孫華偉+張敬峰+何孔旺+趙永前+茅愛華

摘要：應(yīng)用韓同JBT公司的PCV-2抗體檢測試劑盒，對2014年江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院獸醫(yī)研究所動物疫病診斷檢測中心臨床門診收集的。來自宿遷、連云港、南通、鹽城和徐州5市未進行PCV-2疫苗免疫接種的32個中小規(guī)模豬場的990份血清進行PCV-2的抗體檢測，并對其中50份陽性血清進行PCV-2的PCR檢測，以診斷和分析PCV-2在江蘇的感染情況?？贵w檢測結(jié)果表明，990份血清樣品平均抗體陽性率為83.8%。PCR檢測結(jié)果顯示：50份陽性血清的PCV-2檢出率為32.0%。表明，PCV-2感染在江蘇省中小規(guī)模豬場普遍存在。

關(guān)鍵詞：江蘇??；中小規(guī)模豬場；豬圓環(huán)病毒2型（PCV-2）；流行病學(xué)調(diào)查

中圖分類號：S858.285.3文獻標(biāo)識號：A文章編號：1001-4942（2015）04-0117-03

斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征（PMWS）主要由豬圓環(huán)病毒2型（Porcinecircovirustype2，PCV-2）引起，是危害當(dāng)今全球養(yǎng)豬生產(chǎn)主要的免疫抑制性疾病，是繼豬繁殖與呼吸綜合征（PRRS）之后新發(fā)現(xiàn)的又一重要疫病。本病的主要癥狀為呼吸困難、黃疸、漸進性消瘦，剖檢可見淋巴組織水腫、間質(zhì)性肺炎及腎炎。PCV-2不僅可以引起PMWS，而且與豬皮炎與腎病綜合征、增生性壞死性肺炎、豬繁殖與呼吸障礙綜合征、繁殖障礙、先天性顫抖、腸炎等疾病亦有重要關(guān)聯(lián)[1，7]。更為嚴(yán)重的是，PCV-2感染所引起的豬免疫抑制會直接導(dǎo)致其他傳染病免疫失敗，并引起其他病原的繼發(fā)感染，造成的間接損失難以估算[8]。

收稿日期：2015-01-29

基金項目：江蘇省農(nóng)業(yè)科技自主創(chuàng)新項目[編號：CX（14）4049]

本試驗結(jié)合流行病學(xué)和臨床生產(chǎn)，應(yīng)用ELISA和PCR方法，對江蘇省5市32個未免疫豬圓環(huán)病毒疫苗的中小規(guī)模豬場的血清進行PCV-2抗體和抗原的檢測，以對PCV-2在江蘇省的感染情況提供科學(xué)參考。

1材料與方法

1.1血清來源

江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院獸醫(yī)研究所動物疫病診斷檢測中心門診接收的來自宿遷市、連云港市、南通市、鹽城市和徐州市未進行PCV-2疫苗免疫的32個中小規(guī)模豬場的血清樣品990份，在本中心實驗室進行相關(guān)檢測。

1.2主要試劑及儀器

PCV-2抗體檢測試劑盒，購自韓國JBT公司；PCV-2RT-PCR檢測試劑盒，購自北京世紀(jì)元亨動物防疫技術(shù)有限公司；酶標(biāo)儀型號為寶特ExL800，美國寶特公司生產(chǎn)；冷凍高速離心機型號為Centrifuge5424R，產(chǎn)自德國；各種規(guī)格移液器，購自德國Eppendorf公司；恒溫箱、水浴鍋等。

1.3方法

將32個豬場按不同季節(jié)、不同規(guī)模、不同豬只年齡、不同地區(qū)進行劃分，嚴(yán)格按照PCV-2抗體檢測試劑盒說明書進行ELISA抗體檢測操作。結(jié)果判定：通過計算每個樣品的S/P值來判定，若S/P值小于0.4，樣品判定為PCV-2抗體陰性；若S/P值大于或等于0.4，樣品判定為PCV-2抗體陽性。PCV-2的PCR檢測嚴(yán)格按照試劑盒說明書進行。

2結(jié)果與分析

2.1PCV-2抗體檢測結(jié)果

ELISA抗體檢測共檢出陽性血清830份，平均陽性率為83.8%。

2.1.1不同季節(jié)PCV-2抗體陽性率由圖1可知，2014年從春季到冬季，PCV-2的抗體陽性率呈先下降后上升的趨勢，但4個階段的差別不明顯，推測PCV-2感染已沒有明顯季節(jié)性。這一結(jié)果與樊福好[2]的報道一致。

2.1.2不同規(guī)模豬場PCV-2抗體陽性率由表1可知，不同養(yǎng)殖規(guī)模的豬場均有PCV-2感染，但以200頭以上大規(guī)模豬場的血清抗體陽性率最高，為85.9%；100頭以下（包括散養(yǎng)戶）豬場的血清抗體陽性率最低，為81.5%。說明豬圓環(huán)病毒的感染與豬群密度有關(guān)，小規(guī)模豬場的飼養(yǎng)密度相對較大，一旦發(fā)病容易持續(xù)感染，難以凈化。這與楊本勇[3]的報道一致。

2.1.3不同年齡豬只PCV-2抗體陽性率由表2可知，不同生長階段的豬均有PCV-2感染，以種公豬的血清抗體陽性率最高，達95.2%；斷奶保育豬最低，為60.5%。這一結(jié)果與臨床上保育仔豬衰竭綜合征高發(fā)情況一致[4]。大部分保育豬在斷奶后2周開始發(fā)病，這可能與產(chǎn)房仔豬有母源抗體的保護，而保育豬只隨著母源抗體的下降，不能抵御環(huán)境中的野毒有關(guān)。

2.1.4不同地區(qū)PCV-2抗體陽性率由表3可知，在江蘇省上述地區(qū)未免疫PCV-2疫苗的中小規(guī)模豬場，PCV-2抗體陽性率均較高，宿遷中最高，達90.2%；南通市最低，為78.3%。這可能與宿遷市生豬存欄量較大有關(guān)[5]，具體原因有待于進一步調(diào)查研究。

2.2PCR檢測結(jié)果

采用PCR方法，選擇PCV-2血清抗體為陽性的血清樣品50份進行PCV-2目的基因片段擴增，結(jié)果檢出陽性16份，檢出率為32.0%。血清中PCV-2的PCR檢出率明顯低于PCV-2的抗體陽性率，這與血清中PCV-2的檢出率比病理組織低有一定關(guān)系，李郁等[6]報道脾臟和淋巴結(jié)是檢測PCV-2的最佳組織器官。

3結(jié)論與討論

分別采用ELISA方法和PCR方法對臨床門診收集的血清進行PCV-2抗體和PCV-2病毒的檢測，結(jié)果表明，PCV-2血清抗體平均陽性率為83.8%，PCR檢出率為32.0%。在調(diào)查的32個豬場中，有22個豬場的保育豬在斷奶后1～2周（5～10周齡）出現(xiàn)進行性消瘦、生長遲緩、被毛粗亂、腹式呼吸、拉稀等癥狀，死亡率判別較大，介于5%～30%，這與豬場的飼養(yǎng)管理水平和衛(wèi)生狀況有很大關(guān)系。綜上所述，PCV-2感染在江蘇省中小規(guī)模養(yǎng)豬場已經(jīng)相當(dāng)普遍，并將在今后一段時間內(nèi)影響江蘇省養(yǎng)豬生產(chǎn)。因此，進一步對PCV-2進行分子流行病學(xué)監(jiān)測是一項十分重要的工作，對于PCV-2陽性豬場及時進行PCV-2疫苗的免疫是必要的。endprint