毛燕青

[作者單位]　215006 江蘇 蘇州，蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院特需病區(qū)

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TTF-1蛋白在非小細胞肺癌中的表達及臨床意義

毛燕青

[作者單位]215006 江蘇 蘇州，蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院特需病區(qū)

[摘要]目的探討甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子-1(TTF-1)蛋白在非小細胞肺癌(NSCLC)中的表達特點及其與患者臨床病理特征的關(guān)系。方法選取167例本院胸外科術(shù)后病理證實為NSCLC患者的肺癌組織標本，采用免疫組織化學(xué)法檢測本組病理標本中TTF-1蛋白的表達情況，并分析其表達情況與NSCLC患者的臨床病理特征的關(guān)系。結(jié)果167例組織標本中TTF-1蛋白陽性表達95例(56.89%)。TTF-1蛋白在TNM分期Ⅲ+Ⅳ期、發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腺癌患者中呈現(xiàn)高表達，其陽性表達率分別為70.73%、75.36%、83.00%，顯著高于TNM分期Ⅰ+Ⅱ期(43.53%)、未發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(43.88%)、鱗癌患者(17.91%)，且差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；TTF-1蛋白表達與NSCLC患者的年齡、性別、分化程度的關(guān)系無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論TTF-1蛋白在非小細胞肺癌組織中陽性表達率較高，并且與TNM分期、病理類型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有一定的關(guān)系。

[關(guān)鍵詞]甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子-1蛋白；癌,非小細胞肺；表達特點；臨床病理特征

近年來肺癌仍然是惡性腫瘤死亡的主要原因之一，其中非小細胞肺癌(NSCLC)為較為常見的病理類型，相關(guān)臨床病例報道分析表明NSCLC占肺上皮惡性來源腫瘤總數(shù)的70%~80%[1-4]。隨著新型細胞毒性藥物以及分支靶向抗腫瘤藥物的問世，越來越多的腫瘤基礎(chǔ)研究關(guān)注到了基于病理亞型以及相關(guān)高危風(fēng)險基因狀態(tài)的研究中。部分學(xué)者發(fā)現(xiàn)，甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子-1(TTF-1)作為NKχ2家族的一項轉(zhuǎn)錄因子，調(diào)控多種腫瘤相關(guān)基因的表達，多表達于肺癌以及甲狀腺惡性腫瘤中[5-6]，但其與肺癌或者甲狀腺惡性腫瘤臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等臨床因素的關(guān)系研究較少，本研究重在探討TTF-1蛋白在NSCLC中的表達特點及其與NSCLC患者的臨床病理特征的關(guān)系，具體研究如下。

1資料與方法

1.1一般資料選取2011年7月—2014年7月本院胸外科術(shù)后病理檢查證實為NSCLC患者的肺癌組織標本167例作為研究對象。年齡43～78(62.9±11.4)歲，其中男98例、女69例；病理類型：鱗癌67例,腺癌100例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移69例,未發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移98例；分化程度：高分化7例,中分化62例,低分化98例；國際抗癌聯(lián)盟TNM分期：Ⅰ期44例,Ⅱ期41例,Ⅲ期66例,Ⅳ期16例。排除標準：轉(zhuǎn)移性肺癌患者；患者的臨床資料、相關(guān)個人信息、檢查資料不完整者。

1.2實驗方法手術(shù)切除的相關(guān)標本，采用10%中性甲醛固定，石蠟包埋，采用免疫組化法測定蛋白表達。采用熱抗原修復(fù)(1 mmol/L，pH=8.0的EDTA中高壓鍋加熱)，采用甲狀腺瘤體作為陽性對照，PBS代替一抗作為陰性對照，單克隆抗體TTF-1試劑購自南京凱基生物科技有限公司。

1.3免疫組化讀片標準[7]TTF-1蛋白主要定位于細胞核中，SP染色結(jié)果陽性表達為棕黃色顆粒，選取10個高倍鏡視野進行觀察，陽性細胞率<5%為0分，5%～25%為1分，26%～50%為2分，51%～75%為3分，>75%為4分。著色強度：0分著色陰性；1分淺黃色，弱陽性；2分黃色，陽性；3分棕黃色，強陽性。取二者計分的乘積：0分為陰性、1～2分為(+)、3～4分為(++)、>5分為(+++)。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法數(shù)據(jù)分析及統(tǒng)計在專業(yè)軟件SAS 9.0軟件包中處理，計數(shù)資料采用百分率(%)表示，比較采用χ2檢驗。α=0.05為檢驗水準。

2結(jié)果

2.1TTF-1蛋白的陽性表達情況167例NSCLC組織標本，其中TTF-1蛋白陽性表達標本95例(56.89%)，陰性表達標本72例(43.11%)，TTF-1蛋白陽性表達在不同年齡、性別、TNM分期、病理類型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分化程度中的表達情況見表1。TTF-1蛋白在NSCLC組織中的陽性表達，可見細胞核中棕黃色顆粒分布比較密集，見圖1。TTF-1蛋白在NSCLC組織中陰性表達，幾乎未見黃色或棕黃色顆粒于細胞核中，見圖2。

表1　甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子-1蛋白的表達情況表

圖1　甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子-1蛋白在非小細胞肺癌組織中陽性表達(SP ×100)圖2　甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子-1蛋白在非小細胞肺癌組織中陰性表達(SP ×100)

2.2TTF-1蛋白的陽性表達與NSCLC患者的臨床病理特征間的關(guān)系TTF-1蛋白在Ⅲ期+Ⅳ期、發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腺癌患者中呈現(xiàn)高表達，其陽性表達率分別為70.73%、75.36%、83.00%，顯著高于Ⅰ期+Ⅱ期(43.53%)、未發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(43.88%)、鱗癌患者(17.91%)，且差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.001)；TTF-1蛋白表達與NSCLC患者的年齡、性別、分化程度的關(guān)系不顯著(P>0.05)。見表2。

表2　甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子-1蛋白的表達與非小細胞肺癌患者的臨床病理特征間的關(guān)系

3討論

腫瘤的分期以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是影響惡性腫瘤患者生存時間的主要因素，現(xiàn)階段臨床上對于惡性腫瘤的診治仍然以腫瘤的臨床分期為主要依據(jù)，進而決定患者能否接受根治性手術(shù)治療。然而，部分臨床工作者發(fā)現(xiàn)，即使臨床分期相同的同一病理亞型的NSCLC，在采用標準化治療方案后其臨床遠期療效往往不一，存在較為顯著的差異，王可兵等[8]考慮除了臨床分期以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等臨床因素，腫瘤發(fā)病基因水平的因素同樣參與到了患者術(shù)后生存時間的差異性顯現(xiàn)中。近年來隨著新型靶向治療藥物以及高度特異性細胞毒性等抗腫瘤藥物的問世，腫瘤的相關(guān)治療越來越注重腫瘤發(fā)病驅(qū)動基因水平的因素。同時，相關(guān)腫瘤標志物的檢測能顯著提高對患者治療后遠期臨床療效的預(yù)測水平，進而有利于早期干預(yù)、合理采取對策，改善臨床預(yù)后。探討TTF-1是核轉(zhuǎn)錄蛋白NKχ2基因家族成員之一，由染色體14q13的單一位點基因所編碼產(chǎn)生，參與多種基因的表達調(diào)控，相關(guān)組織表達主要見于胚胎以及成熟的肺部組織上皮細胞內(nèi)，同時部分學(xué)者發(fā)現(xiàn)在甲狀腺、前腦以及胎盤形成的過程中存在較高水平的TTF-1表達[9]，本研究重在分析TTF-1蛋白在NSCLC中的表達特點及其與臨床病理特征的關(guān)系。

本研究通過選取167例本院胸外科術(shù)后病理檢查證實為NSCLC患者的病理組織標本，采用免疫組化測定相關(guān)蛋白的表達，結(jié)果發(fā)現(xiàn)TTF-1與患者的年齡、性別、分化程度無明顯關(guān)聯(lián)，但隨著年齡的增加或?qū)τ诓糠帜行曰颊?，TTF-1的表達呈現(xiàn)出了一定增強的趨勢，較為明顯的是TTF-1與病理類型具有一定的關(guān)系。本研究發(fā)現(xiàn)TTF-1在腺癌患者中表達顯著高于其他病理類型組織，其陽性表達率可達85%左右，Ma等[10]研究后也發(fā)現(xiàn)，TTF-1在不同病理類型中存在較大的差異，通過分析87例相關(guān)肺部上皮性惡性腫瘤的臨床病理類型及免疫組化數(shù)據(jù)后發(fā)現(xiàn)，TTF-1在肺腺癌中的陽性表達率達89.9%，顯著高于肺鱗癌2.6%的陽性表達水平，認為TTF-1為肺腺癌的特異性指標，可以作為肺腺癌的參考指標[11]。 Yoshimoto等[12]學(xué)者認為，TTF-1可能與肺癌患者的臨床特征具有一定的顯著性關(guān)聯(lián)，本研究通過分析TTF-1蛋白的陽性表達與患者的臨床病理特征間的關(guān)系后發(fā)現(xiàn)，TTF-1蛋白在TNM分期Ⅲ期+Ⅳ期、發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者中的陽性表達水平顯著升高。Miskovic等[13-14]通過研究24例小樣本相關(guān)臨床資料后發(fā)現(xiàn)，TIF-1的表達與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移存在一定的相關(guān)關(guān)系。李程輝等[15]學(xué)者也通過分析156例相關(guān)臨床資料后發(fā)現(xiàn)，TIF-1在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者中的陽性表達水平顯著升高，筆者通過分析近年來國內(nèi)外相關(guān)文獻后發(fā)現(xiàn)，在肺小細胞型肺癌中，TTF-1可能通過促進th1/th2平衡的打破、IL-6、IL-10的異常活化[16-17]，并上調(diào)CCR5受體，進而促進淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移[18-19]，但本次臨床研究并未發(fā)現(xiàn)TTF-1的表達與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)量存在關(guān)聯(lián)，提示后續(xù)臨床研究可以關(guān)注此問題。由于免疫組化方法的差異、樣本量較小、患者的異質(zhì)性等因素的存在，TIF-1的表達與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移或者臨床分期的關(guān)系需要進一步大樣本的研究。

綜上所述，TTF-1在NSCLC患者中陽性表達率較高，特別是在肺腺癌中的表達顯著高于其他病理類型肺癌，提示其可作為肺腺癌診斷的潛在血清學(xué)指標，而TIF-1與臨床分期以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有較為顯著關(guān)聯(lián)，發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移或者臨床分期Ⅲ期或者Ⅳ期的肺癌患者TTF-1表達顯著上升，但相關(guān)研究需要大樣本的進一步證實。

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(收稿時間：2015-09-18修回時間：2015-10-22)

臨床研究

·論著·

Expression and Clinical Significance of TTF-1 Protein in Non-small-cell Lung Carcinoma

MAO Yan-qing (Department of Special Wards, the First Hospital Affiliated to Soochow University, Suzhou, Jiangsu 215006, China)

[Abstract]ObjectiveTo investigate the expression characteristics of thyroid transcription factor-1 (TTF-1) in non-small-cell lung carcinoma (NSCLC) and its relationship with the clinicopathological features of the patients. MethodsSpecimens of 167 patients with NSCLC confirmed by pathological results after thoracic surgery were collected, and immunohistochemical method was used to detect TTF-1 protein expressions, and then its relationship with the clinicopathological features of the patients with NSCLC was analyzed. ResultsAmong the 167 specimens, there were 95 cases (56.89%) of positive expression TTF-1. TTF-1 protein was highly expressed in TNM staging (stage III + IV), lymph node metastasis and adenocarcinoma patients, and the positive expression rates were 70.73%, 75.36% and 83.00% respectively, and positive expression rates were 43.53% in TNM staging (stage I + II), 43.88% in non-lymph node metastasis and 17.91% in squamous cell carcinoma patients, and the differences were statistically significant (P<0.01). TTF-1 protein expressions in patients with NSCLC showed no significant relations with age, gender, degree of differentiation (P>0.05). ConclusionThe positive expression of TTF-1 protein in non-small-cell lung carcinoma tissues is high, and it has certain relationship with TNM staging, pathological type and lymph node metastasis.

[Key words]Thyroid transcription factor-1 protein; Carcinoma, non-small-cell lung; Expression feature; Clinicopathological features

[DOI]10.3969/j.issn.2095-140X.2015.12.014

[文獻標志碼][中國圖書資料分類號]R730.26A

[文章編號]2095-140X(2015)12-0063-04