老年骨肉瘤患者術(shù)后組織中微管不穩(wěn)定蛋白1、生存素和組織蛋白酶-D的表達(dá)及意義

安貴峰劉軍1

(沈陽醫(yī)學(xué)院附屬中心醫(yī)院骨外科，遼寧沈陽110024)

摘要〔〕目的觀察老年骨肉瘤患者術(shù)后組織中微管不穩(wěn)定蛋白(STMN)1、生存素(Survivin)和組織蛋白酶(Cath)-D的表達(dá)特征，探討其關(guān)系及臨床意義。方法56例老年骨肉瘤患者術(shù)后組織作為觀察組，54例外傷后切除的正常骨組織作為對(duì)照組。應(yīng)用免疫組化SP法檢測(cè)二組中STMN1、Survivin和Cath-D的表達(dá)。結(jié)果二組中STMN1、Survivin和Cath-D表達(dá)的陽性率差異顯著。觀察組中STMN1、Survivin和Cath-D表達(dá)的陽性率與腫瘤的直徑、TNM分期、脈管浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。相關(guān)性分析顯示觀察組中STMN1、Survivin和Cath-D的表達(dá)均未見相關(guān)性。結(jié)論骨肉瘤術(shù)后組織中STMN1、Survivin和Cath-D高表達(dá)，三者不僅能促進(jìn)腫瘤的形成過程，還可以促進(jìn)腫瘤的進(jìn)展。

關(guān)鍵詞〔〕骨肉瘤；微管不穩(wěn)定蛋白；生存素；組織蛋白酶-D；免疫組化

中圖分類號(hào)〔〕R738.1〔文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼〕A〔

1沈陽軍區(qū)總醫(yī)院骨外科

第一作者：安貴峰(1979-)，男，醫(yī)學(xué)博士，副主任醫(yī)師，主要從事脊柱脊髓損傷與功能重建研究。

骨肉瘤在形成過程中與多種基因和蛋白表達(dá)失常為特征，尤其是伴有退行性改變的老年人中更為明顯〔1〕。微管不穩(wěn)定蛋白(STMN)1是重要微管調(diào)節(jié)蛋白，可以對(duì)正常細(xì)胞的支架、細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)運(yùn)輸和紡錘體的形成有重要作用〔2〕。近年學(xué)者發(fā)現(xiàn)STMN1對(duì)惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展有關(guān)，尤其是在白血病、淋巴瘤、間皮瘤及骨腫瘤中〔3〕。生存素(Survivin)是機(jī)體中重要的凋亡抑制蛋白，其發(fā)揮作用的途徑較為廣泛，不僅可以促進(jìn)細(xì)胞增殖和血管新生，還能啟動(dòng)多種蛋白，形成不同途徑的級(jí)聯(lián)反應(yīng)〔4，5〕。組織蛋白酶(Cath)-D是一種蛋白水解酶，可以調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長(zhǎng)、發(fā)育，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖、黏附和轉(zhuǎn)移〔6〕，近來有研究顯示其表達(dá)可能與腫瘤的預(yù)后有關(guān)〔7〕。本文關(guān)注骨肉瘤中STMN1、Survivin和Cath-D的表達(dá)，關(guān)注其臨床意義。

1資料與方法

1.1一般資料2009年1月至2012年12月我院及中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬一院確診的老年人骨肉瘤術(shù)后組織56例作為觀察組，均符合WHO中軟組織與骨腫瘤病理學(xué)和遺傳學(xué)的診斷標(biāo)準(zhǔn)。男30例，女26例；年齡60~89歲，平均67.6歲。收集老年人外傷后切除的正常骨組織(脫鈣標(biāo)本)54例作為對(duì)照組，男28例，女26例；年齡60~80歲，平均63.4歲。兩組一般資料差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。

1.2STMN1、Survivin和Cath-D蛋白表達(dá)的檢測(cè)STMN1、Survivin和Cath-D蛋白的檢測(cè)均應(yīng)用免疫組化SP法。STMN1、Survivin和Cath-D均為濃縮液，實(shí)驗(yàn)前行預(yù)實(shí)驗(yàn)并于正式實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用最佳配比深度的抗體。操作均由病理科主管技師完成，嚴(yán)格按說明書操作，嚴(yán)格質(zhì)控，減少誤差。

1.3STMN1、Survivin和Cath-D蛋白檢測(cè)結(jié)果的判定方法STMN1、Survivin和Cath-D的表達(dá)部位均為細(xì)胞質(zhì)，以細(xì)胞質(zhì)中出現(xiàn)棕黃色的顆粒為陽性細(xì)胞。每張切片選擇10個(gè)腫瘤細(xì)胞集中的區(qū)域，應(yīng)用400倍的高倍視野計(jì)數(shù)，取其平均值。判定結(jié)果以陽性細(xì)胞≥5%定為陽性，<5%定為陰性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SAS6.12統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)及相關(guān)分析。

2結(jié)果

2.1兩組中STMN1、Survivin和Cath-D蛋白表達(dá)陽性率的比較觀察組中STMN1、Survivin和Cath-D表達(dá)的陽性率明顯高于對(duì)照組(P<0.000 1)。見表1。

2.2STMN1、Survivin和Cath-D在觀察組不同臨床特征中表達(dá)的比較觀察組中STMN1、Survivin和Cath-D表達(dá)的陽性率與腫瘤的直徑、TNM分期、脈管浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。見表2。

表1　兩組中STMN1、Survivin和Cath-D蛋白表達(dá)

表2　STMN1、Survivin和Cath-D在觀察組不同臨床

2.3觀察組中STMN1、Survivin和Cath-D的相關(guān)性觀察組中三者間的表達(dá)均未見明顯相關(guān)性(均P>0.05)。

3討論

骨肉瘤的惡性程度很高，預(yù)后差。發(fā)生在股骨下端及脛骨上端的約占所有骨肉瘤的四分之三，多數(shù)為溶骨性，也有少數(shù)為成骨性。病變進(jìn)展時(shí)骨膜下骨皮質(zhì)及髓腔部均可發(fā)生浸潤(rùn)擴(kuò)散。其病理常表現(xiàn)為腫瘤性的骨樣組織、骨樣組織、膠原纖維和軟骨細(xì)胞等。近年研究顯示多種促腫瘤進(jìn)展蛋白高表達(dá)是其重要因素〔1〕。STMN1蛋白在腫瘤中高表達(dá)，可以通過促進(jìn)微管的解聚或阻止微管的聚合從而影響有絲分裂紡錘體的形成，加速腫瘤細(xì)胞的增殖和遷移過程〔8，9〕。研究認(rèn)為STMN1 可以通過磷酸化調(diào)節(jié)自身細(xì)胞的活性，使細(xì)胞微管動(dòng)力平衡調(diào)節(jié)受到影響，此時(shí)下游的靶位是細(xì)胞分裂周期中發(fā)揮作用的微管蛋白、微管及紡錘體等細(xì)胞器〔10，11〕。也有觀點(diǎn)認(rèn)為STMN1表達(dá)后可以通過調(diào)節(jié)微管的解聚，促進(jìn)細(xì)胞運(yùn)動(dòng)，同時(shí)有效改變細(xì)胞的分化和活性，使腫瘤惡性潛能升高〔12，13〕。Survivin具有較強(qiáng)的凋亡抑制作用，并有效干擾細(xì)胞周期，提高細(xì)胞的分裂增殖能力，同時(shí)引起間質(zhì)血管的新生及有功能血管的形成〔14〕。當(dāng)Survivin高表達(dá)時(shí)，可以調(diào)節(jié)腫瘤的遷移過程，使病變處于加速期〔15〕。Cath-D是一種蛋白水解酶，在正常細(xì)胞中表達(dá)較低，當(dāng)其表達(dá)升高或活化后可以直接引起細(xì)胞的增殖過程，同時(shí)催化基底膜和細(xì)胞外基質(zhì)降解，形成局部溶解區(qū)，使細(xì)胞遷移的通道打開，加速腫瘤細(xì)胞移動(dòng)，形成轉(zhuǎn)移灶〔16〕。

老年人常伴有退行性改變，同時(shí)伴有明顯的骨質(zhì)疏松，因此其腫瘤的發(fā)生常具有特殊性。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示STMN1、Survivin和Cath-D高表達(dá)可以促進(jìn)骨肉瘤的發(fā)生過程，此時(shí)異常表達(dá)的蛋白可以引起腫瘤細(xì)胞的繁殖，腫瘤生長(zhǎng)活躍，生長(zhǎng)快，失控性增生明顯。三種蛋白高表達(dá)參與腫瘤的生長(zhǎng)及播散過程，加速腫瘤的進(jìn)展。三種蛋白高表達(dá)時(shí)可以有效促進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng)及周圍鄰近組織的浸潤(rùn)，使腫瘤對(duì)周圍器官和組織的破壞能力增強(qiáng)。三者不存在明顯的協(xié)同作用。STMN1、Survivin和Cath-D三者的作用可能是通過各通路的作用實(shí)現(xiàn)的。但是相關(guān)文獻(xiàn)研究顯示STMN1、Survivin和Cath-D均具有促進(jìn)增殖的作用〔17~19〕，但其具體調(diào)節(jié)機(jī)制有待證實(shí)。

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〔2013-12-23修回〕

(編輯苑云杰)