劉 寧崔桂山楊 玲楊在賓??楊維仁姜淑貞張桂國（．山東農(nóng)業(yè)大學動物科技學院，泰安2708；2．濰坊亨懋動物保健品有限公司，濰坊2604；．山東省畜牧總站，濟南250022）

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冬季條件下維生素A水平對蛋雞抗氧化能力及血清、肝臟和雞蛋維生素A含量的影響

劉 寧1崔桂山2?楊 玲3楊在賓1??楊維仁1姜淑貞1張桂國1
（1．山東農(nóng)業(yè)大學動物科技學院，泰安271018；2．濰坊亨懋動物保健品有限公司，濰坊261041；3．山東省畜牧總站，濟南250022）

摘 要：本試驗旨在研究冬季條件下維生素A水平對蛋雞抗氧化能力及血清、肝臟和雞蛋中維生素A含量的影響。選取525只43周齡健康海蘭褐蛋雞，隨機分為5個組，每個組5個重復，每個重復21只雞。對照組飼喂基礎飼糧（維生素A水平為8 000 IU／kg），試驗組飼糧維生素A水平分別為10 500、13 000、15 500和18 000 IU／kg，其他維生素水平與對照組飼糧保持相同，試驗期42 d。結果表明：隨維生素A水平的增加，血清總抗氧化能力和超氧化物歧化酶的活性呈先升后降趨勢，血清丙二醛含量降低，肝臟中維生素A含量升高，且肝臟中維生素A含量與飼糧維生素A水平顯著線性相關（P＜0．05）；第21和42天時，維生素A水平為8 000～15 500 IU／kg時，隨維生素A水平的增加，雞蛋中的維生素A含量顯著增加（P＜0．05），而維生素A水平為15 500～18 000 IU／kg時，隨維生素A水平的增加，雞蛋中維生素A含量反而顯著降低（P＜0．05）。由此可知，在本試驗條件下，飼糧維生素A水平為10 500～13 000 IU／kg時，蛋雞可以獲得較強的血清抗氧化能力；維生素A水平為15 500 IU／kg時，蛋雞血清、肝臟和雞蛋中可獲得較高的維生素A沉積量。

關鍵詞：維生素A；抗氧化能力；血清維生素A；肝臟維生素A；雞蛋維生素A

??通信作者：楊在賓，教授，博士生導師，E?mail：zbyang204＠163．com

維生素A是蛋雞生產(chǎn)需要的重要脂溶性維生素之一，在體外試驗中被證實是一種有效的抗氧化劑［1－2］，體內試驗中也被證實為一種有效的抗氧化和清除自由基物質［3］。肝臟和血清中維生素A水平是評定飼糧維生素A水平是否滿足需要的敏感指標［4］，而雞蛋中維生素A含量分析是一項估測產(chǎn)蛋雞維生素A營養(yǎng)狀況的診斷技術，通過對雞蛋中維生素A含量的分析測定可以估測飼糧最適維生素A水平，還可以直接用于測定維生素A的生物學效價［5］。目前關于適宜條件以及熱應激下蛋雞維生素A的適宜添加水平的研究較多［6］，但冬季條件下維生素A適宜添加水平卻鮮有報道，北方冬季溫度較低（一般在4℃以下），而當外界溫度降到或低于4℃時，即可引起家禽發(fā)生冷應激［7］，但對于冬季條件下維生素A水平對海蘭褐產(chǎn)蛋雞血清抗氧化以及血清、肝臟和蛋中維生素A沉積量的研究國內未見報道。因此，本試驗從以上4個方面探討冬季條件下蛋雞飼糧適宜維生素A水平。

1　材料與方法

1．1 試驗材料

維生素A由濰坊亨懋動物保健品有限公司提供。

1．2 試驗設計及飼糧

選525只43周齡健康海藍蘭蛋雞，隨機分成5個組，每組5個重復，每個重復21只。對照組飼喂基礎飼糧，按我國《雞飼養(yǎng)標準》維生素A推薦量（8 000 IU／kg）供給；試驗組飼糧在基礎飼糧中依次增加2 500 IU／kg，即維生素A水平分別為10 500、13 000、15 500和18 000 IU／kg，其他維生素水平與對照組飼糧相同?；A飼糧參照NRC （1994）蛋雞標準配制，其組成及營養(yǎng)水見表1。

表1　基礎飼糧組成及營養(yǎng)水平（干物質基礎）Table 1　Composition and nutrient levels of the basal diet（DM basis）　%

1．3 飼養(yǎng)管理

試驗前，飼喂雞場飼糧，收集2周的基礎數(shù)據(jù)，然后換試驗飼糧。試驗期42 d，冬季（外界氣溫變動范圍為－15～2℃，雞舍內溫度變動范圍為5～12℃）進行試驗。試驗雞采用2層階梯式籠養(yǎng)，自由采食與飲水，自然光和人工光照相結合，光照時間為16 h。按蛋雞飼養(yǎng)管理要求進行免疫和消毒。

1．4 試樣采集

于試驗的第1、21、42天，每個重復取2枚雞蛋，每個組共10枚雞蛋用于測定雞蛋維生素A的含量。

試驗結束時每個重復選2只雞，每個組共10只，翅靜脈采血10 mL，以3 000 r／min離心10 min，分離血清，放入－20℃保存待測抗氧化及維生素A含量。采血后屠宰，取肝臟并迅速液氮凍存，待測肝臟維生素A含量。

1．5 檢測指標及方法

1．5．1 抗氧化能力指標

采用試劑盒測定血清中總抗氧化能力（T?AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量，試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。

1．5．2 雞蛋中維生素A含量的測定

測定方法采用GB／T 5009．82—2003《食品中維生素A和維生素E的測定》［8］的方法。

1．5．3 血清及肝臟維生素A含量的測定

血清維生素A含量，采用反相高效液相色譜法測定，波長為325 nm。

肝臟維生素A含量同雞蛋維生素A含量的測定方法相同。

1．6 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)采用SAS 9．2統(tǒng)計軟件進行單因素方差分析（one?way ANOVA）和LSD，差異顯著性采用Duncan氏法進行多重比較，并對維生素A水平的處理效應進行線性和二次回歸分析。P＜0．05為差異顯著。

2　結果與分析

2．1 維生素A水平對蛋雞血清抗氧化能力的影響

由表2可知，飼糧維生素A水平顯著影響蛋雞血清抗氧化能力（P＜0．05）。隨維生素A水平的增加，T?AOC呈線性（P＜0．05）或二次曲線升高（P＜0．05），SOD活性呈二次曲線升高（P＜0．05），MDA含量呈線性（P＜0．05）或二次曲線降低（P＜0．05）。維生素A水平為10 500和13 000 IU／kg時，T?AOC和SOD活性顯著高于8 000 IU／kg時（P＜0．05），而MDA含量顯著低于8 000 IU／kg時（P＜0．05）；與8 000 IU／kg組相比，15 500 IU／kg 組MDA含量顯著降低（P＜0．05），T?AOC和SOD活性差異不顯著（P＞0．05）。維生素A添加水平達到18 000 IU／kg時，雖然MDA含量顯著低于其他水平（P＜0．05），但T?AOC的活性顯著低于8 000 IU／kg時（P＜0．05），而SOD活性與其他水平差異不顯著（P＞0．05）。

表2　維生素A水平對蛋雞血清抗氧化能力的影響Table 2　Effects of vitamin A level on the serum antioxidant capacity of laying hens

2．2 維生素A水平對蛋雞血清、肝臟維生素A含量的影響

由表3可知，飼糧維生素A水平顯著影響蛋雞血清和肝臟維生素A含量（P＜0．05）。隨維生素A水平的增加，血清中維生素A的含量呈二次曲線變化（P＜0．05），肝臟中維生素A含量呈線性（P＜0．05）或二次曲線升高（P＜0．05）。與18 000 IU／kg組相比，15 500 IU／kg組血清維生素A含量差異不顯著（P＞0．05），但其余組間差異顯著（P＜0．05）。10 500 IU／kg組肝臟中維生素A含量與13 000 IU／kg組差異不顯著（P＞0．05），但與其他組間差異顯著（P＜0．05）。

表3　維生素A水平對血清和肝臟維生素A含量的影響Table 3　Effects of vitamin A level on the content of vitamin A in serum and liver of laying hens

2．3 維生素A水平對雞蛋維生素A含量的影響

由表4可知，第21和42天時，飼糧維生素A水平顯著影響雞蛋維生素A含量（P＜0．05）。試驗第21天時，隨維生素A水平從8 000 IU／kg增加到18 000 IU／kg，雞蛋中維生素A含量顯著升高（P＜0．05），且呈線性（P＜0．05）或二次曲線升高（P＜0．05）。試驗第42天時，隨維生素A水平的增加，雞蛋中維生素A含量顯著增加（P＜0．05），且呈現(xiàn)線性（P＜0．05）或二次曲線升高（P＜0．05）。當維生素A水平為18 000 IU／kg時，第21、42天雞蛋中維生素A含量較15 500 IU／kg時顯著降低（P＜0．05）。

表4　維生素A水平對雞蛋維生素A含量的影響Table 4　Effects of vitamin A level on the content of vitamin A in eggs

3　討 論

3．1 維生素A水平對蛋雞血清抗氧化能力的影響

本試驗中的飼糧維生素A水平是在NY／T 33—2004推薦量8 000 IU／kg的基礎上繼續(xù)添加，試驗結果表明維生素A添加水平的增加提高了血清T?AOC和SOD活性，且具有先升后降的趨勢。飼糧維生素A水平為10 500和13 000 IU／kg時，血清T?AOC和SOD活性達到最高，但當維生素A水平為15 500和18 000 IU／kg時，T?AOC和SOD活性卻呈現(xiàn)下降的趨勢，這與張養(yǎng)東［9］，任國峰等［10］的研究結果一致，原因可能是維生素A水平不同可不同程度的影響機體的抗氧化能力，適宜水平能有效的降低脂質過氧化反應，增強T?AOC 和SOD的活性，而水平過高產(chǎn)生反抑制效果，不利于機體的抗氧化能力，導致機體平衡狀態(tài)破壞，降低血清T?AOC和SOD的活性。本試驗還發(fā)現(xiàn)，維生素A添加水平從8 000 IU／kg增加到18 000 IU／kg，血清MDA含量顯著降低，這與謝登玉等［11］的研究結果一致，其原因可能是在冷應激作用下，打破了機體自由基產(chǎn)生與清除的平衡的狀態(tài)，自由基的大量積累出現(xiàn)脂質過氧化，這就使得動物的飼糧中維生素A及其他抗氧化營養(yǎng)物質除了能滿足基本的營養(yǎng)需要外，還要求能維持自由基穩(wěn)衡狀態(tài)［12］，即機體對維生素A的需要量發(fā)生改變。

3．2 維生素A水平對蛋雞血清、肝臟維生素A含量的影響

一般認為維生素A在血清和肝臟中的含量是評定飼糧維生素A水平是否滿足需要的敏感指標［4］。本試驗結果表明，維生素A水平為8 000～13 000 IU／kg時，血清維生素A含量隨飼糧維生素A水平的升高而顯著降低；維生素A水平為15 500～18 000 IU／kg時，血清維生素A含量保持相對穩(wěn)定，這說明，維生素A水平低于15 500 IU／kg，尚不能滿足冬季蛋雞維持血清維生素A正常含量的需要，而添加15 500～18 000 IU／kg維生素A時血清維生素A含量能夠維持相對穩(wěn)定。該結果可以解釋為當飼糧維生素A水平低于某一范圍時，血清維生素A含量下降；而高于某一范圍時，血清維生素A含量則增加；當超過一定范圍時，增加幅度變小，并保持穩(wěn)定［13］。

本研究發(fā)現(xiàn)，肝臟維生素A的含量與飼糧維生素A水平存在顯著的線性相關，這與張麗萍等［14］、張春善等［15］研究結果一致，同時Surai等［16］的試驗表明，給雞強制灌入維生素A，能夠增加肝臟維生素A的沉積量，這說明肝臟是維生素A的存儲器官，其維生素A含量的變化直接反映機體維生素A的攝入情況，同時肝臟具有調節(jié)外周維生素A含量的能力，攝入大量維生素A時，肝臟可將其儲存，避免血液中維生素A含量過高，而維生素A缺乏時，動員肝臟釋放滿足組織需要［17］。

3．3 維生素A水平對雞蛋維生素A含量的影響

雞蛋中正常維生素A含量的分析測定可以估測飼糧最適的維生素A水平，還可直接用于測定維生素A的生物學利用率。Hill等［18］在研究蛋雞維生素A需要量時發(fā)現(xiàn)，飼糧維生素A的水平從1 980 IU／kg增加到22 000 IU／kg時，雞蛋中維生素A含量提高了23倍。Surai等［16］在蛋雞飼糧中添加10 000、20 000、100 000和400 000 IU／kg的維生素A，結果發(fā)現(xiàn)在每個添加水平均能使雞蛋中維生素A的含量增加，在最高水平組中，每克蛋黃中維生素A含量達到85．1 mg。以上研究與本試驗得出的結論相似，另外本試驗還發(fā)現(xiàn)，當維生素A水平從15 500 IU／kg升高至18 000 IU／kg時，雞蛋中維生素A的含量卻顯著降低，這可能是因為過高水平的維生素A對機體的正常代謝造成了損害，導致維生素A在雞蛋中的沉積量減少。

4　結 論

綜合考慮國家相關規(guī)定和成本因素，冬季條件下海蘭褐產(chǎn)蛋雞維生素A水平為10 500～13 000 IU／kg時可以獲得較強的血清抗氧化能力；維生素A水平為15 500 IU／kg時，血清、肝臟和雞蛋維生素A沉積量較高。

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Effects of Vitamin A Level on Antioxidant Capacity in Serum，Vitamin A Contents in Serum，Liver and Egg of Laying Hens in Winter

LIU Ning

1

CUI Guishan

2?

YANG Ling

3

YANG Zaibin

1??

YANG Weiren

1

JIANG Shuzhen

1

ZHANG Guiguo

1

（責任編輯 陳 燕）

（1．College of Animal Science and Technology，Shandong Agricultural University，Tai’an 271018，China；2．Weifang Herao Animal Health Products Co．，Ltd．，Weifang 261041，China；3．Shandong Province Animal Husbandry Station，Jinan 250022，China）

?Contributed equally

??Corresponding author，professor，E?mail：zbyang204＠163．com

Abstract：This experiment was conducted to investigate the effects of vitamin A level on antioxidant function and vitamin A contents in serum，liver and egg of laying hens in winter．A total of 525 healthy Hy?line laying hens were randomly divided into 5 groups with 5 replicates per group and 21 hens per replicate．Hens in the control group were fed a basal diet（contained 8 000 IU／kg vitamin A），and the others in experimental groups were fed diets which contained 10 500，13 000，15 500 and 18 000 IU／kg vitamin A，respectively．All groups had the same level of other vitamins．The experiment lasted for 42 days．The results showed as follows：the ser?um total antioxidant capacity（T?AOC）and superoxide dismutase（SOD）activity increased first and then de?creased with the level of vitamin A increasing，however，the serum content of methane dicarboxylic aldehyde （MDA）was decreased．The content of vitamin A in liver was increased with the level of vitamin A increasing，moreover，the liver content of vitamin A was increased linearly（P＜0．05）．The content of vitamin A in eggs increased significantly with the level of vitamin A from 8 000 to 15 500 IU／kg（P＜0．05），but the content of vitamin A in eggs decreased significantly with the level of vitamin A from 15 500 to 18 000 IU／kg on days 21 and 42（P＜0．05）．In conclusion，dietary vitamin A level from 10 500 to 13 000 IU／kg can obtain the better antioxidant capacity，more contents of vitamin A can obtain in serum，liver and eggs with the level of vitamin A on 15 500 IU／kg．［Chinese Journal of Animal Nutrition，2015，27（7）：2209?2214］

Key words：vitamin A；antioxidant capacity；serum vitamin A；liver vitamin A；egg vitamin A

作者簡介：劉 寧（1989—），男，山東泰安人，碩士研究生，從事動物營養(yǎng)與飼料科學的研究。E?mail：nuli982390＠163．com?同等貢獻作者

收稿日期：2015－01－29

doi：10．3969／j．issn．1006?267x．2015．07．027

文章編號：1006?267X（2015）07?2209?06

文獻標識碼：A

中圖分類號：S816．72；S831