（廣西醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，廣西南寧530021）

方刺參酒補腎壯陽作用的實驗研究

阮氏錦秀，廖遙靈，羅 俊，楊 斌

（廣西醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，廣西南寧530021）

［目的］觀察方刺參酒的補腎壯陽作用，為其應(yīng)用和開發(fā)提供科學(xué)實驗依據(jù)。［方法］①取SPF級SD雄性大鼠60只，去勢3 d后將其隨機分為6組：模型對照組，溶媒對照組，陽性對照組，方刺參酒高、中、低劑量組，每組10只；另取10只不去勢不做任何處理作為正常對照組。每組連續(xù)給藥21 d，第21 d給藥1 h后，將YLS-9A生理、藥理電子刺激儀的刺激電極置于大鼠陰莖部位，觀察大鼠陰莖勃起功能及對附性器官臟器指數(shù)的影響；②取SPF級SD雄性大鼠60只，隨機分成6組：正常對照組，陽性對照組，溶媒對照組，方刺參酒高、中、低劑量組，每組10只，每日給藥1次，連續(xù)28 d。于末次給藥1 h后，進行交配實驗，記錄雄性大鼠撲捉潛伏期、撲捉次數(shù)、射精潛伏期及射精次數(shù)。［結(jié)果］去勢后的大鼠包皮腺、精囊腺+前列腺、提肛肌的臟器指數(shù)均顯著降低，垂體、腎上腺、胸腺等臟器指數(shù)顯著提高，與正常對照組比較差異顯著（P<0.05或P<0.01），但方刺參酒無明顯促進這些器官發(fā)育的作用；與模型對照組比較，方刺參酒高、中劑量組可顯著縮短大鼠陰莖勃起潛伏期（P<0.05或P< 0.01）；與正常對照組比較，方刺參酒中、低劑量組可明顯縮短撲捉潛伏期和射精潛伏期（P<0.05），明顯增加射精次數(shù)（P<0.05或P<0.01）。［結(jié)論］方刺參酒可明顯提高生殖反射閾值及興奮水平，具有一定的補腎壯陽作用。

方刺參酒；補腎壯陽；交配試驗；實驗研究

方刺參酒是由北海博鏵醫(yī)院提供的一種自制藥酒，內(nèi)含海參、牡蠣、山藥、黨參、枸杞子等中藥，具有提高性功能、調(diào)節(jié)性激素分泌紊亂及免疫調(diào)節(jié)等作用，主治陽痿、性功能下降等。方刺參酒在市面上已有銷售，但動物實驗資料尚不夠豐富，因此本研究探討方刺參酒的補腎壯陽作用，旨為其應(yīng)用和開發(fā)提供科學(xué)實驗依據(jù)。

1 實驗材料

1.1 動物SPF級SD大鼠，由廣西醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供。實驗動物生產(chǎn)許可證號：SCXK桂2014-0002；實驗動物使用許可證號：SYXK桂2014-0003。

1.2 藥品與試劑方刺參酒（北海博鏵醫(yī)院提供，酒精度38度，批號：20151202）；注射用青霉素鈉（華北制藥股份有限公司，批號：H13020657）；丙酸睪酮注射液（上海通用藥業(yè)股份有限公司，批號：H31020524）；桂林三花酒（酒精度38度，桂林三花股份有限公司，批號：GB/T10781.3）；黃體酮注射液（廣州白云山明興制藥有限公司，批號：150804）。

1.3 儀器YLS-9A生理、藥理電子刺激儀的刺激電極（濟南益延科技發(fā)展有限公司，批號：201104102）。

2 方法

2.1 對去勢大鼠陰莖勃起潛伏期的觀察取60只雄性大鼠，體重60～80 g，雄性大鼠在10%水合氯醛腹腔注射（ip）麻醉下，消毒陰囊皮膚，摘除雙側(cè)睪丸，術(shù)后肌注青霉素鈉2萬U/kg預(yù)防感染。去勢3 d后，將其隨機分為6組：模型對照組，溶媒對照組，陽性對照組，方刺參酒高、中、低劑量組，每組10只。模型對照組灌胃給予生理鹽水（5 ml/kg），溶媒對照組灌胃給予桂林三花酒（5 ml/kg），陽性對照組皮下注射丙酸睪酮注射劑（0.2 mg/kg），方刺參酒高（10 ml/kg）、中（5 ml/kg）、低（2.5 ml/kg）劑量組灌胃給予相應(yīng)劑量的方刺參酒，每日1次，連續(xù)21 d。此外另取10只雄性大鼠，不做任何處理，與其它各組大鼠同期飼養(yǎng)觀察，作為正常對照組。第21 d給藥1 h后，將YLS-9A生理、藥理電子刺激儀的刺激電極置于大鼠陰莖部位，給予局部電刺激，電流強度為0.2 mA，波寬為100 ms，電壓為150 mV，記錄自刺激開始至陰莖勃起時間（勃起潛伏期）。

2.2 對去勢大鼠相關(guān)附性器官臟器指數(shù)的測量分組與給藥途徑同2.1項，連續(xù)給藥21 d，末次給藥24 h后，動物處死，迅速取包皮腺（雙側(cè)）、精囊腺+前列腺、提肛肌、垂體、腎上腺、胸腺、脾臟，用電子天平稱濕重，計算臟器指數(shù)。

2.3 大鼠交配實驗取體重200～270 g健康成年雄性大鼠60只，隨機分成6組：正常對照組，溶媒對照組，陽性對照組、方刺參酒高、中、低劑量組，每組10只。模型對照組灌胃給予生理鹽水（5 ml/kg），溶媒對照組灌胃給予桂林三花酒（5 ml/ kg），陽性對照組皮下注射丙酸睪酮注射劑（0.2 mg/kg），方刺參酒高（10 ml/kg）、中（5 ml/kg）、低（2.5 ml/kg）劑量組灌胃給予相應(yīng)劑量的方刺參酒，每日1次，連續(xù)28 d。另取60只健康成年雌性大鼠，體重200～270 g，交配前4 h每只皮下注射黃體酮注射液500 μg。交配試驗觀察方法［1］：將雄性大鼠單獨放入55 cm×35 cm×20 cm籠中5 min，使其能夠適應(yīng)新的環(huán)境，然后放入雌性大鼠1只；開始記錄下列指標(biāo)：①自雌鼠投入至雄性大鼠第一次撲捉雌鼠的時間（撲捉潛伏期）；②20 min內(nèi)雄鼠撲捉雌鼠或爬背的動作次數(shù)（撲捉次數(shù)）；③雄鼠自爬背成功后出現(xiàn)舔陰莖的時間（射精潛伏期）；④20 min內(nèi)雄鼠撲捉雌鼠或爬背成功后出現(xiàn)舔陰莖的次數(shù)（射精次數(shù)）。

2.4 統(tǒng)計方法采用SPSS 20.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析。計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間差異采用方差分析，以P<0.05為具有統(tǒng)計學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 對去勢大鼠陰莖勃起潛伏期的影響見表1。

表1 對去勢大鼠陰莖勃起潛伏期的影響（±s）

表1 對去勢大鼠陰莖勃起潛伏期的影響（±s）

注：與模型對照組比較，①P＜0.05，②P＜0.01；與溶媒對照組比較，③P＜0.05

組別n劑量勃起潛伏期（s）正常對照組10-12.12±3.94模型對照組10-18.20±10.11溶媒對照組105 ml/kg11.56±5.15陽性對照組100.2 mg/kg6.71±3.23②③方刺參酒高劑量組1010 ml/kg7.33±2.94②③方刺參酒中劑量組105 ml/kg10.18±4.56①方刺參酒低劑量組102.5 ml/kg12.35±4.88

表1結(jié)果顯示，與模型對照組比較，陽性對照組和方刺參酒高、中劑量組均能明顯縮短大鼠勃起潛伏期（P<0.01或P< 0.05），具有統(tǒng)計學(xué)意義；方刺參酒低劑量組有縮短大鼠陰莖勃起潛伏期的趨勢；與溶媒對照組比較，陽性對照組及方刺參酒高劑量組均可縮短大鼠陰莖勃起潛伏期（P<0.05），具有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果表明方刺參酒具有提高大鼠性興奮作用。

3.2 對去勢大鼠相關(guān)附性器官臟器指數(shù)的影響見表2。

表2結(jié)果顯示，與模型對照組比較，正常對照組和陽性對照組包皮腺、精囊腺+前列腺、提肛肌的臟器指數(shù)明顯升高（P<0.05或P<0.01），方刺參酒中劑量組、溶媒對照組包皮腺臟器指數(shù)明顯高于模型對照組（P<0.05），方刺參酒高、低劑量組精囊腺+前列腺臟器指數(shù)明顯低于模型對照組（P<0.05或P<0.01），但方刺參酒高、中、低劑量組對提肛肌臟器指數(shù)無明顯影響（P＞0.05）；與溶媒對照組比較，方刺參酒低劑量組包皮腺有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），高、中劑量組包皮腺、精囊腺+前列腺、提肛肌的臟器指數(shù)均無明顯差異（P＞0.05）。結(jié)果表明去勢后模型大鼠包皮腺、精囊腺+前列腺、提肛肌的臟器指數(shù)均顯著降低，方刺參酒無明顯提高器官指數(shù)的作用。與模型對照組比較，正常對照組垂體、腎上腺、胸腺臟器指數(shù)明顯降低（P<0.05或P<0.01），陽性對照組腎上腺臟器指數(shù)明顯增高（P<0.05），方刺參酒高劑量組胸腺臟器指數(shù)明顯降低（P＜0.05），方刺參酒低劑量組的脾臟臟器指數(shù)明顯增高（P<0.01）；與溶媒對照組比較，除方刺參酒高劑量組的胸腺臟器指數(shù)明顯低于溶媒對照組（P<0.01）外，其余均無明顯差異（P＞0.05）。結(jié)果表明去勢后大鼠的垂體、腎上腺、胸腺臟器指數(shù)明顯增高，可能是由于大鼠去勢后，通過垂體-腺體軸反饋調(diào)節(jié)，代償性增生所致。

3.3 對大鼠交配能力的影響見表3。

表2 對去勢大鼠相關(guān)附性器官臟器指數(shù)的影響（mg/g±s）

表2 對去勢大鼠相關(guān)附性器官臟器指數(shù)的影響（mg/g±s）

注：與模型對照組比較，①P＜0.05，②P＜0.01；與溶媒對照組比較，③P＜0.05，④P＜0.01

包皮腺精囊腺+前列腺提肛肌正常對照組10-0.44±0.10①3.40±0.43②④1.97±0.30②④模型對照組10-0.34±0.09③0.48±0.15③0.80±0.06溶媒對照組105 ml/kg0.46±0.13①0.35±0.06①③0.79±0.07陽性對照組100.2 mg/kg0.43±0.05①1.73±0.23②④1.73±0.23②④方刺參酒高劑量組1010 ml/kg0.36±0.120.32±0.05②0.75±0.12方刺參酒中劑量組105 ml/kg0.43±0.06①0.40±0.070.91±0.19方刺參酒低劑量組102.5 ml/kg0.36±0.06③0.37±0.08①0.75±0.09組別n劑量垂體腎上腺胸腺脾臟正常對照組10-0.04±0.01①③0.21±0.03②④3.09±0.32②④3.36±0.68模型對照組10-0.06±0.010.29±0.044.44±0.723.10±0.33溶媒對照組105 ml/kg0.06±0.010.29±0.064.76±0.573.28±0.55陽性對照組100.2 mg/kg0.06±0.010.34±0.04①4.36±0.683.17±0.40方刺參酒高劑量組1010 ml/kg0.05±0.020.29±0.063.73±0.67①④2.99±0.43方刺參酒中劑量組105 ml/kg0.06±0.010.33±0.044.76±1.133.25±0.62方刺參酒低劑量組102.5 ml/kg0.06±0.010.30±0.044.20±0.693.63±0.28②組別n劑量

表3 對大鼠交配能力的影響（s）

表3 對大鼠交配能力的影響（s）

注：與正常對照組比較，①P＜0.05，②P＜0.01；與溶媒對照組比較，③P＜0.05，④P＜0.01

組別n劑量撲捉射精潛伏期（s）次數(shù)潛伏期（s）次數(shù)正常對照組10-278.7±102.110.2±4.7553.8±166.43.2±1.3溶媒對照組105 ml/kg194.0±78.37.6±4.7618.3±170.02.5±1.3陽性對照組100.2 mg/kg130.8±55.6②22.0±10.9②④209.3±17.2②④11.3±6.3①③方刺參酒高劑量組1010 ml/kg136.8±31.9①5.4±1.1①417.3±69.22.0±1.0①方刺參酒中劑量組105 ml/kg158.2±54.0①9.8±1.5224.3±72.1①③7.5±1.9②④方刺參酒低劑量組102.5 ml/kg179.5±76.1①11.6±3.2291.3±54.4①③8.0±3.6①③

表3結(jié)果顯示，與正常對照組比較，方刺參酒中、低劑量組可明顯縮短撲捉潛伏期和射精潛伏期（P<0.05），明顯增加射精次數(shù)（P<0.01或P<0.05）；方刺參酒高劑量組雖能明顯縮短撲捉潛伏期（P<0.05），射精潛伏期也有一定的縮短趨勢，但撲捉次數(shù)和射精次數(shù)明顯減少（P<0.05）；與溶媒對照組比較，方刺參酒中、低劑量組可明顯縮短射精潛伏期（P<0.05），明顯增加射精次數(shù)（P<0.01或P<0.05）。結(jié)果表明方刺參酒在一定劑量范圍可明顯縮短射精潛伏期，增加射精次數(shù)，具有提高性功能作用，但劑量過大反而被抑制。

4 討論

近年來關(guān)于補腎中藥的藥理作用和臨床研究有不少報道，主要集中在補腎壯陽、激素水平的調(diào)節(jié)、免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)、對骨結(jié)構(gòu)的影響等方面［2］。補腎中藥在激素水平上的調(diào)節(jié)主要體現(xiàn)在對下丘腦-垂體-性腺軸等的調(diào)節(jié)上，現(xiàn)在藥理研究表明，大鼠去勢后，性能力會逐漸喪失，陰莖勃起潛伏期延長，性激素水平降低，血清中睪酮和皮質(zhì)酮等含量會下降［3］。撲捉是一種性交活動，與雄性大鼠陰莖的勃起直接相關(guān)，陰莖插入是一種感覺刺激過程，射精是感覺刺激達到一定閾值時喚起生殖反射活動的極點，射精潛伏期越短，表明激發(fā)射精的敏感性越大。因此，射精潛伏期提供了一個生殖反射閾值及興奮水平的間接手段［4］。

本實驗對雄性大鼠去勢后造成腎陽虛模型，結(jié)果表明，方刺參酒高、中劑量組能顯著縮短去勢大鼠陰莖勃起潛伏期，提高去勢大鼠陰莖對外部刺激的興奮性；去勢后的模型大鼠包皮腺、精囊腺+前列腺、提肛肌的臟器指數(shù)均顯著降低，說明大鼠去勢后因性激素分泌減少，陰莖、提肛肌、精囊腺+前列腺等主要性器官的發(fā)育受阻，質(zhì)量有所減輕，而方刺參酒無明顯促進這些器官發(fā)育的作用；去勢后大鼠的垂體、腎上腺、胸腺臟器指數(shù)明顯增高，可能是由于大鼠去勢后，通過垂體-腺體軸反饋調(diào)節(jié)，代償性增生所致。

正常雄性大鼠的交配能力可由一定時間內(nèi)雄鼠撲捉潛伏期的長短、撲捉次數(shù)、射精潛伏期的長短和射精次數(shù)等方面來反映。本研究通過雌激素誘導(dǎo)的發(fā)情期雌鼠和正常雄性大鼠交配模型考察方刺參酒壯陽作用。交配試驗結(jié)果表明，與正常對照組比較，方刺參酒中、低劑量組明顯縮短撲捉潛伏期和射精潛伏期，明顯增加射精次數(shù)；高劑量組有明顯縮短撲捉潛伏期，并有一定縮短射精潛伏期的趨勢，但撲捉次數(shù)和射精次數(shù)明顯減少。根據(jù)交配結(jié)果試驗可知方刺參酒在一定劑量范圍可明顯縮短大鼠撲捉潛伏期、射精潛伏期，提高撲捉次數(shù)和射精次數(shù)，但劑量過大反而被抑制，可能原因是方刺參酒相對于大鼠來說酒精度過高（38度），過量對中樞神經(jīng)產(chǎn)生抑制所致。

綜上所述，方刺參酒具有提高生殖反射閾值及興奮水平的作用，至于方刺參酒的作用機制及如何提高其工藝，有待于進一步研究。

［1］關(guān)業(yè)枝，梁榮輝，吳青業(yè)，等.芪茸保健酒補腎壯陽作用的實驗研究［J］.今日藥學(xué)雜志，2011，21（2）：91-93.

［2］宋根偉，張曉燕，姚霜，等.補腎中藥的藥理作用研究概況［J］.山西醫(yī)藥雜志，2011，40（8）：787-789.

［3］楊香瑜，張松.三子強腎混懸顆粒補腎壯陽及抗疲勞作用的研究［J］.中國藥師學(xué)報，2013，16（12）：1764-1767.

［4］王忠山，許宗革，左文靜，等.青春期糖尿病鼠性腺重量及性行為觀察［J］.中國男科學(xué)雜志，1996，10（2）：86-89.

（編輯 陳明偉）

The Experimental Research of Fangcishen Wine on Pharmacological Activities of Tonifying the kidney and Invigorating Yang

RUANSHI Jin－xiu，LIA O Yao－ling，LUO Jun，YANG Bin
（Department of Pharmacology，Guangxi Medical University，Nanning，Guangxi，530021）

［Objective］To study the pharmacological activities of Fangcishen wine for tonifying the kidney and Yang so as toprovide scientific experimental basis for its application and development.［Methods］①SPF－SD male rats were castrated 3 days later and then were randomly divided into 6 groups：model group，solvent group，positive control group and Fangcishen wine groups in high，medium and low doses with 10 rats for each group.The other 10 rats without any treatment for castration were taken as he control group.Each group was administered a continuous treatment for twenty－one days.After one hour of administration on the twentyfirst day，the stimulating electrodes of physiological and pharmacological electronic－stimulation－instrument named YLS－9A were placed at the rat penises to observe the erectile function of rats and the influence of the accessory sex organ index；②SPF－SD male rats were randomly divided into 6 groups：control group，positive control group，solvent group and Fangcishen wine groups in high，medium and low doses with 10 rats for each group.Each group was administered 1 times daily for 28 consecutive days.After one hour of the last administration，the mating experiment was conducted to record the latent period，the number of capture，the latency of ejaculation and the frequency of ejaculation.［Results］The index of visceral gland，seminal vesicle，prostate and levator ani muscle were significantly decreased in castrated rats，and the indexes of pituitary，adrenal gland and thymus were significantly increased compared with those of control group（P＜0.05 or P＜0.01）.Fangcishen wine had no significant role in promoting the development of these organs.The high－dose and the medium－dose of Fangcishen wine groups can significantly shorten the rat penis erection latency compared with those of model group（P＜0.05 or P＜0.01）.The medium－dose and the low－dose of Fangcishen wine groups can significantly shorten the capturing latency and ejaculation latency（P＜0.05），and markedly increased ejaculation frequency compared with those of control group（P＜0.05 or P＜0.01）.［Conclusion］Fangcishen wine，which has a certain role in tonifying kidney and invigorating Yang，can significantly improve the genital reflex threshold and exciting level.

Fangcishen wine；tonifying kidney and invigorating Yang；mating experiment；experimental research

R285.5

A

2095-4441（2016）04－0005－04

2016－10－26

楊斌，教授，碩士研究生導(dǎo)師，E-mail:81960722@qq.com