杜陽(yáng)光 楊晉川 童晶 吳畏畏 張雷 唐瀏英

221006徐州市疾病預(yù)防控制中心（杜陽(yáng)光、楊晉川、童晶、吳畏畏、張雷）；100052北京，中國(guó)疾病預(yù)防控制中心病毒病預(yù)防控制所（唐瀏英）

2010?2015年徐州市流行性感冒病原學(xué)監(jiān)測(cè)分析

杜陽(yáng)光 楊晉川 童晶 吳畏畏 張雷 唐瀏英

221006徐州市疾病預(yù)防控制中心（杜陽(yáng)光、楊晉川、童晶、吳畏畏、張雷）；100052北京，中國(guó)疾病預(yù)防控制中心病毒病預(yù)防控制所（唐瀏英）

目的了解徐州市2010?2015年流行性感冒（流感）流行季節(jié)、毒株構(gòu)成及人群感染情況，為流感防控提供科學(xué)依據(jù)。方法對(duì)國(guó)家級(jí)流感哨點(diǎn)醫(yī)院的流感樣病例標(biāo)本和暴發(fā)疫情標(biāo)本進(jìn)行核酸檢測(cè)和病毒分離鑒定。結(jié)果流感病毒有明顯的季節(jié)流行特征，每年的12月份到第二年3月份均有一次流行高峰，8?9月份也有一次明顯的流行。各年齡組流感樣本陽(yáng)性率存在差異，10歲以下年齡組占病毒陽(yáng)性的64.36%；其次為10?19歲年齡組，占10.69%；最低的為50?59歲年齡組，為3.77%。2010?2015年共采集流感樣病例咽拭子標(biāo)本15 245份，流感陽(yáng)性標(biāo)本1 459份（總陽(yáng)性率為9.57%），其中H3亞型593份（40.64%）、B型627份（占42.97%）和甲型H1N1亞型237份（占16.24%）。分離出細(xì)胞毒株440株，相對(duì)分離率為30.16%（440／1459）。分離出雞胚毒株59株，分離率為13.78%。結(jié)論徐州市2010?2015年間，甲型H3和乙型流感交替流行，偶有甲型H1N1流行，但流行態(tài)勢(shì)不穩(wěn)定。

流行性感冒（流感）是由流感病毒所引起的急性呼吸道傳染病，具有起病急、高度傳染性、傳播速度快等特點(diǎn)［1］，目前尚不能有效控制，也是全球性監(jiān)測(cè)的疾?。?］。徐州市疾病預(yù)防控制中心作為全國(guó)第一批國(guó)家級(jí)流感監(jiān)測(cè)網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室，從2005年即開始開展流感病毒的細(xì)胞分離培養(yǎng)和雞胚分離培養(yǎng)工作，2009年按照國(guó)家流感中心的進(jìn)一步要求又開展了流感病毒的核酸檢測(cè)工作。本文將徐州市2010?2015年流感監(jiān)測(cè)網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室監(jiān)測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析和總結(jié)。

1 材料與方法

1.1 監(jiān)測(cè)點(diǎn)和監(jiān)測(cè)對(duì)象

1.1.1 哨點(diǎn)醫(yī)院監(jiān)測(cè)：徐州市中心醫(yī)院、徐州市第三醫(yī)院的兒科和呼吸內(nèi)科以及徐州市兒童醫(yī)院作為流感監(jiān)測(cè)哨點(diǎn)。監(jiān)測(cè)哨點(diǎn)分別采集周一、周二前來(lái)就診的流感樣病例（influenza?like illness，ILI）咽拭子樣本10?20份送檢，采樣對(duì)象為體溫超過(guò)38℃伴咳嗽或咽痛、發(fā)病3 d以內(nèi)、尚未經(jīng)抗病毒治療的患者。標(biāo)本采集后放入含3?4 ml采樣液的采樣管中，在4℃條件下，48 h內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。未能48 h內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室的，置－70℃或以下保存。

1.1.2 暴發(fā)疫情監(jiān)測(cè)：同一地區(qū)或單位內(nèi)較短時(shí)間內(nèi)出現(xiàn)異常增多的流感樣病例。

1.2 病原學(xué)監(jiān)測(cè)

1.2.1 核酸檢測(cè)：參照《全國(guó)流感監(jiān)測(cè)方案》和《全國(guó)流感監(jiān)測(cè)技術(shù)指南》，將咽拭子標(biāo)本提取核酸，采用Real?time PCR方法進(jìn)行流感病毒核酸的分型定性檢測(cè)。

1.2.2 病毒分離與鑒定：對(duì)核酸檢測(cè)陽(yáng)性的標(biāo)本，選擇狀態(tài)良好的MDCK細(xì)胞進(jìn)行病毒分離，用人O型血進(jìn)行HA試驗(yàn)確定滴度，HA≥1：8的再用國(guó)家流感中心下發(fā)的亞型血清進(jìn)行HI試驗(yàn)。挑取部分細(xì)胞分離陽(yáng)性的原始標(biāo)本進(jìn)行雞胚接種，HA和HI試驗(yàn)同細(xì)胞分離。將分離出的毒株上送到國(guó)家流感中心進(jìn)一步復(fù)核。

2 結(jié)果

2.1 基本情況

2.1.1 季節(jié)流行情況：根據(jù)全國(guó)流感監(jiān)測(cè)技術(shù)指南［中疾控疾發(fā)（2011）381號(hào)］的規(guī)定，每年的4月1日到來(lái)年的3月31日為一個(gè)流感監(jiān)測(cè)年，監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示徐州市區(qū)域內(nèi)流感有明顯的季節(jié)流行特征，除了2011年，每年的12月到來(lái)年3月和8?9月間均有一次明顯的高峰流行，2010年?2015年流行趨勢(shì)見圖1。

圖1 徐州市2010?2015年ILI流行趨勢(shì)圖Fig.1 Epidemic trend of ILI in Xuzhou of 2010?2015

2.1.2 年齡分布：2010?2015年檢出的1 459例核酸陽(yáng)性標(biāo)本，年齡分布在3月與89歲之間；其中10歲以下年齡組的比例最高，為64.36%；其次為10?19歲年齡組，比例為10.69%；最低的為50?59歲年齡組，為3.77%。0?9、10?19、20?29、30?39、40?49、50?59、＞60年齡組的收樣數(shù)分別為7 006、1 144、2 624、1 296、1 136、880和1 058，陽(yáng)性率分別為13.40%、13.63%、3.89%、4.55%、5.72%、6.26%和7.85%。0?9歲和10?19歲的陽(yáng)性率（13.40%和13.63%）顯著高于其他年齡組（P＜0.05），20?29歲的陽(yáng)性率最低，其他年齡組陽(yáng)性率差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

2.2 病原學(xué)檢測(cè)

2.2.1 檢出率：2010?2015年共采集ILI咽拭子標(biāo)本15 245份，流感病毒陽(yáng)性標(biāo)本1 459份，總陽(yáng)性率為9.57%；其中A型832份（占57.03%），B型627份（占42.97%）；其中H3亞型593份（占40.64%），B型627份（占42.97%）和新甲型H1N1亞型237份（占16.24%）；2010?2012年間，B型流感Victoria系和Yamagata系都有，2013?2015年檢出294份B型流感全部為Yamagata系。

分離出細(xì)胞毒株440株，相對(duì)分離率為30.16%（440／1 459）；其中H3占29.35%，Victoria系占35.29%，Yamagata系和H1N1各占17.65%。對(duì)其中440份細(xì)胞分離陽(yáng)性的標(biāo)本進(jìn)行雞胚分離，分離出雞胚毒株59株，分離率為13.78%，其中H1N1占69.49%、Yamagata系占30.51%、H3占3.39%。

2.2.2 毒株優(yōu)勢(shì)變化：2010年Victoria系為優(yōu)勢(shì)株，2011年Victoria系和H3交替流行，2012年H3為優(yōu)勢(shì)株，2013年H1N1為流行優(yōu)勢(shì)株，2014年Yamagata系成為流行優(yōu)勢(shì)株，2015年H3為優(yōu)勢(shì)株。

2.2.3 暴發(fā)疫情：2010?2015年共監(jiān)測(cè)流感暴發(fā)疫情12起，其中Yamagata系引起4起、H3引起3起、H1N1引起2起、待定3起。

3 討論

20世紀(jì)80年代末期開始，流感病毒A1（H1N1）、A3（H3N2）、BV、BY呈循環(huán)出現(xiàn)，并在全球廣泛地傳播，間隔時(shí)間與地區(qū)也頻繁地發(fā)生著變化［3］。從圖1可以看出，徐州市流感每年基本都有兩個(gè)明顯的流行高峰，第一個(gè)大流行峰從12月初到來(lái)年的3月末，第二個(gè)次高峰在8到9月間。第一個(gè)高峰的優(yōu)勢(shì)株先是乙型流感，然后H3慢慢變成優(yōu)勢(shì)株；第二個(gè)高峰基本都是H3引起。2010?2012年，徐州市沒有對(duì)乙型流感進(jìn)行核酸分型，但從細(xì)胞和雞胚分離來(lái)看，這3年Victoria系和Yamagata系都有，以Victoria系占主導(dǎo)。2013?2015年間，核酸檢測(cè)出的乙型流感病毒全是Yamagata系。

兒童是對(duì)呼吸道傳染病最易感的敏感人群［4］，2010年?2015年徐州市ILI流感病毒核酸陽(yáng)性者年齡最小的3月、最大的89歲。從年齡分布來(lái)看，0?9歲和10?19歲的陽(yáng)性率最高，這與徐州市2005?2010年的流行規(guī)律一致［5］，與蘇州市的報(bào)道結(jié)果相近［6］。0?15歲組是呼吸道病原體的主要攜帶人群［7］，可能和該年齡人群大多集中在學(xué)校這類集體場(chǎng)所有關(guān)［8?10］，易于引起流感的傳播流行，且幼兒身體免疫力弱，有癥狀到醫(yī)院就診的比例高。20?29歲陽(yáng)性率最低，可能與該年齡段人群的免疫力高有關(guān)。

從2010?2015年徐州市流感核酸檢測(cè)結(jié)果看，甲型H3和乙型流感占主要部分，分別為40.64%和42.97%；甲型H1N1略少（16.24%），而且流行態(tài)勢(shì)不規(guī)律。檢出了2例H7N9，均出現(xiàn)在2014年年初。分離的毒株中，乙型占37.32%（234／627）、甲型H1N1占32.91%（78／237）、甲型H3則為21.92%（130／593）。H3型流感的雞胚分離，我市除了2012年出現(xiàn)2株，后來(lái)的多年分離不出，這也是當(dāng)前全國(guó)流感病毒雞胚分離面臨的挑戰(zhàn)。

從徐州市流感暴發(fā)疫情來(lái)看，暴發(fā)疫情的出現(xiàn)時(shí)間與病原和當(dāng)年的流行優(yōu)勢(shì)株一致性較高，這對(duì)我們準(zhǔn)確地找出病原，早期、有效地控制暴發(fā)疫情是一個(gè)極大的幫助。

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［2］ 郭元吉，程小文.流行性感冒及其實(shí)驗(yàn)技術(shù)［M］.北京，中國(guó)三峽出版社，1997.

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Etiological analysis of influenza surveillance in Xuzhou from 2010 to 2015

Du Yangguang，Yang Jinchuan，Tong Jing，Wu Weiwei，Zhang Lei，Tang Liuying

Xuzhou Center for Disease Control and Prevention，Xuzhou 221006（Du YG，Yang JC，Tong J，Wu WW，Zhang L）；National institute for Viral Disease Control and Prevention，Chinese Center for Disease Control and Prevention，Beijing100052，China（Tang LY）

Tang Liuying，Email：tangly＠ivdc．chinacdc．cn

ObjectiveTo investigate the prevalence，subtypes and infected population of influenza（flu）viruses in Xuzhou city from 2010 to 2015，providing scientific supports for influenza prevention and control.MethodsMolecular detection and virus isolation were carried out with the throat swab samples collected from influenza?like illness（ILI）cases of national sentinel hospitals and the flu outbreaks.ResultsThe influenza has obvious epidemic characteristics seasonally，two concentrated outbreaks in every December to next March and August to September.The positive rates were different among age groups，the highest was in less than ten years old group（64.36%），then 10?19 years old group（10.69%），and the lowest was in 50?59 years old group（3.77%）.A total of 15 245 swab specimens were collected in which 1 459 strains were detected and identified for influenza viruses with total positive rate of 9.57%.Among these positive samples，593 samples were H3 subtype（40.64%），627 samples were B subtype（42.97%），237 samples were H1N1 subtype（16.24%）.Four hundred and fouty strains were isolated fromMDCK cells the relatively isolate rate was 30.16%（440／1 459），fifty nine strains from embryonated chicken（13.78%）.ConclusionsThe epidemic types of influenza in Xuzhou from 2010 to 2015 were alternation between H3 and B.There were epidemic peaks of H1N1occurred occasionally and unstably.

Influenza；Molecular detection；Virus isolation；Outbreak

唐瀏英，Email：tangly＠ivdc.chinacdc.cn

10.3760／cma.j.issn.1003?9279.2016.06.000

流行性感冒；分子檢測(cè)；病毒分離；暴發(fā)

2016?05?31）