陳書秀

摘要：通過對EM菌與3種不同微藻的共同培養(yǎng)，在營養(yǎng)鹽豐富的水體中，以兩種方式培養(yǎng)的EM菌1∶400～1∶80的體積比添加到藻液中，對金藻、硅藻、綠藻的生長都有一定的促進(jìn)作用，其中對金藻及硅藻生長的促進(jìn)作用更加顯著，生長率提高20%～50%，最終細(xì)胞密度有所提高。

關(guān)鍵詞：EM菌；小新月菱形藻；小球藻；球等鞭金藻3011；生長

水質(zhì)調(diào)控是海水養(yǎng)殖技術(shù)的重要組成部分，只有保持良好的水質(zhì)才能從根本上減少水產(chǎn)動物疾病的發(fā)生。水生生態(tài)系統(tǒng)中藻類與細(xì)菌的關(guān)系十分密切，二者在水體物質(zhì)循環(huán)中起著重要的作用。通過細(xì)菌、藻類來分解、吸收或攝食水體中的營養(yǎng)物質(zhì)，降低有機(jī)物污染；微生物降解有機(jī)物，使其轉(zhuǎn)化為無機(jī)營養(yǎng)鹽，供給藻類生長。微生物和藻類之間就有可能形成協(xié)同作用，從而改善養(yǎng)殖水質(zhì)。近年來人們正致力于藻類-微生物聯(lián)合凈化養(yǎng)殖水質(zhì)的研究，以期建立經(jīng)濟(jì)實用的微藻和微生物綜合調(diào)控養(yǎng)殖水環(huán)境的模式。

EM是由多種有益微生物組成的活菌制劑，在水產(chǎn)養(yǎng)殖上作水質(zhì)凈化、改良劑以及餌料拌合劑，以此凈化水質(zhì)及增強(qiáng)養(yǎng)殖品種的免疫力，從而提高產(chǎn)量和效益。劉淇[1]在南美白對蝦養(yǎng)殖中使用復(fù)合型活菌生物凈水劑，實驗池水體透明度比對照池高39.35%，BOD低24.59%，NH4+-N含量低33.10%。張慶等[2]研究證明，復(fù)合微生物能有效增加水體中的溶解氧，降低水體中氨氮、亞硝酸氮等營養(yǎng)鹽的含量并保持水體中穩(wěn)定的藻相。張玲華等[3]研究表明復(fù)合微生物制劑能有效調(diào)節(jié)養(yǎng)殖池藻群環(huán)境，有害藻類受到抑制；有效地降解養(yǎng)殖池水體中的有機(jī)物，抑制氨氮、COD、TOC的升高，降低亞硝酸鹽的濃度。

藻類通過光合作用釋放氧氣供給好氧異養(yǎng)微生物，而好氧異養(yǎng)微生物對有機(jī)污染物進(jìn)行氧化分解，產(chǎn)生CO2和無機(jī)氮、磷化合物又能給藻類提供光合作用所需碳源和營養(yǎng)，如此循環(huán)，稱為“藻菌共生”。Gomez GilB等[4]報道將Vibrio alginolyticus C7b菌和微藻Chaetoceros muelleri共同培養(yǎng)，Vibrio alginolyticus C7b菌迅速增長并在9 d的成熟過程中保持穩(wěn)定的高濃度。而Vibrio alginolyticus C7b菌單獨培養(yǎng)時，1 d后數(shù)量即開始減少。由此可見，將藻類對污水中氮磷和有機(jī)物的攝取去除功能與細(xì)菌強(qiáng)大的污染降解能力有效結(jié)合起來，在養(yǎng)殖環(huán)境中可以讓它們更好地發(fā)揮作用。目前，在“藻菌共生”理論基礎(chǔ)上建立的“菌藻共生系統(tǒng)”已在城市污水處理上顯示了巨大的優(yōu)勢，而在水產(chǎn)養(yǎng)殖廢水凈化方面的研究和報道甚少，需要進(jìn)一步研究。而在人類環(huán)保健康意識的增強(qiáng)下，微生物水質(zhì)凈化劑以及“菌藻共生系統(tǒng)”在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用必將有著更為廣泛的前景。

本文使用了滄州某有限公司提供的一種培藻肥水型EM菌，利用此EM菌的菌液與微藻共同培養(yǎng)，研究EM菌對3種微藻生長狀態(tài)的影響，以期為此EM菌應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖生產(chǎn)提供理論依據(jù)。

1材料與方法

1.1實驗材料

EM菌滄州某有限公司提供的一種培藻肥水型EM菌，主要由乳酸菌、硝化菌、芽孢桿菌、光合菌、酵母菌等組成。

小新月菱形藻、小球藻、球等鞭金藻3011。

1.2實驗方法

EM菌培養(yǎng)：①取EM菌10 g+紅糖20 g添加到1 L消毒海水中（海水中加f培養(yǎng)母液），放于30 ℃條件下發(fā)酵4～5 d；②5 g EM菌+5 g紅糖+10 g面粉+10 g玉米面+5 g豆面添加到500 mL消毒海水中，于30 ℃下培養(yǎng)至出現(xiàn)濃厚的酒香味。

微藻培養(yǎng)：兩種方式培養(yǎng)的EM菌分別加入到200 mL相同藻密度的小新月菱形、3011、小球藻中，分別添加0.5 mL、2.5 mL或5 mL EM菌液，以f培養(yǎng)基培養(yǎng)的藻液為對照，每個處理組設(shè)置3個平行。

2實驗結(jié)果

2.1除對照組外，其他處理組均未添加任何營養(yǎng)鹽（小新月菱形）

實驗結(jié)果如圖1，添加2.5 mL紅糖培養(yǎng)的EM菌的處理組延緩期較短，培養(yǎng)第二天達(dá)到指數(shù)生長期，且達(dá)到的細(xì)胞密度最大（除對照組外），但與對照組相比較生長期較短，鏡檢觀察細(xì)胞完整度較好，視野中的雜質(zhì)較少。添加0.5 mL淀粉等培養(yǎng)的EM菌的處理組也可達(dá)到較大的細(xì)胞密度，但是鏡檢發(fā)現(xiàn)雜質(zhì)較多，細(xì)胞有破碎。

圖1在未添加任何營養(yǎng)鹽的

海水中添加EM菌培養(yǎng)小新月菱形藻

2.2所有處理組都先添加f培養(yǎng)基，然后再加入不同量的EM菌

圖2為在已添加f培養(yǎng)基的海水中添加EM菌培養(yǎng)小新月菱形藻，圖中可以看出，以紅糖或面粉等培養(yǎng)的EM菌0.5 mL加入到200 mL小新月菱形藻，在整個生長周期中都有顯著的促進(jìn)作用，其生長率顯著高于對照組。

圖2在已添加f培養(yǎng)基的海水中

添加EM菌培養(yǎng)小新月菱形

圖3為在已添加f培養(yǎng)基的海水中添加EM菌培養(yǎng)3011，圖中可以看出，以面粉等培養(yǎng)的EM菌5 mL加入到200 mL3011藻液中，在整個生長周期中有顯著促進(jìn)作用，生長率及細(xì)胞密度顯著高于其他各組。另外以紅糖或面粉等培養(yǎng)的EM菌2.5 mL加入到200 mL 3011藻液中，其生長率及細(xì)胞密度也顯著地高于對照組。

圖3在已添加f培養(yǎng)基的海水中

添加EM菌培養(yǎng)3011

圖4在已添加f培養(yǎng)基的海水中

添加EM菌培養(yǎng)小球藻

圖4為在已添加f培養(yǎng)基的海水中添加EM菌培養(yǎng)小球藻，圖中可以看出，EM菌0.5或2.5 mL加入至200 mL藻液中也有一定的促進(jìn)作用，但是效果不顯著。

3小結(jié)與討論

從實驗中可以看出，在營養(yǎng)鹽豐富的水體中，以兩種方式培養(yǎng)的EM菌1∶400～1∶80的體積比添加到藻液中，對金藻、硅藻、綠藻的生長都有一定的促進(jìn)作用，其中對金藻及硅藻生長的促進(jìn)作用更加顯著，生長率提高20%～50%，最終細(xì)胞密度有所提高。因此，建議在培養(yǎng)微藻時，在正常添加營養(yǎng)鹽的情況下，以1∶400～1∶80的體積比將EM菌液添加到藻液中，在海參池等營養(yǎng)豐富的水體中也可適量添加此EM菌，但必須提前觀察水體中浮游生物的組成種類，以免造成敵害生物的大量繁殖。

利用菌藻聯(lián)合調(diào)控養(yǎng)殖水質(zhì)，可以改善池塘微生態(tài)結(jié)構(gòu)，既能保持水體透明度，又能為養(yǎng)殖生物提供好較好的天然餌料，是實施生態(tài)養(yǎng)殖的有效途徑之一。陳海敏[5]探索了光合細(xì)菌和小球藻聯(lián)合處理調(diào)控養(yǎng)殖水體水質(zhì)情況，實驗結(jié)果表明，光合細(xì)菌和小球藻能很好地去除水體的氮磷。沈南南等[6]研究結(jié)果表明，小球藻和芽孢桿菌聯(lián)合處理組對水質(zhì)的調(diào)控效果明顯優(yōu)于僅添加芽孢桿菌組或小球藻組。黃翔鵠等[7]研究結(jié)果表明人工引入波吉卵囊藻和微綠球藻于凡納濱對蝦養(yǎng)殖環(huán)境中，水質(zhì)能夠得到顯著的改善。

本實驗在實驗室條件下進(jìn)行，具有恒定的溫度、光照等環(huán)境因素，而且未向水體中補(bǔ)充外源有機(jī)物和無機(jī)鹽，因此隨著培養(yǎng)時間的延長，養(yǎng)殖水體中營養(yǎng)物質(zhì)迅速消耗，溶解氧、二氧化碳的量也在不斷變化，這些因素共同作用于益生菌和微藻的生長。但是外界環(huán)境中的水體，溫度、光照等不恒定，且有外源營養(yǎng)鹽的補(bǔ)充，與實驗室環(huán)境完全不同。因此，EM菌對三種微藻的影響機(jī)制非常復(fù)雜，有待進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn)：

[1] 劉淇.科新牌復(fù)合型活性生物凈水劑在南美白對蝦養(yǎng)殖中的應(yīng)用研究[J].中國水產(chǎn)，2001（6）：82-83

[2]張慶，李卓佳，陳康德，等.復(fù)合微生物對養(yǎng)殖水體生態(tài)因子的影響.上海水產(chǎn)大學(xué)學(xué)報，1999，8（1）：4-7

[3]張玲華，田興山，鄺哲師，等.復(fù)合微生物制劑在改善水產(chǎn)養(yǎng)殖微生態(tài)環(huán)境中的應(yīng)用.廣東飼料，2004，13（1）：22-23

[4]Gomez-Gil B，Roque A，Velascc-Blanco G.Culture of Vibrio algi nolyticus C7b，apotential probiotic bacterium，with the microalgae Chaetocer os mulelleri[J].Aqua，2002，211：43-48

[5]陳海敏，陳聲明.工廠化水產(chǎn)養(yǎng)殖廢水菌藻聯(lián)合處理模式研究[J].浙江樹人大學(xué)學(xué)報，2002，2（4）：64-67

[6]沈南南，李純厚，賈曉平，等.小球藻與芽孢桿菌對對蝦養(yǎng)殖水質(zhì)調(diào)控作用的研究[J].海洋水產(chǎn)研究，2008，29（2）：48-52

[7]黃翔鵠，李長玲，鄭蓮，等.固定化微藻對蝦池弧菌數(shù)量動態(tài)的影響[J].水生生物學(xué)報，2005，29（6）：684-688

（收稿日期：2015-10-27；修回日期：2015-11-04）