杜仲葉醇提物對去卵巢大鼠所致骨質(zhì)疏松的防治作用

陳立強(qiáng)趙文杰1王振齊亞靈陳玉強(qiáng)楊宇劉振玉

(佳木斯大學(xué)，黑龍江佳木斯154007)

摘要〔〕目的觀察杜仲葉醇提物對去卵巢大鼠骨質(zhì)疏松(OP)模型的影響，探究杜仲防治OP的作用機(jī)制。方法選取10月齡SD雌性大鼠，制作去卵巢大鼠OP模型，分為假手術(shù)組、模型組、阿爾法骨化醇(ALF)組、杜仲葉醇組，并觀察各組股骨重量、脛骨抗彎力、血清堿性磷酸酶(ALP)的變化。結(jié)果與模型組比較，杜仲葉醇組股骨重量明顯增加，脛骨抗彎力增強(qiáng)，ALP含量增高(P<0.05)；與ALF組無明顯差異(P>0.05)。結(jié)論杜仲葉醇提物通過提高血清ALP含量，增加股骨重量，提高脛骨抗彎力等因素防治OP。

關(guān)鍵詞〔〕杜仲；去卵巢；骨質(zhì)疏松；血清堿性磷酸酶

中圖分類號〔〕R683.42〔文獻(xiàn)標(biāo)識碼〕A〔

基金項(xiàng)目：黑龍江省衛(wèi)生廳科研項(xiàng)目(2011-425)；佳木斯大學(xué)科研項(xiàng)目(S2010-43)；佳木斯大學(xué)研究生科技創(chuàng)新項(xiàng)目(LZZ2014_003)

通訊作者：齊亞靈(1967-)，女，醫(yī)學(xué)博士，教授，博士生導(dǎo)師，主要從事中藥抗衰老研究。

1黑龍江省農(nóng)墾二院

第一作者：陳立強(qiáng)(1979-)，男，實(shí)驗(yàn)師，在讀碩士，主要從事中藥抗衰老研究。

骨質(zhì)疏松(OP)是一種全身性骨骼疾病；以骨的組織結(jié)構(gòu)出現(xiàn)退化、骨的重量減輕、骨的脆性增加、易發(fā)生骨折為特征；其治療難度大、發(fā)病率高〔1〕。機(jī)體生理性、退行性的變化導(dǎo)致的OP的發(fā)病率隨年齡的增長而增加。本研究觀察杜仲葉醇提物對去卵巢OP大鼠股骨重量、脛骨抗彎力、血清堿性磷酸酶(ALP)的影響。

1材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)動物及主要試劑10月齡SD雌性大鼠(哈爾濱醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供)48只，體重(269.2±18.7)g，自由攝食、飲水。阿爾法骨化醇(ALF)(上海寶曼生物科技有限公司)，杜仲葉(佳木斯市寶泰醫(yī)藥公司)，血清ALP檢測試劑盒(艾美捷科技有限公司)。

1.2實(shí)驗(yàn)分組與動物模型〔2〕建立將大鼠隨機(jī)分成4組，每組12只，即假手術(shù)組、模型組、ALF組和杜仲葉醇提物組。成功制作去卵巢大鼠所致OP模型，去卵巢大鼠骨量丟失，出現(xiàn)明顯的OP特征，模型穩(wěn)定，可靠〔3〕。水合氯醛(0.3 ml/kg)腹腔注射，麻醉后，無菌環(huán)境下打開腹腔，模型組、ALF組及杜仲葉醇組摘除雙側(cè)卵巢，假手術(shù)組不摘卵巢。關(guān)閉腹腔并逐層縫合。青霉素(2萬U/只)肌注。

1.3給藥方法術(shù)后10 d，ALF組：ALF(0.75 μg/10只)灌胃；杜仲葉醇組：杜仲葉醇提物6 g/kg灌胃。假手術(shù)和模型組給予等量蒸餾水灌胃。1次/d，持續(xù)90 d。治療結(jié)束后頸椎脫臼處死，心臟穿刺抽取0.5~1 ml血液，凝固后10 000 r/min取血清，4℃保存。取股骨、脛骨，剔除骨表面軟組織，稱重。

1.4脛骨抗彎力測定將大鼠脛骨置推拉力計模具上，自中點(diǎn)處下壓，記錄脛骨斷裂時壓力。

1.5ALP活力測定按照試劑盒說明。

1.6統(tǒng)計學(xué)方法應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行單因素方差分析，LSD(L)檢驗(yàn)。

2結(jié)果

2.1各組體重及股骨重量術(shù)后各組體重較術(shù)前明顯增加，與假手術(shù)組比較，模型組體重增加尤為顯著(P<0.01)，股骨重量明顯降低(P<0.01)；與模型組比較，ALF和杜仲葉醇組體重增加不顯著，股骨重量有所增高(P<0.05)，見表1。

2.2各組股骨抗彎力檢測結(jié)果與假手術(shù)組比較，模型組抗彎力降低(P<0.05)，ALF組和杜仲葉醇組抗彎力上升(P<0.05)；與模型組比較，ALF和杜仲葉醇組脛骨抗彎曲力顯著提高(P<0.01)。ALF組和杜仲葉醇組差異不顯著，見表2。

2.3各組ALP檢測結(jié)果與假手術(shù)組比較，模型組血清ALP含量明顯降低，ALF與杜仲葉醇組明顯增高(P<0.05)，但ALF組和杜仲葉醇組差異不顯著。

表1　各組體重與股骨重

與假手術(shù)組比較:1)P<0.05，2)P<0.01；與模型組比較:3)P<0.05

表2　各組脛骨抗彎力及血清ALP值

與模型組比較:1)P<0.05，2)P<0.01；與假手術(shù)組比較:3)P<0.05

3討論

隨增齡，人體的組織、器官發(fā)生退化而導(dǎo)致的OP包括老年性O(shè)P和婦女絕經(jīng)后OP，前者主要與衰老有關(guān)，后者主要與雌激素不足有關(guān)〔2〕。由于杜仲富含酚酸、木脂素和黃酮類等化學(xué)物質(zhì)，杜仲葉醇提物具有類似性激素作用。本研究說明去卵巢后OP大鼠的骨量逐漸減少，骨強(qiáng)度下降；應(yīng)用ALF和杜仲葉醇提取物治療后，可以通過改善骨的質(zhì)量，有效防治因雌激素降低而導(dǎo)致的骨質(zhì)丟失，進(jìn)而改善OP癥狀。

ALP由成骨細(xì)胞產(chǎn)生，當(dāng)骨受到損傷時，成骨細(xì)胞活動增強(qiáng)，致使細(xì)胞內(nèi)的ALP 釋放進(jìn)入血液中，引起血清 ALP 活性增高〔3~6〕。本文結(jié)果表明，杜仲葉醇提物防治OP，與提高去卵巢大鼠ALP含量，促進(jìn)成骨細(xì)胞功能活動有關(guān)。

綜上，杜仲葉醇提物通過提高血清ALP含量，增加股骨重量，提高脛骨抗彎力進(jìn)而改善骨的質(zhì)量等因素防治OP，其作用機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

4參考文獻(xiàn)

1Hubacek JA，Weichetova M，Bohuslavova R，etal.Genetic polymorphisms of TGF-β，PAI-1，and COL1A-1，and determination of bone mineral density in Caucasian females〔J〕.Endoc Regul,2006；40(1)：77-81.

2田茂友，李洪洋.去卵巢大鼠骨質(zhì)疏松模型研究〔J〕.現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2007；34(12)：2239-41.

3劉曉青，崔燎，吳鐵，等.人參防治去卵巢大鼠骨丟失生化指標(biāo)的觀察〔J〕.中國老年學(xué)雜志，2005；25(3)：299-301.

4陳鄒陽.聯(lián)合檢測骨折患者血漿堿性磷酸酶與纖維蛋白原的意義〔J〕.國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2012；12(33)：2922-3.

5董華，胡乃武，董清平.骨痛仙膠囊對家兔骨折血清堿性磷酸酶、鈣、磷影響的實(shí)驗(yàn)研究〔J〕.中醫(yī)藥學(xué)報，2003；31(2)：51-2.

6李建明，張英.血清堿性磷酸酶與骨折愈合的相關(guān)性分析〔J〕.新疆醫(yī)學(xué)，2014；44(1)：8-10.

〔2013-12-19修回〕

(編輯苑云杰)