吳晶瀅

（湖南省長沙市廣益實驗中學 410014）

糖化血紅蛋白檢測技術的應用

吳晶瀅

（湖南省長沙市廣益實驗中學 410014）

糖化血紅蛋白是紅細胞中的血紅蛋白與葡萄糖持續(xù)地不可逆地進行非酶促蛋白糖基化反應的產(chǎn)物，它的形成與多種因素有關。在人們飲食結(jié)構(gòu)、飲食習慣等因素的變化下，我國糖尿病發(fā)生率顯著升高，糖尿病可引起一系列的并發(fā)癥，嚴重影響患者的身體健康，加強糖尿病的早期診斷與防范尤為關鍵。本文主要就糖化血紅蛋白檢測技術的應用展開綜述。

糖化血紅蛋白檢測技術；應用；分析

糖化血紅蛋白（glycated hemoglobin A1c，Hb A1c）是葡萄糖與人體血液中紅細胞血紅蛋進行非酶促蛋白糖基化反應的產(chǎn)物，這一物質(zhì)的形成由血糖作用時間和濃度決定，若人體血糖濃度偏高，那么糖化血紅蛋白指數(shù)也會隨之增高。因此，糖化血紅蛋白也是檢測人體血糖水平變化的金標準。

1 糖化血紅蛋白在糖代謝異常診斷中的意義

目前，關于Hb A1c在糖代謝異常的篩查與診斷中都有著重要的意義，與FBG、2hBG相比，Hb A1c的診斷更加具有優(yōu)越性。檢測FBG需要空腹8h，患者只能上午就診，而Hb A1c在任何時間都可以檢測，也不會受到運動、生活方式的影響，且臨床研究顯示，F(xiàn)BG、2hBG診斷符合率只有不到80%，準確性不高，Hb A1c指標的應用顯著提升了診斷的準確性。如果糖尿病患者FBG控制已達標，每年至少應做2次Hb A1c檢測，對于FBG控制不穩(wěn)或需要改變治療方案的患者及正在進行胰島素治療者，應每3個月進行1次Hb A1c的檢測。Hb A1c檢測在技術上的優(yōu)勢使其還適合發(fā)現(xiàn)糖尿病的高危人群。

2 糖化血紅蛋白檢測技術的常用方式

2.1 離子交換層析法

離子交換層析法是利用了血紅蛋白β鏈N端纈氨酸電荷的差異，來利用陽離子交換層析柱吸附平衡樹脂，其中糖化血紅蛋白正電荷較少，再使用不同pH值的緩沖液即可成功得到層析譜，最后檢測數(shù)值用百分比來顯示。目前醫(yī)院的常用儀器為日本TOSOH公司的HLC-723G7，這是現(xiàn)階段檢測精度最高的儀器。

2.2 手工微柱法

手工微柱法不僅可以檢測出糖化血紅蛋白的樹脂，還可以檢測出血紅蛋白C以及血紅蛋白S的存在情況，檢測結(jié)果可靠性非常高。手工微柱法還有一個突出的優(yōu)勢是成本低廉，適合在基層醫(yī)院中推廣，但是由于微柱質(zhì)量與層析時間難以控制，重復利用性不高。常用的為英國DREW SCIENTIFIC公司生產(chǎn)的DS5糖化血紅蛋白儀。

2.3 親和層析法

親和層析法最早在1981年被研發(fā)成功，該種方式可以成功檢測固定硼酸陰離子、糖化血紅蛋白1，2順式二醇基團，使用山梨醇分離復合物即可成功洗脫糖化血紅蛋白，其檢測結(jié)果與HPLC的結(jié)果是一致的。親和層析法不會受到Schiffbase、HbF等因素的影響，但是不同類型的儀器，結(jié)果存在一定的差異。

2.4 酶檢測法

酶檢測法是近年來誕生的新型檢測技術，其檢測原理是基于蛋白酶切斷糖化血紅蛋白β鏈N末端糖化二肽，其產(chǎn)物過氧化氫會與顯色劑發(fā)生反應，利用吸光度測定法即可得出Hb A1c的濃度。酶檢測法準確性非常高，無論是與免疫法還是與HPLC，都表現(xiàn)出良好的相容性能，已經(jīng)成為一種重點檢測方式。

3 糖化血紅蛋白檢測技術的應用

Hb A1c最為常見的應用就是在糖尿病診斷中的應用，可以及時發(fā)現(xiàn)早期糖尿病。多數(shù)早期糖尿病患者雖然FBG、2hBG檢測結(jié)果正常，但是出現(xiàn)了糖尿病的臨床癥狀，如果無法確診，即可應用Hb A1c，如果超過正常值，則為可疑，應該進行長期的觀察與追蹤。Hb A1c還可以監(jiān)測糖尿病患者并發(fā)癥的發(fā)生情況，臨床研究顯示，Hb A1c數(shù)值每增加一個百分比，那并發(fā)癥的發(fā)生率會增加12個百分比，常見的并發(fā)癥有糖尿病足，糖尿病腎病、心臟病等，如果可以降低Hb A1c水平，那么將有效降低糖尿病并發(fā)癥的發(fā)生率。研究表明Hb A1c＜6.5%的患者中幾乎不存在視網(wǎng)膜病變，Hb A1c≥6.5%視網(wǎng)膜病變的發(fā)生率顯著增高。隨著Hb A1c的升高，視網(wǎng)膜病變、腎臟病變、神經(jīng)病變和微量白蛋白尿的發(fā)生幾率均增加。

近年來的研究顯示，Hb A1c與心腦動脈病變也有密切的關聯(lián)，在非糖尿病冠心病患者群體中，Hb A1c數(shù)值集中在6～7%，當高于這一數(shù)值時，那么冠心病發(fā)病率將大大上升，Hb A1c與冠脈病變積分為正比關系，是冠心病發(fā)生的獨立危險因素。關于Hb A1c與心腦動脈病變之間的關系，臨床中尚未明確，可能與紅細胞黏度上升、高血糖損傷內(nèi)皮、氧合血紅蛋白離解速度緩慢等因素有關。因此，Hb A1c是臨床中鑒別糖尿病冠心病以及非糖尿病冠心病的重要標準。

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