麥冬多糖對(duì)亞急性衰老小鼠皮膚組織衰老程度的影響

陸洪軍宋麗娜付天佐李曉濤宋琳琳1

(佳木斯大學(xué)第一附屬醫(yī)院， 黑龍江佳木斯154002)

摘要〔〕目的觀察麥冬多糖對(duì)衰老小鼠皮膚組織衰老程度的影響。方法選用昆明種小鼠40只，雌雄各半，隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型組、高、低劑量(分別為10、5 g/kg)給藥組，每組10只。除正常對(duì)照組注射等量生理鹽水外，其他組均采用頸背部皮下注射 D-半乳糖(劑量為5 g/kg) 建立衰老模型，連續(xù)40 d。造模的同時(shí)皮膚給藥，40 d后取各組小鼠背部皮膚檢測(cè)羥脯氨酸含量、超氧化物歧化酶活力和丙二醛含量。結(jié)果麥冬多糖可明顯提高亞急性衰老小鼠皮膚中超氧化物歧化酶活力及羥脯氨酸含量，并使丙二醛含量降低。結(jié)論麥冬多糖具有抗皮膚衰老的作用。

關(guān)鍵詞〔〕麥冬多糖；皮膚衰老；D-半乳糖

中圖分類(lèi)號(hào)〔〕R285.5〔文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼〕A〔

基金項(xiàng)目：黑龍江省衛(wèi)生廳科研課題(No.2013255)；黑龍江省自然科學(xué)

通訊作者：宋琳琳(1982-)，女，講師，碩士，主要從事天然藥物開(kāi)發(fā)研究。

1佳木斯大學(xué)藥學(xué)院

第一作者：陸洪軍(1970-)，男，碩士，副主任醫(yī)師，主要從事臨床醫(yī)學(xué)研究。

麥冬為百合科植物沿階草的塊根，味微苦，寒，入肺、胃、心經(jīng)〔1〕。對(duì)于麥冬多糖化學(xué)成分的研究，一般主要集中在抗炎、抗氧化以及免疫活性上。本研究探討麥冬多糖對(duì)亞急性衰老小鼠皮膚衰老程度的影響。

1材料與方法

1.1試劑與儀器麥冬藥材購(gòu)自佳木斯金天藥店，經(jīng)佳木斯大學(xué)藥學(xué)院鑒定；95%乙醇(天津市北方天醫(yī)化學(xué)試劑廠)；D-半乳糖(上海恒信化學(xué)試劑有限公司生產(chǎn))；羥脯氨酸、丙二醛、超氧化物歧化酶測(cè)定試劑盒均由南京建成生物工程研究所提供。KQ-520 DE醫(yī)用數(shù)控超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)；SHZ-Ⅲ循環(huán)水真空泵(鄭州長(zhǎng)城科教儀器有限公司)；756MC紫外可見(jiàn)光分光光度計(jì)(上海第三分析儀器廠)；TJ82-3型電動(dòng)離心沉淀機(jī)(遼陽(yáng)制藥機(jī)械廠)；FSH-2組織勻漿機(jī)(江蘇省金壇市恒豐儀器廠)。

1.2麥冬多糖的提取將麥冬藥材在60℃烘箱中干燥24 h，粉碎后過(guò)30目篩密封保存待用。稱(chēng)取經(jīng)預(yù)處理的麥冬粉末50 g，對(duì)料液比、提取溫度和提取時(shí)間進(jìn)行單因素提取試驗(yàn)，優(yōu)選出麥冬多糖提取的最佳提取工藝為提取溫度25℃，超聲波提取兩次，每次20 min，第一次按1∶20的比例加水1 000 ml，第二次按1∶15的比例加水750 ml，合并濾液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓濃縮至200 ml，加入95%的乙醇沉淀12 h，減壓濃縮至200 ml，濃縮液制得麥冬粗多糖86.38 g。

1.3動(dòng)物與造模取小鼠40只(佳木斯大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供)，隨機(jī)分成4組，每組10只，雌雄各半，分別為空白對(duì)照組，模型組，麥冬多糖高劑量和低劑量組。頸背部皮下注射5%D-半乳糖(5 g·kg-1·d-1)制造亞急性衰老模型，空白對(duì)照組頸背部皮下注射生理鹽水，連續(xù)40 d。

1.4給藥方法①空白對(duì)照組皮下注射生理鹽水5 g/kg，再灌胃蒸餾水5 g·kg-1·d-1；②模型組皮下注射D-半乳糖溶液5 g/kg，灌胃蒸餾水5 g·kg-1·d-1；③麥冬多糖高、低劑量組皮下注射5%D-半乳糖5 g·kg-1·d-1，再分別灌胃麥冬多糖10、5 g·kg-1·d-1，連續(xù)40 d。

1.5皮膚勻漿制備及檢測(cè)指標(biāo)末次給藥后將小鼠處死并將其背部脫毛，取10% 的皮膚組織100 mg，離心取上清液后備用。然后將上清液稀釋至1%，測(cè)定超氧化物歧化酶活性(SOD)(黃嘌呤氧化酶法)、丙二醛(MDA)含量(硫代巴比妥酸比色法)；再將上清液稀釋至2%測(cè)定羥脯氨酸(HYP)含量(氯胺酮法)，均按試劑盒說(shuō)明書(shū)方法測(cè)定。

1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用t檢驗(yàn)。

2結(jié)果

與模型組相比，高、低劑量組皮膚組織SOD、HYP水平顯著升高、MDA含量顯著降低(P<0.05)。與空白對(duì)照組相比，模型組SOD、MDA、HYP含量均差異明顯(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1　各組皮膚SOD活力、MDA含量、

與模型組比較：1)P<0.05，2)P<0.01；與空白對(duì)照組比較：3)P<0.05

3討論

衰老的機(jī)制主要包括線粒體衰老學(xué)說(shuō)、氧自由學(xué)說(shuō)、端粒酶學(xué)說(shuō)、遺傳學(xué)說(shuō)等。研究表明當(dāng)皮膚出現(xiàn)皺紋、彈性下降等方面的表現(xiàn)與膠原蛋白的含量下降有關(guān)，因此，膠原蛋白含量的變化可以提示皮膚老化的程度〔2，3〕。而HYP是膠原蛋白中的一種重要氨基酸，因此測(cè)定皮膚中HYP含量變化可作為判定皮膚衰老程度的一個(gè)指標(biāo)〔4〕。本文結(jié)果提示，麥冬多糖能顯著增加衰老小鼠皮膚組織SOD活力和降低MDA含量，表明它具有延緩皮膚衰老的作用，同理，皮膚組織中HYP含量升高也具有類(lèi)似的抗衰老作用。

4參考文獻(xiàn)

1林曉,徐德生,馮怡,等.麥冬多糖的單糖組成研究〔J〕.中草藥,2005;36(10):1488.

2吳景東,李德新.絞股藍(lán)延緩大鼠皮膚衰老作用的實(shí)驗(yàn)研究〔J〕.中醫(yī)藥學(xué)刊,2006；24(7):1226-7.

3張如意,王蓉,葉翠飛,等.烏膠囊對(duì)老年大鼠皮膚彈性及抗氧化能力的影響〔J〕.中國(guó)老年學(xué)雜志,2007；27(10):1964-6.

4王紅麗,吳鐵,吳志華,等.丹參酮和維生素E抗皮膚衰老作用的比較研究〔J〕.中國(guó)老年學(xué)雜志,2003;23(12):861-2.

〔2013-12-07修回〕

(編輯苑云杰)