張麗芳

(中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院 北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)實驗動物研究所，　北京 100021)

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關(guān)于國家標準中實驗大、小鼠細菌檢測項目修改的建議

張麗芳

(中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院 北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)實驗動物研究所，北京 100021)

【摘要】本文在分析國外實驗動物細菌質(zhì)量監(jiān)測標準的基礎(chǔ)上,對我國國家標準中實驗大、小鼠細菌檢測項目的修改提出了建議。

【關(guān)鍵詞】細菌學(xué);檢測;大鼠;小鼠

實驗動物細菌質(zhì)量控制標準是實驗動物管理中極其重要的一環(huán)，直接關(guān)系到動物實驗的準確性、實驗動物福利和工作人員的健康,同時，它也代表著我國實驗動物科學(xué)發(fā)展的水平。因此在制定時也應(yīng)考慮到國際上其他國家標準制定的內(nèi)容， 盡可能與世界各國標準相一致，使我國標準進到國際水平。

國外一般不制定實驗動物質(zhì)量以及相關(guān)支撐條件的國家標準，對實驗動物微生物質(zhì)量控制也沒有統(tǒng)一標準，但他們的核心檢測病原是一致的[1-6]。本文比較了國外各大實驗動物檢測機構(gòu)設(shè)定的細菌檢測項目，對我國國家標準中實驗大、小鼠細菌檢測項目的設(shè)定提出以下建議：

1去除假結(jié)核耶爾森菌(Yersiniapseudotuberculosis)和小腸結(jié)腸炎耶爾森菌(Yersiniaenterocolitica)檢測項目

假結(jié)核耶爾森菌廣泛分布于各種水體及土壤等環(huán)境中，宿主非常廣泛，許多家畜或野生動物包括冷血脊椎動物等都具有不同程度的致病力。自然感染途徑主要是消化道，人類感染主要是通過接觸被感染動物糞便污染的食物和水，以及與動物的直接接觸造成的。對人類可致急性腸系膜淋巴結(jié)炎、腸炎、結(jié)節(jié)性紅斑和敗血癥等4種臨床表現(xiàn)。實驗動物中對豚鼠可引起自然流行性疾病，是豚鼠重要的致病菌[7]。

小腸結(jié)腸炎耶爾森菌幾乎遍布世界各地，具有廣泛的宿主性。主要通過消化道傳播。人類可致嬰幼兒腹瀉，成人主要引起回腸炎和結(jié)節(jié)性紅斑病，甚至敗血癥死亡。對家畜一般無致病性，但可引起綿羊、山羊及豬的腹瀉，還可致綿羊流產(chǎn)。扁桃體帶菌豬是人類感染本菌的主要傳染源和宿主[7]。

我國國家標準病原菌檢測項目的制定主要基于以下三個方面的考慮：(1)排除人獸共患病病原和動物烈性傳染病病原。(2)對動物危害大和科學(xué)研究干擾大的病原。(3)條件致病菌。

當評價某一病原菌的風(fēng)險時，歷史數(shù)據(jù)和文獻是主要的參考資料。上述兩菌是重要的人畜共患菌，但文獻中未見實驗大、小鼠感染這兩種細菌并導(dǎo)致臨床癥狀的報道，也未有實驗研究影響及宿主的代謝、 免疫或生理過程影響的報道。

國外實驗動物檢測機構(gòu)Charles River Laboratory，Taconic，The Jackson Laboratory，歐洲實驗動物科學(xué)協(xié)會聯(lián)合會 (FELASA)，Harlan Laboratories，日本實驗動物中央研究所等大、小鼠細菌檢測項目中均不含有假結(jié)核耶爾森菌(Yersiniapseudotuberculosis)和小腸結(jié)腸炎耶爾森菌(Yesiniaenterocolitica)這兩種細菌[2-6]，故建議去除假結(jié)核耶爾森菌(Yersiniapseudotuberculosis)和小腸結(jié)腸炎耶爾森菌(Yesiniaenterocolitica)檢測項目。

2去除大腸埃希菌 O115 a,C,K(B)EscherichiacoliO115 a,C，K(B) 檢測項目。

1960年代和1970年代相繼在美國、日本暴發(fā)流行以小鼠降結(jié)腸嚴重增厚為病理特征的傳染性鼠結(jié)腸增生癥，造成乳鼠極高死亡率[8]，日本將分離到的病原命名為大腸埃希菌O115 a,C,K(B)(EscherichiacoliO115 a,C，K(B),而美國將分離到的病原命名為弗氏檸檬酸桿菌4280(Citrobacterfreundii4280)。檸檬酸桿菌屬的成員原來分別包含在沙門氏菌屬和埃希氏菌屬中，1954年開始列為獨立的檸檬酸桿菌屬,1993年Brenner等應(yīng)用 DNA 雜交技術(shù)對本菌屬各種代表株重新進行分類，將此病原定義為嚙齒檸檬酸桿菌(Citrobacterrodentium，C.rodentium)，分類學(xué)上屬于腸桿菌科(Enterobacteriaceae)，檸檬酸桿菌屬(Citrobacter)[9,10]。中國國家標準細菌檢測項目大腸埃希菌 O115 a,C,K(B)EscherichiacoliO115 a,C,K(B)一直沿用日本舊稱，而日本已將此稱呼棄用，改為嚙齒檸檬酸桿菌(Citrobacterrodentium，C.rodentium)，國外各大檢測實驗機構(gòu)也用嚙齒類檸檬酸桿菌 (Citrobaeterrodetium)替代。

嚙齒類檸檬酸桿菌 (Citrobaeterrodetium)，是檸檬酸桿菌屬中唯一分離自小鼠的基因種。該菌的自然宿主為小鼠，通過糞口途徑傳播。多對2～3周齡乳鼠致病,特征性病變是結(jié)腸增生,其它臨床癥狀不典型，如腹瀉、體重下降、生長遲緩等。對研究影響的報道很少,僅限于感染小鼠大腸粘膜上皮細胞動力學(xué)改變,對1,2-二甲肼的易感性增加,腫瘤誘導(dǎo)的潛伏期縮短,加速1,2-二甲肼的致癌作用?；铙w動物檢測兼顧到到血清抗體的檢測,送檢動物多為6周齡以上，且近年來國內(nèi)外均未見小鼠感染報道,故建議常規(guī)檢測中可以去除大腸埃希菌 O115 a,C,K(B) Escherichia coli O115 a,C;K(B)即嚙齒檸檬酸桿菌(Citrobacterrodentium，C.rodentium)檢測項目。

參考文獻：

[1]GB 14922.2-2011 中華人民共和國國家標準 實驗動物 微生物學(xué)等級及監(jiān)測 [S]. 中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局, 2011.

[2]http://www.criver.com/customer-service/resources/infectious[OL].

[3]https://www.jax.org/jax-mice-and-services[OL].

[4]http://www.envigo.com/resources/health-monitoring-reports/envigo-66-rodent-health-procedures/[OL].

[5]http://www.taconic.com/quality/health-testing-program/health-standards/[OL].

[6]M?hler M (Convenor), M Berard, R Feinstein, et al. Recommendations for the health monitoring of mouse, rat, hamster, guinea pig and rabbit colonies in breeding and experimental units. [J]. Lab Anim, 2014, 48(3): 178-192.

[7]陸承平. 獸醫(yī)微生物學(xué)(第4版) [M]. 北京：中國農(nóng)業(yè)出版社, 2007: 113-120.

[8]Brthold SW, Coleman GL, Blatt PN, et al. The etiology of transmissible murine colonic hyperplasia [J]. Lab Anim Sci，1976, 26: 889-894.

[9]趙克義, 闞方奇, 李景學(xué), 等. 檸檬酸桿菌的分類近況 [J]. 中國衛(wèi)生檢驗雜志, 2001, 11(2): 252-253.

[10]Schauer DB, Zabel BA, Pedraza IF, et al. Genetic and biochemical characterization ofCitrobacterrodentiumsp. nov [J]. J Clin Microbiol, 1995, 33(8): 2064-2068.

〔修回日期〕2015-12-25

Suggestion for modification of bacteriological quality monitoring of laboratory mice and rats in China

ZHANG Li-fang

(Institute of Laboratory Animal Science, Chinese Academy of Medical Sciences (CAMS) & Peking Union Medical Collage (PUMC), Beijing 100021, China)

【Abstract】Based on the analysis of the standards of bacteriological quality monitoring of laboratory animals in developed countries, this paper provides suggestion for modification of bacteriological quality monitoring of laboratory mice and rats in China.

【Key words】Quality monitoring; Bacteriology; Laboratory mice; Laboratory rats

doi:10.3969.j.issn.1671-7856. 2016.02.008

【中圖分類號】R-33

【文獻標識碼】A

【文章編號】1671-7856(2016) 02-0040-02

[通訊作者]張麗芳，女，碩士，研究方向：實驗動物細菌學(xué). E-mail: zhanglifanglhl@aliyun.com。

“實驗動物國家標準論壇”專題