翟俊杰，張紅瑞，趙新會，高致明*

(1.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 農(nóng)學(xué)院 大別山區(qū)農(nóng)林特色產(chǎn)業(yè)協(xié)同創(chuàng)新中心，河南 鄭州 450002； 2.安徽九洲方圓制藥有限公司，安徽 亳州 236000)

河南產(chǎn)丹參適宜采收期初探

翟俊杰1，張紅瑞1，趙新會2，高致明1*

(1.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 農(nóng)學(xué)院 大別山區(qū)農(nóng)林特色產(chǎn)業(yè)協(xié)同創(chuàng)新中心，河南 鄭州 450002； 2.安徽九洲方圓制藥有限公司，安徽 亳州 236000)

為探究河南產(chǎn)丹參的適宜采收時期，測定了河南產(chǎn)丹參不同采收期根干質(zhì)量、丹參酮ⅡA含量和丹酚酸B含量以及這2種有效成分的產(chǎn)量。結(jié)果顯示，嵩縣、伊川、方城3個種源的丹參中丹參酮ⅡA和丹酚酸B含量均在7月份達(dá)到最高，而丹參根干質(zhì)量均在11月份達(dá)到最大，丹參有效成分含量最大的時間和丹參產(chǎn)量最高的時間不重疊。這3個種源丹參的丹參酮ⅡA和丹酚酸B產(chǎn)量(根干質(zhì)量×有效成分含量)從3月到11月均逐漸增加，并在11月達(dá)到最大。采收時間對河南產(chǎn)丹參的2個有效成分含量、根干質(zhì)量及有效成分產(chǎn)量均有較大影響。綜合考慮，以丹參有效成分產(chǎn)量為標(biāo)準(zhǔn)，確定河南產(chǎn)丹參的適宜采收期為11月。

丹參； 采收期； 產(chǎn)量； 有效成分含量； 有效成分產(chǎn)量

丹參是唇形科植物丹參(SalviamiltiorrhizaBge.)的干燥根和根莖，具有活血祛瘀、通經(jīng)止痛、涼血消癰、清心除煩等功效，是我國常用的大宗中藥材之一[1]。丹參的有效成分為脂溶性的菲醌類成分和水溶性的酚酸類成分兩大類，丹參酮ⅡA和丹酚酸B分別是丹參脂溶性成分和水溶性成分的代表成分[2]。其中，丹參酮ⅡA具有抗急性缺氧、抗心律失常、改善血管平滑肌功能、保護(hù)神經(jīng)系統(tǒng)等作用[3]。丹酚酸B不僅對心肌梗死具有良好的預(yù)防作用，還可以明顯改善心肌缺血再灌注的損傷等[4]。

丹參作為治療心血管疾病的傳統(tǒng)常用藥材，近年來，需求量逐年增加，種植面積也隨之增大。河南、陜西、山東是我國丹參的三大主產(chǎn)區(qū)，但由于各地氣候條件、土壤類型、種植技術(shù)等各不相同，使不同產(chǎn)區(qū)丹參的適宜采收時期存在差異。近年來,關(guān)于山東產(chǎn)丹參適宜采收期的報道較多[5-9]，但對于河南產(chǎn)丹參適宜采收時期的報道卻較少，為探尋適合河南環(huán)境條件和種植技術(shù)的丹參采收時間，選取在河南種植面積較大的嵩縣、伊川、方城3個種源丹參種植于河南農(nóng)業(yè)大學(xué)科教園區(qū)，研究不同采收時間對其產(chǎn)量、有效成分含量、有效成分產(chǎn)量的影響，以期為今后河南產(chǎn)丹參適宜采收期的確定提供參考。

1 材料和方法

1.1 試驗材料

供試丹參種子分別采自河南嵩縣、伊川、方城三地，繁殖于河南農(nóng)業(yè)大學(xué)科教園區(qū)。園區(qū)海拔高度約87 m，試驗地土壤為中壤土，于2013年7月育苗，2013年10月移栽至大田，每公頃種植120 000株，田間常規(guī)管理。自2014年3月10日至2014年11月10日，每月采收一次，55 ℃下烘干，備用。

1.2 儀器與試劑

主要儀器：Waters高效液相色譜儀(2489紫外檢測器；1525泵)、ATELA 色譜柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)、奧豪斯DV215CD電子天平。主要試劑：丹參酮ⅡA(產(chǎn)品批號：110766-200619)、丹酚酸B(產(chǎn)品批號：111562-200706)(均購自中國藥品生物制品檢定所)。甲醇、乙醇、甲酸均為色譜純，水為超純水，其他試劑均為分析純。

1.3 指標(biāo)測定

產(chǎn)量取各個處理的采樣總量的平均單株干質(zhì)量。丹參酮ⅡA和丹酚酸B測定參照2010版《中國藥典》“丹參”項下的方法進(jìn)行[1]。線性關(guān)系考察試驗中，以實(shí)際進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，得丹參酮ⅡA的標(biāo)準(zhǔn)曲線為：Y=7×106X-13 091，r=0.999 5，顯示對照品在0～0.32 μg與峰面積呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系；丹酚酸B的標(biāo)準(zhǔn)曲線為：Y=1×106X+20 022，r=0.999 5，顯示對照品在0～5.6 μg與峰面積呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。精密度試驗中RSD為0.72%，儀器精密度良好。加樣回收率試驗的回收率為97.52%，RSD為0.74%。穩(wěn)定性試驗中樣品峰面積的RSD為0.96%(n=7)，樣品在24 h內(nèi)性質(zhì)穩(wěn)定。重復(fù)性試驗得出丹參酮ⅡA的平均含量為5.6 mg/g，RSD=1.34%(n=5)，丹酚酸B的平均含量為100.4 mg/g，RSD=1.26%(n=5)。

1.4 數(shù)據(jù)分析

數(shù)據(jù)采用DPS v7.05版數(shù)據(jù)分析軟件進(jìn)行單因素試驗統(tǒng)計分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 采收期對丹參產(chǎn)量的影響

由圖1可知，隨著丹參植株生育進(jìn)程的推進(jìn)，丹參的根干質(zhì)量均表現(xiàn)為逐漸增加的趨勢。其中3—6月和10—11月期間，丹參根干質(zhì)量的增加非常緩慢，7—10月，丹參的根干質(zhì)量均呈現(xiàn)快速增長的趨勢。在11月，3個種源丹參根干質(zhì)量均達(dá)到最大。

圖1 不同生長期丹參根干質(zhì)量的變化

2.2 采收期對丹參有效成分含量的影響

2.2.1 采收期對丹參中丹參酮ⅡA含量的影響 由圖2可知，采收時間不同，丹參中丹參酮ⅡA的含量也各不相同。丹參酮ⅡA含量均在7月份最大，3月份最低；4月份含量較3月份有所增加，5月份含量較4月份有所降低，5、6、7月份丹參中丹參酮ⅡA的含量穩(wěn)步增加，在7月份達(dá)到最高值后8、9月份的含量逐漸減少。其中嵩縣和伊川種源的樣品丹參酮ⅡA含量10月份稍高于9月份，而方城種源樣品丹參酮ⅡA含量10月份低于9月份，3個種源丹參樣品中10月和11月份的丹參酮ⅡA含量均相差不明顯。

圖2 不同生長期丹參根中丹參酮ⅡA含量的變化

2.2.2 采收期對丹參中丹酚酸B含量的影響 由圖3可知，不同采收時間，丹參中丹酚酸B的含量也各不相同,4、7月份分別達(dá)峰值。3個種源丹參中丹酚酸B含量在3—7月份總體上呈逐漸增加的趨勢，且均在7月份達(dá)到最大值。7月份后丹參中丹酚酸B的含量均呈現(xiàn)下降趨勢，其中7—10月份其丹酚酸B含量下降速度較快。在10—11月期間，3個種源丹參中丹酚酸B含量變化均較小。

圖3 不同生長期丹參根中丹酚酸B含量的變化

2.3 采收期對丹參有效成分產(chǎn)量的影響

2.3.1 采收期對丹參的丹參酮ⅡA產(chǎn)量的影響 由圖4可知，丹參根的單株丹參酮ⅡA產(chǎn)量均隨收獲時間的推后而呈逐漸增加的趨勢，且均在11月份達(dá)到最大值。其中嵩縣種源丹參的單株丹參酮ⅡA產(chǎn)量一直高于其他二者；伊川種源丹參的單株丹參酮ⅡA產(chǎn)量在整個生育期較其他二者一直較低。

圖4 不同生長期丹參的丹參酮ⅡA產(chǎn)量的變化

2.3.2 采收期對丹參的丹酚酸B產(chǎn)量的影響 由圖5可知，隨采收時間的不斷推后，丹參根的單株丹酚酸B產(chǎn)量均隨之逐漸增加，且均在11月份達(dá)到最大值。其中嵩縣種源丹參的單株丹酚酸B產(chǎn)量較其他二者一直較高；方城種源丹參的單株丹酚酸B產(chǎn)量在10—11月增長迅速；而伊川種源丹參的單株丹酚酸B產(chǎn)量在8—11月呈現(xiàn)較緩慢增加趨勢。

圖5 不同生長期丹參的丹酚酸B產(chǎn)量的變化

3 結(jié)論與討論

本研究中3—11月所有月份采收的丹參中丹參酮ⅡA和丹酚酸B的含量均滿足2010版《中國藥典》的規(guī)定(丹參酮ⅡA含量不得少于0.2%、丹酚酸B含量不得少于3%)。但各個月份采收的丹參樣品其丹參酮ⅡA、丹酚酸B的含量以及根干質(zhì)量均存在明顯差異，這可能是因為同一藥用植物，不同發(fā)育時期的次生代謝產(chǎn)物成分及所占比例處于動態(tài)變化中[10]。這3個種源丹參中丹參酮ⅡA和丹酚酸B的含量均在7月份達(dá)到最高，這可能是由于在此時期，丹參的生長時期比較短，根尚未膨大，有效成分含量占總物質(zhì)量的比例較大引起的[11]；在7—10月份，有效成分含量下降，可能是由于此時期丹參根迅速膨大造成的，有研究顯示丹參根中丹參酮ⅡA的含量與丹參根直徑呈負(fù)相關(guān)，且丹參根中丹酚酸B含量皮部較木質(zhì)部高，此時期丹參的根迅速膨大，根直徑迅速增加，同時根皮部所占體積減少，由此造成此時期丹參2種主要有效成分含量均下降[12]；10—11月有效成分含量大體穩(wěn)定，可能是由于此時期丹參植株地上部分逐漸干枯，根系生長緩慢，使根的生物量和有效成分含量同步增加，結(jié)果顯示其有效成分含量相對穩(wěn)定。

丹參根干質(zhì)量的最大值在11月份，而丹參2種有效成分含量均在7月份達(dá)到最高，丹參有效成分含量最高的時間與丹參產(chǎn)量最高的時間不重疊。

有效成分產(chǎn)量為有效成分含量與樣品產(chǎn)量的乘積，可以綜合反映樣品有效成分含量與樣品產(chǎn)量2個因素[13-15]，且郭巧生的《藥用植物栽培學(xué)》[16]指出，如果藥用植物活性成分的含量高峰期與藥用部位產(chǎn)量不一致時，則以藥用部位活性成分積累總量最大值為適宜采收期，即有效成分產(chǎn)量最大值為適宜采收期。因此用丹參各個時期的有效成分產(chǎn)量作為判斷丹參適宜采收期的標(biāo)準(zhǔn)，更全面、客觀、具有說服力。

不同采收期丹參根的丹參酮ⅡA和丹酚酸B產(chǎn)量均隨采收時間的后移而增加，并在11月達(dá)到最大。此外，在實(shí)際操作中，11月丹參的地上部分已經(jīng)完全干枯，但土地尚未凍結(jié)，比較利于對丹參的采挖。綜合丹參的有效成分產(chǎn)量及在實(shí)際操作中的可行性考慮，11月是河南產(chǎn)丹參的適宜采收時期。但關(guān)于丹參在不同生育期有效成分含量的變化與丹參次生代謝物質(zhì)的代謝途徑間的關(guān)系，還有待于進(jìn)一步研究。

[1] 國家藥典委員會.中國藥典(第一部)[S].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2010：70-71.

[2] 王勺,戴佳琨,李燕,等.影響丹參質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)因素的研究進(jìn)展[J].西北藥學(xué)雜志,2011,26(1):75-77.

[3] 張萌濤,錢亦華,唐安琪.丹參酮ⅡA藥理作用的研究進(jìn)展[J].醫(yī)學(xué)綜述,2010,16(17):2661-2663.

[4] 林超,劉兆國,錢星,等.丹酚酸B在心血管疾病中藥理作用研究進(jìn)展[J].中國野生植物資源,2015,31(4):449-452.

[5] 戚虎昶,楊波,彭震宇,等.不同批次丹參中丹參酮ⅡA和丹酚酸B含量的比較[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊,2009,27(8):1780-1782.

[6] 張珺,藍(lán)建芳,關(guān)亞麗,等.HPLC法測定不同采收期丹參中丹參酮ⅡA及丹酚酸B含量[J].齊魯藥事,2011,30(10):572-573.

[7] 李正國,余立佐.不同采收期山東丹參脂溶性成分含量變化的研究[J].齊魯藥事,2007,2(7):401-402.

[8] 冉蓉,周鳳琴,王婷,等.山東產(chǎn)丹參的丹參酮ⅡA含量比較[J].中藥材,2008,31(3):331-333.

[9] 姜衛(wèi)衛(wèi),張永清,李佳.丹參最佳采收期初探[J].現(xiàn)代中藥研究與初探,2008,22(1):12-14.

[10] 董娟娥.幾種藥用植物次生代謝物含量變化規(guī)律及影響因子研究[D].北京:中國科學(xué)院教育部水土保持與生態(tài)環(huán)境研究中心,2008.

[11] 劉靈娣,謝曉亮,溫春秀,等.丹參有效成分積累規(guī)律研究[J].河北農(nóng)業(yè)科學(xué),2012,16(10):32-34.

[12] 白方坤.丹參生長發(fā)育與有效成分積累的相關(guān)性研究[D].新鄉(xiāng):河南師范大學(xué),2011.

[13] 周麗萍,伊偉貞,祁建軍,等.不同品質(zhì)和生長年限對丹參產(chǎn)量及有效成分積累動態(tài)的影響[J].醫(yī)學(xué)綜述,2012,31(5):8-17.

[14] 朱媛,馮源,祖艷群,等.不同時期UV-B輻射增強(qiáng)對燈盞花生物量和藥用有效成分產(chǎn)量的影響[J].農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報,2010,29(z1):53-58.

[15] 江湖,蘇虎.基因調(diào)控技術(shù)提高藥用植物細(xì)胞有效成分產(chǎn)量的研究進(jìn)展[J].中草藥,2006,37(11):7-8.

[16] 郭巧生.藥用植物栽培學(xué)[M].北京：高等教育出版社,2009:171-172.

Study on Optimal Harvesting Time ofSalvamiltiorrhizaBge. in Henan

ZHAI Junjie1，ZHANG Hongrui1，ZHAO Xinhui2，GAO Zhiming1*

(1.Collaborative Innovation Center of Agri-forestry Industry in Dabieshan Area,College of Agriculture,Henan Agricultural University,Zhengzhou 450002,China； 2.Anhui Jiuzhou Fangyuan Pharmaceutical Co.,Ltd.,Bozhou 236000,China)

To research the optimal harvesting time ofSalvamiltiorrhizaBge.in Henan,the dry weight of roots,the contents of tanshinoneⅡA and salvianolic acid B,and the yield of the above two active ingredients ofSalvamiltiorrhizaBge.were measured and analyzed in Henan in different harvesting time.The results showed that for theSalvamiltiorrhizaBge.originated from Song county,Yichuan county,Fangcheng county,the dry weight of roots were greatest in November,the contents of tanshinoneⅡA and salvianolic acid B were highest in July,and the time when the contents of the two active ingredients reached the maximum did not overlap that the yield reached the maximum.The yield of the two active ingredients were gradually increased from March to November,and reached the maximum in November.The harvesting time had a great influence on the contents of the two active ingredients,dry weight of roots and the yield of the two active ingredients ofSalvamiltiorrhizaBge.in Henan.Comprehensive consideration,with the yield of active ingredients as the standard,November was the most suitable harvesting time forSalvamiltiorrhizaBge.in Henan.

SalviamiltiorrhizaBge.； harvesting time； yield； contents of active ingredients； yield of active ingredients

2015-09-29

國家“三區(qū)”科技人才項目(30800626);河南省教育廳科學(xué)技術(shù)研究重點(diǎn)項目(12B360002)；河南省高等學(xué)校重點(diǎn)科研項目(16A360009)

翟俊杰(1989-)，女，河南周口人，在讀碩士研究生，研究方向：藥用植物栽培。 E-mail:zhaijunjie1127@163.com

*通訊作者：高致明(1960-)，男，河南南陽人，教授，主要從事中藥標(biāo)準(zhǔn)化栽培及植物源農(nóng)藥研究。 E-mail:gaozhiming672@sohu.com

S567.5+3

A

1004-3268(2016)03-0112-04