受體品種對薩?？搜蚺咛ヒ浦彩芴ヂ实挠绊?/h1>
2016-03-25 23:00:26韓煜茹馬春江
草食家畜 2016年5期
曾 滔，韓煜茹，馬春江
（新疆哈密地區(qū)畜牧工作站，新疆哈密839000）
受體品種對薩?？搜蚺咛ヒ浦彩芴ヂ实挠绊?/p>
曾 滔，韓煜茹，馬春江*
（新疆哈密地區(qū)畜牧工作站，新疆哈密839000）
研究目的：研究不同受體品種對薩?？搜蚺咛ヒ浦彩芴ヂ实挠绊?。方法：首先對薩福克成年母羊進行同期發(fā)情、激素誘導(dǎo)超數(shù)排卵和人工授精，發(fā)情后5.5～6 d手術(shù)沖胚并對胚胎分級，使用腹腔鏡將單枚A級胚胎移植到相同發(fā)情天數(shù)的受體母羊子宮角，受體母羊品種為多浪羊、小尾寒羊、湖羊和雜交羊（以哈薩克羊為母本，多浪和小尾寒羊為父本的雜種羊），30 d后用B超進行妊娠檢查。結(jié)果：湖羊作為受體母羊受胎率最低，只有52.0％；而雜交羊作為受體羊的受胎率最高，達到68.7％；多浪羊和小尾寒羊的受胎率分別為65.1％和66.7％。但卡方檢驗表明不同受體品種間差異不顯著（P＞0.05）。結(jié)論：以上受體品種對薩?？搜蚺咛ヒ浦彩芴ヂ蕸]有顯著影響。
胚胎移植；受胎率；受體品種；妊娠檢查
10.16863 /j.cnki.1003-6377.2016.05.005
胚胎移植技術(shù)是指將良種母畜的早期胚胎取出，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的一般母畜體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育成為新個體的繁殖技術(shù)。為了改良哈密地區(qū)肉用綿羊品種，提高羊肉品質(zhì)及加速引進良種肉羊的擴繁速度，填補良種肉種羊的缺口，哈密地區(qū)自2013年開始由政府補貼大批量進行肉羊胚胎移植項目，2015年哈密地區(qū)養(yǎng)殖企業(yè)從澳大利亞購買了上千只薩福克純種肉羊，利用胚胎移植技術(shù)將優(yōu)質(zhì)薩?？巳庋蛉后w迅速擴繁，并向全區(qū)推廣。
哈密地區(qū)目前養(yǎng)殖有多個綿羊品種，主要包括本土品種哈薩克羊和多浪羊、引入品種湖羊、小尾寒羊等。本研究擬探討以多浪羊、小尾寒羊、湖羊和雜交羊作為受體，對薩?？搜蚺咛ヒ浦彩芴ヂ实挠绊?，以期為薩?？搜虻暮笃诖笠?guī)模擴繁提供理論依據(jù)。
1 材料與方法
1.1實驗動物
供體母羊為澳大利亞引進的薩?？搜?，共55只，年齡2.5歲，平均體重65 kg。受體羊為多浪羊、小尾寒羊、湖羊、雜交羊。受體羊均來自哈密市牧祥養(yǎng)殖專業(yè)合作社，均為2～4歲經(jīng)產(chǎn)母羊。受體羊各品種所處圈舍不同，在圈舍中按體重大小分群15～20只為一欄，精料粗蛋白18％，采用TMR技術(shù)，日糧采食量按體重4％供給。
1.2主要藥品和試劑
FSH（寧波三生藥業(yè)）、PG（寧波三生藥業(yè)）、靜松林、鹽酸普魯卡因、腎上腺素、PBS緩沖液、Holding液、海綿栓（氟孕酮、新西蘭進口）、酒精、碘酊、新潔爾滅、礦物油、生理鹽水。
1.3主要器械及設(shè)備
手術(shù)車、創(chuàng)布、剪毛剪、手術(shù)剪、止血鉗、夾子、腸鉗、移液槍、連續(xù)變倍體式顯微鏡、恒溫水浴鍋、烘干箱、高壓滅菌鍋、恒溫臺等。
1.4供體羊的超數(shù)排卵和胚胎鑒定
對供體薩?？四秆蜻M行埋栓處理，海綿栓在供體羊陰道內(nèi)放置13 d。在取出海綿栓前2 d開始肌肉注射FSH，總劑量300 U，按每天早晚各1次、劑量遞減的方法連續(xù)注射3 d，共六次。在注射FSH第5針時，將海綿栓取出，同時注射0.1 mg PG，并清洗陰道。海綿栓取出24 h開始試情，根據(jù)發(fā)情情況進行人工授精。供體羊發(fā)情5.5～6 d時，采用子宮角沖胚方法進行手術(shù)沖胚。
子宮角收集的液體放在連續(xù)變倍體式顯微鏡下鏡檢，將胚胎從集卵皿吸至放有Holding液的四孔皿中，在連續(xù)變倍體式顯微鏡下觀察受精卵的形態(tài)、色調(diào)、分裂球的大小、均勻度、細胞的密度與透明帶的間隙以及變性情況，根據(jù)上述標準對受精卵進行鑒定和分級，詳細記錄每只供體羊出胚數(shù)和可用胚胎數(shù)。A級胚胎：胚胎形態(tài)完整，輪廓清晰，呈球形，分裂球大小均勻，結(jié)構(gòu)緊湊，色調(diào)和透明度適中，無附著的細胞和液泡，細胞變性率不超過10％。
1.5受體羊的同期發(fā)情和內(nèi)窺鏡法胚胎移植
對受體母羊肌肉注射0.1mg PG，12～60 h用試情公羊進行試情，以母羊接受爬跨為準，用自噴漆做出標記后挑出，做好受體羊的發(fā)情記錄與當(dāng)天發(fā)情的供體羊一同標識。
受體羊術(shù)前要空腹十二小時，仰臥于手術(shù)保定架上，在后肢內(nèi)側(cè)鼠蹊部做1.5～2 cm切口，用腹腔鏡確認黃體發(fā)育狀況，優(yōu)良的黃體予以移植。在另一側(cè)做切口，用腸鉗引導(dǎo)出黃體側(cè)子宮角，將裝有胚胎的移植管順子宮角方向插入宮腔，推出胚胎，隨即子宮復(fù)位。移植側(cè)切口縫合消毒。
1.6受體羊的妊娠鑒定
使用B超對胚胎移植后30 d的受體羊進行妊娠檢查，采用直腸內(nèi)探查，將受體羊只保定后檢查者站于羊體一側(cè)，探頭涂布耦合劑后，將探頭插入直腸，朝向盆腔入口方向進行掃查。母羊一般取自然站立姿勢，助手在旁扶持，遇到腹部大的經(jīng)產(chǎn)母羊需要幫檢查者托起腹部便于妊娠檢查操作。
1.7數(shù)據(jù)分析
使用卡方檢驗分析不同品種的受胎率。
2 結(jié)果與分析
本次移植受體187只（四個品種），共移植A級胚胎187枚。經(jīng)過B超檢查，多浪羊、小尾寒羊、湖羊、雜交羊的受胎率分別為65.12％、66.67％、52.00％和68.67％，卡方檢驗表明，品種間差異不顯著，見表1。
3 討論
影響胚胎移植的因素有很多，例如胚胎等級、季節(jié)、供受體發(fā)情同步差、受體的營養(yǎng)狀況、受體的黃體情況，移植環(huán)境、移植方法、操作人員的熟練程度等。本次試驗是2015年12月10日在初冬季節(jié)開始，供體和受體膘情優(yōu)良，發(fā)情率達到90％，黃體形狀和等級都很好。
10-11月份是綿羊的繁殖季節(jié)，綿羊的季節(jié)性生殖特性會影響到在不同季節(jié)進行的同期發(fā)情和超數(shù)排卵效果。張金龍等（2013）報道，季節(jié)對受體羊胚胎移植效果的影響較大，秋冬季節(jié)（9-12月份）受胎率較高，夏季（6-8月份）受胎率較低，本實驗與上述結(jié)果相一致。
此次為單胚移植,作為受體羊的4個品種中,湖羊和小尾寒羊為多胎品種,哈薩克雜交羊和多浪羊多數(shù)為單胎。本實驗中單胎或多胎品種受體并不影響胚胎移植的妊娠率，這與吳曉東等人（2005）將杜泊羊胚胎移植給不同品種受體母羊后妊娠率差異不顯著的結(jié)論相一致。這與劉引區(qū)等人（2012）將薩?？搜蚺咛ヒ浦步o小尾寒羊和小尾寒羊雜種羊妊娠率差異極顯著結(jié)論相左。
此次胚胎移植產(chǎn)羔在2016年5月，共計產(chǎn)羔87只，受體羊產(chǎn)羔率71.31％，公母比49:51，初生重平均5 kg，羔羊生長發(fā)育良好。結(jié)果表明：單胎品種的雜交羊胚胎移植妊娠率比多胎品種的小尾寒羊和湖羊高,但是差異不顯著。
[1]張金龍，張效生，崔茂盛，等.受體因素對肉羊胚胎移植效果的影響[J].中國草食動物科學(xué)，2013,（3）:22-24.
[2]韓麗娟.受體羊?qū)ε咛ヒ浦残Ч绊懙难芯縖J].中國草食動物科學(xué)，2015，（6）:68-70.
[3]楊昇，馮建忠，張金龍，等.影響羊胚胎移植妊娠率的因素分析[J].中國畜牧雜志，2005,41（7）:41-43.
[4]吳曉東，蘇蕾，和協(xié)超，等.受體品種、體重及移植季節(jié)對杜泊羊胚胎妊娠率和新生羔羊體重的影響[J].動物學(xué)研究，2005,26（6）：627-631.
[5]竇建兵，吐爾地·克里木，姜啟銀，等.薩福克羊?qū)Χ嗬搜蚣翱ɡ瓗鞝栄蚺咛ヒ浦苍囼瀳蟾鎇J].新疆畜牧業(yè),2006，(4):30-31.
[6]劉占奇.牛、羊胚胎移植技術(shù)推廣及影響受體利用率、妊娠率的因素分析[D].蘭州：甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)，2004.
[7]王大廣，呂禮良，王曉陽，等.薩?？巳庋蚺咛ヒ浦残Ч鸞J].黑龍江畜牧獸醫(yī),2006(11):45-46.
[8]劉引區(qū)，李愛朵，趙建華，等.神木縣薩福克羊胚胎移植效果分析[J].中國畜禽種業(yè),2012,8(9):55-56.
[9]呂禮良，王曉陽，付帥，等.胚胎移植技術(shù)在綿羊擴繁中的應(yīng)用[J].農(nóng)業(yè)與技術(shù)，2004,24（5）:109-111.
[10]陳童.薩福克肉羊胚胎移植關(guān)鍵技術(shù)的研究與應(yīng)用[D].石河子：石河子大學(xué),2013.
Effects of Recipient Varieties Against Conception Rate of Embryo Transp lantation in Suffolk Sheep
ZENG Tao,HAN Yu-ru,MA Chun-jiang*
（Animal Husbandry Station of HamiDistrict,Xinjiang Hami 839000，China）
Purpose of the study:to study the effects of different recipient varieties against conception rate of embryo transplantation in Suffolk sheep,Method:Firstly,estrus synchronization,superovulation and artificial insemination on adult Suffolk ewes were conducted,5.5-6 days after estrus,embryos were flushed and classified by surgery,single A-class embryo was transplanted into the cornua uteri in the receptor who iswith same days of estrus by use of laparoscope,the receptor varietiesmainly include Duolang sheep,Han sheep, Hu sheep and hybrid sheep（a kind of hybrid sheep,taking Kazakh sheep as female parent,Han and Doulang sheep as paternal）,30 days later,checked its pregnancy with B ultrasonic.Results:as the receptor,Hu sheep was in lowest conception rate,only 52.0％;while the hybrid sheep was in highest pregnancy rate,reached 68.7％;and Duolang sheep and Han sheep was 65.1％and 66.7％respectively,however,Chi-square test showed that the difference between different varieties of receptors is not significant（P>0.05）.Conclusion:the aforesaid varieties had no significanteffect on the pregnancy rate of embryo transplantation in Suffolk sheep.
embryo transplantation;conception rate;receptor species;pregnancy check
S814.6
：A
：1003－6377（2016）05－0024-04
國外專用肉羊胚胎移植推廣項目（哈地黨農(nóng)（2014）3號）
曾滔(1977-)，男，本科，畜牧師，研究方向：動物營養(yǎng)與繁殖。E-mail：fanyuzhongxin@126.com
馬春江（1972-），男，農(nóng)業(yè)推廣研究員，研究方向：動物營養(yǎng)與繁殖。
2016-04-20，
：2016-05-02
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曾 滔，韓煜茹，馬春江
（新疆哈密地區(qū)畜牧工作站，新疆哈密839000）
受體品種對薩?？搜蚺咛ヒ浦彩芴ヂ实挠绊?/p>
曾 滔，韓煜茹，馬春江*
（新疆哈密地區(qū)畜牧工作站，新疆哈密839000）
研究目的：研究不同受體品種對薩?？搜蚺咛ヒ浦彩芴ヂ实挠绊?。方法：首先對薩福克成年母羊進行同期發(fā)情、激素誘導(dǎo)超數(shù)排卵和人工授精，發(fā)情后5.5～6 d手術(shù)沖胚并對胚胎分級，使用腹腔鏡將單枚A級胚胎移植到相同發(fā)情天數(shù)的受體母羊子宮角，受體母羊品種為多浪羊、小尾寒羊、湖羊和雜交羊（以哈薩克羊為母本，多浪和小尾寒羊為父本的雜種羊），30 d后用B超進行妊娠檢查。結(jié)果：湖羊作為受體母羊受胎率最低，只有52.0％；而雜交羊作為受體羊的受胎率最高，達到68.7％；多浪羊和小尾寒羊的受胎率分別為65.1％和66.7％。但卡方檢驗表明不同受體品種間差異不顯著（P＞0.05）。結(jié)論：以上受體品種對薩?？搜蚺咛ヒ浦彩芴ヂ蕸]有顯著影響。
胚胎移植；受胎率；受體品種；妊娠檢查
10.16863 /j.cnki.1003-6377.2016.05.005
胚胎移植技術(shù)是指將良種母畜的早期胚胎取出，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的一般母畜體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育成為新個體的繁殖技術(shù)。為了改良哈密地區(qū)肉用綿羊品種，提高羊肉品質(zhì)及加速引進良種肉羊的擴繁速度，填補良種肉種羊的缺口，哈密地區(qū)自2013年開始由政府補貼大批量進行肉羊胚胎移植項目，2015年哈密地區(qū)養(yǎng)殖企業(yè)從澳大利亞購買了上千只薩福克純種肉羊，利用胚胎移植技術(shù)將優(yōu)質(zhì)薩?？巳庋蛉后w迅速擴繁，并向全區(qū)推廣。
哈密地區(qū)目前養(yǎng)殖有多個綿羊品種，主要包括本土品種哈薩克羊和多浪羊、引入品種湖羊、小尾寒羊等。本研究擬探討以多浪羊、小尾寒羊、湖羊和雜交羊作為受體，對薩?？搜蚺咛ヒ浦彩芴ヂ实挠绊?，以期為薩?？搜虻暮笃诖笠?guī)模擴繁提供理論依據(jù)。
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1.2主要藥品和試劑
FSH（寧波三生藥業(yè)）、PG（寧波三生藥業(yè)）、靜松林、鹽酸普魯卡因、腎上腺素、PBS緩沖液、Holding液、海綿栓（氟孕酮、新西蘭進口）、酒精、碘酊、新潔爾滅、礦物油、生理鹽水。
1.3主要器械及設(shè)備
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1.4供體羊的超數(shù)排卵和胚胎鑒定
對供體薩?？四秆蜻M行埋栓處理，海綿栓在供體羊陰道內(nèi)放置13 d。在取出海綿栓前2 d開始肌肉注射FSH，總劑量300 U，按每天早晚各1次、劑量遞減的方法連續(xù)注射3 d，共六次。在注射FSH第5針時，將海綿栓取出，同時注射0.1 mg PG，并清洗陰道。海綿栓取出24 h開始試情，根據(jù)發(fā)情情況進行人工授精。供體羊發(fā)情5.5～6 d時，采用子宮角沖胚方法進行手術(shù)沖胚。
子宮角收集的液體放在連續(xù)變倍體式顯微鏡下鏡檢，將胚胎從集卵皿吸至放有Holding液的四孔皿中，在連續(xù)變倍體式顯微鏡下觀察受精卵的形態(tài)、色調(diào)、分裂球的大小、均勻度、細胞的密度與透明帶的間隙以及變性情況，根據(jù)上述標準對受精卵進行鑒定和分級，詳細記錄每只供體羊出胚數(shù)和可用胚胎數(shù)。A級胚胎：胚胎形態(tài)完整，輪廓清晰，呈球形，分裂球大小均勻，結(jié)構(gòu)緊湊，色調(diào)和透明度適中，無附著的細胞和液泡，細胞變性率不超過10％。
1.5受體羊的同期發(fā)情和內(nèi)窺鏡法胚胎移植
對受體母羊肌肉注射0.1mg PG，12～60 h用試情公羊進行試情，以母羊接受爬跨為準，用自噴漆做出標記后挑出，做好受體羊的發(fā)情記錄與當(dāng)天發(fā)情的供體羊一同標識。
受體羊術(shù)前要空腹十二小時，仰臥于手術(shù)保定架上，在后肢內(nèi)側(cè)鼠蹊部做1.5～2 cm切口，用腹腔鏡確認黃體發(fā)育狀況，優(yōu)良的黃體予以移植。在另一側(cè)做切口，用腸鉗引導(dǎo)出黃體側(cè)子宮角，將裝有胚胎的移植管順子宮角方向插入宮腔，推出胚胎，隨即子宮復(fù)位。移植側(cè)切口縫合消毒。
1.6受體羊的妊娠鑒定
使用B超對胚胎移植后30 d的受體羊進行妊娠檢查，采用直腸內(nèi)探查，將受體羊只保定后檢查者站于羊體一側(cè)，探頭涂布耦合劑后，將探頭插入直腸，朝向盆腔入口方向進行掃查。母羊一般取自然站立姿勢，助手在旁扶持，遇到腹部大的經(jīng)產(chǎn)母羊需要幫檢查者托起腹部便于妊娠檢查操作。
1.7數(shù)據(jù)分析
使用卡方檢驗分析不同品種的受胎率。
2 結(jié)果與分析
本次移植受體187只（四個品種），共移植A級胚胎187枚。經(jīng)過B超檢查，多浪羊、小尾寒羊、湖羊、雜交羊的受胎率分別為65.12％、66.67％、52.00％和68.67％，卡方檢驗表明，品種間差異不顯著，見表1。
3 討論
影響胚胎移植的因素有很多，例如胚胎等級、季節(jié)、供受體發(fā)情同步差、受體的營養(yǎng)狀況、受體的黃體情況，移植環(huán)境、移植方法、操作人員的熟練程度等。本次試驗是2015年12月10日在初冬季節(jié)開始，供體和受體膘情優(yōu)良，發(fā)情率達到90％，黃體形狀和等級都很好。
10-11月份是綿羊的繁殖季節(jié)，綿羊的季節(jié)性生殖特性會影響到在不同季節(jié)進行的同期發(fā)情和超數(shù)排卵效果。張金龍等（2013）報道，季節(jié)對受體羊胚胎移植效果的影響較大，秋冬季節(jié)（9-12月份）受胎率較高，夏季（6-8月份）受胎率較低，本實驗與上述結(jié)果相一致。
此次為單胚移植,作為受體羊的4個品種中,湖羊和小尾寒羊為多胎品種,哈薩克雜交羊和多浪羊多數(shù)為單胎。本實驗中單胎或多胎品種受體并不影響胚胎移植的妊娠率，這與吳曉東等人（2005）將杜泊羊胚胎移植給不同品種受體母羊后妊娠率差異不顯著的結(jié)論相一致。這與劉引區(qū)等人（2012）將薩?？搜蚺咛ヒ浦步o小尾寒羊和小尾寒羊雜種羊妊娠率差異極顯著結(jié)論相左。
此次胚胎移植產(chǎn)羔在2016年5月，共計產(chǎn)羔87只，受體羊產(chǎn)羔率71.31％，公母比49:51，初生重平均5 kg，羔羊生長發(fā)育良好。結(jié)果表明：單胎品種的雜交羊胚胎移植妊娠率比多胎品種的小尾寒羊和湖羊高,但是差異不顯著。
[1]張金龍，張效生，崔茂盛，等.受體因素對肉羊胚胎移植效果的影響[J].中國草食動物科學(xué)，2013,（3）:22-24.
[2]韓麗娟.受體羊?qū)ε咛ヒ浦残Ч绊懙难芯縖J].中國草食動物科學(xué)，2015，（6）:68-70.
[3]楊昇，馮建忠，張金龍，等.影響羊胚胎移植妊娠率的因素分析[J].中國畜牧雜志，2005,41（7）:41-43.
[4]吳曉東，蘇蕾，和協(xié)超，等.受體品種、體重及移植季節(jié)對杜泊羊胚胎妊娠率和新生羔羊體重的影響[J].動物學(xué)研究，2005,26（6）：627-631.
[5]竇建兵，吐爾地·克里木，姜啟銀，等.薩福克羊?qū)Χ嗬搜蚣翱ɡ瓗鞝栄蚺咛ヒ浦苍囼瀳蟾鎇J].新疆畜牧業(yè),2006，(4):30-31.
[6]劉占奇.牛、羊胚胎移植技術(shù)推廣及影響受體利用率、妊娠率的因素分析[D].蘭州：甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)，2004.
[7]王大廣，呂禮良，王曉陽，等.薩?？巳庋蚺咛ヒ浦残Ч鸞J].黑龍江畜牧獸醫(yī),2006(11):45-46.
[8]劉引區(qū)，李愛朵，趙建華，等.神木縣薩福克羊胚胎移植效果分析[J].中國畜禽種業(yè),2012,8(9):55-56.
[9]呂禮良，王曉陽，付帥，等.胚胎移植技術(shù)在綿羊擴繁中的應(yīng)用[J].農(nóng)業(yè)與技術(shù)，2004,24（5）:109-111.
[10]陳童.薩福克肉羊胚胎移植關(guān)鍵技術(shù)的研究與應(yīng)用[D].石河子：石河子大學(xué),2013.
Effects of Recipient Varieties Against Conception Rate of Embryo Transp lantation in Suffolk Sheep
ZENG Tao,HAN Yu-ru,MA Chun-jiang*
（Animal Husbandry Station of HamiDistrict,Xinjiang Hami 839000，China）
Purpose of the study:to study the effects of different recipient varieties against conception rate of embryo transplantation in Suffolk sheep,Method:Firstly,estrus synchronization,superovulation and artificial insemination on adult Suffolk ewes were conducted,5.5-6 days after estrus,embryos were flushed and classified by surgery,single A-class embryo was transplanted into the cornua uteri in the receptor who iswith same days of estrus by use of laparoscope,the receptor varietiesmainly include Duolang sheep,Han sheep, Hu sheep and hybrid sheep（a kind of hybrid sheep,taking Kazakh sheep as female parent,Han and Doulang sheep as paternal）,30 days later,checked its pregnancy with B ultrasonic.Results:as the receptor,Hu sheep was in lowest conception rate,only 52.0％;while the hybrid sheep was in highest pregnancy rate,reached 68.7％;and Duolang sheep and Han sheep was 65.1％and 66.7％respectively,however,Chi-square test showed that the difference between different varieties of receptors is not significant（P>0.05）.Conclusion:the aforesaid varieties had no significanteffect on the pregnancy rate of embryo transplantation in Suffolk sheep.
embryo transplantation;conception rate;receptor species;pregnancy check
S814.6
：A
：1003－6377（2016）05－0024-04
國外專用肉羊胚胎移植推廣項目（哈地黨農(nóng)（2014）3號）
曾滔(1977-)，男，本科，畜牧師，研究方向：動物營養(yǎng)與繁殖。E-mail：fanyuzhongxin@126.com
馬春江（1972-），男，農(nóng)業(yè)推廣研究員，研究方向：動物營養(yǎng)與繁殖。
2016-04-20，
：2016-05-02
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