盧宗桂

(寧德市產(chǎn)品質(zhì)量檢驗所，福建 寧德 352100)

福建省是我國產(chǎn)茶大省，制茶、飲茶、販茶歷史悠久，其種質(zhì)資源豐富，茶葉種類繁多，茶園面積、茶葉總產(chǎn)量均居我國前茅，所以茶葉安全問題備受關(guān)注。六六六、滴滴涕在十幾年前就是禁用農(nóng)藥，其性質(zhì)穩(wěn)定，非常難以降解，容易存在于土壤中；三氯殺螨醇為茶樹生長過程中禁用農(nóng)藥。目前茶葉中有三氯殺螨醇超標(biāo)，六六六、滴滴涕檢出的情況，一方面是六六六、滴滴涕土壤中的存在，另一方面不排除在茶葉的生長過程中有施用三氯螨醇的情況。因此建立快速準確的方法監(jiān)測茶葉中三個參數(shù)，九個農(nóng)殘是本文研究的方向。

1 材料與方法

1.1 主要儀器和藥品試劑

1.1.1 儀器

Agilent 7890B氣相色譜儀，配ECD，DB-5(30 m*0.32 mm*0.25 μm)色譜柱；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器；循環(huán)水真空泵；超聲波清洗器；組織搗碎機；旋窩振蕩器。

1.1.2 藥品試劑

正己烷、丙酮、石油醚(30-60)均為色譜純、氯化鈉(分析純)、濃硫酸(優(yōu)級純)；9種農(nóng)藥標(biāo)準溶液(100 μg/mL，均購自農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護科研監(jiān)測所：α-HCH、β-HCH、γ-HCH、δ-HCH、p，p’-滴滴伊、p，p’-滴滴滴、o，p’-滴滴涕、p，p’-滴滴涕、三氯殺螨醇)，按需要用正己烷配成不同濃度的混標(biāo)儲存于冰箱中備用。

1.2 試樣前處理和色譜分析

1.2.1 樣品的提取與凈化

準確稱取已磨碎的茶葉2.0g(精確到0.01g)于50ml離心管中，加入6ml水，浸泡30min，加入20.0ml正己烷+丙酮(2+1，體積比)，超生15min，加入一定量氯化鈉使其飽和，劇烈振搖，離心5min，吸取上清液于100ml茄形瓶中，殘渣再用20ml正己烷+丙酮(2+1，體積比)重復(fù)提取一次，合并上清液于35℃水浴上減壓濃縮至近干，加入5ml正己烷轉(zhuǎn)移至10ml離心管中，加0.5ml濃硫酸凈化，振蕩旋窩0.5min，于3000r/min離心5min。取上清液進行GC分析。

1.2.2 色譜條件

色譜柱：DB-5(30 m*0.32mm*0.25μm)；進樣口溫度：250℃；檢測器溫度：300℃。

柱溫升溫程序：80℃(2min)-20℃/min-200℃(3min)-3℃/min-250℃(4min)；載氣：高純N2(純度≥99.999%)；進樣方式：不分流進樣(0.75min后開啟分流閥)；載氣流速：1.0ml/min；尾吹氣：60ml/min；進樣量：1.0μl。在此條件下的色譜圖見圖1。

1-α-HCH、2-β-HCH、3-γ-HCH、4-δ-HCH、5-三氯殺螨醇、6-p，p’-滴滴伊、7-p，p’-滴滴滴、8-o，p’-滴滴涕、9-p，p’-滴滴涕

圖1 六六六、滴滴涕、三氯殺螨醇標(biāo)樣色譜圖

1.2.3 色譜分析

采用自動進樣器進樣，在相同的氣相色譜條件下，分別將9種農(nóng)藥的混合標(biāo)液和凈化后的樣品等體積穿插進樣，以保留時間定性，以樣品峰面積與標(biāo)準峰面積比較定量。

2 結(jié)果與分析

2.1 茶葉是否加水與提取溶劑的選擇

對于茶葉是否加水做兩組實驗。第一組實驗：茶葉不加水，添加一定濃度混標(biāo)，分別用正己烷+丙酮(2+1，體積比)、石油醚按上述提取方法處理上機分析，計算回收率；第二組實驗：茶葉加水浸泡30min，添加一定濃度混標(biāo)，處理方法同組一，計算回收率。

通過比較組一、組二回收率結(jié)果，發(fā)現(xiàn)組二的結(jié)果優(yōu)于組一，特別是o，p’-滴滴涕、p，p’-滴滴涕回收率有明顯的提高，所以本實驗在提取過程中選擇先用水浸泡30min。

通過比較同組之間回收率結(jié)果，發(fā)現(xiàn)使用正己烷+丙酮(2+1，體積比)效果更好，雖然使用石油醚提取回收率能夠滿足實驗要求，但是使用正己烷+丙酮(2+1，體積比)提取回收率更優(yōu)，具有更高的精確性，所以本實驗選擇正己烷+丙酮(2+1，體積比)作為提取溶劑。

2.2 凈化條件的選擇

茶葉中組分復(fù)雜，色素干擾嚴重，如何凈化茶葉中的雜質(zhì)，保留有效組分是茶葉前處理中的關(guān)鍵問題。濃硫酸能夠有效去除茶葉中的雜質(zhì)、色素，凈化后液體澄清，并且六六六、滴滴涕、三氯殺螨醇在濃硫酸環(huán)境中不會變質(zhì)、變性，測試回收率結(jié)果均能滿足實驗要求。所以本實驗采用濃硫酸凈化茶葉中的雜質(zhì)。

2.3 線性范圍及檢出限

將混合標(biāo)準溶液配制成六六六、滴滴涕(0.01、0.02、0.05、0.1、0.2μg/ml)、三氯殺螨醇(0.02、0.04、0.1、0.2、0.4μg/ml)的標(biāo)準工作液，在1.2.3色譜條件下進行測定，以色譜峰面積為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)作標(biāo)準曲線，得9種農(nóng)藥的線性方程和相關(guān)系數(shù)，以3倍噪音計算方法檢出限，10倍噪音計算方法定量限，結(jié)果見表1。

表1 9種農(nóng)藥的保留時間、線性、檢出限和定量限

2.4 方法回收率和精密度

取茶葉空白樣品，分別加入三個濃度的農(nóng)藥標(biāo)準混合標(biāo)液(有機氯：0.025、1.25、5.0mg/kg；菊酯類：0.05、2.5、10.0mg/kg)，按本方法的操作步驟重復(fù)測定3次，計算9種農(nóng)藥的加標(biāo)回收率和精密度，結(jié)果見表2。由表2可見，本方法能滿足六六六、滴滴涕及三氯殺螨醇的檢測要求。

表2 9種農(nóng)藥在茶葉中的添加濃度、回收率試驗結(jié)果和精密度

3 結(jié)論

有效去除雜質(zhì)，保留檢測組分是農(nóng)藥殘留前處理的關(guān)鍵，本方法對茶葉檢測是否加水、不同溶劑的提取進行了摸索，利用濃硫酸去除茶葉中的雜質(zhì)、色素，達到理想的凈化效果?；厥章屎椭噩F(xiàn)性均能滿足定量分析的要求，可很好的用于茶葉中六六六、滴滴涕和三氯殺螨醇的檢測要求。

[1] 馮潔，湯樺，陳大舟等.茶葉中9種有機氯和擬除蟲菊酯農(nóng)藥殘留的前處理方法研究[J].分析測試學(xué)報，2010，29(10)：1041-1047.

[2] 劉小文，吳國星，高熹等.幾種新技術(shù)在茶葉農(nóng)藥分析樣品前處理中的應(yīng)用[J].云南大學(xué)學(xué)報：自然科學(xué)版，2008，30(SI)：210-214.

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[4] 傅水玉，陳曉生，王明等.氣相色譜法測定茶葉有機氯農(nóng)藥殘留的前處理方法研究[J].杭州師范學(xué)院學(xué)報：自然科學(xué)版，2006，5(2)：118-122.

[5] 食品中有機氯農(nóng)藥多組分殘留量的測定(GB/T 5009.19-2008)[S].

[6] 茶葉、水果、食用植物油中三氯殺螨醇殘留量的測定(GB/T 5009.176-2003)[S].