胡紅蓮謝天宇楊淑青高 民姚焰礎（．內蒙古農牧業(yè)科學院動物營養(yǎng)與飼料研究所，呼和浩特0003；．內蒙古農業(yè)大學動物科學學院，呼和浩特0008；3．重慶市畜牧科學院動物營養(yǎng)研究所，重慶40460）

亞急性瘤胃酸中毒對奶山羊血漿細胞因子和激素含量的影響

胡紅蓮1謝天宇2楊淑青2高 民1姚焰礎3?
（1．內蒙古農牧業(yè)科學院動物營養(yǎng)與飼料研究所，呼和浩特010031；2．內蒙古農業(yè)大學動物科學學院，呼和浩特010018；3．重慶市畜牧科學院動物營養(yǎng)研究所，重慶402460）

摘 要：本試驗旨在研究以遞增飼糧非纖維性碳水化合物與中性洗滌纖維比（NFC／NDF）方式誘導奶山羊發(fā)生亞急性瘤胃酸中毒（SARA）后，血漿細胞因子和激素含量的變化。選取9只體況良好，體重接近的泌乳期莎能奶山羊，隨機分為3組（對照組、SARA組、恢復組，n＝3），對照組飼喂基礎飼糧，SARA組和恢復組先后飼喂NFC／NDF為1．40、1．79、2．31、3．23的4種試驗飼糧誘導SARA發(fā)生，每種飼喂15 d，恢復組奶山羊誘導SARA后自由采食青干草30 d。對照組3只羊分別在飼養(yǎng)30、60（與SARA組同時）和90 d（與恢復組同時）屠宰。結果表明：1）SARA長期提高了血漿LPS濃度，恢復組與SARA組差異不顯著（P＞0．05）。2）與對照組相比，SARA組奶山羊血漿中促炎性細胞因子腫瘤壞死因子－α（TNF?α）、白細胞介素（IL）?1β和IL?6含量呈升高趨勢（P＞0．05），IL?2含量顯著升高（P＜0．05），IL?8含量呈降低趨勢（P＞0．05），γ－干擾素（IFN?γ）含量顯著降低（P＜0．05），抗炎性細胞因子IL?4和IL?10含量均呈降低趨勢（P＞0．05）；SARA組奶山羊血漿中生長激素、胰島素樣生長因子－Ⅰ、胰島素含量變化不顯著（P＞0．05），催乳素（PRL）和皮質醇（COR）含量均顯著升高（P＜0．05）。3）與SARA組相比，恢復組奶山羊血漿中TNF?α、IL?1β、IL?2、IL?6這些促炎性細胞因子的含量仍持續(xù)性升高，其中IL?1β和IL?2含量顯著升高（P＜0．05）；恢復組奶山羊血漿中PRL含量仍維持與SARA組同一水平（P＞0．05），而COR含量則回歸到對照組水平（P＞0．05）。本研究結果顯示，SARA可引起奶山羊血漿中長時間含有一定量的LPS，引發(fā)機體免疫和炎癥反應，并引起內分泌激素的變化，這一系列變化導致奶山羊長期處于應激狀態(tài)。

關鍵詞：亞急性瘤胃酸中毒；奶山羊；細胞因子；激素

隨著集約化、規(guī)?；B(yǎng)殖的擴大和優(yōu)質牧草的缺乏，以及對短期利潤的追求，亞急性瘤胃酸中毒（subacute ruminal acidosis，SARA）已經成為危害奶牛的一種群發(fā)性常見營養(yǎng)代謝性疾病，多發(fā)于泌乳初期和高峰期，對高產奶牛尤為嚴重，它能使其產奶量下降、生產率降低，更為嚴重的是會繼發(fā)一系列病征，使奶牛淘汰率大幅提高，使用年限縮短，治療成本增加，這給我國奶牛業(yè)造成了很大的經濟損失。近年來在奶牛［1－3］、肉牛［4］、山羊［5－6］的諸多研究結果顯示，使用高精料誘導SARA發(fā)生時，瘤胃會產生大量細菌內毒素脂多糖（lipopolysaccharide，LPS），高濃度的LPS可轉運入血［7－8］，進入血液的LPS可促進體內產生多種炎性細胞因子和急性期蛋白，誘發(fā)細胞因子的連鎖反應，使動物機體處于免疫應激狀態(tài)［1，8－9］，而且LPS也能通過改變體內激素等水平來調節(jié)機體的物質代謝［10］，這一系列的變化使動物機體處于一種慢性應激狀態(tài)，進而加劇了機體對疾病的易感性［11］。目前，國內外關于SARA的研究主要集中于瘤胃發(fā)酵模式、微生物區(qū)系、異常代謝產物和血液參數的改變，對免疫、內分泌及應激反應的研究較少。本研究旨在以奶山羊為動物模型，探討以遞增飼糧非纖維性碳水化合物與中性洗滌纖維比（NFC／NDF）方式誘發(fā)泌乳期山羊產生SARA后，血漿內分泌激素、炎性細胞因子與抗炎性細胞因子含量的變化，初步揭示SARA所導致的應激反應以及對機體免疫系統和內分泌系統的長期影響作用，為本病的深入研究提供試驗基礎與理論依據。

1　材料與方法

1．1 試驗動物與飼養(yǎng)

選用健康狀況良好，體重接近（35～40）kg的泌乳期莎能奶山羊9只，手術安裝永久性瘤胃瘺管，恢復期20 d，于2013年6月至2013年10月飼養(yǎng)于內蒙古自治區(qū)農牧業(yè)科學院動物試驗基地動物房，單籠飼養(yǎng)。

1．2 試驗設計

采用單因子試驗設計，隨機分成3組，即對照組（n＝3）、SARA組（n＝3）和恢復組（n＝3）。對照組飼喂基礎飼糧（NFC／NDF為1．40），SARA組和恢復組通過先后飼喂NFC／NDF為1．40、1．79、2．31、3．23的試驗飼糧誘導SARA發(fā)生，每種飼糧持續(xù)飼喂15 d；恢復組奶山羊待SARA誘導成功后自由采食青干草30 d，使其逐漸恢復。對照組3只羊分別在飼養(yǎng)30、60（與SARA組同時）和90 d（與恢復組同時）屠宰。

試驗飼糧參照NRC（1981）奶山羊營養(yǎng)需求配制。試驗飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。整個試驗期，每日06：00和18：00分2次等量飼喂，自由飲水。

表1　試驗飼糧組成及營養(yǎng)水平（干物質基礎）Table 1 Composition and nutrient levels of experimental diets（DM basis）　%

1．3 主要試劑及儀器

白細胞介素（IL）－1β、IL?2、IL?4、IL?6、IL?8、IL?10、腫瘤壞死因子－α（TNF?α）、γ－干擾素（IFN?γ）試劑盒購自美國R＆D公司，生長激素（GH）、催乳素（PRL）、胰島素樣生長因子－Ⅰ（IGF?Ⅰ）、胰島素（INS）、皮質醇（COR）及LPS試劑盒購自北京華英生物技術研究所。

主要儀器有：pH電極（S651CD，美國Sensorex公司）、pH變送器（692，美國Jenco公司）、無紙記錄儀（R4100，浙大中控儀表有限公司）、多功能酶標儀（Synergy H4，美國BioTek儀器公司）、全自動放免計數儀（γ?911，中國科技大學實業(yè)總公司）。

1．4 試驗方法

1．4．1 瘤胃液pH連續(xù)監(jiān)測

采用動態(tài)pH連續(xù)監(jiān)測記錄系統對瘤胃液pH進行24 h連續(xù)監(jiān)測，具體方法見文獻［12］。以瘤胃液pH作為判定SARA發(fā)生的主要參數，當瘤胃液pH＜5．5每天持續(xù)時間＞3 h即認為SARA模型建立。

1．4．2 血漿的采集和處理方法

各組飼養(yǎng)試驗結束，晨飼前用加有促凝劑的真空采血管從頸靜脈處采集20 mL，靜置30 min，3 000 r／min離心15 min，制得的血漿轉移至離心管中，置于－20℃冰箱中保存。

1．4．3 血漿激素和細胞因子測定方法

采用放射性免疫法（RIA）測定GH、PRL、IGF?Ⅰ、INS、COR含量及LPS濃度；采用酶聯免疫吸附測定法（ELISA）測定TNF?α、IFN?γ、IL?1β、IL?2、IL?4、IL?6、IL?8及IL?10等細胞因子含量。嚴格按照試劑盒說明書進行測定。

1．5 數據統計

所有數據首先采用Excel進行整理，采用SPSS 11．5軟件ANOVA程序進行單因素方差分析，用Duncan氏法進行多重比較，試驗數據用平均值±標準誤表示。

2　結 果

2．1 不同NFC／NDF飼糧對瘤胃液pH的影響

由表2可知，逐漸遞增飼糧NFC／NDF對奶山羊瘤胃液pH影響較大。隨著飼糧NFC／NDF增大，瘤胃液pH平均值從6．20降至5．76，降低了0．44（P＜0．05），最大值從6．59降至5．98，降低了0．61（P＜0．05），最小值則從5．87降至5．51，降低了0．36（P＜0．05），且每日瘤胃液pH＜5．5的持續(xù)時間由0 h延長至3．83 h（P＜0．05）。根據SARA的定義（瘤胃液pH＜5．5的持續(xù)時間大于3 h以上），飼糧NFC／NDF由1．40逐漸遞增至3．23時，成功誘導了SARA。

表2　不同NFC／NDF飼糧對奶山羊瘤胃液pH的影響Table 2 Effects of different dietary NFC／NDF on rumen fluid pH in dairy goats

2．2 SARA對奶山羊血漿LPS濃度與細胞因子含量的影響

由表3可以看出，血漿中LPS濃度SARA組為0．77 EU／mL、恢復組為0．63 EU／mL，均高于對照組的0．59 EU／mL，但差異不顯著（P＞0．05）。與對照組相比，SARA組奶山羊血漿中TNF?α、IL?1β和IL?6含量呈升高趨勢（P＞0．05），IL?2含量顯著升高（P＜0．05），而IL?4、IL?8和IL?10含量呈降低趨勢（P＞0．05），IFN?γ含量顯著降低（P＜0．05）。恢復組TNF?α、IL?1β、IL?2、IL?6這些細胞因子的含量仍持續(xù)升高，IL?1β和IL?2含量顯著高于SARA組和對照組（P＜0．05），IL?8含量仍呈持續(xù)性降低趨勢（P＞0．05），IL?4和IFN?γ含量低于對照組略高于SARA組，差異不顯著（P＞0．05），IL?10含量與SARA組無差異，略低于對照組，但均無顯著性差異（P＞0．05）。

表3　SARA對奶山羊血漿脂多糖濃度與細胞因子含量的影響Table 3 Effects of subacute ruminal acidosis on levels of plasma LPS and cytokines in dairy goats　 ng／L

2．3 SARA對奶山羊血漿激素含量的影響

由表4可以看出，SARA組奶山羊血漿中GH、IGF?Ⅰ含量與對照組無顯著差異（P＞0．05），INS含量略低于對照組（P＞0．05），PRL和COR含量顯著高于對照組（P＜0．05）?；謴徒M奶山羊血漿中GH、IGF?Ⅰ、INS含量與SARA組奶山羊基本一致（P＞0．05），COR含量則回歸到對照組水平（P＞0．05），而PRL含量與SARA組一樣維持較高水平（P＞0．05）。血漿激素含量的變化說明SARA對血漿GH、IGF?Ⅰ含量沒有影響，對INS含量影響很小，而主要影響了PRL和COR 2種激素的含量。

表4　SARA對奶山羊血漿激素含量的影響Table 4 Effects of subacute ruminal acidosis on plasma hormone contents in dairy goats

3　討 論

3．1 飼糧NFC／NDF對瘤胃液pH的影響

SARA是一種以瘤胃液pH較低為典型特征的營養(yǎng)代謝病，因此常把瘤胃液pH作為衡量SARA發(fā)生與否及中毒程度最有效、最直接、最常用的指標［13］。瘤胃液pH長時間處于5．5～5．8之間為輕度SARA，pH長時間處于5．2～5．5之間為中度SARA，pH＜5．2為急性瘤胃酸中毒［14］。Gozho等［15］研究認為，瘤胃液pH在5．2～5．6之間波動時間每天長達3～5 h可作為SARA發(fā)生的判定標準。本研究結果表明，隨著飼糧NFC／NDF增加，瘤胃液pH下降速率和幅度隨之增大，當飼糧NFC／NDF由1．40、1．79、2．31遞增至3．23時，瘤胃液pH顯著下降，飼喂NFC／NDF為3．23的飼糧2周后瘤胃液pH＜5．5每日連續(xù)3 h以上，且pH＜5．5曲線面積大于1，成功誘導了SARA的產生。作者及本研究團隊前期研究表明，當飼糧NFC／NDF達2．58時，瘤胃液pH在5．2～5．5之間持續(xù)時間長達7．5 h以上［5，16］。出現以上差異的原因一方面可能是由于試驗動物品種的不同，本試驗選用的是莎能奶山羊，而前期研究選用的是關中奶山羊；另一方面可能由于飼糧營養(yǎng)水平及非纖維性碳水化合物（NFC）攝入量不同所致，本試驗中當飼糧NFC／NDF＝3．23時，NFC攝入量為577．5 g／d，而前期研究中NFC／NDF＝2．58時，NFC攝入量為610．5 g／d。同時也可能與誘導時間長短不同有關，本試驗誘導期為60 d，前期研究誘導期為40 d，誘導時間的長短與NFC攝入量不同可能是產生差異的關鍵。由于以上因素導致誘導SARA的嚴重程度不同，盡管在誘導SARA嚴重程度上存在差異，但這些研究結果皆表明，通過遞增精料的方式飼喂奶山羊易發(fā)生SARA。

3．2 SARA對奶山羊血漿LPS濃度與細胞因子含量的影響

LPS是革蘭氏陰性菌的細胞壁結構成分，是誘發(fā)炎癥反應的主要致病成分。最近的許多研究均表明，飼喂高精料飼糧誘導反芻動物發(fā)生SARA時，瘤胃會產生大量細菌內毒素LPS，使瘤胃液中LPS濃度升高［1－6］。由于酸性環(huán)境和LPS的存在致使胃腸道黏膜上皮細胞屏障功能受損，上皮細胞通透性增加［17－18］，LPS可通過感染受損的瘤胃上皮轉運入血，使血液中的LPS濃度大幅增加，LPS激增反過來又會進一步加劇SARA的發(fā)展［1，15］?？梢?，LPS是參與SARA發(fā)病過程的主要致病因素之一。本試驗研究結果表明，SARA組奶山羊血漿中LPS濃度（0．77 EU／mL）高于健康對照組（0．59 EU／mL），與作者前期研究及眾多研究者報道相一致，進一步印證了LPS在SARA發(fā)病的關鍵作用。同時本試驗研究結果顯示，恢復組奶山羊血漿中LPS濃度（0．63 EU／mL）較SARA組雖有所下降但仍顯著高于健康對照組，提示SARA引起奶山羊血漿中長時間含有高濃度LPS，必引起機體系統性炎癥反應的存在。

細胞因子是一類由活化的淋巴細胞和單核巨噬細胞產生的一類非抗體、非補體的免疫活性介質，在調節(jié)免疫應答、炎癥反應、物質代謝和神經內分泌等多個方面發(fā)揮著重要作用，它們構成了機體復雜的免疫調節(jié)網絡。在醫(yī)學研究中根據其在調節(jié)炎癥反應等過程中致炎作用和抗炎作用，將其分為促炎性細胞因子與抗炎性細胞因子，IL?1、IL?2、IL?6、IL?17、IL?18、IL?23、IL?27、TNF?α、TNF?β、IFN?γ等屬于促炎性細胞因子，主要由單核細胞以及巨噬細胞產生，參與細胞免疫反應；抗炎性細胞因子包括IL?4、IL?10和IL?13等，主要由T細胞產生，參與體液免疫反應［19］。在促炎性細胞因子中，TNF?α是機體應激反應中產生最早且作用最重要的炎性細胞因子，TNF?α不僅能介導LPS的多種生物學效應，而且通過誘導其他炎癥介質的協同作用，擴大其生物學效應，從不同環(huán)節(jié)在體內產生炎性反應和組織損傷。許多研究結果證實，機體在受到LPS刺激后，體內TNF?α含量升高，這與本試驗結果一致。IFN?γ是機體細胞經病毒誘導而產生的一種重要的細胞因子，具有抗病毒、抗腫瘤和免疫調節(jié)作用［20］。本試驗中SARA組奶山羊血漿IFN?γ含量顯著低于健康奶山羊，這可能是奶山羊容易發(fā)生細菌感染的重要原因。IL?1是一種具有炎癥介導活性和免疫調節(jié)作用的細胞因子，以IL－1α和IL?1β 2種形式存在，其中IL?1β屬于介導炎癥反應的前炎癥介質。IL?2是細胞免疫調節(jié)中重要的細胞因子，其含量的高低是機體細胞免疫水平的重要標志［21］。IL?6是一種促炎遞質，大量產生會加劇體內炎性反應，甚至導致一些疾病的惡化。IL?8是奶牛體內發(fā)生炎癥反應的重要趨化因子。在抗炎性細胞因子中，IL?4是一種重要的免疫活性調節(jié)因子，是B細胞增殖活化，合成產生免疫球蛋白E（IgE）的絕對必需因子，最大用途是作為Th2細胞的標志性因子，其含量顯著升高提示機體免疫處于Th2細胞主導狀態(tài)；IL?10是炎癥和免疫反應的強有力控制者，可下調IL?2、IFN?γ等促炎性細胞因子，具有廣泛的免疫抑制活性［22］。以往研究表明，進入機體中的LPS能刺激單核巨噬細胞釋放大量的細胞因子，如TNF?α、IL?1、IL?6、IL?8等，這些細胞因子會引起“瀑布式炎癥級聯反應”，造成細胞和器官的多種損傷。在本試驗中，SARA發(fā)生使血液中LPS濃度增加，機體受到LPS刺激后，使促炎性細胞因子IL?1β、IL?6和TNF?α含量升高，IL?2含量顯著升高，IL?8含量降低，IFN?γ含量顯著降低；同時使抗炎性細胞因子IL?4、IL?10含量下降，但差異不顯著，總體表現為促炎作用，機體免疫處于細胞免疫主導狀態(tài)。且自然恢復組中TNF?α、IL?1β、IL?2、IL?6這些促炎性細胞因子仍持續(xù)性升高，特別是IL?1β和IL?2含量顯著升高，出現過度的炎癥反應，并持續(xù)性引起組織損傷，進一步加重對機體的損害。這些試驗結果提示，SARA影響了機體的免疫功能，使細胞免疫起主導作用，促進了炎性細胞因子的大量分泌，引起促炎性細胞因子與抗炎性細胞因子的失衡，使動物長期處于免疫應激狀態(tài)。

3．3 SARA對奶山羊血漿內分泌激素含量的影響

動物血液激素水平在某種程度上可反映動物生理調節(jié)特點。在本試驗中，血漿中GH、IGF?Ⅰ和INS 3種激素含量各組間差異均不顯著，從數值上看，對照組、SARA組、恢復組奶山羊血漿GH、IGF?Ⅰ含量呈依次升高趨勢，但幾乎接近，INS含量呈降低趨勢，SARA組和恢復組INS含量幾乎一致，表明SARA對血漿中GH和IGF?Ⅰ2種激素含量沒有影響，對INS含量影響很小，這與張樹坤等［23］報道的泌乳期山羊發(fā)生SARA時血漿IGF?I、INS含量變化較大，GH含量變化不大的研究結果不一致，這可能與SARA誘導方式、嚴重程度不同等有關。INS是調節(jié)三大營養(yǎng)物質代謝、降低血糖的重要激素。本試驗中SARA引起INS含量呈降低趨勢，INS這種變化可能與SARA導致機體發(fā)生炎癥反應，抑制了營養(yǎng)物質的代謝，從而應對外界的不良環(huán)境有關。本試驗中SARA對血漿PRL和COR含量產生了顯著影響。PRL是由下丘腦分泌的，是機體免疫－神經－內分泌調節(jié)網絡中的一個非常重要的激素，對淋巴細胞的增殖有著促進的作用，其含量升高有利于免疫反應的發(fā)生［24］。本試驗中，SARA組奶山羊血漿PRL含量顯著高于健康對照組，且自然恢復組仍維持較高PRL含量，這與張樹坤等［23］報道，泌乳期山羊處于SARA狀態(tài)時其血漿PRL含量升高的研究結果接近，表明在SARA條件下，機體的免疫水平增強，積極對抗應激反應。COR是體內重要的應激和代謝激素，不僅參與機體內分泌調節(jié)，而且與動物的免疫功能和炎癥反應密切相關，其含量升高有利于動物抵御應激反應，特別是針對由炎癥引起的應激反應。本試驗中，SARA組奶山羊血漿COR含量均顯著高于健康對照組，這與賈媛媛等［6］所報道的采用高精料飼糧誘導泌乳期山羊發(fā)生SARA時血漿COR含量明顯升高的研究結果相一致，COR這種變化可能與下丘腦－垂體－腎上腺皮質軸（hypo?thalamie?pituitary?adrenalaxis，HPA）被激活有關。Sapolsky等［25］指出，LPS引起機體免疫反應，免疫細胞釋放大量細胞因子，部分細胞因子能夠影響下丘腦－垂體－腎上腺的內分泌功能，最終導致血漿COR含量升高，從而有利于機體及早消除血漿中的LPS。血液中COR含量升高可作為評價HPA激活的標志，本試驗中SARA組奶山羊血漿COR含量顯著升高，但恢復組COR含量又回歸到健康對照組水平，這些結果提示SARA期奶山羊HPA被激活，使COR分泌顯著增加，此時機體處于一種應激狀態(tài)，隨著時間的進一步延長，機體從應激中有所恢復，HPA反應降低，進而導致COR分泌減弱，逐漸恢復到正常水平。

4　結 論

遞增飼糧NFC／NDF方式誘導奶山羊發(fā)生SARA，伴隨血漿中LPS濃度升高，不僅影響了機體免疫功能，使細胞免疫處于主導作用，促進了炎性細胞因子持續(xù)性大量分泌，機體產生慢性炎癥，同時影響了內分泌激素含量，引起內分泌紊亂，這些變化導致機體長期處于應激狀態(tài)，從而可能造成奶山羊對疾病的易感性增加，以致損害奶山羊的健康與生產性能。

參考文獻：

［1］ KHAFIPOUR E，KRAUSE D O，PLAIZIER J C．A grain?based subacute ruminal acidosis challenge causes translocation of lipopolysaccharide and triggers inflam?mation［J］．Journal of Dairy Science，2009，92（3）：1060－1070．

［2］ GOZHO G N，KRAUSE D O，PLAIZIER J C．Rumen lipopolysaccharide concentration and inflammatory re?sponse during grain?induced subacute ruminal acidosis in dairy cows［J］．Journal of Dairy Science，2007，90 （2）：856－866．

［3］ LI S，KHAFIPOUR E，KRAUSE D O，et al．Effects of subacute ruminal acidosis challenges on fermentation and endotoxins in the rumen and hindgut of dairy cows［J］．Journal of Dairy Science，2012，95（1）：294－303．

［4］ GOZHO G N，KRAUSE D O，PLAIZIER J C．Rumen lipopolysaccharide and inflammation during grain ad?aptation and subacute ruminal acidosis in steers［J］．Journal of Dairy Science，2006，89（11）：4404－4413．

［5］ 胡紅蓮，劉大程，盧德勛，等．日糧不同非纖維性碳水化合物與中性洗滌纖維的比值對奶山羊瘤胃液和血液中內毒素、組織胺含量的影響［J］．中國畜牧獸醫(yī)，2012，39（3）：104－109．

［6］ 賈媛媛，王紹慶，常廣軍，等．高精料誘導的SARA對泌乳期山羊血液和瘤胃液中皮質醇的影響［J］．草業(yè)學報，2012，21（4）：259－266．

［7］ SRISKANDAN S，ALTMANN D M．The immunology of sepsis［J］．The Journal of Pathology，2008，214 （2）：211－223．

［8］ ZEBELI Q，AMETAJ B N．Relationships between ru?men lipopolysaccharide and mediators of inflammatory response with milk fat production and efficiency in dairy cows［J］．Journal of Dairy Science，2009，92 （8）：3800－3809．

［9］ PLAIZIER J C，KHAFIPOUR E，LI S，et al．Subacute ruminal acidosis（SARA），endotoxins and health con?sequences［J］．Animal Feed Science and Technology，2012，172（1／2）：9－21．

［10］ JOHNSON R W，PROPES M J，SHAVIT Y．Corticos?terone modulates behavioral and metabolic effects of lipopolysaccharide［J］．American Journal of Physiolo?gy，1996，270（1）：R192－R198．

［11］ ALLEN M S．Effects of diet on short?term regulation of feed intake by lactating dairy cattle［J］．Journal of Dairy Science，2000，83（7）：1598－1624．

［12］ 胡紅蓮．奶山羊亞急性瘤胃酸中毒營養(yǎng)生理機制的研究［D］．博士學位論文．呼和浩特：內蒙古農業(yè)大學，2008：26．

［13］ NOCEK J E，ALLMAN J G，KAUTZ W P．Evaluation of an indwelling ruminal probe methodology and effect of grain level on diurnal pH variation in dairy cattle ［J］．Journal of Dairy Science，2002，85（2）：422－428．

［14］ PENNER G B，BEAUCHEMIN K A，MUTSVANG?WA T．Severity of ruminal acidosis in primiparous Holstein cows during the periparturient period［J］．Journal of Dairy Science，2007，90（1）：365－375．

［15］ GOZHO G N，PLAIZIER J C，KRAUSE D O，et al．Subacute ruminal acidosis induces ruminal lipopo?lysaccharide endotoxin release and triggers an inflam?matory response［J］．Journal of Dairy Science，2005， 88（4）：1399－1403．

［16］ 鄔宇航．亞急性瘤胃酸中毒對瘤胃、瓣胃上皮細胞增殖與凋亡的影響［D］．碩士學位論文．呼和浩特：內蒙古農業(yè)大學，2013．

［17］ CHIN A C，FLYNN A N，FEDWICK J P，et al．The role of caspase?3 in lipopolysaccharide?mediated dis?ruption of intestinal epithelial tight junctions［J］．Cana?dian Journal of Physiology and Pharmacology，2006，84（10）：1043－1050．

［18］ 楊淑青．亞急性瘤胃酸中毒對奶山羊瘤胃上皮屏障功能影響機制的研究［D］．碩士學位論文．呼和浩特：內蒙古農業(yè)大學，2014．

［19］ 楊勇，張巍，王麗英．炎癥性腸病免疫發(fā)病機制的研究進展［J］．中國實驗診斷學，2012，16（1）：181－183．

［20］ SEN G C．Viruses and interferons［J］．Annual Review of Microbiology，2001，55：255－281．

［21］ ANTONY P A，PAULOS C M，AHMADZADEH M，et al．Interleukin?2?dependent mechanisms of tolerance and immunity in vivo［J］．The Journal of Immunolo?gy，2006，176（9）：5255－5266．

［22］ 彭樹靈，楊淑君．九味白術湯對實驗性潰瘍性結腸炎大鼠血清白介素－1β及白介素－10的影響［J］．中國醫(yī)藥導報，2013，10（19）：40－42．

［23］ 張樹坤，姜雪元，謝正露，等．精料飼喂對泌乳山羊血漿激素水平及產乳性能的影響［J］．畜牧與獸醫(yī)，2012，44（增刊）：142．

［24］ ARKINS S，DANTZER R，KELLEY K W．Somatolac?togens，somatomedins，and immunity［J］．Journal of Dairy Science，1993，76（8）：2437－2450．

（責任編輯 王智航）

［25］ SAPOLSKY R M，ROMERO L M，MUNCK A U．How do glucocorticoids influence stress responses？Integrating permissive，suppressive，stimulatory，and preparative actions［J］．Endocrine Reviews，2000，21 （1）：55－89．

Effects of Subacute Ruminal Acidosis on Plasma Cytokine and Hormone Contents in Dairy Goats

HU Honglian1XIE Tianyu2YANG Shuqing2GAO Min1YAO Yanchu3?
（1．Institue of Animal Nutrition and Feed，Inner Mongolia Academy of Agricultural＆Animal Husbandry Sciences，Hohhot 010031，China；2．College of Animal Science，Inner Mongolia Agriculture University，Hohhot 010018，China；3．Institute of Animal Nutrition，Chongqing Academy of Animal Sciences，
Chongqing 402460，China）

?Corresponding author，associate professor，E?mail：yc1223＠163．com

Abstract：This experiment was conducted to investigate the effects of subacute ruminal acidosis（SARA）in?duced by gradually increasing dietary non?fiber carbohydrate／neutral detergent fiber ratios（NFC／NDF）on plasma hormone and cytokine contents in dairy goats．Nine healthy lactating Saanen dairy goats with similar body weight were randomly allocated to three groups（control group，SARA group and recovery group，n＝3）．Dairy goats in control group were fed a basal diet；those in SARA group and recovery group were fed diets with different NFC／NDF（1．40，1．79，2．31 and 3．23，respectively，each for 15 days），which gradually in?duced SARA；those in recovery group were ad libitum fed green hay for 30 days after SARA．The three goats in control group were slaughtered on days 30，60（together with SARA goup）and 90 of feeding（together with recovery group）．The results showed as follows：1）plasma lipopolysaccharide（LPS）concentration was increased for a long time as a result of SARA challenge，and there was no significant difference between SARA group and recovery group（P＞0．05）．2）Compared with control group，the contents of plasma tumor necrosis factor?α（TNF?α），interleukin（IL）?1β and IL?6 tended to be increased（P＞0．05），and IL?2 content was significantly increased（P＜0．05），but interferon?γ（IFN?γ）content was significantly decreased（P＜0．05），and the contents of plasma IL?4，IL?8 and IL?10 tended to be decreased in SARA group（P＞0．05）；the con?tents of plasma growth hormone，insulin?like growth factor?Ⅰand insulin were not changed（P＞0．05），and the contents of prolactin and cortisol were significantly increased（P＜0．05）．3）Compared with SARA group，the contents of plasma TNF?α，IL?1β，IL?2，IL?6 in recovery group were still persistently increased，in which IL?1β and IL?2 contents were significantly increased（P＜0．05）；plasma prolactin content stayed at the same level as SARA group（P＞0．05），and plasma cortisol content was back to the same level as control group（P＞0．05）．These results indicate that SARA can increase plasma LPS concentration of dairy goats，which can lead to systemic immune and inflammatory responses，endocrine hormones alterations．These changes will result in stress of dairy goats for a long time．［Chinese Journal of Animal Nutrition，2015，27（2）：418?425］

Key words：SARA；dairy goat；cytokine；hormone

通信作者：?姚焰礎，副研究員，E?mail：yc1223＠163．com

作者簡介：胡紅蓮（1977—），女，內蒙古烏拉特前旗人，副研究員，博士，主要從事反芻動物營養(yǎng)調控技術研究。E?mail：honglianhu2010＠163．com

基金項目：國家自然科學基金項目（31101739）；現代農業(yè)（奶牛）產業(yè)技術體系建設專項資金（CARS?37）

收稿日期：2014－09－02

doi：10．3969／j．issn．1006?267x．2015．02．012

文章編號：1006?267X（2015）02?0418?08

文獻標識碼：A

中圖分類號：S826