王艷春

·實(shí)驗(yàn)研究·

注射用硫酸頭孢匹羅安全性實(shí)驗(yàn)研究

王艷春

目的探討注射用硫酸頭孢匹羅的安全性。方法配置不同濃度的鹽酸頭孢匹羅注射液,應(yīng)用大鼠、大耳白兔等動(dòng)物進(jìn)行靜脈血管刺激實(shí)驗(yàn)、變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)、肌肉刺激實(shí)驗(yàn)及溶血實(shí)驗(yàn)。結(jié)果溶血性實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),無絮狀沉淀。肌肉刺激性實(shí)驗(yàn)及靜脈血管刺激性實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),無炎癥及壞死等病變。經(jīng)變態(tài)反應(yīng)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),硫酸頭孢匹羅注射液對(duì)于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均無變態(tài)反應(yīng)影響。結(jié)論注射用硫酸頭孢匹羅對(duì)于紅細(xì)胞并無溶血性反應(yīng)及變態(tài)反應(yīng),對(duì)靜脈血管及肌肉組織并無刺激反應(yīng),值得臨床進(jìn)一步研究應(yīng)用。

注射用；硫酸頭孢匹羅；安全性；實(shí)驗(yàn)研究

硫酸頭孢匹羅為第四代頭孢菌素類藥物,為臨床針對(duì)革蘭陽性菌抗菌素新藥［1］。在投入到臨床使用之前,根據(jù)國家有關(guān)條例,需要對(duì)其安全性進(jìn)行動(dòng)物研究［2］。硫酸頭孢匹羅具有廣譜抗菌活性,此藥對(duì)于葡萄球菌、肺炎球菌均有顯著的抗菌效果,并且此類藥物對(duì)于綠膿桿菌具有頭孢他啶相似的抗菌效果,臨床中主要適用于未知病原菌或敏感菌屬造成的下呼吸道感染、腎盂腎炎、皮膚或軟組織感染等。本研究將注射硫酸頭孢匹羅應(yīng)用于動(dòng)物實(shí)驗(yàn),具體闡述如下。

1 材料與方法

1.1樣本來源 本研究所選實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均是中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供,所選實(shí)驗(yàn)藥劑有通化茂祥有限公司和程度生物制品研究所生產(chǎn)。

1.1.1溶血性實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為大耳白兔,雌雄各半,藥劑包括0.5 g硫酸頭孢匹羅、0.9%氯化鈉溶液。

1.1.2靜脈血管刺激性 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為4只大耳白兔,試劑為5 mg/L硫酸頭孢匹羅試劑。

1.1.3變態(tài)反應(yīng)實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為18只飼養(yǎng)大鼠,用鹽酸頭孢匹羅,吸附百日咳、白喉、破傷風(fēng)聯(lián)合疫苗疫苗、卵白蛋白、甲醛試劑。吸附百日咳、白喉、破傷風(fēng)聯(lián)合疫苗,由成都生物制品研究所生產(chǎn),生產(chǎn)批號(hào)為200504004-5。疫苗中每毫升中有白喉效價(jià)多于30 U,百日咳效價(jià)多于4.0 U,破傷風(fēng)效價(jià)多于40 U。應(yīng)用卵白蛋白為1 g/瓶,用氯化鈉稀釋成1.4 mg/ml、甲醛500 ml。

1.1.4肌肉刺激性實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為4只大耳白兔,試劑為5 mg/L硫酸頭孢匹羅試劑。

1.2研究方法

1.2.1溶血性實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為大耳白兔,應(yīng)用試劑為硫酸頭孢匹羅注射液,取實(shí)驗(yàn)動(dòng)物心臟新鮮血液20 ml,在脫纖維處理后向試管內(nèi)加入0.9%氯化鈉溶液,將其離心處理,設(shè)置離心時(shí)間為5 min,轉(zhuǎn)速為2500 r/min,離心后去除上清液,多次重復(fù)離心,使最后得到溶液無色透明,將余下血細(xì)胞做成實(shí)驗(yàn)紅細(xì)胞懸液,按照1：50比例進(jìn)行稀釋。取0.5 g注射用硫酸頭孢匹羅,以0.9%氯化鈉溶液將其稀釋至0.1 g/ml。取7支試管,編號(hào)1～7號(hào)。分別加入2.5 ml 2%紅細(xì)胞懸液,其中1～6號(hào)試管按照梯度加入0.9%氯化鈉溶液,1號(hào)試管加入2.0 ml,6號(hào)試管加入2.5 ml,7號(hào)試管不加入氯化鈉溶液,向1～5號(hào)試管內(nèi)加入0.1 g/ml注射用硫酸頭孢匹羅,使試管內(nèi)溶液均達(dá)到5 ml,7號(hào)試管加入純化水為空白對(duì)照。

1.2.2靜脈血管刺激性 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為大耳白兔樣本4只,亦采用同體左右對(duì)比方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn),每只白兔右側(cè)耳緣靜脈滴注注射用硫酸頭孢匹羅5 mg/ml,左側(cè)耳緣靜脈滴注等容積0.9%氯化鈉溶液5 ml/kg,2次/d給藥,連續(xù)滴注4 d,最后一次給藥24 h后進(jìn)行處死,于注射近心端1.5～3.0 cm剪取耳緣,常規(guī)切片染色后鏡檢,觀察有無血栓形成、內(nèi)皮損傷等病理變化。

1.2.3變態(tài)反應(yīng)實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為18只飼養(yǎng)大鼠,分A、B、C三組,每組6只。C組為對(duì)照組,A組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分別應(yīng)用0.1 g/ml注射用硫酸頭孢匹羅試劑,B組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物注射卵蛋白溶液,C組大鼠注射0.9%氯化鈉注射液,以上實(shí)驗(yàn)均進(jìn)行腹腔注射0.5 ml,隔日注射1次,連續(xù)注射21 d,觀察記錄第14、21 d大鼠情況。

1.2.4肌肉刺激性實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為4只大耳白兔,以同一只動(dòng)物左右肢作為對(duì)照,將動(dòng)物左側(cè)肱四頭肌注射0.9%氯化鈉注射液1 ml,右側(cè)肱四頭肌注射鹽酸頭孢匹羅注射液1 ml,注射后48 h將動(dòng)物樣本處死,解剖白兔取出雙側(cè)肱四頭肌,觀察肱四頭肌肌肉組織是否出現(xiàn)刺激反應(yīng),之后進(jìn)行常規(guī)染色切片,鏡下進(jìn)行觀察。

1.3觀察指標(biāo) 溶血性實(shí)驗(yàn)判別結(jié)果是以紅細(xì)胞混懸液變?yōu)榧t色澄清為溶血實(shí)驗(yàn)陽性,若溶液出現(xiàn)棕紅色絮狀沉淀,則代表紅細(xì)胞凝集,若出現(xiàn)紅細(xì)胞下沉,上層液體無色澄清,則為溶血實(shí)驗(yàn)陰性。肌肉刺激性實(shí)驗(yàn)主要對(duì)肌肉纖維組織橫紋、結(jié)構(gòu)完整性、炎癥及其他反應(yīng)進(jìn)行探討。變態(tài)反應(yīng)實(shí)驗(yàn)以實(shí)驗(yàn)動(dòng)物是否發(fā)生變態(tài)反應(yīng)進(jìn)行對(duì)照觀察。

2 結(jié)果

研究發(fā)現(xiàn),硫酸頭孢匹羅注射液對(duì)動(dòng)物并無顯著溶血、變態(tài)反應(yīng),且對(duì)血管、肌肉并無嚴(yán)重刺激性反應(yīng),具體溶血性實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),1～6號(hào)試管均未見溶血反應(yīng),紅細(xì)胞全部下沉,上清液無色澄清,并無絮狀沉淀。肌肉刺激性實(shí)驗(yàn)及靜脈血管刺激性實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),組織切片下肌肉組織紋理清晰,結(jié)構(gòu)完整,均無炎癥及壞死等病變,靜脈血管紋理清晰,血管無損傷,無明顯水腫及炎癥反應(yīng)出現(xiàn),內(nèi)皮細(xì)胞排列整齊,血管壁無增厚且無栓塞形成,總結(jié)得出硫酸頭孢匹羅注射液對(duì)動(dòng)物并無明顯刺激作用。經(jīng)變態(tài)反應(yīng)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),頭孢匹羅注射液對(duì)動(dòng)物無變態(tài)反應(yīng)影響。

3 小結(jié)

本次研究屬臨床新藥研制階段性成果,具體是以小樣本作為新藥安全性評(píng)價(jià)的一種應(yīng)用。硫酸頭孢匹羅具有第三代頭孢菌素特征并且此類藥物與青霉素結(jié)合蛋白親和力較高,能在細(xì)菌壁膜間隙中維持較高濃度,對(duì)于染色體和質(zhì)粒介導(dǎo)的β-內(nèi)酰胺酶親和力低且穩(wěn)定［3］。本次研究可知注射用硫酸頭孢匹羅對(duì)于紅細(xì)胞并無溶血性反應(yīng)及變態(tài)反應(yīng),對(duì)靜脈血管及肌肉組織并無刺激反應(yīng),值得臨床進(jìn)一步研究應(yīng)用。

［1］張健翔,趙利枝,姚西玲.注射用硫酸頭孢匹羅的安全性研究.實(shí)用藥物與臨床,2010,13(3):190-192.

［2］耿武洪.注射用硫酸頭孢匹羅安全性實(shí)驗(yàn)研究.醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2008,27(3):278-279.

［3］李寶媛,唐曉露.注射用硫酸頭孢匹羅含量測(cè)定方法研究.黑龍江科技信息,2010(6):195.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2016.02.228

2015-10-09］

114032 鞍山市雙山醫(yī)院藥劑科