李衛(wèi)東(德州學院農(nóng)學系德州市禽業(yè)工程技術研究中心,山東德州253023)
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柴雞馬立克病的病理學觀察與血清學診斷
李衛(wèi)東
(德州學院農(nóng)學系德州市禽業(yè)工程技術研究中心,山東德州253023)
馬立克病(MD)是雞的一種以淋巴組織增生的病毒性腫瘤病,主要侵害外周神經(jīng)系統(tǒng),以周圍神經(jīng)、性腺、虹膜、內臟器官、肌肉和皮膚的單獨或多發(fā)的單核細胞浸潤為特征,具有高度傳染性,也是一種免疫抑制性疾病。雞馬立克病1907年首先由匈牙利獸醫(yī)病理學家馬立克(Dr.Joseph Marek)報道,英國的Biggs于1961年建議使用“馬立克病”的名字命名,為各國的禽病學家所接受。到目前為止本病呈世界性分布,對養(yǎng)禽業(yè)造成嚴重經(jīng)濟損失。
山東省德州市某柴雞養(yǎng)殖戶飼養(yǎng)的2 800只本地柴雞,于1日齡時接種了MD疫苗,95日齡時出現(xiàn)采食下降、消瘦、萎頓等癥狀,并出現(xiàn)零星死亡,每天死亡1~10只,一直持續(xù)到130日齡,之后逐漸減少,共計死亡221只,死亡率高達7.89%。臨床癥狀可見病雞精神沉郁,羽毛松亂、走路遲緩,食欲減退、貧血、拉綠色或淡黃色稀糞,病雞極度消瘦,最后高度衰竭而死亡。應用了抗生素以及喹諾酮類藥物,治療無效。
將送檢的22只病雞進行外部檢查和剖檢??梢姴‰u精神委頓,雞冠蒼白,羽毛部分脫落,腹瀉、消瘦,肢體麻痹和皮膚結節(jié)腫瘤。剖開腹腔后,肝、脾腫大,達正常的2~3倍左右,表面及切面都有大小不等、粟粒至葡萄大的灰白色腫瘤結節(jié)、質地脆,部分雞的肝臟、脾臟只見到彌漫性腫大而表面沒見白色腫瘤;腺胃腫大,腺胃壁增厚、變硬,黏膜脫落,乳突模糊,有的病例見有黏膜出血、糜爛和潰瘍;腎臟腫大,散在腫瘤結節(jié);心包膜增厚,有的病死雞心臟冠狀脂肪出血;病雞卵巢、輸卵管發(fā)育不良,卵巢有腫瘤結節(jié)。部分雞喉頭、氣管有少量黏液,肺臟大多有水腫實變;肌肉蒼白,部分雞見有肌肉腫瘤結節(jié);腔上囊萎縮。采集肝臟腫瘤結節(jié)切片,H.E.染色,鏡下觀察發(fā)現(xiàn)腫瘤病灶由多形態(tài)淋巴細胞組成。
3.1抗原檢測分別采集22只雞的新生羽毛囊浸泡于5倍量的生理鹽水中,用玻棒將羽髓壓擠,反復凍融3次,6 000 r/min離心10 min,取上清液作為待檢羽髓抗原,用含8%NaCl、pH值7.2 的PBS和1%瓊脂糖制備凝膠板,然后按常規(guī)法打孔,加樣后與馬立克病標準陽性血清(標準抗原和陽性血清由中國農(nóng)業(yè)科學院哈爾濱獸醫(yī)研究所制備)進行瓊脂擴散試驗,濕盒中37℃孵育48 h觀察結果。待檢的22份羽髓抗原中有16份與馬立克病標準陽性血清孔之間出現(xiàn)清晰致密的沉淀線,陽性率為72.73%;
3.2抗體檢測分別采集8只病雞的血清作為待檢抗體樣本,與馬立克病標準抗原進行瓊脂擴散試驗,濕盒中37℃孵育48 h觀察結果。8份血清樣本與馬立克病標準抗原孔間均出現(xiàn)清晰致密的沉淀線。
22只病雞,每只雞以無菌操作取雞肝、脾、血液等病料接種于鮮血瓊脂斜面,經(jīng)37℃48 h培養(yǎng),均無細菌生長。
據(jù)流行特點、發(fā)病年齡、零星死亡、癥狀、剖檢變化以及血清學試驗,診斷為雞馬立克病。
5.1雞馬立克病根據(jù)臨床癥狀和病變部位可分為即神經(jīng)型、皮膚型、內臟型和眼型四種類型。此次發(fā)病的柴雞群,確診為內臟型馬立克病。
5.2本次發(fā)病柴雞的血清學檢驗馬立克病抗原抗體均為陽性,病理剖檢學觀察發(fā)現(xiàn)肌肉中存在腫瘤,腔上囊萎縮,這些變化與淋巴白血病相鑒別。
5.3發(fā)病柴雞群1日齡接種了馬立克病疫苗,但仍在3月齡后發(fā)病,證明發(fā)生了免疫失敗。凍干疫苗產(chǎn)生免疫力的時間較晚,雛雞感染馬立克病毒后,幾個月后才表現(xiàn)出癥狀,并引起死亡,馬立克病疫苗對雞的保護只是一種干擾作用,只能干擾MDV對機體的作用,而不能防止周圍環(huán)境的病毒進入體內,也不能阻止體內病毒排出體外向周圍擴散,此時,當雞群受到馬立克病病毒入侵時,就很容易造成免疫失敗,引發(fā)雞群感染發(fā)病。MDV能引起免疫抑制作用,導致雞群更高的腫瘤發(fā)生率和較差的生產(chǎn)性能。
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中圖分類號:S858.31
文獻標志碼:B
文章編號:0529- 6005(2016)03- 0058- 01
收稿日期:2014-08-22
作者簡介:李衛(wèi)東(1964-),男,副教授,本科,從事動物醫(yī)學教學,E-mail:dwwswx@163.com