范子玲，周玉龍，夏 成，吳 凌，舒 適，許楚楚，肖鑫煥，王 剛，白云龍（黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，黑龍江 大慶 163319）

黑龍江省某豬場散發(fā)慢性豬瘟的診斷

范子玲，周玉龍，夏 成★，吳 凌，舒 適，許楚楚，肖鑫煥，王 剛，白云龍
（黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，黑龍江 大慶 163319）

豬瘟是由豬瘟病毒引起的豬的一種急性或慢性、熱性和高度接觸性傳染病。近年，由于普遍采取疫苗接種等預(yù)防措施，豬瘟流行形式發(fā)生了變化，呈散發(fā)性流行。2015年10月，黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)獸醫(yī)院接到來自大慶某豬場的3頭發(fā)病豬，根據(jù)發(fā)病情況、臨床檢查、剖檢病理變化及RT-PCR檢測結(jié)果，最終確診為慢性豬瘟。

慢性豬瘟；發(fā)病情況；臨床檢查；病理剖檢變化；RT-PCR檢測

豬瘟是一種高度接觸性、傳染性的病毒性疾病。豬是本病唯一的自然宿主，不同品種、年齡和性別的豬均可感染，患病和弱毒株感染的母豬，可經(jīng)胎盤垂直感染胎兒[1]。該病一年四季均可發(fā)生，一般以春、秋較為嚴(yán)重；自然感染潛伏期為5～7 d，短的2 d，長的21 d[2]。在本病常發(fā)地區(qū)，豬群有一定的免疫性，發(fā)病率和病死率較低；在新疫區(qū)發(fā)病率和病死率在90%以上。本病呈世界性分布，由于危害程度高，對養(yǎng)豬業(yè)造成巨大經(jīng)濟(jì)損失，世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）將本病列入A類16種法定傳染病之一，并規(guī)定為國際重要檢疫對象[3]。

根據(jù)臨床癥狀的表現(xiàn)程度和持續(xù)時(shí)間，豬瘟可分為急性型、慢性型、溫和型。急性型豬瘟，病豬癥狀很明顯，病死率極高[4]。慢性型豬瘟臨床癥狀：病豬體溫升高不明顯，病程長，可超過1個(gè)月，貧血，消瘦，常伏臥，行走無力，有時(shí)輕熱，食欲不振，便秘和腹瀉交替出現(xiàn)，有的患豬皮膚呈紫斑或出現(xiàn)死痂[5]。其剖檢病理變化為出血和梗死變化不明顯，但回腸末端、盲腸和結(jié)腸常有特征性壞死和紐扣狀潰瘍[6]。由于疫苗接種等預(yù)防措施的作用下，慢性型豬瘟發(fā)病率低，臨床癥狀較輕，病程較長，不易診斷，易被忽視，會(huì)給養(yǎng)豬業(yè)帶來很大的損失。因此，慢性豬瘟被列為養(yǎng)豬場亟需解決的重要疫病之一。本文現(xiàn)就某豬場散發(fā)的慢性豬瘟的診斷情況介紹如下。

1 發(fā)病情況

黑龍江大慶地區(qū)某豬場飼養(yǎng)母豬135頭、育肥豬400頭，保育豬350頭及未斷奶仔豬共1 000多頭，各個(gè)階段的豬分舍飼養(yǎng)。該豬場有較規(guī)范性的免疫程序，母豬接種疫苗種類（豬瘟疫苗、偽狂犬疫苗、口蹄疫疫苗、細(xì)小病毒疫苗和水腫病疫苗等）；仔豬接種疫苗種類及時(shí)間（豬瘟兔化弱毒疫苗，30 d左右；偽狂犬疫苗，50 d左右；口蹄疫疫苗，60 d左右）。此次發(fā)病豬為2頭育肥豬和1頭保育豬，2頭育肥豬2015年10月8日發(fā)病，次日即死亡，1頭保育豬送檢當(dāng)日（2015年10月9日）發(fā)病，未死亡。

2 臨床癥狀

2頭育肥豬（編號(hào)1、2）在8日早上八時(shí)發(fā)現(xiàn)精神沉郁，行動(dòng)緩慢，不進(jìn)食，頭部下垂，次日9時(shí)發(fā)現(xiàn)死亡。其中1號(hào)豬體表有廣泛出血點(diǎn)（圖1），尤其是腹下、耳根和四肢內(nèi)側(cè)等部位明顯，腹部膨大，眼瞼水腫（圖2）；2號(hào)豬腹部膨大，體表無其他異常。1頭保育豬（編號(hào)3）送檢當(dāng)日早上發(fā)病，不能站立，呈游泳狀，體表無其他異常。1頭保育豬（編號(hào)3）送檢當(dāng)日早上發(fā)病，不能站立，呈游泳狀，體表無其他異常。

圖1 1號(hào)豬皮膚廣泛出血點(diǎn)Fig.1 Widely hemorrhagic spot of the swine

圖2 1號(hào)豬眼瞼水腫Fig.2 Palpebral edema of the swine

3 病理剖檢變化

1號(hào)豬：下頜淋巴結(jié)水腫、出血，喉頭充血，脾出現(xiàn)黑色梗死灶，肝無異常，肺炎性水腫，腎無異常，膀胱黏膜出血，腸鼓氣，回盲腸部有紐扣狀的偽膜性壞死和潰瘍（圖3）。

圖3 1號(hào)豬回盲腸部紐扣狀Fig.3 Status marmoratus showing ileocecum of the swine mandibulares on the cross section of the lymphonodi

2號(hào)豬：喉頭、下頜淋巴結(jié)水腫，下頜淋巴結(jié)大理石樣出血（圖4），喉頭充血，腹腔積血水、纖維素性滲出，脾出血，肝邊緣壞死，肺無異常，膀胱黏膜出血，腎有壞死灶、質(zhì)軟，胃黏膜出血，腸鼓氣，腸黏膜出血、內(nèi)容物呈番茄醬樣，回盲腸部有紐扣狀的偽膜性壞死和潰瘍。

3號(hào)豬：下頜淋巴結(jié)水腫、出血不嚴(yán)重，喉頭有出血點(diǎn)，脾腫大、出血、梗死（圖5），肝壞死，腎盂出血（圖6），腎發(fā)白、質(zhì)軟，胃黏膜潰瘍，回盲腸部有紐扣狀的偽膜性壞死和潰瘍。

圖4 2號(hào)豬下頜淋巴結(jié)切面大理石樣Fig.4 Buttonhole lesion in

圖5 3號(hào)豬脾腫大、出血、梗死Fig.5 Enlargement,hemorrhage and

圖6 3號(hào)豬腎盂出血Fig.5 Hemorrhage in the pelvis of infarction on the spleen of the swine the swine

4 反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-PCR）

在無菌條件下（超凈臺(tái)），分別取3頭豬的脾組織約1 g，用滅菌研磨器充分研磨，經(jīng)處理后，提取豬瘟病毒RNA，合成cDNA，以此為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增，反應(yīng)體系為25 μL，取PCR擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行電泳、照膠，目的片段為288 bp[7]。

圖7 3頭豬RT-PCR檢測結(jié)果Fig.7 RT-PCR Detection results of three swine

由圖7可見，用RT-PCR方法擴(kuò)增出的3頭豬病毒的目的片段都在288 bp左右，與預(yù)計(jì)的理論值相符，表明此3頭豬病原為豬瘟病毒。

5 診斷

根據(jù)發(fā)病情況、臨床癥狀、剖檢病理變化及RTPCR檢測結(jié)果可確診3頭豬患慢性豬瘟。

6 分析討論

本豬場在豬30日齡時(shí)已接種過豬瘟兔化弱毒疫苗，仍有3頭豬發(fā)病，說明絕大部分的豬獲得了良好的免疫保護(hù)，達(dá)到了預(yù)防效果，但是應(yīng)盡量杜絕免疫后還會(huì)發(fā)病的現(xiàn)象。經(jīng)過調(diào)查，發(fā)現(xiàn)這3頭豬發(fā)病應(yīng)該與漏打或疫苗接種不規(guī)范所致的免疫劑量不足有關(guān)[8-9]。除此之外，造成免疫失敗的原因還有很多：如疫苗選擇不當(dāng)，疫苗保存運(yùn)輸不當(dāng)，免疫抑制劑的應(yīng)用，免疫程序不合理，有免疫空檔，母豬豬瘟病毒持續(xù)性感染，免疫豬出現(xiàn)免疫耐受等[10]。

通過病理剖檢變化，觀察到特征性病變，回盲腸部有紐扣狀的偽膜性壞死和潰瘍，已基本確認(rèn)該病為慢性豬瘟，但是與問診結(jié)果不相符：2頭豬發(fā)病次日即死亡，從發(fā)病持續(xù)時(shí)間和死亡時(shí)間來看，該病發(fā)病急，不符合慢性豬瘟癥狀。后經(jīng)過進(jìn)一步詢問，得知3頭豬發(fā)病已有幾天，懷疑是水腫病，就用治療水腫病方法進(jìn)行治療，直到有2頭病豬死亡才送檢。由此看來，就可以完全確診為慢性豬瘟。

豬瘟的診斷方法有很多，例如動(dòng)物接種試驗(yàn)、免疫熒光抗體試驗(yàn)等[11]，但這些診斷方法費(fèi)時(shí)較長，不利于豬瘟的快速診斷及快速針對性防疫的實(shí)際需要，而RT－PCR診斷方法采取少量病料（實(shí)質(zhì)臟器和體液等）即可對豬瘟進(jìn)行快速診斷，且對所有類型的豬瘟都是一種有效的快速診斷方法[12]。因此，在本次病例中采用RT-PCR進(jìn)行快速確診。

通常豬場一旦發(fā)生豬瘟，需要采取的緊急防控措施有：①處理病死豬，深埋；②對未發(fā)病豬緊急接種豬瘟兔化弱毒疫苗，進(jìn)行加強(qiáng)免疫[13]；③認(rèn)真消毒被污染地方，糞便堆積發(fā)酵、無害化處理；④平時(shí)做好疫病監(jiān)測[14]；⑤制定合理的免疫程序；⑥加強(qiáng)飼養(yǎng)管理。然而，由于本豬場散發(fā)了慢性豬瘟，提示豬場疫苗免疫還存在漏洞，患病的豬將成為傳染源[15]，對其他豬群構(gòu)成危害，一旦疫區(qū)未患病豬免疫力降低，就會(huì)被感染而患病，這樣就隨時(shí)有暴發(fā)豬瘟的危險(xiǎn)。因此，一般情況下對沒有發(fā)病的同群豬常應(yīng)用大劑量的疫苗，一方面是強(qiáng)烈刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體；另一方面是疫苗抗原的占位作用，能阻止強(qiáng)毒對其他正常細(xì)胞和組織的侵襲和毒害；而且，疫苗抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生干擾素，會(huì)抑制病毒的繁殖[16]。

綜上所述，豬瘟的防控重點(diǎn)以預(yù)防為主，及時(shí)嚴(yán)格的接種疫苗可以降低發(fā)病率，減少損失。因此，應(yīng)高度重視免疫監(jiān)測，及時(shí)掌握豬群的整體免疫狀態(tài)，制定出適于各自豬場的個(gè)性化免疫程序。

[1]寧宜寶，王琴，趙耘.豬瘟病毒持續(xù)感染與豬瘟預(yù)防控制[J].中國獸藥雜志，2005，39（5）：31-35.

[2]陳浦言.獸醫(yī)傳染病學(xué)[M].第5版.北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2006，210-216.

[3]李道龍.豬瘟診斷防制策略[J].農(nóng)技服務(wù)，2014，31 (10):132-132.

[4]陶玉順，黃濤，袁東波，等.目前我國豬瘟的流行現(xiàn)狀及防控策略[J].畜牧與獸醫(yī)，2008，40（8）：90-94.

[5]魏良思，凌靜.仔豬慢性豬瘟的診斷及預(yù)防[J].豬業(yè)科學(xué)，2006，23（3）：30-31.

[6]南金魚，王建鋒.慢性豬瘟的診斷與防制[J].甘肅畜牧獸醫(yī)，2007，37（2）：21-22.

[7]吳凌，白云龍，冉旭華，等.仔豬散發(fā)亞臨床豬瘟及其抗體效價(jià)分析[J].現(xiàn)代畜牧獸醫(yī)，2014（7）：35-38.

[8]Dong X N,Chen Y H.Marker vaccine strategies and candidate CSFV marker vaccines[J].Vaccine,2007,25（2）：205-230.

[9]石軍，趙武，梁家幸，等.非典型豬瘟的診斷與防制對策[J].廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009，40（1）：88-91.

[10]陳友貴.豬瘟診斷與防疫[J].四川畜牧獸醫(yī)，2009（9）：50-51.

[11]李升和.豬瘟的診斷及其科學(xué)防制[J].畜牧與飼料科學(xué)，2009（7）：48-53.

[12]Zhang X J,Han Q Y,Sun Y,et al.Development of a triplex TaqMan real-time RT-PCR assay for differential detection of wild-type and HCLV vaccine strains of classical swine fever virus and bovine viral diarrhea virus 1 [J].Research in veterinary science,2012,92（3）:512-518.

[13]仇華吉，童光志，沈榮顯.豬瘟兔化弱毒疫苗——半個(gè)世紀(jì)的回顧[J].中國農(nóng)業(yè)科學(xué)，2005，38（8）：1675-1685.

[14]姚文生，范學(xué)政，王琴，等.我國豬瘟流行現(xiàn)狀與防控措施建議[J].中國獸藥雜志，2011，45（9）：44-47.

[15]王海平.豬瘟免疫失敗的原因及對策探析[J].畜牧獸醫(yī)雜志，2012，31（4）：123-124.

[16]譚海，陳忠，王剛.規(guī)模化豬場非典型豬瘟的診斷及綜合防制[J].動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2003，24（5）：135-135.

The diagnosis of sporadic chronic swine fever in the pig farm of Heilongjiang province

Fan Ziling,Zhou Yulong,Xia Cheng*,Wu Ling,Shu Shi, Xu Chuchu,Xiao Xinhuan,Wang Gang,Bai Yunlong
(College of Animal Science and Veterinary Medicine,Heilongjiang Bayi Agricultural University,Heilongjiang Daqing 163319)

Classical swine fever is an acute or chronic,feverish and highly contagious disease of swine,caused by classical swine fever virus.In recent years,the prevalence of classical swine fever has shown sporadic due to widespread vaccination.In October 2015,the veterinary hospital of Heilongjiang Bayi Agricultural University treated three infected swine,according to the results of incidence,clinical examination,pathologic measurement and RT-PCR detection,the three swine were diagnosed as chronic swine fever.

Chronic swine fever;Incidence;Clinical examination;Pathological changes;RT-PCR detection

S858.28

B

1672-9692(2015)12-0043-04

2015-09-21

范子玲（1991-），女，在讀碩士，研究方向?yàn)榕R床獸醫(yī)學(xué)科研和實(shí)踐。

夏成（1964-），男，博士，教授，主要研究方向?yàn)槟膛I養(yǎng)代謝病。