黃國(guó)威李國(guó)慶嚴(yán)曉菊呂萍李歡劉晨郭維維楊仕明于寧

1川北醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院耳鼻咽科（南充637000）

2解放軍總醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科 耳鼻咽喉研究所（北京100853）

·基礎(chǔ)研究·

糖尿病性耳聾聽(tīng)力變化特點(diǎn)

黃國(guó)威1，2李國(guó)慶1嚴(yán)曉菊1呂萍1李歡2劉晨2郭維維2楊仕明2于寧2

1川北醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院耳鼻咽科（南充637000）

2解放軍總醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科 耳鼻咽喉研究所（北京100853）

目的探討自發(fā)性糖尿病鼠初期聽(tīng)力變化特點(diǎn)。方法清潔級(jí)雄性，7周齡Zucker Diabetes Fat(ZDF)大鼠根據(jù)糖尿病發(fā)病與否分發(fā)生糖尿病的ZDF模型鼠（fa/fa）為實(shí)驗(yàn)組10只，不發(fā)生糖尿病的ZDF對(duì)照鼠（fa/+）為對(duì)照組5只。分別于2、3、4、5、6月大小時(shí)測(cè)大鼠的體重、空腹血糖、短聲誘發(fā)聽(tīng)性腦干反應(yīng)（Click-ABR）、短純音誘發(fā)聽(tīng)性腦干反應(yīng)（tb-ABR）、畸變產(chǎn)物耳聲發(fā)射（DPOAEs）。結(jié)果實(shí)驗(yàn)鼠在第2月齡內(nèi)12小時(shí)禁食不禁飲測(cè)空腹血糖在正常范圍，第3月齡時(shí)實(shí)驗(yàn)鼠的空腹血糖已達(dá)糖尿病標(biāo)準(zhǔn)并維持在較高水平；對(duì)照組大鼠血糖一直保持在正常范圍。根據(jù)測(cè)得空腹血糖值大小實(shí)驗(yàn)組空腹血糖值上升相對(duì)較快的鼠（實(shí)驗(yàn)組H）在4月齡時(shí)tb-ABR在8kHz上的閾值較其2月齡時(shí)閾值升高（P＜0.05）；Click-ABR 90dBSPLⅠ波潛伏期、Ⅰ-Ⅲ間期較在2月齡時(shí)延長(zhǎng)（P＜0.05），4月后Ⅰ波潛伏期、Ⅰ-Ⅲ間期開(kāi)始縮短。實(shí)驗(yàn)組空腹血糖上升相對(duì)較慢鼠（實(shí)驗(yàn)組L）在5月齡時(shí)tb-ABR在8kHz、16kHz、32kHz的閾值較2月齡時(shí)閾值升高（P＜0.05），以32kHz聽(tīng)力損失最嚴(yán)重，Click-ABR90dBSPLⅠ波及Ⅰ-Ⅲ波潛伏期出現(xiàn)較明顯延長(zhǎng)（P＜0.05），5月后Ⅰ波潛伏期、Ⅰ-Ⅲ間期開(kāi)始縮短。對(duì)照組大鼠實(shí)驗(yàn)前后聽(tīng)力無(wú)變化（P＞0.05）。結(jié)論肥胖ZDF糖尿病大鼠發(fā)病前期聽(tīng)力無(wú)明顯變化，糖尿病鼠發(fā)病穩(wěn)定后1到2個(gè)月（即4、5月齡）開(kāi)始出現(xiàn)較明顯的聽(tīng)力損害；糖尿病聽(tīng)力損失的發(fā)病進(jìn)展速度也許與血糖升高的快慢有關(guān)；糖尿病鼠高頻聽(tīng)力損失較重，提示臨床糖尿病人應(yīng)當(dāng)監(jiān)測(cè)高頻聽(tīng)力變化。

ZDF鼠；Ⅱ型糖尿?。欢@；聽(tīng)力減退

This study was supported by Major State Basic Research Development Program of China(973)(No.2012CB967900 and 2014CB943002),National Natural Science Foundation of China(NSFC)(No.81271081,81528005 and 81470700),Noise Research Fund (No.BWS14B080 and JDZYY20132),and Sichuan province health department（110298）

Declaration of interest：The anther report no conflict of interest

糖尿病(DM)是僅次于心血管疾病和癌癥之后的第三大疾病，隨著生活水平的提高，其發(fā)病在國(guó)內(nèi)外呈逐年增高的趨勢(shì)，并且在中、低等收入的國(guó)家增長(zhǎng)最快[1]，據(jù)《新英格蘭醫(yī)學(xué)雜志》發(fā)表中華醫(yī)學(xué)會(huì)糖尿病學(xué)分會(huì)“中國(guó)糖尿病和代謝綜合征研究組”關(guān)于我國(guó)糖尿病患病率調(diào)查的最新結(jié)果顯示，我國(guó)20歲以上人群中糖尿病的患病率達(dá)9.7%總?cè)藬?shù)在9200萬(wàn)人以上。同期糖尿病前期的患病率高達(dá)15.5%人數(shù)達(dá)14800萬(wàn)以上[2]，我國(guó)已經(jīng)成為世界第一糖尿病大國(guó)。糖尿病是一種慢性代謝性疾病，越來(lái)越多的臨床資料顯示聽(tīng)力下降的發(fā)病與糖尿病有著密切關(guān)系,是其重要的并發(fā)癥之一。然而臨床上糖尿病發(fā)病被發(fā)現(xiàn)時(shí)一般較晚，糖尿病初期對(duì)聽(tīng)力影響并不清楚，相關(guān)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)亦不多見(jiàn)。

肥胖Zucker Diabetes Fat（ZDF）大鼠表現(xiàn)為高血糖、高胰島素血癥、高血脂和中度高血壓,在生化代謝、組織形態(tài)改變和產(chǎn)生心血管并發(fā)癥的血液指標(biāo)與人類糖尿病具有極強(qiáng)的相似性[3]，成為較理想的自發(fā)性Ⅱ型糖尿病動(dòng)物模型，其糖尿病的整個(gè)發(fā)病過(guò)程亦符合Ⅱ型糖尿病的發(fā)病特點(diǎn)，有利于實(shí)驗(yàn)對(duì)糖尿病整個(gè)過(guò)程聽(tīng)力的觀察。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)檢測(cè)ZDF鼠糖尿鼠聽(tīng)力，來(lái)分析糖尿病病發(fā)病前后聽(tīng)力變化的情況。

1 實(shí)驗(yàn)材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

ZDF模型鼠（fa/fa）與ZDF對(duì)照鼠（fa/+）均購(gòu)自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司，雄性、7周齡大小，SPF級(jí)，隔離系統(tǒng)下喂養(yǎng)。

1.2 實(shí)驗(yàn)儀器

專用隔聲屏蔽室，電反應(yīng)測(cè)聽(tīng)系統(tǒng)（美國(guó)，TDT公司，TDT系統(tǒng)Ⅲ，Rx6），Madsen DPOAE檢測(cè)系統(tǒng)（丹麥，Madsen公司），Accu-ChekR卓越型血糖儀。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 動(dòng)物分組

清潔級(jí)ZDF大鼠按夠得的模型鼠與對(duì)照鼠分實(shí)驗(yàn)組（fa/fa）10只，對(duì)照組（fa/-）5只，雄性，7周齡。這種品系模型鼠在8周（2月）后開(kāi)始出現(xiàn)血糖升高，12周（3月）時(shí)血糖明顯升高已達(dá)糖尿病標(biāo)準(zhǔn)并出現(xiàn)糖尿病相關(guān)癥狀。故適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后根據(jù)其自發(fā)性糖尿病特點(diǎn)將實(shí)驗(yàn)鼠按照月齡分組，2月齡前分為正常期，2月到3月為過(guò)渡期，3月以后為糖尿病期，分別于2、3、4、5、6月測(cè)大鼠的體重、空腹血糖、畸變產(chǎn)物耳聲發(fā)射（distortion product otoacoustic emissions，DPOAEs）、短聲誘發(fā)聽(tīng)性腦干反應(yīng)（Click-evoked Au?ditory Brainstem Response，Click-ABR）、短純音誘發(fā)聽(tīng)性腦干反應(yīng)（tone burst evoked Auditory Brainstem Response，tb-ABR）。

1.3.2 體重與血糖檢測(cè)

在每次測(cè)聽(tīng)前稱取老鼠體重，老鼠空腹12小時(shí)（禁食不禁飲）后用無(wú)菌刀片劃開(kāi)大鼠尾部左或右側(cè)小靜脈用卓越型血糖儀測(cè)得其血糖值，當(dāng)空腹血糖大于等于7.6mol/L時(shí)認(rèn)為實(shí)驗(yàn)大鼠開(kāi)始發(fā)生糖尿病。

1.3.3 聽(tīng)力檢測(cè)

畸變產(chǎn)物耳聲發(fā)射（DPOAEs）檢測(cè)。應(yīng)用丹麥Madsen公司DPOAEs檢測(cè)系統(tǒng)。用1%戊巴比妥鈉麻醉老鼠成功后，將DPOAE探頭密封于ZDF鼠外耳道內(nèi)。取f2的4363.6、8715.3、17442.4、34884.9Hz為測(cè)試頻率，f2/f1=1.2，L1=65dB，L2= 55dB疊加次數(shù)100次，以DPOAE的幅度值大于本底噪聲6dB為引出標(biāo)準(zhǔn)。

短聲誘發(fā)聽(tīng)性腦干反應(yīng)（Click-ABR）閾值及各個(gè)波潛伏期作為觀察指標(biāo)，用1%戊巴比妥鈉麻醉老鼠成功后，將記錄電極插入大鼠顱頂兩耳廓前緣連線中點(diǎn)，參考電極和接地電極分別置于記錄耳和非記錄耳的耳后溝至眼角的皮膚之下，確定電阻值小于或等于1kΩ。刺激聲為寬頻帶短聲(Click)，帶通濾波為高通100Hz低通3000Hz，觀察窗時(shí)間10ms，疊加1024次，以剛能引最穩(wěn)定的Ⅲ波的聲刺激強(qiáng)度作為該耳聽(tīng)反應(yīng)閾。分別測(cè)試分別于大鼠2、3、4、5、6月齡時(shí)五個(gè)時(shí)間段大鼠雙耳ABR波形圖閾值并做記錄。用4、8、16、32kHz的短純音誘發(fā)聽(tīng)性腦干反應(yīng)（tb-ABR）方法同上，并測(cè)得相應(yīng)頻率的閾值。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS20.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，圖表采用Sigma Plot10.0軟件分析，先進(jìn)行各組方差齊性檢驗(yàn)，滿足方差齊性，各組間均數(shù)比較采用單因素方差分析(ANOVA)和t檢驗(yàn)；不滿足方差齊性，采用非參數(shù)檢驗(yàn)。P＜0.05為差異顯著，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；P＞0.05為無(wú)顯著區(qū)別，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1 空腹血糖及體重變化

實(shí)驗(yàn)組L（實(shí)驗(yàn)血糖上升相對(duì)較慢鼠）、實(shí)驗(yàn)鼠H（實(shí)驗(yàn)血糖上升相對(duì)較快鼠）體重隨時(shí)間變化情況，2到3月時(shí)實(shí)驗(yàn)組體重增長(zhǎng)明顯快于對(duì)照組，血糖升高較快鼠體重增長(zhǎng)相對(duì)較快，4到5月實(shí)驗(yàn)組出現(xiàn)體重減輕，而對(duì)照鼠體重持續(xù)增加（圖1）。實(shí)驗(yàn)鼠在2月齡前12小時(shí)內(nèi)禁食不禁飲空腹血糖在正常范圍內(nèi)，3月時(shí)實(shí)驗(yàn)鼠的空腹血糖已達(dá)糖尿病標(biāo)準(zhǔn)，之后空腹血糖均維持在較高水平，而對(duì)照鼠空腹血糖一直維持在正常水平（圖2）。

圖1 實(shí)驗(yàn)組L、實(shí)驗(yàn)鼠H與對(duì)照組體重隨時(shí)間變化情況。Fig.1 The weight changes among L group,H group and control group with the time.

圖2 實(shí)驗(yàn)組L、實(shí)驗(yàn)鼠H與對(duì)照組空腹血糖隨時(shí)間變化情況。Fig.2 The fasting blood-glucose changes among L group,H group and the control group with the time.

2.2 畸變產(chǎn)物耳聲發(fā)射（DPOAEs）

本次實(shí)驗(yàn)糖尿病鼠DPOAEs值各時(shí)間段變化并不明顯，在所測(cè)的4個(gè)頻率均能引出幅度值大于本底噪聲6dB的DP值，無(wú)明顯幅度降低，DP幅度值由高到底依次是8、16、4、32kHz。

2.3 聽(tīng)性腦干反應(yīng)（ABR）

對(duì)照鼠各時(shí)間段自身前后對(duì)比Click-ABR及tb-ABR各個(gè)頻率聽(tīng)閾值無(wú)明顯改變，；實(shí)驗(yàn)組L（實(shí)驗(yàn)血糖上升相對(duì)較慢鼠）自身前后對(duì)比3、4月與2月8k閾值比較P＜0.05，5月與2月8k、16k、32k閾值比較P＜0.05；實(shí)驗(yàn)鼠H（實(shí)驗(yàn)血糖上升相對(duì)較快鼠）自身前后對(duì)比4月與2月8k閾值比較P＜0.05（表1）。（主要觀察的是糖尿病鼠前后聽(tīng)力變化的情況，對(duì)照鼠是為了排除這種品系鼠本身存在聽(tīng)力問(wèn)題，或在觀察期間出現(xiàn)老年性耳聾。）

對(duì)照鼠各時(shí)間段自身前后對(duì)比Click-ABR90dB?SPL各波潛伏期無(wú)明顯變化。實(shí)驗(yàn)鼠L（實(shí)驗(yàn)血糖上升相對(duì)較慢鼠）4、5月時(shí)與2月比較Ⅰ波潛伏期、Ⅰ-Ⅲ間期延長(zhǎng)P＜0.05，在5月時(shí)Ⅰ波潛伏期、Ⅰ-Ⅲ間期出現(xiàn)延長(zhǎng)達(dá)到最大；實(shí)驗(yàn)鼠H（實(shí)驗(yàn)血糖上升相對(duì)較快鼠）3、4月時(shí)與2月比較Ⅰ波潛伏期、Ⅰ-Ⅲ間期出現(xiàn)延長(zhǎng)P＜0.05，在4月時(shí)Ⅰ波潛伏期、I-Ⅲ間期出現(xiàn)延長(zhǎng)達(dá)到最大（表2）。

3 討論

3.1 糖尿病引起的聽(tīng)力損失病因分析

二型糖尿病主要以高糖血癥、高脂血癥、胰島素抵抗等為發(fā)病特點(diǎn)的慢性代謝性疾病，以微血管損害、外周神經(jīng)纖維損傷較多見(jiàn)。糖尿病也可以通過(guò)多種途徑影響聽(tīng)覺(jué)傳導(dǎo)通路，從而引起聽(tīng)力的改變。目前關(guān)于糖尿病導(dǎo)致聽(tīng)力下降病因的分析多樣，主要有糖尿病引起的血管病變、周圍和中樞神經(jīng)病變、血流動(dòng)力學(xué)改變、自身免疫反應(yīng)、遺傳因素等導(dǎo)致的聽(tīng)力下降。

從糖尿病的發(fā)病特點(diǎn)及其發(fā)病特點(diǎn)，可以從糖尿病引起的耳代謝的變化、耳微循環(huán)血供的變化、以及聽(tīng)覺(jué)傳導(dǎo)通路上相關(guān)細(xì)胞外環(huán)境穩(wěn)態(tài)的變化方面考慮。糖尿病初期由于胰島素抵抗致胰島素相對(duì)分泌不足使得血糖不能及時(shí)有效的進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)利用，逐漸引起血糖升高，而葡糖糖可以自由在血液與細(xì)胞外液間進(jìn)行交換但卻不能自由通過(guò)細(xì)胞膜，糖尿病本身發(fā)病原因更是使得葡糖糖進(jìn)入細(xì)胞障礙，從而導(dǎo)致細(xì)胞外相對(duì)高糖高滲狀態(tài)引起細(xì)胞外環(huán)境穩(wěn)態(tài)的變化，間接對(duì)聽(tīng)力產(chǎn)生影響。

表1 大鼠ABR聽(tīng)閾值各個(gè)時(shí)間段變化情況（±s），*較自身2月齡時(shí)比較P＜0.05Table1 RatsABR threshold value changes In different month（±s），*Compare with its two months old P＜0.05

表1 大鼠ABR聽(tīng)閾值各個(gè)時(shí)間段變化情況（±s），*較自身2月齡時(shí)比較P＜0.05Table1 RatsABR threshold value changes In different month（±s），*Compare with its two months old P＜0.05

Age of rats（month）ABR threshold value（dBSPL）23456 grouping Control group L group H group control group L group H group control group L group H group control group L group H group control group L group H group Click 20.83±2.04 21.67±2.58 20.00±2.36 22.50±2.74 20.83±2.04 20.00±0.00 22.50±2.74 20.00±0.00 22.00±2.58 20.83±2.04 23.33±2.58 21.50±2.42 22.50±4.18 27.50±2.74 25.50±1.58 tb4k 16.67±2.58 15.83±2.04 19.00±2.11 19.17±2.04 20.83±2.04 19.50±1.58 20.00±3.16 20.00±3.16 21.00±2.11 20.83±2.04 20.83±2.04 19.50±2.84 22.50±4.18 25.83±3.76 23.50±3.38 tb8k 10.00±0.00 5.00±0.00 6.50±2.42 8.33±2.58 8.33±2.58*9.00±2.11 10.00±3.16 10.83±2.04*12.00±2.58*10.00±0.00 20.83±2.04 9.50±2.84 12.50±2.74 14.17±2.04 14.00±2.11 tb16k 14.17±2.04 10.00±3.16 13.50±2.42 14.17±2.04 12.50±2.74 14.50±2.84 13.33±2.58 11.67±2.58 15.50±2.84 15.00±0.00 15.83±2.04*14.00±2.11 18.33±4.08 16.67±4.08 16.00±2.11 tb32k 29.17±3.76 25.83±3.76 30.50±3.69 29.17±2.04 28.33±2.58 32.50±4.25 33.33±2.58 28.33±4.08 36.00±6.15 30.00±0.00 40.00±4.47*32.00±4.22 34.17±3.76 36.67±5.16 34.00±2.11

表2 大鼠潛伏期及波間間期各月變化情況（±s），*較自身2月齡時(shí)比較P＜0.05Table 2 Rats Click 90dBSPL peak latency and period change In different month（±s），*Compare with its two months old P＜0.05

表2 大鼠潛伏期及波間間期各月變化情況（±s），*較自身2月齡時(shí)比較P＜0.05Table 2 Rats Click 90dBSPL peak latency and period change In different month（±s），*Compare with its two months old P＜0.05

Age of rats（month）Click 90dBSPL peak latency and period（ms）23456 grouping control group L group H group control group L group H group control group L group H group control group L group H group control group L group H group I peak latency 1.70±0.033 1.62±0.037 1.71±.039 1.70±0.041 1.66±0.036 1.75±0.043*1.72±0.030 1.69±0.025*1.78±0.050*1.72±0.021 1.80±0.033*1.72±0.033 1.75±0.033 1.76±0.064 1.71±0.039 I-III period 1.62±0.038 1.53±0.016 1.60±0.050 1.65±0.051 1.55±0.033 1.70±0.062*1.63±.075 1.58±0.037*1.76±0.117*1.66±0.036 1.82±0.099*1.68±0.088 1.69±0.147 1.72±0.073 1.64±0.048 III-IV period 0.90±0.020 0.80±0.052 0.85±0.035 1.65±0.051 0.75±0.053 0.84±0.054 0.74±0.036 0.73±0.037 0.88±0.065 0.77±0.022 0.86±0.051 0.76±0.054 0.78±0.070 0.70±0.092 0.67±0.089

糖類是細(xì)胞維持正常功能的主要能源物質(zhì)，特別是聽(tīng)覺(jué)傳導(dǎo)通路，由于其大多處于工作狀態(tài)，對(duì)聲能時(shí)刻進(jìn)行電生理轉(zhuǎn)換，需要大量的能量供應(yīng)，然而糖尿病使得細(xì)胞對(duì)糖利用障礙，使得大部分能量來(lái)源不能通過(guò)糖類獲得，需要消耗體內(nèi)的脂肪或蛋白質(zhì)來(lái)完成供能，使得細(xì)胞的負(fù)荷加重、中間代謝產(chǎn)物增多有文獻(xiàn)報(bào)道2型糖尿病患者血清糖基化終末產(chǎn)物（advanced glycation end products，AGEs）及脂聯(lián)素（adiponectin，APN)與糖尿病聽(tīng)力損害的發(fā)生及發(fā)展具有相關(guān)[4]。楊風(fēng)波等[5]發(fā)現(xiàn)Hensen細(xì)胞內(nèi)含有大量的脂肪滴認(rèn)為其對(duì)毛細(xì)胞不僅有支持作用還可以利用脂肪滴為毛細(xì)胞供能從而維持毛細(xì)胞的正常功能，然而糖尿病血糖代謝障礙后期會(huì)并發(fā)血脂代謝紊亂從而也會(huì)影響其對(duì)毛細(xì)胞的供能，進(jìn)而影響聽(tīng)覺(jué)細(xì)胞的正常功能，引起聽(tīng)力變化。

糖尿病發(fā)病后隨著時(shí)間延長(zhǎng)會(huì)發(fā)生微血管及周圍神經(jīng)的病變，微血管的變化主要表現(xiàn)為血管紋微血管基底膜增厚[6]，從而使得內(nèi)耳血供減少，氧及能量物質(zhì)供應(yīng)相對(duì)減少，代謝產(chǎn)物堆積進(jìn)一步加重。隨著細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的改變、代謝方式的改變、微循環(huán)血供減少、代謝產(chǎn)物的堆積最終引起耳蝸的正常結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生變化。

3.2 糖尿病對(duì)外毛細(xì)胞的影響

本次實(shí)驗(yàn)糖尿病鼠DPOAEs值變化并不明顯，在所測(cè)的4個(gè)頻率均能引出正常的DP值，說(shuō)明糖尿病初期對(duì)大鼠外毛細(xì)胞功能損傷不明顯，提示糖尿病引起的聽(tīng)覺(jué)傳導(dǎo)通路的損傷可能發(fā)生在外毛細(xì)胞之后。tb-ABR測(cè)試8000Hz是本次試驗(yàn)老鼠所選的4個(gè)頻率中測(cè)得閾值最低的一個(gè)頻率，說(shuō)明本實(shí)驗(yàn)大鼠在這個(gè)頻率段的聽(tīng)覺(jué)較為敏感，而糖尿病發(fā)病初期實(shí)驗(yàn)鼠在該頻率閾值較對(duì)照鼠閾值降低，這也許與糖尿病初期外毛細(xì)胞外環(huán)境的變化有關(guān)，大部分種系動(dòng)物的外毛細(xì)胞其側(cè)面只與液體接觸，其內(nèi)的液體目前主要考慮來(lái)源與外淋巴或隧道內(nèi)血管，糖尿病初期使得外毛細(xì)胞外環(huán)境血糖升高，毛細(xì)胞對(duì)糖的攝取增加供能增加從而使得外毛細(xì)胞的放大機(jī)制得到增強(qiáng)。由于耳蝸基底膜細(xì)胞所處外環(huán)境的不同，耳蝸基底膜細(xì)胞如外毛細(xì)胞其主要供能物質(zhì)是糖還是脂肪（或其它），對(duì)糖的攝取是否依賴于胰島素，及具體糖的攝取、轉(zhuǎn)運(yùn)及代謝方式，值得我們進(jìn)一步去探究。

3.3 糖尿病對(duì)聽(tīng)覺(jué)通路傳導(dǎo)的影響

有臨床資料顯示2型糖尿病患者發(fā)生聽(tīng)力損失后，其純音測(cè)聽(tīng)顯示多個(gè)頻率都存在輕度、溫和的聽(tīng)力閾值下降，以高頻聽(tīng)力損失更明顯，腦干聽(tīng)覺(jué)誘發(fā)電位顯示Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ波的潛伏期（PL）較正常者延長(zhǎng)，Ⅰ-Ⅲ、Ⅲ-Ⅴ、Ⅰ-Ⅴ波的間期（IPL）均較正常者亦延長(zhǎng)[7]。與本實(shí)驗(yàn)tb-ABR結(jié)果多個(gè)頻率輕度聽(tīng)力下降，以高頻聽(tīng)力損失較明顯，Click-ABR90dBSPLⅠ波潛伏期及Ⅰ-Ⅲ間期出現(xiàn)較明顯延長(zhǎng)相符合。之所以聽(tīng)力損失多以高頻聽(tīng)力損失為主，這與耳蝸內(nèi)毛細(xì)胞本身的分布特點(diǎn)及耳蝸內(nèi)氧自由基、鈣通道等的分布特點(diǎn)有關(guān)[8]。Click-ABR90dBSPLⅠ波潛伏期及Ⅰ-Ⅲ間期出現(xiàn)較明顯延長(zhǎng)提示糖尿病引起的病變可能累及到耳蝸及聽(tīng)覺(jué)傳入通路，如內(nèi)毛細(xì)胞突觸復(fù)合體或其之后神經(jīng)可能出現(xiàn)損傷。

比較有趣的發(fā)現(xiàn)，糖尿病鼠在出現(xiàn)tb-ABR各頻率閾值，特別是Click-ABR90dBⅠ波潛伏期Ⅰ-Ⅲ間期的延長(zhǎng)達(dá)到較重程度后（4月到5月齡左右）并未出現(xiàn)進(jìn)一步加重，相反tb-ABR各頻率閾保持不變或輕度降低，Click-ABR90dBⅠ波潛伏期Ⅰ-Ⅲ間期Ⅰ-Ⅳ間期縮短（即有所恢復(fù)），考慮是否耳蝸基底膜細(xì)胞及神經(jīng)傳導(dǎo)通路相關(guān)細(xì)胞對(duì)高糖耐受適應(yīng)的可能。而對(duì)照鼠因年齡的原因開(kāi)始出現(xiàn)聽(tīng)力損失考慮老年性聾可能，所以適當(dāng)高糖環(huán)境對(duì)聽(tīng)力是否有保護(hù)（如對(duì)突發(fā)性耳聾、老年性耳聾的保護(hù)）作用，有待進(jìn)一步去證實(shí)。

3.4 糖尿病聽(tīng)力變化與血糖上升快的關(guān)系

Click-ABR90dBⅠ波潛伏期Ⅰ-Ⅲ間期Ⅰ-Ⅳ間期的變化以及tb-ABR 8000Hz聽(tīng)力閾值的變化，與糖尿病鼠空腹血糖變化有著一定的聯(lián)系，空腹血糖上升較快的實(shí)驗(yàn)鼠較先出現(xiàn)上訴的聽(tīng)力變化，這與糖尿病患者聽(tīng)力損失嚴(yán)重程度與血糖控制情況密切相關(guān)[9]相符合。

糖尿病鼠多在糖尿病2個(gè)月后出現(xiàn)比較明顯聽(tīng)力損失及潛伏期延長(zhǎng)，與本鼠的發(fā)病特點(diǎn)有一定關(guān)系，據(jù)觀察糖尿病鼠在發(fā)生糖尿病兩個(gè)月后出現(xiàn)了明顯的眼部病變，體重也出現(xiàn)較明顯的減輕，也許這個(gè)階段是糖尿病并發(fā)癥高發(fā)期，耳聾也屬于糖尿病并發(fā)癥之一，在這個(gè)時(shí)間段發(fā)病亦符合疾病自身特點(diǎn)，有文獻(xiàn)報(bào)道也顯示糖尿病在有其他并發(fā)癥存在的情況下其發(fā)生聽(tīng)力損失的可能性更高[10]。

綜上所述，根據(jù)本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示糖尿病初發(fā)期也許會(huì)反應(yīng)性的引起部分頻率聽(tīng)力敏感性增加、閾值降低，隨著糖尿病進(jìn)一步發(fā)展、血糖的控制不佳逐漸會(huì)出現(xiàn)聽(tīng)力下降及ABR潛伏期延長(zhǎng)。故建議糖尿病患者在糖尿病初期在積極治療糖尿病的同時(shí)應(yīng)做常規(guī)的聽(tīng)力檢測(cè)、并定期聽(tīng)力復(fù)查，可以早期的發(fā)現(xiàn)并治療糖尿病引起的聽(tīng)力下降，亦可反映糖尿病的治療情況。

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Characteristics of hearing loss in diabetic fat rats

HUANG Guowei1,2，LI Guoqing1，YAN Xiaoju1，LV Ping1，LI Huan2，LIU Chen2，GUO Weiwei2，YANG Shiming2，YU Ning2
1 Department of Otolaryngology,North Sichuan Medical College Affiliated Hospital,Nanchong 637000
2 Department of Otolaryngology,Head and Neck Surgery,Institute of Otolaryngology,Department of Radiology,Chinese PLA General Hospital（Beijing 100853）

ObjectiveTo study the characteristics of early stage hearing loss in rats with primary diabetes.MethodsZucker diabetic fat(ZDF)rats(7 weeks old)were divided into a diabetes/obesity group(fa/fa,n=10)and a control group (fa/+,n=5).The rats were weighed and fasting blood-glucose tested.Auditory brainstem responses were tested using clicks (Click-ABR)and tone burst(tb-ABR),together with distortion product otoacoustic emissions(DPOAEs),at 1,2,4 and 6 month.ResultsIn rats in the diabetes obesity group,12 hours fasting blood-glucose was within normal range in the first 2 months,but elevated to diabetes diagnosis levels and maintained at a high level after 3 months,while fasting blood-glucose remained in the normal range in control rats.In rats with rapidly rising fasting blood-glucose levels,tb–ABR thresholds at 8000 Hz were higher at 4 months than at 2 months(P＜0.05),with wave I latency and I-III interval of Click-ABRs(90 dBSPL)prolonged compared to at 2 months(P＜0.05).Interestingly,these animals showed shorter wave I latency and I-III intervals after 4 months.Rats in the diabetes/obesity group with slowly rising fasting blood-glucose showed higher tb-ABR thresholds at 8,16 and 32 kHz at 5 months than at 2 months(P＜0.05),especially at 32 kHz.Hearing levels in control group rats showed no significant change before and after the study(P＞0.05).Conclusion There is no obvious change in ABR thresholds in ZDF rats in the early stage(2-3 months).They begin to show hearing impairment when they are 4-5 months old.The rate of hearing loss in diabetic rats may be associated with the speed of blood glucose raising.Hearing loss at high frequencies in diabetic rats indicates the need to monitor high frequency hearing change in diabetic patients as soon as possible.

Zucker Diabetes Fat；type 2 diabetes；deaf；hearing loss.

R764.43

A

1672-2922（2016）06-813-6

2016-10-08審核人：翟所強(qiáng)）

10.3969/j.issn.1672-2922.2016.06.022

國(guó)家973計(jì)劃重大科學(xué)研究計(jì)劃干細(xì)胞項(xiàng)目（2012CB967900與2014CB943002）、軍隊(duì)項(xiàng)目（BWS14B080、JDZYY20132）、國(guó)家自然基金項(xiàng)目（81271081、81528005與81470700）及四川省衛(wèi)生廳課題（110298）共同支持下在解放軍總醫(yī)院完成。

黃國(guó)威與劉晨為并列第一作者

黃國(guó)威，碩士，研究方向:糖尿病性耳聾聽(tīng)力損傷機(jī)制

呂萍，Email:1240646911@qq.com