賈雙雙，徐坤

(1.安徽科技學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院，安徽 鳳陽(yáng) 233100；2.山東農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝科學(xué)與工程學(xué)院，山東 泰安 271018)

南方根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)侵染對(duì)不同抗性番茄砧木滲調(diào)物質(zhì)及羥脯氨酸含量的比較

賈雙雙1,2，徐坤2*

(1.安徽科技學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院，安徽 鳳陽(yáng) 233100；2.山東農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝科學(xué)與工程學(xué)院，山東 泰安 271018)

摘要：為探討番茄砧木對(duì)南方根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)的抗性生理機(jī)制，以高感砧木Ls-89與高抗砧木坂砧2號(hào)為試材，采用盆栽人工接種線(xiàn)蟲(chóng)二齡幼蟲(chóng)法，研究了南方根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)侵染對(duì)不同抗性番茄砧木幼苗滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)及細(xì)胞壁羥脯氨酸含量的影響。研究表明，未接種南方根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)的番茄砧木幼苗，其根系與葉片可溶性糖、可溶性蛋白、脯氨酸等滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)與細(xì)胞壁羥脯氨酸含量變化并未因品種抗性不同而有顯著差異(P>0.05)；接種南方根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)后，滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)含量與細(xì)胞壁羥脯氨酸含量變化規(guī)律基本一致，均呈周期性升高，且坂砧2號(hào)升幅顯著高于Ls-89(P<0.05)。據(jù)此認(rèn)為，可溶性糖、可溶性蛋白、脯氨酸、細(xì)胞壁羥脯氨酸等物質(zhì)的含量變化均與番茄砧木幼苗對(duì)南方根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)的抗性密切相關(guān)，可作為評(píng)判植株抗性的綜合指標(biāo)。

關(guān)鍵詞：番茄；砧木幼苗；南方根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)；滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)；細(xì)胞壁羥脯氨酸

DOI：10.11686/cyxb2014333

Jia S S, Xu K. The effects ofMeloidogyneincognitainfection on osmolyte and hydroxyproline levels in tomato rootstock seedlings with different resistance. Acta Prataculturae Sinica, 2015, 24(7): 123-130.

賈雙雙， 徐坤. 南方根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)侵染對(duì)不同抗性番茄砧木滲調(diào)物質(zhì)及羥脯氨酸含量的比較. 草業(yè)學(xué)報(bào), 2015, 24(7): 123-130.

http://cyxb.lzu.edu.cn

收稿日期：2014-08-20；改回日期：2014-12-10

基金項(xiàng)目：安徽省教育廳項(xiàng)目(KJ2013B078)，安徽科技學(xué)院引進(jìn)人才項(xiàng)目(ZRC2013351),山東省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)創(chuàng)新體系(SDAIT-02-022-05)和山東省農(nóng)業(yè)重大應(yīng)用技術(shù)創(chuàng)新項(xiàng)目(31648)資助。

作者簡(jiǎn)介：賈雙雙(1984-)，女，河北趙縣人，講師，博士。E-mail：jiashuang84@163.com

通訊作者*Corresponding author. E-mail：xukun@sdau.edu.cn

Abstract:In order to clarify the physiological resistance mechanism of tomato rootstock to Meloidogyne incognita, both a highly susceptible rootstock variety Ls-89 and a highly resistant rootstock variety Banzhen No.2 were planted in pots and inoculated with second instar larvae to study the effects of M. incognita infection on osmolyte levels and cell wall hydroxyproline contents of these differentially resistant tomato rootstock varieties. Without M. incognita inoculation, there was no significant difference (P>0.05) between seedlings of the two varieties in concentrations of osmoregulation substances, including soluble sugar, soluble protein, proline and cell wall hydroxyproline. After inoculation, the concentrations of osmoregulation substances and cell wall hydroxyproline contents were increased in roots and leaves in seedlings of the two varieties, with the responses in Banzhen No.2 being significantly higher (P<0.05) than those of Ls-89. These results indicate that changes in soluble sugar, soluble protein, proline and cell wall hydroxyproline concentrations are closely associated with the resistance of tomato rootstock seedlings to M. incognita, and could be used as general indices of plant resistance elevation.

The effects ofMeloidogyneincognitainfection on osmolyte and hydroxyproline levels in tomato rootstock seedlings with different resistance

JIA Shuang-Shuang1,2, XU Kun2*

1.CollegeofLifeScience,AnhuiScienceandTechnologyUniversity,Fengyang233100,China; 2.CollegeofHorticultureScienceandEngineering,ShandongAgriculturalUniversity,Tai’an271018,China

Key words: tomato (Lycopersiconesculentum); rootstock seedlings;Meloidogyneincognita; osmoregulation substance; cell wall hydroxyproline

植物寄生線(xiàn)蟲(chóng)病是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的重要病害之一，已在世界范圍內(nèi)引發(fā)巨大經(jīng)濟(jì)損失[1-2]，因此，前人對(duì)植物線(xiàn)蟲(chóng)病的防治方法[3-4]、抗性機(jī)制[5]等進(jìn)行了較多的研究。前人研究表明，植物寄生線(xiàn)蟲(chóng)病不僅顯著降低根系吸收能力[6]，影響根系活力[7-8]，還顯著降低葉片葉綠素含量[9-10]。談家金等[11]研究表明，松材線(xiàn)蟲(chóng)侵染使黑松(Pinusthunbergii)幼苗莖部可溶性糖與可溶性蛋白含量降低，并認(rèn)為可溶性蛋白含量可用于病害的早期診斷；而郝玉金等[12]研究發(fā)現(xiàn)，山定子(Malusbaccata)接種南京毛刺線(xiàn)蟲(chóng)后，根尖游離脯氨酸與還原糖含量呈現(xiàn)不同程度的增加，而總糖含量卻降低。

富含羥脯氨酸糖蛋白(hydroxyproline-rich glycoprotein，HRGP)是高等植物細(xì)胞壁中特有的一種結(jié)構(gòu)蛋白，廣泛存在于植物中。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，它與植物的抗病性存在密切關(guān)系[13]。其羥脯氨酸(Hyp)含量高是這類(lèi)糖蛋白的特點(diǎn)之一，且細(xì)胞壁中HRGP含量與Hyp含量呈正相關(guān)[14]，因此，對(duì)羥脯氨酸(Hyp)含量的測(cè)定，在某種程度上代表了HRGP的含量。翟衡等[15]研究發(fā)現(xiàn)，不同抗性蘋(píng)果砧木接種南京毛刺線(xiàn)蟲(chóng)后，根尖組織細(xì)胞壁中Hyp含量均有不同程度的增加，且抗性砧木的增加幅度均大于感病砧木，并認(rèn)為Hyp含量的增加可能是蘋(píng)果砧木抵御南京毛刺線(xiàn)蟲(chóng)的一種防御機(jī)制。趙小釩和弭忠祥[16]也發(fā)現(xiàn)，不同抗性大豆(Glycinemax)品種感染灰斑病后，抗病品種葉片細(xì)胞壁中Hyp無(wú)論是積累含量還是維持時(shí)間均顯著高于感病品種，并認(rèn)為Hyp含量的積累與大豆對(duì)灰斑病的抗性密切相關(guān)。

番茄(Lycopersiconesculentum)是我國(guó)設(shè)施栽培面積最大的蔬菜之一，因其復(fù)種指數(shù)高、連作重茬栽培較為普遍，致使番茄根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)病頻發(fā)[17-18]。Lopez-Perez等[19]、Rivard和Louws[20]指出，采用抗性品種和利用抗性砧木嫁接栽培將成為最具潛力的防控作物根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)病的有效方法，但不同抗性番茄砧木對(duì)南方根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)的反應(yīng)不同，而且關(guān)于番茄砧木抗南方根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)的生理機(jī)制研究甚少。泰勒和薩塞[21]指出，在適宜的環(huán)境條件下，根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)的生活周期為30 d左右。由于植物苗期是對(duì)逆境脅迫最為敏感的時(shí)期，在植物生長(zhǎng)早期進(jìn)行抗性篩選鑒定較為容易[22]，因此，本試驗(yàn)在前文[23]研究基礎(chǔ)上，選用2個(gè)抗南方根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)水平顯著不同的番茄砧木為試材，研究南方根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)一個(gè)侵染周期內(nèi)，幼苗根系與葉片中可溶性糖、可溶性蛋白、脯氨酸等滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)及細(xì)胞壁Hyp的變化動(dòng)態(tài)，旨在探討滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)及細(xì)胞壁Hyp積累與番茄砧木幼苗抗南方根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)的關(guān)系，為進(jìn)一步研究番茄砧木抗線(xiàn)蟲(chóng)生理機(jī)制及抗性砧木的篩選鑒定提供理論參考。

1材料與方法

1.1　試驗(yàn)材料

試驗(yàn)于2011-2012年在山東農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝實(shí)驗(yàn)站進(jìn)行，供試番茄砧木為抗南方根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)水平顯著不同的2個(gè)品種Ls-89(高感)、坂砧2號(hào)(高抗)[23]。種子浸種催芽后，播于50孔穴盤(pán)內(nèi)，播后置日光溫室培養(yǎng)。幼苗長(zhǎng)至3～4片真葉時(shí)，移植于直徑25 cm、高18 cm的塑料盆中，每盆2株，每品種栽植180盆，每30盆為一個(gè)處理小區(qū)，其中3個(gè)小區(qū)接種南方根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)二齡幼蟲(chóng)，另3個(gè)小區(qū)為對(duì)照，隨機(jī)區(qū)組排列，重復(fù)3次。盆內(nèi)栽培基質(zhì)(砂∶土=1∶2)經(jīng)160℃高溫殺菌2 h。

1.2　接種取樣

移栽番茄砧木幼苗緩苗后，在幼苗根圍打孔(5孔/盆)，將南方根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)二齡幼蟲(chóng)按5000條/盆注入，對(duì)照注入等量清水，然后用土掩埋。

分別于接種南方根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)后第0，1，3，7，14，21，28，35 天取樣，每次每小區(qū)隨機(jī)取3株，將根系及葉片用流水洗凈，擦去表面水分后，投入液氮中，帶回實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行相應(yīng)生理指標(biāo)的測(cè)定，同時(shí)調(diào)查計(jì)算根結(jié)指數(shù)和病情指數(shù)。

1.3　測(cè)定指標(biāo)和方法

1.3.1抗病指標(biāo)的測(cè)定參照毛愛(ài)軍等[24]制定的標(biāo)準(zhǔn)調(diào)查番茄幼苗發(fā)病情況，并計(jì)算病情指數(shù)(disease index，DI)。0級(jí)：植株根部無(wú)根瘤；1級(jí)：植株根部形成1~2個(gè)根瘤；2級(jí)：植株根部形成3~10個(gè)根瘤；3級(jí)：植株根部形成11~30個(gè)根瘤；4級(jí)：植株根部形成31~100個(gè)根瘤；5級(jí)：植株根部形成根瘤數(shù)超過(guò)100個(gè)。

DI=∑(各病級(jí)植株數(shù)×該級(jí)數(shù))/(調(diào)查總株數(shù)×最重病級(jí)數(shù)值)×100

采用Boiteux和Charchar[25]的方法計(jì)算根結(jié)指數(shù)(gall index，GI)，GI=單株根結(jié)數(shù)/單株根鮮重(g)。

1.3.2可溶性糖含量的測(cè)定按照趙世杰等[26]的方法進(jìn)行，采用蒽酮比色法進(jìn)行提取和測(cè)定，于630 nm下比色。

1.3.3可溶性蛋白含量的測(cè)定按照趙世杰等[26]的方法進(jìn)行，采用考馬斯亮藍(lán)法進(jìn)行提取和測(cè)定，于595 nm下比色。

1.3.4脯氨酸(Pro)含量的測(cè)定按照趙世杰等[26]的方法進(jìn)行，采用磺基水楊酸—酸性茚三酮法進(jìn)行提取和測(cè)定，于520 nm下比色。

1.3.5細(xì)胞壁羥脯氨酸(Hyp)含量的測(cè)定按照馮潔等[27]的方法制備細(xì)胞壁干樣，按照Shailasree等[28]的方法測(cè)定細(xì)胞壁Hyp含量。取細(xì)胞壁干樣20 mg，懸浮于5 mL 6 mol/L HCl中，110℃酸解18 h。取酸解液2 mL，用1 mol/L KOH溶液調(diào)pH值至7.0，加1 mL pH 8.7 0.8 mol/L硼酸緩沖液和2 mL 0.2 mol/L氯胺T，室溫下反應(yīng)25 min，加2 mL 3.6 mol/L Na2S2O3溶液終止反應(yīng)，加2 g KCl飽和后用3 mL甲苯萃取，棄甲苯層，于沸水浴中加熱30 min，冷卻后加4 mL甲苯再次萃取，取甲苯層2 mL與1 mL對(duì)甲氨基苯甲醛(DAMB)試劑室溫顯色20 min，560 nm處測(cè)定OD值，計(jì)算Hyp含量。

1.4　數(shù)據(jù)處理

采用Microsoft Excel 2003與SPSS 17.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理和統(tǒng)計(jì)分析。

2結(jié)果與分析

2.1　接種南方根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)對(duì)不同抗性番茄砧木幼苗發(fā)病情況的影響

從表1可以看出，接種南方根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)后7 d，高感品種Ls-89幼苗根系已形成少量根結(jié)，說(shuō)明線(xiàn)蟲(chóng)已侵入根系，其后，隨侵染時(shí)間的延長(zhǎng)，Ls-89的根結(jié)指數(shù)(GI)與病情指數(shù)(DI)均迅速升高，至接種后35 d時(shí)，其GI與DI分別高達(dá)30.45和96.67；而高抗品種坂砧2號(hào)直至接種28 d后，植株根系才出現(xiàn)根結(jié)，且其GI與DI分別僅為0.15和9.67，接種后35 d，分別為0.44和26.67。

2.2　南方根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)侵染對(duì)番茄砧木幼苗滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)含量的影響

2.2.1幼苗根系與葉片可溶性糖含量的變化Ls-89與坂砧2號(hào)未接種根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)的對(duì)照幼苗根系與葉片可溶性糖含量逐漸升高(圖1)，且坂砧2號(hào)顯著高于Ls-89(P<0.05)。接種后，Ls-89與坂砧2號(hào)根系與葉片可溶性糖含量均隨著侵染發(fā)生顯著性變化，至接種后7 d，根系可溶性糖含量均達(dá)峰值，兩砧木分別較其對(duì)照增加65.60%和106.01%(P<0.01)，之后迅速降低，至28 d時(shí)降至最低，隨后于35 d因二次侵染又有所升高，在整個(gè)侵染進(jìn)程中，坂砧2號(hào)始終顯著高于Ls-89(P<0.05)。接種后，Ls-89與坂砧2號(hào)葉片可溶性糖含量均在21 d達(dá)到峰值，分別較其對(duì)照增加46.80%和83.44%(P<0.01)。

表1　接種南方根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)后供試番茄砧木幼苗發(fā)病情況比較

注：同列不同小寫(xiě)字母表示差異顯著(P<0.05)，不同大寫(xiě)字母表示差異極顯著(P<0.01)。

Note：Different small letters in the same column mean significant difference at 0.05 level, different capital letters mean extremely significant difference at 0.01 level.

圖1　南方根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)對(duì)番茄砧木幼苗根系和葉片可溶性糖含量的影響Fig.1　Effect of M. incognita on soluble sugar content in roots and leaves of tomato rootstock seedlings　S′與R′分別表示接種南方根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)的Ls-89與坂砧2號(hào)，S與R分別表示其對(duì)照，下同。S′ and R′ represent Ls-89 and Banzhen No.2 inoculated with M. incognita, respectively, S and R represent that of the control, respectively. The same below.

2.2.2幼苗根系與葉片可溶性蛋白含量的變化圖2可以看出，Ls-89與坂砧2號(hào)未接種根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)的對(duì)照幼苗根系與葉片可溶性蛋白含量差異不顯著(P>0.05)。接種后7 d，Ls-89與坂砧2號(hào)根系可溶性蛋白含量均達(dá)峰值，分別較其對(duì)照增加172.88%和198.75%(P<0.01)；而葉片則在接種后14 d達(dá)到峰值，分別較其對(duì)照增加48.67%和74.68%(P<0.05)。

圖2　南方根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)對(duì)番茄砧木幼苗根系和葉片可溶性蛋白含量的影響Fig.2　Effect of M. incognita on soluble protein content in roots and leaves of tomato rootstock seedlings

2.2.3幼苗根系與葉片脯氨酸含量的變化圖3所示，未接種根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)的Ls-89與坂砧2號(hào)對(duì)照幼苗根系與葉片Pro含量變化不大，且差異不顯著(P>0.05)。接種3 d，Ls-89與坂砧2號(hào)根系Pro含量均達(dá)峰值，分別較其對(duì)照增加166.30%和242.86%(P<0.01)，而葉片均在接種后14 d達(dá)到峰值，分別較其對(duì)照增加73.90%和108.68%(P<0.01)。

圖3　南方根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)對(duì)番茄砧木幼苗根系和葉片脯氨酸含量的影響Fig.3　Effect of M. incognita on proline content in roots and leaves of tomato rootstock seedlings

2.2.4幼苗根系與葉片細(xì)胞壁Hyp含量的變化圖4所示，未接種根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)的Ls-89與坂砧2號(hào)幼苗根系與葉片細(xì)胞壁Hyp含量變化基本穩(wěn)定，且差異不顯著(P>0.05)，但根系顯著高于葉片(P<0.05)。接種后，Ls-89和坂砧2號(hào)根系與葉片細(xì)胞壁Hyp含量發(fā)生劇烈變化，至7 d時(shí)，兩砧木根系細(xì)胞壁Hyp含量達(dá)峰值，分別較其對(duì)照增加91.79%和133.33%(P<0.01)，之后迅速降低，至接種后28 d降至低谷，隨后因二次侵染又有所升高。接種后至7 d，Ls-89葉片細(xì)胞壁Hyp含量逐漸升高，7~21 d間又稍有降低，至28 d達(dá)峰值，較其對(duì)照增加96.44%(P<0.01)；而坂砧2號(hào)于侵染后14 d達(dá)峰值，較其對(duì)照增加109.62%(P<0.01)。整個(gè)侵染過(guò)程中，坂砧2號(hào)根系與葉片細(xì)胞壁Hyp含量均高于Ls-89。

圖4　南方根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)對(duì)番茄砧木幼苗根系和葉片羥脯氨酸含量的影響Fig.4　Effect of M. incognita on Hyp content in roots and leaves of tomato rootstock seedlings

3討論

3.1　南方根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)對(duì)不同抗性番茄砧木幼苗滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)的影響

可溶性糖、可溶性蛋白與脯氨酸等均是植物體內(nèi)適應(yīng)逆境脅迫的重要滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)，與植物抗性密切相關(guān)[10,29-32]。劉大偉等[33]研究表明，不同抗性大豆品種接種大豆胞囊線(xiàn)蟲(chóng)后，抗病品種可溶性糖含量低于感病品種，而可溶性蛋白含量則相反。Lewis和McClure[34]研究發(fā)現(xiàn)，不同抗性棉花(Gossypiumhirsutum)品種遭受南方根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)侵染后，根系脯氨酸含量增加，但感病品種增幅顯著高于抗病品種。而本研究結(jié)果表明，接種南方根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)后，高感砧木Ls-89與高抗砧木坂砧2號(hào)根系與葉片可溶性糖、可溶性蛋白與脯氨酸等滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)含量升高，這與劉業(yè)霞等[35]的研究結(jié)果一致，與談家金等[11]相反，且坂砧2號(hào)升幅顯著高于Ls-89(P<0.05)，這與Lewis和McClure[34]的研究結(jié)果相反。這可能是因?yàn)榭共≌枘究梢酝ㄟ^(guò)調(diào)節(jié)體內(nèi)滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)含量來(lái)調(diào)節(jié)代謝平衡，延緩根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)侵害，而感病砧木隨著線(xiàn)蟲(chóng)侵染，根結(jié)指數(shù)與病情指數(shù)持續(xù)增長(zhǎng)，植株生長(zhǎng)受抑制，可用滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)減少，無(wú)法正常調(diào)節(jié)代謝平衡。

3.2　南方根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)對(duì)不同抗性番茄砧木幼苗細(xì)胞壁Hyp含量的影響

細(xì)胞壁富含羥脯氨酸糖蛋白，與植物的抗病性存在密切關(guān)系，目前已在多種植物病害中證實(shí)[13]。Esquerre-Tugaye等[36]研究認(rèn)為，甜瓜(Cucumismelo)幼苗感染炭疽病后，莖部細(xì)胞壁Hyp含量增加；Sujeeth等[37]研究發(fā)現(xiàn)，不同抗性珍珠粟(Pennisetumglaucum)幼苗感染霜霉病后，抗病品種胚芽鞘細(xì)胞壁Hyp含量顯著高于感病品種。本研究結(jié)果也證實(shí)，不同抗性番茄砧木幼苗接種南方根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)后，根系與葉片細(xì)胞壁Hyp含量升高，且高抗砧木坂砧2號(hào)顯著高于高感砧木Ls-89(P<0.05)。

4結(jié)論

不同抗性番茄砧木幼苗滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)差異不大，而遭受南方根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)侵染后，可溶性糖、可溶性蛋白與脯氨酸等滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)含量迅速升高，細(xì)胞壁也隨之積累較多的羥脯氨酸，且均以高抗砧木坂砧2號(hào)顯著高于高感砧木Ls-89(P<0.05)。說(shuō)明高抗砧木可通過(guò)較高含量的可溶性糖、可溶性蛋白及脯氨酸等滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)，細(xì)胞壁也通過(guò)積累較多的羥脯氨酸來(lái)調(diào)節(jié)代謝平衡，延緩根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)侵害。滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)與細(xì)胞壁羥脯氨酸含量的增加是番茄砧木幼苗抗根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)的機(jī)制之一。

References：

[1]Williamson V M, Hussey R S. Nematode pathogenesis and resistance in plants. The Plant Cell, 1996, 8(10): 1735-1745.

[2]Sasser J N. Plant Pasasitic Nematodes: the Farmer’s Hidden Enemy[M]. Beijing: Popular Science Press, 1992.

[3]Giannakou I O, Anastasiadis I. Evaluation of chemical strategies as alternatives to methyl bromide for the control of root-knot nematodes in greenhouse cultivated crops. Crop Protection, 2005, 24: 499-506.

[4]Cao Z P, Yu Y L, Chen G K,etal. Impact of soil fumigation practices on soil nematodes and microbial biomass. Pedosphere, 2004, 14(3): 387-393.

[5]Tan J J, Ye J R. Research advance in pathogenic mechanism of pine wood nematode disease. Journal of Huazhong Agricultural University, 2003, 22(6): 613-617.

[6]Zhai H, Guan X Q, Zhao C Z,etal. Screening of Chinese grape species resistant toM.incognita. Acta Horticulturae Sinica, 2000, 27(1): 27-31.

[7]Li W C, Dong H, Wang X F. Effects of root-knot nematode on growth, quality and yield of cucumber in greenhouse. Journal of Shandong Agricultural University, 2006, 37(1): 35-38.

[8]Bin S Y, Yao S M, Lin J T,etal. Some physiological changes of peanut plants infected withMeloidogynearenaria. Journal of Huazhong Agricultural University, 1999, 18(2): 121-124.

[9]Guo Y Y, Xu K, Wang X F. Effects ofMeloidogyneincognitaonon the growth and development of ginger. Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica, 2005, 14(5): 155-158.

[10]Chen Y H, Ye J R, Wei C J,etal. Effects of pine wood nematode (PWN) infection on water regime and metabolism of related to hosts. Acta Phytopathologica Sinica, 2005, 35(3): 201-207.

[11]Tan J J, Ye J R, Hao D J,etal. Effects of pine wood nematode,Bursaphelenchusxylophilus, on some physio-biochemical indexes of Japanese black pine,Pinusthunbergii. Acta Phytopathologica Sinica, 2011, 41(1):44-48.

[12]Hao Y J, Zhai H, Wang S H. Change of physiochemical substances inMalusbaccatainfected withTrichodorusnanjingensis. Acta Phytopathologica Sinica, 1999, 29(1): 82-85.

[13]Song F M, Zheng Z, Ge Q X. Hydroxyproline-rich glycoproteins in plant-pathogen interactions in the accumulation, the role and regulation. Plant Physiology Communications, 1992, 28(2): 141-145.

[14]Lamport D T, Miller D H. Hydroxyproline arabinosides in the plant kingdom. Plant Physiology, 1971, 48: 454-456.

[15]Zhai H, Hao Y J, Wang S H. Preliminary study on the resistance mechanism of apple rootstock to a stubby root nematode. Acta Phytophylacica Sinica, 1999, 26(3): 208-212.

[16]Zhao X F, Mi Z X. Study on content of hydroxyproline in cell wall in relation to resistance toCrecosporasojinahare. Soybean Science, 2000, 19(2): 146-149.

[17]Peng D L, Tang W H. Advance of resistance gene Mi to root-knot nematodes in tomato. Journal of Shenyang Agricultural University, 2001, 32(3): 220-223.

[18]Sasser J N, Eisenback J D, Carter C C,etal. The internationalMeloidogyneproject-its goals and accomplishments. Annual Review Phytopathology, 1983, 21: 271-288.

[19]Lopez-Perez J A, Strange M L, Kaloshian I,etal. Differential response ofMigene-resistant tomato rootstocks to root-knot nematodes (Meloidogyneincognita). Crop Protection, 2006, 25: 382-388.

[20]Rivard C L, Louws F J. Tomato grafting for disease resistance and increased productivity. Sustainable Agriculture Research &Education, 2011, 12: 1-8.

[21]Taylor A L, Sasser J N. Plant Root-knot Nematode[M]. Yang B J, translation. Beijing: Science Press, 1983.

[22]Zhang L Q, Zhang F Y, Hasi A. Research progress on alfalfa salt tolerance. Acta Prataculturae Sinica, 2012, 21(6): 296-305.

[23]Jia S S, Gao R G, Xu K. Screening and evaluation of tomato rootstocks for resistance toMeloidogyneincognita. Scientia Agricultura Sinica, 2009, 42(12): 4301-4307.

[24]Mao A J, Chai M, Yu S C,etal. Technique of identification for resistance to root-knot nematode in tomato and its application. Acta Agriculture Boreali-occidentalis Sinica, 2005, 14(4):140-144.

[25]Boiteux L S, Charchar J M. Genetic resistance to root-knot nematode (Meloidogynejavanica) in eggplant (Solanummelongena). Plant Breeding, 1996, (3): 198-200.

[26]Zhao S J, Liu H S, Dong X C. Techniques of Plant Physiological Experiment[M]. Beijing: China Agricultural Science and Technology Press, 1998.

[27]Feng J, Chen Q Y, Shi L Y. Accumulation of HRGP in cell wall of cotton treated withFusariumoxysporumF. SP.Vasinfectumrelatedto the resistance toFusariumwilt. Acta Phytopathologica Sinica, 1995, 25(2): 133-138.

[28]Shailasree S, Ramachandra Kini K, Deepak S,etal. Accumulation of hydroxyproline-rich glycoproteins in pearl millet seedlings in response toSclerosporagraminicolainfection. Plant Science, 2004, 167: 1227-1234.

[29]Cao F X, Wang M, Teng T,etal. Influence of pine wood nematode on plasma-membrane permeability and soluble sugar content ofPinuselliottiileaves. Journal of Central South Forestry University, 2006, 26(6): 169-171.

[30]Zhang H S, Zhao G Q, Li M F,etal. Physiological responses ofPennisetumlongissimumvar.intermediumseedlings to PEG, low temperature and salt stress treatments. Acta Prataculturae Sinica, 2014, 23(2): 180-188.

[31]Liu A R, Zhang Y B, Zhong Z H,etal. Effects of salt stress on the growth and osmotica accumulation ofColeusblumei. Acta Prataculturae Sinica, 2013, 22(2): 211-218.

[32]Shi L R, Niu Y L, Li M Z. Physiological response ofSonchusbrachyotusto salt stress. Acta Prataculturae Sinica, 2010, 19(6): 272-275.

[33]Liu D W, Duan Y X, Chen L J,etal. Physiological mechanism of huipizhiheidou resistant to Race 3 of soybean cyst nematode. Soybean Science, 2010, 29(3): 471-473.

[34]Lewis S A, McClure M A. Free amino acids in roots of infected cotton seedlings resistant and susceptible toMeloidogyneincognita. Journal of Nematology, 1975, 7(1): 10-15.

[35]Liu Y X, Jiang F, Zhang N,etal. Relationship between osmoregulation and Bacterial wilt resistance of grafted pepper. Acta Horticulturae Sinica, 2011, 38(5): 903-910.

[36]Esquerre-Tugaye M T, Lafitte C, Mazau D,etal. Cell surfaces in plant-microorganism interactions. Plant Physiology, 1979, 64: 320-326.

[37]Sujeeth N, Deepak S, Shailasree S,etal. Hydroxyproline-rich glycoproteins accumulate in pearl millet after seed treatment with elicitors of defense responses againstSclerosporagraminicola. Physiological and Molecular Plant Pathology, 2010, 74: 230-237.

參考文獻(xiàn)：

[2]Sasser J N. 植物寄生線(xiàn)蟲(chóng)——農(nóng)業(yè)的隱蔽敵害[M]. 北京: 科學(xué)普及出版社, 1992.

[5]談家金, 葉建仁. 松材線(xiàn)蟲(chóng)病致病機(jī)理的研究進(jìn)展. 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào), 2003, 22(6): 613-617.

[6]翟衡, 管雪強(qiáng), 趙春芝, 等. 中國(guó)葡萄抗南方根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)野生資源的篩選. 園藝學(xué)報(bào), 2000, 27(1): 27-31.

[7]李文超, 董會(huì), 王秀峰. 根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)對(duì)日光溫室黃瓜生長(zhǎng)、果實(shí)品質(zhì)及產(chǎn)量的影響. 山東農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版), 2006, 37(1): 35-38.

[8]賓淑英, 姚圣梅, 林進(jìn)添, 等. 花生根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)對(duì)花生植株主要生理指標(biāo)的影響. 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào), 1999, 18(2): 121-124.

[9]郭衍銀, 徐坤, 王秀峰. 南方根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)對(duì)生姜生長(zhǎng)發(fā)育的影響. 西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào), 2005, 14(5): 155-158.

[10]陳玉惠, 葉建仁, 魏初獎(jiǎng), 等. 松材線(xiàn)蟲(chóng)侵染對(duì)馬尾松、黑松水分及其相關(guān)代謝的影響. 植物病理學(xué)報(bào), 2005, 35(3): 201-207.

[11]談家金, 葉建仁, 郝德君, 等. 松材線(xiàn)蟲(chóng)對(duì)黑松一些生理生化指標(biāo)的影響. 植物病理學(xué)報(bào), 2011, 41(1): 44-48.

[12]郝玉金, 翟衡, 王壽華. 山定子感染南京毛刺線(xiàn)蟲(chóng)后幾種生理生化物質(zhì)的變化. 植物病理學(xué)報(bào), 1999, 29(1): 82-85.

[13]宋鳳鳴, 鄭重, 葛起新. 富含羥脯氨酸糖蛋白在植物-病原物相互作用中的積累、作用及調(diào)控. 植物生理學(xué)通訊, 1992, 28(2): 141-145.

[15]翟衡, 郝玉金, 王壽華. 蘋(píng)果砧木對(duì)南京毛刺線(xiàn)蟲(chóng)的抗性機(jī)制初探. 植物保護(hù)學(xué)報(bào), 1999, 26(3): 208-212.

[16]趙小釩, 弭忠祥. 細(xì)胞壁羥脯氨酸的含量與大豆灰斑病抗性關(guān)系的研究. 大豆科學(xué), 2000, 19(2): 146-149.

[17]彭德良, 唐文華. 番茄抗根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)Mi基因研究進(jìn)展. 沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào), 2001, 32(3): 220-223.

[21]泰勒 A L, 薩塞 J N. 植物根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)[M]. 楊寶君, 譯. 北京: 科學(xué)出版社, 1983: 5-43.

[22]張立全, 張鳳英, 哈斯阿古拉. 紫花苜蓿耐鹽性研究進(jìn)展. 草業(yè)學(xué)報(bào), 2012, 21(6): 296-305.

[23]賈雙雙, 高榮廣, 徐坤. 番茄砧木對(duì)南方根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)抗性鑒定. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué), 2009, 42(12): 4301-4307.

[24]毛愛(ài)軍, 柴敏, 于拴倉(cāng), 等. 番茄抗根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)接種鑒定技術(shù)及其應(yīng)用. 西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào), 2005, 14(4): 140-144.

[26]趙世杰, 劉華山, 董新純. 植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)[M]. 北京: 中國(guó)農(nóng)業(yè)科技出版社, 1998.

[27]馮潔, 陳其煐, 石磊巖. 枯萎菌誘導(dǎo)棉花細(xì)胞壁富含羥脯氨酸糖蛋白積累與枯萎病抗性間的關(guān)系. 植物病理學(xué)報(bào), 1995, 25(2): 133-138.

[29]曹福祥, 王猛, 滕濤, 等. 松材線(xiàn)蟲(chóng)對(duì)濕地松葉片質(zhì)膜和可溶性糖的影響. 中南林學(xué)院學(xué)報(bào), 2006, 26(6): 169-171.

[30]張懷山, 趙桂琴, 栗孟飛, 等. 中型狼尾草幼苗對(duì)PEG、低溫和鹽脅迫的生理應(yīng)答. 草業(yè)學(xué)報(bào), 2014, 23(2): 180-188.

[31]劉愛(ài)榮, 張遠(yuǎn)兵, 鐘澤華, 等. 鹽脅迫對(duì)彩葉草生長(zhǎng)和滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)積累的影響. 草業(yè)學(xué)報(bào), 2013, 22(2): 211-218.

[32]時(shí)麗冉, 牛玉璐, 李明哲. 苣荬菜對(duì)鹽脅迫的生理響應(yīng). 草業(yè)學(xué)報(bào), 2010, 19(6): 272-275.

[33]劉大偉, 段玉璽, 陳立杰, 等. 灰皮支黑豆抗大豆胞囊線(xiàn)蟲(chóng)3號(hào)生理小種的生理機(jī)制. 大豆科學(xué), 2010, 29(3): 471-473.

[35]劉業(yè)霞, 姜飛, 張寧, 等. 嫁接辣椒對(duì)青枯病的抗性及其與滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)的關(guān)系. 園藝學(xué)報(bào), 2011, 38(5): 903-910.