食管鱗狀細(xì)胞癌中Survivin和Smac蛋白的表達(dá)及與臨床病理的關(guān)系

李新宇張海云何榮琦張萬(wàn)飛許榮譽(yù)

(福建醫(yī)科大學(xué)附屬泉州第一醫(yī)院胸部腫瘤外科，福建泉州362000)

摘要〔〕目的探討食管鱗狀細(xì)胞癌中Survivin和Smac蛋白的表達(dá)及與臨床病理的關(guān)系。方法收集該院2013年5月至2014年6月行手術(shù)治療的60例食管鱗狀細(xì)胞癌患者手術(shù)存檔標(biāo)本，使用免疫組化法檢測(cè)Survivin和Smac蛋白在癌細(xì)胞組織及正常組織中的表達(dá)，同時(shí)比較Survivin和Smac蛋白表達(dá)與食管鱗狀細(xì)胞癌臨床病理特征的關(guān)系，分析Survivin和Smac蛋白表達(dá)的相關(guān)性。結(jié)果食管鱗狀細(xì)胞癌組織中Survivin陽(yáng)性表達(dá)率為70.0%，明顯高于癌旁正常組織23.3%(P<0.05)；而Smac蛋白在食管鱗狀細(xì)胞癌組織中陽(yáng)性表達(dá)率為66.7%，低于周圍正常組織88.3%(P<0.05)。Survivin蛋白的表達(dá)與患者TNM分期、浸潤(rùn)程度呈明顯相關(guān)性，在Ⅲ期及深層浸潤(rùn)組織中陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于Ⅰ期及淺層浸潤(rùn)組織(P<0.05)；Smac蛋白表達(dá)與患者TNM分期呈明顯相關(guān)性，其在Ⅲ期中陽(yáng)性表達(dá)率明顯低于Ⅰ期(P<0.05)；在食管鱗狀細(xì)胞癌中，Survivin的表達(dá)明顯高于Smac蛋白表達(dá)，兩者呈明顯負(fù)相關(guān)性(r =-0.397，P=0.009)。結(jié)論Survivin和Smac蛋白的表達(dá)與食管鱗狀細(xì)胞癌的發(fā)生發(fā)展具有一定相關(guān)性，可作為治療及預(yù)后預(yù)測(cè)的重要指標(biāo)。

關(guān)鍵詞〔〕食管鱗狀細(xì)胞癌；Survivin蛋白；Smac蛋白

中圖分類號(hào)〔〕R735〔文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼〕A〔

通訊作者：許榮譽(yù)(1964-)，男，碩士，主任醫(yī)師，主要從事胸部腫瘤外科研究。

第一作者：李新宇(1979-)，男，主治醫(yī)師，主要從事胸部腫瘤外科研究。

癌癥發(fā)生發(fā)展與細(xì)胞凋亡具有密切相關(guān)性。細(xì)胞凋亡作為高度保守性的細(xì)胞主動(dòng)死亡的調(diào)控機(jī)制，主要通過(guò)促凋亡因子和抑凋亡因子之間的相互作用完成整個(gè)調(diào)控過(guò)程，正常的細(xì)胞凋亡對(duì)機(jī)體的生長(zhǎng)和發(fā)育具有重要意義〔1〕。Survivin是近年來(lái)新發(fā)現(xiàn)的腫瘤細(xì)胞凋亡抑制蛋白(IAP)家族成員之一，具有高度特異性，在胚胎和發(fā)育的胎兒組織和多種腫瘤組織中均有表達(dá)。Smac蛋白是一種由線粒體釋放到細(xì)胞質(zhì)的重要的凋亡調(diào)節(jié)子，可通過(guò)與IAP結(jié)合，使其喪失抑制作用，對(duì)細(xì)胞凋亡的完成具有重要作用〔2〕。本研究擬探討食管鱗狀細(xì)胞癌組織中Survivin和Smac蛋白的表達(dá)與患者臨床病理的關(guān)系。

1資料與方法

1.1一般資料收集我院2013年5月至2014年6月收治的60例行手術(shù)切除的TNM Ⅰ～Ⅲ期食管鱗狀細(xì)胞癌的手術(shù)存檔標(biāo)本，所有患者均經(jīng)病理診斷為食管鱗狀細(xì)胞癌，男35例，女25例；年齡38～74〔平均(54.3±8.9)〕歲；依據(jù)國(guó)際抗癌聯(lián)盟(2002年)TNM分期標(biāo)準(zhǔn)：Ⅰ期19例，Ⅱ期26例，Ⅲ期15例；無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移34例，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移26例。所有患者均未接受術(shù)前放化療及其他藥物治療，排除并發(fā)嚴(yán)重心、腎、肺等重要器官功能不全及全身系統(tǒng)性疾病患者。

1.2Survivin和Smac蛋白檢測(cè)采用免疫組化法檢測(cè)Survivin和Smac蛋白表達(dá)。組織蠟塊切片厚度為3～4 μm，采用兔抗人Survivin多克隆抗體及鼠抗人Smac單抗，免疫組化染色試劑盒為北京中杉金橋生物技術(shù)公司生產(chǎn)，一抗?jié)舛仍O(shè)為1∶100。400倍光鏡下觀察，盲法計(jì)數(shù)5～10個(gè)視野的陽(yáng)性細(xì)胞百分比，分別以陽(yáng)性標(biāo)記指數(shù)(LI)表示。

1.3結(jié)果判定Survivin及Smac陽(yáng)性判定：組織切片染色以胞質(zhì)染成淡黃或棕黃色為陽(yáng)性，Survivin陽(yáng)性細(xì)胞百分率分級(jí)設(shè)置：<10%計(jì)為(-)，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)占10%～29%為(+)，30%～60%為()，>60%為()；Smac陽(yáng)性細(xì)胞百分率：陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)<5%為(-)，10%～19%為(+)，20%～30%為()，>30%為()。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS16.0軟件，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，相關(guān)性分析應(yīng)用Spearman等級(jí)相關(guān)分析法。

2結(jié)果

2.1Survivin和Smac蛋白在食管鱗狀細(xì)胞癌組織及周圍正常組織中的表達(dá)情況食管鱗狀細(xì)胞癌組織中Survivin陽(yáng)性表達(dá)率為70.0%(42例)，明顯高于癌旁正常組織23.3%(14例)(χ2=26.254，P<0.05)；Smac蛋白在食管鱗狀細(xì)胞癌組織中陽(yáng)性表達(dá)率為66.7%(40例)，低于周圍正常組織88.3%(53例)(χ2=8.082，P<0.05)。

2.2Survivin和Smac蛋白表達(dá)與食管鱗狀細(xì)胞癌臨床病理特征的關(guān)系Survivin蛋白的表達(dá)與患者TNM分期、浸潤(rùn)程度呈明顯相關(guān)性，在Ⅲ期及深層浸潤(rùn)組織中陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于Ⅰ期及淺層浸潤(rùn)組織(χ2=13.242,8.141，P<0.05)；Smac蛋白表達(dá)與患者TNM分期呈明顯相關(guān)性，其在Ⅲ期中陽(yáng)性表達(dá)率明顯低于Ⅰ期(χ2=15.233，P<0.05)。見表1。

表1　Survivin和Smac蛋白表達(dá)與

與Ⅲ期比較：1)P<0.05；與深層比較：2)P<0.05

2.3Survivin和Smac蛋白在食管鱗狀細(xì)胞癌中表達(dá)相關(guān)性分析在食管鱗狀細(xì)胞癌中，Survivin和Smac蛋白的表達(dá)呈明顯負(fù)相關(guān)性(r=-0.397，P=0.009)。

3討論

食管癌的發(fā)生與發(fā)展是一個(gè)多因素參與的復(fù)雜病變過(guò)程，有研究〔3〕表明，促細(xì)胞凋亡相關(guān)基因與食管癌的發(fā)生、發(fā)展具有密切相關(guān)性，因此，從分子水平了解食管鱗狀細(xì)胞癌的發(fā)病機(jī)制對(duì)其預(yù)后及臨床治療具有重要意義。Survivin是新發(fā)現(xiàn)的IAP家族成員之一，其基因定位于染色體17q25；Survivin蛋白為腫瘤特異性凋亡抑制因子，通過(guò)參與細(xì)胞周期調(diào)控抑制細(xì)胞凋亡，有效控制癌細(xì)胞的增殖。有研究報(bào)道〔4〕，Survivin蛋白在肺癌、胃癌、卵巢癌、乳腺癌及結(jié)腸癌等惡性腫瘤中高表達(dá)，并與其預(yù)后密切相關(guān)。Surivin蛋白在腫瘤發(fā)生過(guò)程中表達(dá)上調(diào)，與腫瘤的演進(jìn)相關(guān)并可預(yù)測(cè)其病程進(jìn)度〔5〕。在癌組織中，Survivin蛋白的表達(dá)可干擾細(xì)胞正常凋亡過(guò)程，使癌細(xì)胞獲得永生。在腫瘤細(xì)胞中，Survivin蛋白的表達(dá)程度越高，對(duì)癌細(xì)胞凋亡抑制作用越強(qiáng)，預(yù)示腫瘤的惡性程度越強(qiáng)，患者生存期明顯縮短，且預(yù)后不佳，是判讀腫瘤患者預(yù)后情況的重要指標(biāo)〔6〕。

Smac蛋白是由線粒體釋放的一類癌細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)因子，可特異性與IAP結(jié)合，抑制IAP活性，從而使其失去抑制細(xì)胞凋亡能力，達(dá)到促進(jìn)癌細(xì)胞凋亡的目的〔7〕。有研究報(bào)道〔8〕，Smac蛋白的表達(dá)與腫瘤的惡性程度呈負(fù)相關(guān)性，這與本研究結(jié)果一致。分析原因，食管鱗狀細(xì)胞癌進(jìn)展的過(guò)程中存在細(xì)胞增殖被過(guò)度激活的機(jī)制，同時(shí)細(xì)胞過(guò)度增殖又啟動(dòng)細(xì)胞凋亡機(jī)制，但當(dāng)細(xì)胞增殖機(jī)制被激活的強(qiáng)度超過(guò)同時(shí)啟動(dòng)的細(xì)胞凋亡機(jī)制時(shí)，食管鱗狀細(xì)胞癌仍然向前進(jìn)展。

另外，本研究提示Smac蛋白可對(duì)Survivin蛋白表達(dá)進(jìn)行負(fù)反饋調(diào)節(jié)，Smac蛋白表達(dá)減少直接或間接導(dǎo)致Survivin蛋白表達(dá)升高，抑制細(xì)胞凋亡，從而促進(jìn)腫瘤的進(jìn)展及惡化。

4參考文獻(xiàn)

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〔2014-08-07修回〕

(編輯袁左鳴)