王友令,袁小遠(yuǎn),徐懷英,張玉霞,李莉
(山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院家禽研究所,山東 濟(jì)南 250100)
一例種鴿新城疫的分離鑒定與防治*
王友令,袁小遠(yuǎn),徐懷英,張玉霞,李莉
(山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院家禽研究所,山東 濟(jì)南 250100)
鴿新城疫,又稱鴿瘟或 I型鴿副粘病毒病,是由鴿I型副粘病毒引起的急性、熱性、接觸性、敗血性傳染病,以腹瀉和脊髓炎為主要特征[1]。本病自1981年在蘇丹被發(fā)現(xiàn)以來(lái),西歐和美國(guó)等地相繼報(bào)道了此病[2]。1986年在深圳某鴿場(chǎng)發(fā)現(xiàn)了該病,該病傳播迅速,發(fā)病率和死亡率高,乳鴿對(duì)該病敏感性最高,病死率高達(dá)50%~100%,是當(dāng)前危害養(yǎng)鴿業(yè)的重要疫病之一,常給養(yǎng)鴿戶造成很大的經(jīng)濟(jì)損失[3]。2016年3月山東聊城某農(nóng)戶送檢一批疑似患有新城疫的種鴿,經(jīng)臨床檢查剖檢結(jié)合實(shí)驗(yàn)室診斷,確診為鴿新城疫,現(xiàn)將診斷結(jié)果報(bào)道如下:
2016年3月,山東聊城某農(nóng)戶養(yǎng)殖的不同日齡種鴿陸續(xù)發(fā)病。其中產(chǎn)蛋種鴿發(fā)病率為27%,死亡率為13%。后備種鴿發(fā)病率為100%,死亡率90%。發(fā)病種鴿精神沉郁,羽毛蓬松,食欲不振,部分產(chǎn)沙殼蛋,后期呈現(xiàn)扭頭、伸頸、雙腳麻痹、不能站立、雙翅下垂等神經(jīng)癥狀。后備鴿首先發(fā)生嚴(yán)重的水樣下痢,排黃綠色稀糞,渴欲增加,伴有陣發(fā)性痙攣、震顫,頭頸扭曲,逐步消瘦而死亡。
對(duì)送檢的10只死亡鴿子進(jìn)行剖檢,剖檢時(shí)鴿子因脫水皮膚較難剝離,皮下廣泛淤斑性出血,有紅、紫紅、黑紅等特征性病變;腦充血,有少量的出血點(diǎn),腦實(shí)質(zhì)水腫;肝腫大,有出血點(diǎn)及出血斑,部分有針頭大小壞死點(diǎn);脾腫大;腎蒼白、腫大;有些病例見(jiàn)小腸、直腸和泄殖腔充血或出血。
3.1 細(xì)菌分離 根據(jù)常規(guī)的細(xì)菌分離方法,用接種環(huán)無(wú)菌采集鴿的肝臟并接種于普通培養(yǎng)基、血平板培養(yǎng)基、麥康凱培養(yǎng)基上,置于38℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h,均無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)。
3.2 病毒分離 以無(wú)菌操作取具有典型癥狀的病鴿的氣管、腦、肝臟、腎臟研磨成勻漿,用無(wú)菌生理鹽水按1:3稀釋?zhuān)磸?fù)凍溶2~3次后以3000轉(zhuǎn)∕min離心10min,取上清液,用45μm注射濾器過(guò)濾,按2000IV∕ml各加入青霉素、鏈霉素置4℃冰箱過(guò)夜作用。無(wú)菌檢查合格后,尿囊腔接種10日齡SPF雞胚10枚,0.2ml/枚,于37℃溫箱培養(yǎng)。每天照胚4次,觀察并記錄死亡情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn),在接種56h后,雞胚全部死亡,收獲死亡雞胚尿囊液做進(jìn)一步鑒定。
3.3 紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)[4,5](HA) 取死亡雞胚尿囊液做紅細(xì)胞凝集試驗(yàn),尿囊液對(duì)紅細(xì)胞凝集效價(jià)為26,結(jié)果表明收獲的雞胚液含可凝集雞紅細(xì)胞的病毒。
3.4 血凝抑制試驗(yàn)[4,5](HI) 取發(fā)病鴿血清16份,經(jīng)血凝抑制試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果為ND:7、6、3、3、2、4、8、6、6、4、4、2、0、3、5、7平均值達(dá)到 4.4,ND抗體水平明顯偏低,且離散度較大。
3.5 血清交叉反應(yīng) 分別用 H5、H9、H7、ND、EDS陽(yáng)性血清與該分離株做交叉反應(yīng),結(jié)果發(fā)現(xiàn)僅ND陽(yáng)性血清能抑制該分離毒凝集紅細(xì)胞,而其它陽(yáng)性血清不能抑制該分離毒的血凝特性,由此斷定該分離毒為NDV。
3.6 分離毒MDT、ICPI、IVPI的測(cè)定[4,5]取新鮮尿囊液進(jìn)行1日齡SPF雛雞腦內(nèi)接種致病指數(shù)(ICPI)、雞胚平均死亡時(shí)間(MDT)、42日齡SPF雞靜脈接種指數(shù)測(cè)定(IVPI),結(jié)果該新城疫病毒分離株對(duì)1日齡雛雞腦內(nèi)接種致病指數(shù)(ICPI)為1.75,42日齡 SPF雞翅靜脈接種致病指數(shù) (IVPI)為2.36,雞胚平均死亡時(shí)間(MDT)為53.2h,按標(biāo)準(zhǔn)判定該分離毒為強(qiáng)毒。
4.1 對(duì)發(fā)病鴿群進(jìn)行緊急接種La Sota弱毒疫苗,并用該分離毒滅活后做成水苗進(jìn)行聯(lián)合注射,為防止繼發(fā)感染,可在飲水中加入抗生素,連用3~5d。在使用疫苗前后在飲水中加入多維素,以提高機(jī)體免疫力,減少應(yīng)激反應(yīng),加快恢復(fù)。
4.2 經(jīng)確診后,也可用高倍量的干擾素飲水,或新城疫卵黃抗體注射以抑制病毒在鴿體內(nèi)的復(fù)制。但一旦鴿群恢復(fù)正常,應(yīng)立即進(jìn)行免疫接種。
4.3 對(duì)鴿群進(jìn)行大面積消毒,應(yīng)用兩種以上消毒劑每天輪流消毒,可殺滅病菌,抑制病毒增殖與分裂,從而消滅傳播源。
4.4 對(duì)未發(fā)病鴿群建議從提高機(jī)體抵抗力入手,提高飼料質(zhì)量,增加維生素含量從而提高機(jī)體免疫力。還要做好嚴(yán)格的防疫措施,加強(qiáng)環(huán)境及衛(wèi)生管理,可應(yīng)用抗病毒及抗菌藥物進(jìn)行預(yù)防性投藥,細(xì)心觀察鴿群,一有癥狀及時(shí)就診治療。
4.5 在有條件的情況下最好用分離毒做成自家滅活油乳劑疫苗對(duì)鴿群進(jìn)行2次以上免疫,會(huì)獲得良好的免疫預(yù)防效果[6]。
當(dāng)前,還沒(méi)有針對(duì)鴿新城疫的專(zhuān)用商品疫苗,養(yǎng)鴿生產(chǎn)中養(yǎng)殖戶常用雞新城疫La Sota弱毒疫苗預(yù)防鴿新城疫,然而仍有一部分鴿場(chǎng)會(huì)發(fā)生新城疫,這與鴿群的新城疫免疫抗體水平及鴿場(chǎng)的生物安全性措施是否嚴(yán)格執(zhí)行有關(guān)。種鴿生產(chǎn)中鴿場(chǎng)應(yīng)根據(jù)當(dāng)?shù)匦鲁且吡餍星闆r制定合理的免疫程序,并定期進(jìn)行免疫效果監(jiān)測(cè)分析。如果能用本發(fā)病鴿場(chǎng)分離到的毒株做成油乳劑疫苗進(jìn)行免疫效果會(huì)更好,同時(shí)做好飼養(yǎng)管理,加強(qiáng)飼料營(yíng)養(yǎng)并及時(shí)補(bǔ)充多維素,增強(qiáng)其抵抗力[7]。該場(chǎng)經(jīng)以上綜合防治措施后,該群鴿死亡率明顯下降,一個(gè)月后基本恢復(fù)了正常,產(chǎn)蛋率也有了明顯的上升。
總之,鴿新城疫應(yīng)以預(yù)防為主,嚴(yán)格執(zhí)行生物安全措施,才能獲得良好的生產(chǎn)效益。
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S858.39
C
1673-1085(2016)09-0032-02
2016-08-19
山東省科技發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目資助:鴿瘟病毒的流行病學(xué)與防控技術(shù)研究(No.2013GNC11026)。
王友令,博士,副研究員,主要從事家禽疫病及分子流行病學(xué)的研究。Email:Wangyouling71@163. com>。