劉 濤， 唐開(kāi)城， 謝 敏， 周傳勇， 寇 強(qiáng)， 劉 翠， 徐玉玲

(1.成都大學(xué) 藥學(xué)與生物工程學(xué)院， 四川 成都 610106; 2.成都大學(xué) 張瀾學(xué)院， 四川 成都 610106)

川明參產(chǎn)地加工方法初步研究

劉 濤1， 唐開(kāi)城1， 謝 敏1， 周傳勇2， 寇 強(qiáng)2， 劉 翠1， 徐玉玲1

(1.成都大學(xué) 藥學(xué)與生物工程學(xué)院， 四川 成都 610106; 2.成都大學(xué) 張瀾學(xué)院， 四川 成都 610106)

以歐前胡素含量為指標(biāo)，對(duì)不同產(chǎn)地加工方式的樣品進(jìn)行測(cè)定和比較.結(jié)果表明：川明參皮中歐前胡素含量約為無(wú)皮川明參中含量的8.6倍；梯度烘干法所得藥材含量最高，恒溫烘干法與常溫干燥法兩者差異不大且皆低于梯度烘干法；硫磺熏制會(huì)導(dǎo)致藥材中歐前胡素含量降低，而煮制與否對(duì)藥材質(zhì)量影響不大.為了更好地保留川明參中的有效成分，其最佳產(chǎn)地加工方式為，洗凈藥材，除去根須，采用梯度烘干法進(jìn)行干燥，并采用適當(dāng)?shù)陌b材料包裝.

川明參；歐前胡素；產(chǎn)地加工方法

0 引 言

川明參始載于《飲片從新》中明黨參項(xiàng)下，為傘形科川明參屬植物川明參的干燥根,為川產(chǎn)道地藥材,具有滋陰補(bǔ)肺,健脾等功效,主治肺熱咳嗽、熱病傷陰等癥[1].川明參主產(chǎn)區(qū)分布在四川金堂、巴中、蒼溪、中江、閬中等地，作為可藥食兩用的藥材，川明參的市場(chǎng)需求量較大[2].目前，川明參產(chǎn)地采收加工方法為:移栽后第二年的清明前后采挖，采收后除去泥沙及根須，將根部表皮刮去或用粗糠殼搓至色白，并在清水中洗凈，再置沸水中煮至無(wú)白心，取出，浸漂，曬干或烘干[3].此外，在川明參的產(chǎn)地加工時(shí)，一般會(huì)用硫磺熏制川明參藥材.在本課題開(kāi)展過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，現(xiàn)階段產(chǎn)地加工方法對(duì)藥材有效成分含量影響極大，而文獻(xiàn)中關(guān)于川明參產(chǎn)地加工方式考察報(bào)道較少，為改善其加工方法,本研究對(duì)川明參不同產(chǎn)地加工方法的樣品進(jìn)行了初步研究.

1 儀器與試藥

1.1 儀 器

實(shí)驗(yàn)所用儀器包括：P230Ⅱ型高效液相色譜儀、FA2004型分析電子天平(上海良平儀器儀表有限公司)，KQ-100E型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)，DZF-6050A型真空恒溫干燥箱(北京中興偉業(yè)儀器有限公司).

1.2 試 藥

實(shí)驗(yàn)所用試藥包括：歐前胡素(批號(hào)，140511)，由四川維克奇生物科技有限公司提供；川明參采收自四川蒼溪龍山鎮(zhèn)；純凈水.

2 方 法

2.1 藥材不同部位含量研究

為了藥材美觀，產(chǎn)地加工川明參多去皮，但去皮過(guò)程較麻煩.研究發(fā)現(xiàn)，皮類中的次生代謝物也較多，去皮可能會(huì)影響其臨床療效.對(duì)此，本研究對(duì)川明叁去皮的必要性進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)：取常溫干燥川明參適量，用小刀將其皮刮下，分開(kāi)處理，皮為1#，無(wú)皮川明參為2#.

2.1.1 色譜條件[4].

實(shí)驗(yàn)的色譜條件為：色譜柱為C18(4.6 mm×250 mm，5 μm)，流動(dòng)相為甲醇—水(65∶35)，流速1.0 mL·min-1，檢測(cè)波長(zhǎng)246 nm，柱溫為室溫，進(jìn)樣量為10 μL.

2.1.2 對(duì)照品溶液制備.

取歐前胡素對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇溶解制成每1 mL含42.80 μg的溶液，制得對(duì)照品溶液.

2.1.3 供試品溶液制備.

取過(guò)3號(hào)篩的川明參藥材約2 g，置于具塞錐形瓶中，精密加入甲醇30 mL，超聲(功率250 W，頻率35 kHz)處理30 min，過(guò)濾，取續(xù)濾液10 mL，置于蒸發(fā)皿中，水浴濃縮，加甲醇溶解并定容至5 mL，制得供試品溶液.

2.1.4 線性關(guān)系考察.

取歐前胡素對(duì)照品溶液，分別進(jìn)樣1、2、4、6、8、16、20 μL，按上述色譜條件，測(cè)定歐前胡素峰面積積分值，得回歸方程為，

Y=4895.9X(R2=0.999).

2.1.5 重復(fù)性考察.

取同一批川明參藥材樣品共6份,按“2.1.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液,分別進(jìn)樣10 μL,測(cè)定其平均含量為歐前胡素0.0317 mg/g(RSD=2.98%).結(jié)明表明，本法重復(fù)性良好.

2.1.6 加樣回收率考察.

取同一批川明參藥材樣品共6份,約1 g,分別加入5 mL 45.84 μg/mL歐前胡素對(duì)照品溶液、25 mL甲醇，按“2.1.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液,在“2.1.2”項(xiàng)下色譜條件下測(cè)定.結(jié)果表明，歐前胡素的平均回收率為101.51%(RSD=3.88%).

2.1.7 樣品的含量測(cè)定.

在選定色譜條件下進(jìn)樣測(cè)定，采用外標(biāo)法計(jì)算川明參藥材中歐前胡素含量，結(jié)果見(jiàn)表1.

表1 川明參皮與無(wú)皮川明參歐前胡素含量

由表1可知，含皮川明參中歐前胡素含量明顯高于無(wú)皮川明參中含量，且約為無(wú)皮川明參歐前胡素含量的8.6倍，考慮到川明參藥效成分含量以及能源消耗，建議川明參產(chǎn)地加工時(shí)不去皮.

2.2 不同干燥方法考察

通過(guò)對(duì)川明參產(chǎn)地的干燥方法考察，發(fā)現(xiàn)干燥途徑有多種，常見(jiàn)的有曬干、晾干、蒸制處理及以上方法混合處理等方法.為了選擇最優(yōu)的加工方法，本研究對(duì)不同干燥方式進(jìn)行了探討.

2.2.1 川明參干燥方法.

實(shí)驗(yàn)采用的干燥方法為：

1)將川明參平鋪于鐵盤上，置于80 ℃烘箱中至干，約20 h，編為1#.

2)將川明參平鋪于鐵盤上，10 h內(nèi)溫度控制在30 ℃，后保持55 ℃ 10 h，中間不翻動(dòng)，最后保持80 ℃至烘干，編為2#.

3)將川明參平鋪于鐵盤上，放置在陰涼處自然風(fēng)干，約20 d，編為3#.

2.2.2 供試品制備.

按照“2.1.3”項(xiàng)下方法取1#、2#、3#適量，制備供試品溶液.

2.2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果.

按照“2.1.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，采用外標(biāo)法計(jì)算不同干燥方法所得川明參藥材中歐前胡素含量，結(jié)果見(jiàn)表2.

表2 不同干燥方法所得川明參歐前胡素含量

由表2可知，采用梯度烘干法所得川明參歐前胡素含量最高，而采用恒溫烘干法與常溫干燥法兩者差異不大且皆低于梯度烘干法.

2.3 硫磺熏制考察

通過(guò)對(duì)川明參產(chǎn)地的加工方式考察，發(fā)現(xiàn)在產(chǎn)地一般會(huì)用硫磺對(duì)川明參進(jìn)行熏制[5]，其原因是，硫磺熏制可使川明參藥材變白，同時(shí)也能防蟲(chóng)防蛀，延長(zhǎng)保存時(shí)間.但在本課題的開(kāi)展過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，硫磺熏制可能會(huì)使藥材質(zhì)量下降，所以本研究對(duì)硫磺熏制是否影響藥材質(zhì)量進(jìn)行了探討.

2.3.1 供試品制備.

參考川明參產(chǎn)地加工方式，取不同干燥方式所得1#、2#、3#樣品適量，用硫磺熏制2～3 h，編號(hào)分別為4#、5#、6#，按照“2.1.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液.

2.3.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果.

照“2.1.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，采用外標(biāo)法計(jì)算川明參藥材中歐前胡素含量，結(jié)果見(jiàn)表3.

表3 不同干燥方式硫磺熏制所得川明參歐前胡素含量

由表3可知，采用硫磺熏制方法會(huì)導(dǎo)致川明叁中歐前胡素含量降低，直接影響了川明參藥材的質(zhì)量.

2.4 煮制合理性考察

根據(jù)產(chǎn)地調(diào)研及文獻(xiàn)研究，川明參的產(chǎn)地加工方法多采用水煮后干燥，其目的是便于藥材干燥.本研究對(duì)藥材于水煮過(guò)程中藥材成分是否損失進(jìn)行了分析.

2.4.1 供試品制備.

參考產(chǎn)地加工方式，取外觀相似同一批川明參適量，分成兩份，將其中一份置于沸水中煮至透心，約2～3 min，編號(hào)為1#，另一份未煮的川明參編號(hào)為2#.采用梯度干燥法將其干燥，并按照“2.1.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液.

2.4.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果.

按照“2.1.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，采用外標(biāo)法計(jì)算川明參藥材中歐前胡素含量，結(jié)果見(jiàn)表4.

表4 煮制與否所得川明參歐前胡素含量

由表4可知，煮制方式對(duì)川明參藥材中歐前胡素含量影響較小.為了便于加工干燥，對(duì)川明參進(jìn)行煮制加工還是有一定的必要.

3 結(jié)果與討論

據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，川明參根及葉中分離得到的化學(xué)成分主要有香豆素類、黃酮類、甾醇類、苷類、氨基酸及糖類等[4].另外，有研究表明,川明參藥效活性部位為石油醚提取物,其中主要含各種香豆素類成分[5].因此，本研究選擇香豆素類成分的7-甲基香豆素與歐前胡素為對(duì)照品，但在實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，通過(guò)薄層色譜法以及高效液相色譜法都未檢測(cè)出川明參中含有7-甲基香豆素，究其原因，可能是含量過(guò)低所致，將其作為指標(biāo)不合適.另?yè)?jù)文獻(xiàn)報(bào)道，歐前胡素具有抗菌、平喘、抗過(guò)敏以及抗腫瘤活性等作用，具有很大的研究?jī)r(jià)值，故本研究最終選擇以川明參中的歐前胡素含量作為評(píng)價(jià)指標(biāo).

在課題開(kāi)展的過(guò)程中，對(duì)在成都荷花池及主流藥店購(gòu)買的川明參商品藥材進(jìn)行了測(cè)定，其歐前胡素含量極低或者檢測(cè)不出，

而從產(chǎn)地直接購(gòu)買的新

鮮川明參藥材則歐前胡素含量較高，判斷其產(chǎn)地加工方法可能對(duì)其有所影響，所以對(duì)其產(chǎn)地不同加工方式進(jìn)行了探討.

通過(guò)對(duì)產(chǎn)地加工方式的調(diào)查發(fā)現(xiàn)，川明參去皮的目的為使川明參變白，光澤鮮亮.但通過(guò)實(shí)驗(yàn)所考察最佳加工方式加工所得藥材外觀并無(wú)缺陷，且符合人們對(duì)天然藥物應(yīng)具有天然屬性的市場(chǎng)需求，參照太子參、黨參等根莖類藥材的產(chǎn)地加工方式，建議川明參產(chǎn)地加工時(shí)不用去皮.

同時(shí)，本研究對(duì)產(chǎn)地加工中用硫磺熏制方式進(jìn)行了考察，其主要目的為使川明參藥材變白及防蟲(chóng)防蛀，延長(zhǎng)保存時(shí)間.但目前并無(wú)文獻(xiàn)表明川明參不用硫磺熏制容易生蟲(chóng)，該加工方法有導(dǎo)致藥材中歐前胡素等次生代謝產(chǎn)物含量降低并且硫磺殘留超標(biāo)的缺陷，且藥材美白與藥效并無(wú)直接關(guān)系.因此，建議川明參產(chǎn)地加工時(shí)不使用硫磺熏制的方法.

通過(guò)對(duì)川明參含皮去皮的歐前胡素含量、不同烘干方式加工、硫磺熏制及煮制合理性的考察和對(duì)比，本研究建議：川明參產(chǎn)地加工方法為洗凈藥材，除去根須，采用梯度烘干法進(jìn)行干燥，并利用適當(dāng)?shù)陌b材料包裝.

[1]雷曉莉,張梅.不同加工方法對(duì)川明參多糖及歐前胡素含量的影響[J].中藥與臨床,2012，3(2):34-36.

[2]李宏,趙波,劉靜,等.RP-HPLC測(cè)定川明參藥材中香豆素含量[J].成都醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2010，5(2):122-124.

[3]宋芳芳,雷曉莉,冉艷，等.川明參中二氧化硫的殘留量與其香豆素含量的相關(guān)性分析[J].華西藥學(xué)雜志,2010，7(1):174-176.

[4]劉靜,李宏,郭平，等.川明參質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)初步研究[J].中成藥,2010,32(2):329-331.

[5]張梅,蘇筱琳,雨田，等.川明參藥理作用初步研究[J].中藥藥理與臨床,2007,23(2):49-50.

Preliminary Study of Primary Processing Methods of Chuanminshen Violanceum Sheh Et Shan

LIUTao1,TANGKaicheng1,XIEMin1,ZHOUChuanyong2,KOUQiang2,LIUCui1,XUYulin1

(1.School of Pharmacy and Bioengineering, Chengdu University, Chengdu 610106, China;2.School of Zhanglan, Chengdu University, Chengdu 610106, China)

The samples of different primary processing methods are tested and compared by taking the content of imperatorin as indicators.The results show that the content of imperatorin in bark of Chuanminshen violanceum Sheh et Shan is 8.6 times of that in Chuanminshen violanceum Sheh et Shan without bark.The content of medicinal material reaches the highest by gradient drying.Constant temperature drying and normal temperature drying make little difference,and therefore,compared with gradient drying,the content of medicinal material obtained in the ways mentioned above is lower.The content of imperatorin will be lowered by sulfur smoking, while boiling and not boiling have little effect on the quality of Chuanminshen violanceum Sheh et Shan.In order to preserve the effective components better,the best primary processing method of Chuanminshen violanceum Sheh et Shan is that washing crude drug first,then removing fibrous root,drying by temperature gradient and finally packaging with the most appropriate packaging material.

Chuanminshen violanceum Sheh et Shan;imperatorin;primary processing methods

1004-5422(2016)04-0331-04

2016-01-14.

四川省“千人計(jì)劃”(2013332)、 四川省大學(xué)生創(chuàng)新試驗(yàn)課題(201611079039)資助項(xiàng)目.

劉 濤(1976 — )， 男， 博士， 高級(jí)工程師， 從事中成藥新藥開(kāi)發(fā)與再評(píng)價(jià)研究.

TQ461；R283

A