備母豬陽(yáng)性率為20%，種公豬陽(yáng)性率為28%。（見(jiàn)表4 原種豬場(chǎng)各種豬群抗體檢測(cè)情況表）

表2 原種豬場(chǎng)采樣數(shù)量表

表3 原種豬場(chǎng)重點(diǎn)動(dòng)物疫病抗體檢測(cè)情況表

表4 原種豬場(chǎng)各種豬群抗體檢測(cè)情況表

表5 原種豬場(chǎng)病料重點(diǎn)動(dòng)物疫病病原檢測(cè)表

2.1.3 奶牛血清樣品 采集奶牛血清樣品50份，檢測(cè)布魯氏桿菌病抗體結(jié)果陽(yáng)性率均為0%。

2.2 病原學(xué)檢測(cè)

2.2.1 原種雞場(chǎng)棉拭子 采集228份咽喉/泄殖腔雙腔棉拭子分別進(jìn)行高致病性禽流感H5亞型核酸、禽流感H7亞型核酸、新城疫核酸檢測(cè)，結(jié)果為均為陰性。

2.2.2 原種鴨場(chǎng)棉拭子 采集290份咽喉/泄殖腔雙腔棉拭子分別進(jìn)行高致病性禽流感H5亞型核酸、禽流感H7亞型核酸、鴨瘟核酸檢測(cè)，結(jié)果均為陰性。

2.2.3 原種豬場(chǎng)組織樣品 采集A、B、C、D、E、F，5個(gè)原種場(chǎng)250份種豬扁桃體樣品，并與血清樣品一一對(duì)應(yīng)，進(jìn)行豬繁殖與呼吸障礙綜合征、高致病性豬藍(lán)耳病、豬瘟病毒核酸檢測(cè)，結(jié)果均為陰性。2014年4月～9月，陸續(xù)收集到各原種豬場(chǎng)病料共54份（為哺乳期至100日齡以內(nèi)病死豬組織樣品），進(jìn)行豬偽狂犬病、豬繁殖與呼吸障礙綜合征、高致病性豬藍(lán)耳病、豬瘟、O型口蹄疫病毒核酸檢測(cè)，檢出豬偽狂犬核酸陽(yáng)性樣品6份，陽(yáng)性率11.11%，其他病種均為陰性。6份豬偽狂犬核酸陽(yáng)性樣品均從B場(chǎng)12份樣品中檢出，B場(chǎng)樣品陽(yáng)性率50%，這與血清型檢測(cè)B場(chǎng)gE抗體高相吻合。（見(jiàn)表5 原種豬場(chǎng)病料重點(diǎn)動(dòng)物疫病病原檢測(cè)表）

2.2.4 奶牛 抽檢50頭奶牛先進(jìn)行采血，后在頸部皮內(nèi)接種牛結(jié)核菌素，72h觀察接種部分測(cè)量皮厚差，結(jié)果均為陰性。

2.3 結(jié)果分析

（1）從此次本底調(diào)查檢測(cè)結(jié)果看，原種雞場(chǎng)常年開(kāi)展禽流感、新城疫綜合防控，取得了較好成效。一是高致病性禽流感H5亞型、新城疫免疫到位，抗體滴度水平高且均勻度整齊，總體抗體合格率分別達(dá)98.96%、97.92%，構(gòu)筑了有效免疫保護(hù)屏障。棉拭子高致病性禽流感H5亞型、禽流感H7亞型、新城疫病原學(xué)核酸檢測(cè)均未發(fā)現(xiàn)病毒陽(yáng)性樣品。二是禽白血病ALV-AB抗體陽(yáng)性率為45.61%；禽白血病ALV-J抗體陽(yáng)性率為61.84%；禽白血病P27抗原陽(yáng)性率為6.94%。表明該場(chǎng)存在禽白血病污染比較嚴(yán)重，應(yīng)及時(shí)淘汰陽(yáng)性檢出雞只[2]。三是雞白痢抗體陽(yáng)性率達(dá)28.51%，表明該場(chǎng)存在沙門(mén)氏菌污染且比較嚴(yán)重，應(yīng)采取生物安全綜合防控措施并及時(shí)淘汰陽(yáng)性檢出雞只。今后開(kāi)展重點(diǎn)動(dòng)物疫病凈化工作的關(guān)鍵在于禽白血病和雞白痢2種疫病的防控。

（2）從此次本底調(diào)查檢測(cè)結(jié)果看，原種鴨場(chǎng)高致病性禽流感H5亞型核酸、禽流感H7亞型核酸、鴨瘟核酸檢測(cè)，結(jié)果均為陰性。且該場(chǎng)各項(xiàng)條件比較到位，可以優(yōu)先實(shí)施鴨瘟凈化工作。

（3）A、B、C、D、E，5個(gè)原種豬場(chǎng)常年開(kāi)展豬瘟等重點(diǎn)動(dòng)物疫病綜合防控，取得了較好成效。一是豬瘟免疫效果好，抗體整齊，總體免疫抗體合格率90.8%，豬瘟免疫保護(hù)達(dá)到了較高的水平；病原學(xué)檢測(cè)未檢出豬瘟病毒陽(yáng)性樣品。二是豬繁殖與呼吸綜合征抗體免疫效果有待加強(qiáng)，免疫抗體合格率為86.4%；病原學(xué)檢測(cè)顯示沒(méi)有藍(lán)耳病和高致病性豬藍(lán)耳病野毒感染。三是O型口蹄疫免疫抗體合格率76.4%，特別D場(chǎng)、E場(chǎng)需加強(qiáng)口蹄疫免疫并定期監(jiān)測(cè)；口蹄疫病原核酸（通用型）均為陰性，表明未感染口蹄疫病毒。四是豬偽狂犬病[3]。豬偽狂犬病gB抗體合格率98.4%，豬偽狂犬病gE抗體，陽(yáng)性率19.6%；組織樣品豬偽狂犬病核酸陽(yáng)性率11.1%。表明豬偽狂犬病在我市個(gè)別原種豬場(chǎng)中存在，應(yīng)引起養(yǎng)殖場(chǎng)業(yè)主的重視。

（4）規(guī)模奶牛企業(yè)“布病和結(jié)核病”綜合防控工作成績(jī)顯著。本次調(diào)查檢測(cè)奶牛血清50份，均未檢出“兩病”陽(yáng)性奶牛。規(guī)模奶牛企業(yè)堅(jiān)持每年兩次“兩病”監(jiān)測(cè)，并對(duì)檢出的陽(yáng)性牛按要求進(jìn)行撲殺、無(wú)害化處理，為奶?！皟刹　眱艋ぷ鞯於▓?jiān)實(shí)基礎(chǔ)。同時(shí)，奶牛場(chǎng)還積極開(kāi)展A型口蹄疫、O型口蹄疫、亞洲I型口蹄疫等疫病防控工作，有利于進(jìn)一步疫病凈化[4]。

3 結(jié)論

（1）從收回的10份問(wèn)卷調(diào)查看，各個(gè)原種畜禽場(chǎng)建設(shè)布局以及生產(chǎn)管理總體上處于較好水平，建場(chǎng)設(shè)計(jì)規(guī)劃比較到位，生產(chǎn)管理能夠因地制宜，根據(jù)各場(chǎng)不同實(shí)際情況合理制定免疫程序，能夠較好地防控重點(diǎn)動(dòng)物疫病。

（2）原種雞場(chǎng)主要問(wèn)題是禽白血病和雞白痢2種垂直傳染性動(dòng)物疫病陽(yáng)性率較高，需大力加強(qiáng)監(jiān)測(cè)、淘汰陽(yáng)性雞只與凈化相結(jié)合等綜合防控措施，不斷凈化種源。

（3）原種鴨場(chǎng)各項(xiàng)條件優(yōu)越，可以優(yōu)先走凈化鴨瘟路線，做到逐場(chǎng)逐個(gè)疫病凈化。

（4）養(yǎng)豬業(yè)的穩(wěn)定生產(chǎn)和可持續(xù)發(fā)展是以種豬健康為前提的。以上檢測(cè)結(jié)果表明，豬繁殖與呼吸障礙綜合征、高致病性豬藍(lán)耳病、豬瘟病毒病原學(xué)檢測(cè)結(jié)果均為陰性，我市原種豬場(chǎng)重點(diǎn)動(dòng)物疫病防控總體處于較好的水平。A、C、E場(chǎng)豬偽狂犬病原和血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果均為陰性，具備開(kāi)展豬偽狂犬病凈化的良好條件，建議著手制定符合本場(chǎng)實(shí)際的凈化方案，開(kāi)展豬偽狂犬病凈化。D場(chǎng)在血清中有檢測(cè)出gE抗體陽(yáng)性樣品，說(shuō)明D場(chǎng)可能存在豬偽狂犬野毒感染情況。B場(chǎng)豬偽狂犬病野毒感染嚴(yán)重，應(yīng)采取嚴(yán)格果斷的措施，制定科學(xué)合理的免疫方案，使用安全高效的gE基因缺失疫苗，擴(kuò)大種豬核心群監(jiān)測(cè)面，增加監(jiān)測(cè)頻次，淘汰gE抗體陽(yáng)性種豬，降低野毒感染率。

（5）我市大型奶牛企業(yè)不多。此次調(diào)查的奶牛企業(yè)具備凈化“兩病”條件，可以結(jié)合本場(chǎng)優(yōu)先開(kāi)展凈化“兩病”。

動(dòng)物疫病凈化工作的意義不僅僅在于提高生產(chǎn)性能，更是事關(guān)公共衛(wèi)生安全的第一道屏障，是一項(xiàng)長(zhǎng)期的、需要投入大量人力物力財(cái)力的系統(tǒng)工程，是我國(guó)動(dòng)物疫病防控工作的最終方向，需要政府強(qiáng)力推動(dòng)以及企業(yè)主的積極配合。通過(guò)開(kāi)展本底調(diào)查工作，提高了養(yǎng)殖業(yè)主對(duì)開(kāi)展動(dòng)物疫病凈化重要性的認(rèn)識(shí)程度，促進(jìn)其積極參與動(dòng)物疫病凈化工作。本次調(diào)查及時(shí)對(duì)種畜禽場(chǎng)疫病防控工作存在的不足之處進(jìn)行綜合分析，并提出有針對(duì)性的指導(dǎo)建議，提高了畜禽疫病綜合防控效果。本次調(diào)查為掌握我市原種畜禽場(chǎng)重點(diǎn)疫病情況，制定種畜禽重點(diǎn)動(dòng)物疫病凈化方案提供基礎(chǔ)性資料和科學(xué)依據(jù)。

致謝：感謝參與此次本底調(diào)查的各個(gè)原種畜禽場(chǎng)、相關(guān)縣（市、區(qū)）動(dòng)物疫病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)工作人員及我中心各位同仁，在時(shí)間任務(wù)的情況下，為及時(shí)完成此項(xiàng)種畜禽場(chǎng)重點(diǎn)疫病本底調(diào)查任務(wù)作了大量有著有成效工作。

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[3] 田克恭，李明.動(dòng)物疫病診斷技術(shù)—理論與應(yīng)用[M].中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2014，（6）：170-176.

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林志謙（1979—），男，大學(xué)本科，獸醫(yī)師，主要從事動(dòng)物疫病防控工作。