向秋玲 蔣銳 姜海斌

鹿藿水提取物抗雄性小鼠生育作用研究

向秋玲 蔣銳 姜海斌

目的 研究鹿藿水提取物的抗雄性小鼠生育作用的影響。方法雄性小鼠分為4組，給藥，然后與雌鼠合籠交配，觀察雌鼠給藥70 d、停藥20 d妊娠率。結(jié)果 用藥70 d作用較明顯。停藥20 d，與陰性對(duì)照組結(jié)果非常接近。結(jié)論 鹿藿水提取物具有良好的抗生育作用，停藥后不影響后續(xù)生育能力。

鹿藿水提取物；抗生育作用；附睪；精子

鹿藿（Rhynchosia Volubilis Lour）是我國(guó)避孕經(jīng)驗(yàn)方中的一味主藥。王建剛等[1]用鹿藿根4種提取物對(duì)大鼠灌胃進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)對(duì)雄性大鼠有抗生育及抗菌作用。本實(shí)驗(yàn)深入研究鹿藿根水提取物的抗生育作用，為將其開發(fā)為新型外用避孕藥提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料

1.1 藥品與試劑

鹿藿根（購(gòu)于湖南懷化，由吉首大學(xué)陳功錫教授鑒定）；醋酸棉酚（北京中棉紫光生物技術(shù)有限責(zé)任公司，批號(hào)061116）。

1.2 動(dòng)物

成年雌、雄性小鼠（湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限司提供，動(dòng)物許可證號(hào)：SCXK（湘）2013-0004，動(dòng)物合格證號(hào)：NO43004700006140）。

2 方法

2.1 提取及實(shí)驗(yàn)用藥的配制

干燥鹿藿根10 kg，粉碎，加入30 L純凈水，60℃浸泡24 h，提取2次，過濾，減壓蒸餾濃縮，制得鹿藿水提取物浸膏，保存?zhèn)溆?，?shí)驗(yàn)時(shí)用生理鹽水稀釋成4%的溶液。

2.2 抗生育實(shí)驗(yàn)

70 d雄性小鼠80只，體重（28.2±1.4）g左右，分為4組：陰性對(duì)照組（生理鹽水），陽(yáng)性對(duì)照組給予醋酸棉酚450 mg/（kg·d），鹿藿水提取物低、高劑量的水浸膏150，450 mg/（kg·d）組，每組20只，給藥組每次0.01 ml/g，灌胃，陰性對(duì)照組給予相同劑量的生理鹽水灌胃，每天1次，連續(xù)給藥70 d。

2.3 妊娠率和妊娠抑制率

雄鼠給藥20 d后與雌性小鼠1：1合籠，合籠期間繼續(xù)給雄鼠灌藥，以雌鼠陰道涂片檢查出精子為妊娠第1天，70 d后分籠，解剖雌鼠，計(jì)算妊娠率、平均活胎數(shù)、死胎數(shù)和著床點(diǎn)數(shù)。根據(jù)以上方法，記錄給藥70 d、停藥10 d時(shí)實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所得數(shù)據(jù)使用SPSS15.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析，計(jì)量數(shù)據(jù)采用（均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差）±s）表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用%表示，采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 用藥后對(duì)雌鼠妊娠抑制的結(jié)果

用藥70 d后，藥物組抑制妊娠效果較用藥20 d時(shí)降低，但仍很明顯，尤其是高劑量組。見表1。

3.2 停藥后對(duì)雌鼠妊娠抑制的結(jié)果

停藥20 d后，妊娠率與生理鹽水組接近，尤其是低劑量組，與生理鹽水組比較，P＞0.05，差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表2。

4 討論

精子的發(fā)生主要包括精原細(xì)胞的增殖分化，精母細(xì)胞的減數(shù)分裂和精子細(xì)胞的發(fā)育過程。而精子的成熟則依賴于附睪微環(huán)境[2]，抗生育藥物可作用于以上任一環(huán)節(jié)。從上述結(jié)果可看出，連續(xù)用藥后，鹿藿水提取物即能抑制妊娠率，尤其是連續(xù)用藥20 d后，雌鼠妊娠率降低，說明鹿藿水提取物對(duì)雄性小鼠具有抗生育作用[3]。用藥后小鼠生育率降低，精子總數(shù)減少，可以推測(cè)鹿藿跟水提取物能夠抑制睪丸精子的產(chǎn)生。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果又可以看出用藥后精子活動(dòng)受到影響，說明鹿藿抗雄性小鼠生育在也附睪部位，影響了精子的成熟。研究發(fā)現(xiàn)[4]，β-甲基2，4-二甲氧基-吡喃巖藻糖苷可能在附睪即與巖藻糖苷轉(zhuǎn)移酶或巖藻糖苷酶結(jié)合，繼而干擾在雌鼠體內(nèi)的精卵結(jié)合。同時(shí)不排除鹿藿其他成分的作用或多種成分共同作用[5]。對(duì)用藥后睪丸及附睪組織進(jìn)行觀察，發(fā)現(xiàn)鹿藿水提取物對(duì)睪丸及附睪僅有輕微影響，且從停藥后的各項(xiàng)數(shù)據(jù)可知，鹿藿抗生育作用維持時(shí)間短，易恢復(fù)。因此，停藥后不會(huì)影響雄性小鼠的生育能力。

綜上所述，鹿藿水提取物抗雄性小鼠生育能力強(qiáng)，毒性小，對(duì)睪丸影響很弱，不會(huì)影響生育能力，是安全有效的抗雄性生育能力的藥物，且試驗(yàn)證明鹿藿提取物對(duì)生殖道常見致病微生物也有較好的抑制作用[6]。對(duì)于鹿藿抗生育作用的深人研究及化學(xué)成分的進(jìn)一步分析，有可能發(fā)現(xiàn)比較理想的男性避孕藥。

表1 用藥70 d對(duì)小鼠妊娠的影響

表2 停藥20 d對(duì)小鼠妊娠的影響

[1]徐叔云，卞如濂，陳修.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2003：1572-1573.

[2]唐運(yùn)革，唐立新，王奇玲，等.廣東地區(qū)男性精液質(zhì)量的流行病學(xué)調(diào)查[J].廣東醫(yī)學(xué)，2014（9）：1402-1404.

[3]黃世興，孟天慶，王驍，等.鹿藿正丁醇提取物體外殺精作用及機(jī)制探討[J].中國(guó)計(jì)劃生育和婦產(chǎn)科，2013，5（2）：35.

[4]胡廉，熊承良.中藥鹿藿的抑菌實(shí)驗(yàn)研究[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2006，18（3）：435.

[5]王建剛，熊承良，王學(xué)廷,等.鹿藿醇提取物的體外殺精及抗菌作用[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2007，18（10）：2388.

[6]伏曉敏，勵(lì)千里，金愛華.氯已定醋酸鹽的體外殺精效果及抑菌作用的研究[J].中國(guó)現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)雜志，2003，20（2）：97-99.

The Study of Rhynchosia Volubilis Water Extract Anti-male Mice Fertility

XIANG Qiuling JIANG Rui JIANG Haibin Changde Vocational Technical College Medicine Department，Changde 415000，China

Objective To study the anti-fertility effects of rhynchosia volubilis water extract anti-male fertility in mice.Methods Anti-fertility experiment，mice male were administered continuously，then mated with females，females pregnancy rate was observed.Results Continuously medicate rhynchosia volubilis water extract for 70 days，the effect was still evident.drug withdrawal for 20 days，the results are very close to the negative control group.Conclusion Rhynchosia volubilis water has a good anti-fertility effect，after the drug withdrawal，it does not affect subsequent fertility.

Rhynchosia volubilis water extract，Anti-fertility effect，Epididymis，Sperm

R364.7

B

1674-9308（2015）29-0031-02

10.3969/j.issn.1674-9308.2015.29.022

415000常德職業(yè)技術(shù)學(xué)院醫(yī)學(xué)系

湖南省普通高等學(xué)?？茖W(xué)研究項(xiàng)目（No：11C0164）