杜悅 張衛(wèi)紅 付奇

眾所周知，在軟包裝的生產(chǎn)過程中，塑料添加劑的作用舉足輕重，添加劑不僅能改善軟包裝的特性和品質(zhì)，還能保障其生產(chǎn)順利進(jìn)行。壬基酚聚氧乙烯醚是一種常見的塑料添加劑，是壬基酚和環(huán)氧乙烷的縮合反應(yīng)產(chǎn)物，具有很好的分散、滲透、乳化、抗酸堿、抗氧化還原等性能。但是，壬基酚聚氧乙烯醚在自然環(huán)境中容易被分解為壬基酚，這是一種可以起到雌激素效能的內(nèi)分泌干擾素，對(duì)人體的免疫系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)都有一定的毒性，并且會(huì)促進(jìn)癌細(xì)胞生長。近年來，食品軟包裝中檢出壬基酚的報(bào)道屢見不鮮，所以終端商家對(duì)軟包裝中壬基酚等物質(zhì)的檢測(cè)要求也越來越嚴(yán)格。

目前，普遍采用高效液相色譜法（HPLC）對(duì)軟包裝中壬基酚等物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)，該方法利用液體濃度與對(duì)特定光的吸收度之間的關(guān)系對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定量檢測(cè)，利用色譜柱和流動(dòng)相的調(diào)節(jié)純化各種物質(zhì)，定性更準(zhǔn)確，靈敏度更高，且成本更低。本文研究了使用高效液相色譜法檢測(cè)食品軟包裝中壬基酚、辛基酚、壬基酚聚氧乙烯醚、對(duì)苯二酚單乙醚4種物質(zhì)的方法，對(duì)二極管陣列檢測(cè)器（DAD）和熒光檢測(cè)器（FLD）在其中的應(yīng)用進(jìn)行了比較。

檢測(cè)條件與檢測(cè)方法

1.材料與試劑

（1）試劑：甲醇，色譜純（天津江天化工技術(shù)有限公司）。

（ 2 ）標(biāo)準(zhǔn)溶液：壬基酚，標(biāo)準(zhǔn)品以2500μg/mL的濃度溶于乙腈/甲醇（1：1）（ACCUstandard，美國）；辛基酚，標(biāo)準(zhǔn)品以2500μg/mL的濃度溶于乙腈/甲醇（9：1）（ACCUstandard，美國）；壬基酚聚氧乙烯醚，標(biāo)準(zhǔn)品0.25g，（ACCUstandard，美國）；對(duì)苯二酚單乙醚，標(biāo)準(zhǔn)品以1000μg/ mL的濃度溶于甲醇（ACCUstandard，美國）。

檢測(cè)樣品：含壬基酚、辛基酚、壬基酚聚氧乙烯醚共0.4mg/kg以及對(duì)苯二酚單乙醚0.32mg/kg的醇溶性酚醛樹酯薄膜。

2.儀器與設(shè)備

電熱鼓風(fēng)干燥箱，型號(hào)為GZX-9246MBE，生產(chǎn)廠家為上海博迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠；超聲波提取儀，型號(hào)為AS720，生產(chǎn)廠家為天津奧特賽恩斯儀器有限公司；高效液相色譜儀（DAD及FLD檢測(cè)器），型號(hào)為1260，生產(chǎn)廠家為美國安捷倫科技發(fā)展有限公司。

3.檢測(cè)方法

（1）標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

使用甲醇將4種物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)溶液逐級(jí)稀釋為壬基酚50mg/L、辛基酚50mg/L、壬基酚聚氧乙烯醚50mg/L和對(duì)苯二酚單乙醚20mg/L的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，將標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液加入甲醇中，分別配制成含壬基酚、辛基酚、壬基酚聚氧乙烯醚共10mg/L以及對(duì)苯二酚單乙醚8mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)使用液。再取相應(yīng)量的混合標(biāo)準(zhǔn)使用液至甲醇中配制成5種工作曲線標(biāo)準(zhǔn)溶液，即含壬基酚、辛基酚、壬基酚聚氧乙烯醚共0.20mg/L、0.40mg/L、0.60mg/L、0.80mg/L、1.0mg/L以及對(duì)苯二酚單乙醚為0.16mg/L、0.32mg/L、0.48mg/L、0.64mg/L、0.80mg/L。

（2）樣品處理

將含壬基酚、辛基酚、壬基酚聚氧乙烯醚、對(duì)苯二酚單乙醚的醇溶性酚醛樹酯薄膜剪碎，取1.0g置于具塞錐形瓶，加10mL甲醇，在60℃下超聲提取30min，得到的溶液即為待測(cè)液。

（3）液相色譜條件

經(jīng)前期調(diào)研和試驗(yàn)，確定液相色譜條件為，色譜柱：C18柱； 流動(dòng)相：甲醇+水=85+15；流速：0.85mL/min；進(jìn)樣量：10μL；柱溫箱溫度：40℃；DAD檢測(cè)器檢測(cè)波長：220nm；FLD檢測(cè)器激發(fā)波長：232nm，發(fā)射波長：312nm 。

（4）檢測(cè)方法

采用HPLC-DAD檢測(cè)法和HPLCFLD檢測(cè)法分別對(duì)工作曲線標(biāo)準(zhǔn)液和待測(cè)液進(jìn)行檢測(cè)。

結(jié)果與分析

1.HPLC-DAD檢測(cè)壬基酚等4種物質(zhì)

采用HPLC-DAD檢測(cè)壬基酚等4種物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖1所示，保留時(shí)間及標(biāo)準(zhǔn)曲線如表1所示，對(duì)待測(cè)液進(jìn)行十組重復(fù)檢測(cè)獲得的檢測(cè)濃度值如表2所示，通過重復(fù)性試驗(yàn)獲得方法的重復(fù)性、被測(cè)物回收率和檢出限等相關(guān)統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)如表3所示。

從結(jié)果可以看出，HPLC-DAD檢測(cè)法對(duì)壬基酚等4種物質(zhì)的檢出限為0.09～0.23mg/kg，此檢出限低于SN/ T1850.1-2006《紡織品中烷基苯酚類及烷基苯酚聚氧乙烯醚類的測(cè)定 第1部分 高效液相色譜法》規(guī)定的0.5mg/ kg的檢出限。查詢臨界極差系數(shù)表，當(dāng)樣本數(shù)n=10時(shí)，f（10）=4.5，故4種物質(zhì)的可接受極差CrR0.95=f（10）σr依次為對(duì)苯二酚單乙醚為0.140mg/ kg、辛基酚為0.212mg/kg、壬基酚為0.342mg/kg、壬基酚聚氧乙烯醚為0.198mg/kg?？梢娫摲椒ㄏ?種物質(zhì)檢測(cè)數(shù)值的極差均小于臨界極差，該方法的重復(fù)性可以接受。但使用該方法進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，被測(cè)物的回收率最小為73.1%，最大為131.7%，跨距稍大，這說明該方法的重復(fù)性還待提高。

2.HPLC-FLD檢測(cè)壬基酚等4種物質(zhì)

采用HPLC-FLD檢測(cè)壬基酚等4種物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖2所示，保留時(shí)間及標(biāo)準(zhǔn)曲線如表4所示，對(duì)待測(cè)液進(jìn)行十組重復(fù)檢測(cè)后獲得的濃度值如表5所示，通過重復(fù)性試驗(yàn)獲得方法的重復(fù)性、被測(cè)物回收率和檢出限等相關(guān)統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)如表6所示。

從數(shù)據(jù)可以看出，HPLC-FLD檢測(cè)法對(duì)壬基酚等4種物質(zhì)的檢出限為0.02mg/kg，是HPLC-DAD檢測(cè)法的1/10。查詢臨界極差系數(shù)表，當(dāng)樣本數(shù)n=10時(shí)，f（10）=4.5，故4種物質(zhì)的臨界極差CrR0.95=f（10）σr依次為對(duì)苯二酚單乙醚為0.027mg/kg、辛基酚為0.027mg/kg、壬基酚為0.036mg/kg、壬基酚聚氧乙烯醚為0.027mg/kg?？梢姡摲椒ㄏ?種物質(zhì)檢測(cè)數(shù)值的極差均小于臨界極差，該方法的重復(fù)性可以接受。而且，使用該方法檢測(cè)獲得的被測(cè)物回收率為93.6%～100.8%，在通常色譜要求的90.0%～110.0%回收率的范圍內(nèi)，重復(fù)性更好。

3.HPLC-DAD和HPLC-FLD兩種檢測(cè)方法的比較

通過分析上述兩種檢測(cè)方法下4種目標(biāo)物的保留時(shí)間可以發(fā)現(xiàn)，目標(biāo)物保留時(shí)間相對(duì)分散，從3min至10min不等，兩色譜峰之間的間隔至少為1min，這說明C18色譜柱與甲醇/水的流動(dòng)相的配合可以將4種目標(biāo)物分離開來，在色譜圖上可以呈現(xiàn)明顯而互無交集的峰形圖。通過分析兩種檢測(cè)方法的標(biāo)準(zhǔn)曲線發(fā)現(xiàn)，其線性均可以達(dá)到0.999以上，說明兩種方法的標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)0.2～1.0mg/kg濃度的樣品均能呈現(xiàn)良好線性，這也說明在純?nèi)芤旱臓顟B(tài)下，兩種方法對(duì)目標(biāo)物的分辨和相應(yīng)響應(yīng)都很好。在對(duì)樣品的檢測(cè)中，HPLC-DAD檢測(cè)法的檢出限、重復(fù)性和被測(cè)物回收率都差于HPLC-FLD檢測(cè)法。主要是因?yàn)閱喂馐腄AD受到雜質(zhì)和樣品基體的干擾更大，當(dāng)樣品中雜質(zhì)過多或有對(duì)相同波長光有強(qiáng)吸收的物質(zhì)時(shí)會(huì)干擾檢測(cè)器，造成檢測(cè)數(shù)據(jù)重復(fù)性差，回收率偏差大。而使用FLD時(shí)，和目標(biāo)物有相同激發(fā)波長和發(fā)射波長的雜質(zhì)或干擾物的幾率更小，所以HPLC-FLD檢測(cè)法的抗干擾能力更強(qiáng)，能夠減少雜質(zhì)和樣品基體對(duì)目標(biāo)物檢測(cè)的影響，可以獲得更低的檢出限和更好的重復(fù)性。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：使用HPLC-DAD檢測(cè)法和HPLC-FLD檢測(cè)法均可以對(duì)壬基酚、辛基酚、壬基酚聚氧乙烯醚和對(duì)苯二酚單乙醚進(jìn)行檢測(cè)。HPLCFLD檢測(cè)法抗干擾能力更強(qiáng)，實(shí)驗(yàn)顯示的檢出限值為0.02mg/kg，被測(cè)物回收率為93.6%～100.8%，標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.006～0.008，檢測(cè)精度更符合檢測(cè)要求。而HPLC-FLD檢測(cè)法更適合對(duì)食品軟包裝中壬基酚、辛基酚、壬基酚聚氧乙烯醚和對(duì)苯二酚單乙醚進(jìn)行檢測(cè)。