邢 煥 孫春陽 欒素軍 薩仁娜* 張宏福 丁美芳

(1.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所，動物營養(yǎng)學(xué)國家重點實驗室，北京 100193;2.北京市飼料監(jiān)察所，北京 100012)

飼糧中使用抗生素添加劑能夠提高畜禽生產(chǎn)性能，增加養(yǎng)殖效益，但是由于藥物殘留及抗藥性等問題，對人類和動物健康造成的危害日益嚴(yán)重。研究安全有效的添加劑，是發(fā)展高效、低耗、污染少養(yǎng)殖業(yè)的必然趨勢。葡萄糖氧化酶(glucose oxidase，GOD)是一種脫氫氧化酶，催化腸道內(nèi)葡萄糖分解產(chǎn)生過氧化氫和葡萄糖酸［1］，反應(yīng)過程中消耗胃腸道內(nèi)的氧，為消化道內(nèi)有益厭氧微生物(如乳酸桿菌、雙歧桿菌等)提供生存環(huán)境，同時產(chǎn)生的過氧化氫能夠抑制大腸桿菌、沙門氏菌等有害微生物，從而調(diào)整腸道微生物菌群結(jié)構(gòu)［2－6］。大量研究表明，葡萄糖氧化代謝產(chǎn)生的葡萄糖酸能夠降低腸道pH，偏酸的環(huán)境有利于腸道內(nèi)各種消化酶保持活性，易于養(yǎng)分的消化吸收［7－8］，因此 GOD能夠起到類似于抗生素、益生菌和酸化劑的作用?！讹暳咸砑觿┢贩N目錄(2013)》將GOD列為飼用酶制劑允許在飼料中使用。硒是機體不可缺少的一種微量元素，是構(gòu)成谷胱甘肽氧化物酶(GSHPx)的主要成分，GSH-Px催化還原型谷胱甘肽(GSH)變?yōu)檠趸凸入赘孰?GSSG)，且能夠催化過氧化氫(H2O2)分解為水(H2O)，發(fā)揮抗氧化作用，進而保護機體細(xì)胞及組織免受過氧化物的損傷［9］，具有提高動物機體免疫力、促進生長和改善肉品質(zhì)等作用［10］。酵母硒是在酵母發(fā)酵過程中通過富集高含量的無機硒而形成的一類有機硒，除具備硒元素特有的功能外，同時具有生物安全高、環(huán)保和易吸收等特點［11］，作為飼料中一種優(yōu)質(zhì)的有機硒源，在國外尤其是發(fā)達國家，應(yīng)用已久［12］。研究表明，酵母硒可以改善畜禽生產(chǎn)性能［13］，增強機體抗氧化能力［14－15］，提高機體免疫能力［16－17］。由此可見，GOD和酵母硒均有促進動物機體消化吸收，提高免疫功能的作用。在規(guī)?；B(yǎng)殖條件下，GOD和酵母硒聯(lián)合使用，是否影響肉雞生產(chǎn)性能及免疫器官的發(fā)育，是否影響血清相關(guān)指標(biāo)，尚未見報道。本試驗在規(guī)?；怆u養(yǎng)殖場的配合飼料中使用GOD和酵母硒混合添加劑，測定生產(chǎn)性能及免疫器官發(fā)育，為標(biāo)準(zhǔn)化養(yǎng)殖條件下混合添加劑的應(yīng)用提供數(shù)據(jù)支持。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

混合添加劑在飼糧中的添加量為0.2%，其中有效成分為β-D-GOD(活性為30 U/g)、酵母硒(200 mg/kg，其中硒含量為2 000 mg/kg)，其他為載體稻殼粉。

1.2 試驗動物及飼糧

試驗動物選用1日齡愛拔益加(AA)肉雞，參照NRC(1994)肉雞營養(yǎng)需要配制飼糧，基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

1.3 試驗設(shè)計與飼養(yǎng)管理

本試驗在北京市平谷區(qū)某規(guī)?；怆u養(yǎng)殖場進行。選擇1日齡AA肉雞5 000只，隨機分為2個組，分別為對照(CT)組和試驗(EM)組，每個組4個重復(fù)，每個重復(fù)625只雞。養(yǎng)殖方式為網(wǎng)上平養(yǎng)。對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗組飼喂基礎(chǔ)飼糧+0.2%的GOD和酵母硒混合添加劑。試驗期為42 d，1～21 d為試驗前期，22～42 d為試驗后期。所有肉雞飼養(yǎng)管理條件一致，自由采食和飲水，24 h光照。1日齡雛雞溫度控制在34～35℃，之后每周下降2～3℃，至35日齡時雞舍內(nèi)溫度為21℃;相對濕度控制在55% ～65%。按照常規(guī)程序進行免疫接種。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of basal diets(air-dry basis) %

1.4 測定指標(biāo)和方法

1.4.1 生產(chǎn)性能測定

每天記錄雞群死淘只數(shù)。分別在肉雞21和42日齡，每個重復(fù)隨機選取30只雞，進行個體空腹稱重(停料12 h、不停水)，記錄采食量，計算各組肉雞的平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)、料重比(F/G)和死亡率。

1.4.2 血清指標(biāo)測定

肉雞21和42日齡時，每個重復(fù)隨機取5只雞，翅靜脈采血，3 000 r/min離心15 min，分離血清，－20℃冰箱保存待測。全自動生化分析儀(日立，7100)測定血清總蛋白、白蛋白、球蛋白、尿素氮含量。

1.4.3 屠宰性能測定

分別在肉雞21和42日齡時，每個重復(fù)隨機取5只雞開展屠宰試驗，參考文獻［18］中描述的方法，測定并計算肉雞屠宰率、半凈膛率、全凈膛率和腹脂率。取脾臟、胸腺、法氏囊，去除附著組織并用濾紙吸干血水，電子天平稱重，計算免疫器官指數(shù)。

1.5 數(shù)據(jù)處理

試驗數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。數(shù)據(jù)采用SAS 9.2統(tǒng)計軟件中ANOVA程序進行單因素方差分析和Duncan氏法多重比較，以P＜0.05為顯著水平。

2 結(jié)果

2.1 混合添加劑對肉雞生產(chǎn)性能和屠宰性能的影響

肉雞的生產(chǎn)性能指標(biāo)列于表2。在1～21日齡，試驗組肉雞的ADFI、ADG高于對照組2.58%和 1.67%(P ＜0.05)，F(xiàn)/G 低于對照組 3.36%(P＜0.05)。在22～42日齡，試驗組肉雞的 ADFI、ADG分別比對照組高了1.55%和6.93%(P＜0.05)，同時 F/G 降低了 5.13%(P ＜0.05)。在肉雞生長全期(1～42日齡)，試驗組的 ADFI、ADG高于對照組 1.83% 和 6.66%(P ＜0.05)，F(xiàn)/G 低于對照組4.44%(P＜0.05)。在1～21日齡和22～42日齡時，試驗組死亡率低于對照組，但統(tǒng)計上差異不顯著(P＞0.05)。在肉雞生長全期試驗組死亡率顯著降低(P＜0.05)。

表2 混合添加劑對肉雞生產(chǎn)性能的影響Table 2 Effects of compound additive on performance of broilers

由表3可知，肉雞21日齡，試驗組屠宰率、全凈膛率和半凈膛率顯著高于對照組(P＜0.05)，分別提高 2.35%、4.11%和 3.23%;在肉雞 42 日齡屠宰時，試驗組各項指標(biāo)與對照組無顯著差異(P＞0.05)。

2.2 混合添加劑對肉雞免疫器官指數(shù)的影響

由表4可知，21日齡時，試驗組肉雞法氏囊指數(shù)顯著高于對照組(P＜0.05)，脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)雖有提高，但未達顯著水平(P＞0.05);42日齡時，試驗組肉雞的胸腺指數(shù)顯著高于對照組(P＜0.05)，其余指數(shù)在2組之間無顯著差異(P＞0.05)。

2.3 混合添加劑對肉雞血清生化指標(biāo)的影響

由表5可知，在21日齡時，與對照組相比，試驗組肉雞血清總蛋白含量提高了6.36%(P＜0.05)，白蛋白、球蛋白含量沒有顯著變化(P＞0.05);在42日齡時，試驗組肉雞血清球蛋白含量高于對照組8.50%(P ＜0.05)，總蛋白、白蛋白含量無顯著變化(P＞0.05)。21、42日齡試驗組肉雞血清尿素氮含量顯著低于對照組(P＜0.05)。

表3 混合添加劑對肉雞屠宰性能的影響Table 3 Effects of compound additive on slaughter performance of broilers %

表5 混合添加劑對肉雞血清生化指標(biāo)的影響Table 5 Effects of compound additive on serum biochemical parameters of broilers

3 討論

3.1 混合添加劑對肉雞生產(chǎn)性能的影響

家禽的生產(chǎn)性能受品種、營養(yǎng)、環(huán)境等諸多因素的影響。規(guī)?；怆u養(yǎng)殖場為了提高效益，往往在飼糧中使用多種添加劑，比如抗生素、抗氧化劑、酸化劑、多種復(fù)合酶等，這些添加劑的作用效果是否具有累加效應(yīng)或拮抗作用，相關(guān)研究報道較少。本試驗選擇以GOD和酵母硒為主要成分的混合添加劑，在規(guī)?；怆u場開展試驗，結(jié)果表明，混合添加劑顯著提高肉雞ADFI和ADG，顯著降低F/G與死亡率。有研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中加入0.2%的GOD，35日齡肉雞采食量顯著提高，增重率和成活率分別比對照組提高6.23%和3.5%［19］。在玉米 －豆粕基礎(chǔ)飼糧中添加0.15 mg/kg的酵母硒，嶺南黃羽肉雞平均日增重和飼料轉(zhuǎn)化率分別提高了17.86%和16.19%［20］。本試驗將GOD與酵母硒聯(lián)合使用，當(dāng)混合制劑添加量為0.2%時，肉雞ADG提高了6.66%，F(xiàn)/G降低了4.44%，成活率增加了32.31%，這與本實驗室前期研究結(jié)果相一致［21］。與前人研究結(jié)果相比，混合添加劑改善成活率的效果比單獨添加GOD要高，表明酵母硒與GOD的聯(lián)合使用，具有改善肉雞健康水平的作用。本試驗屠宰數(shù)據(jù)顯示，混合添加劑可以顯著提高21日齡肉雞的屠宰率、全凈膛率和半凈膛率，這與二者的特性有關(guān)。GOD可以消耗腸道內(nèi)的氧，產(chǎn)生葡萄糖酸及H2O2，調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)平衡［5］，改善腸道形態(tài)［22］，提高消化酶的活性［23］，提高養(yǎng)分利用率［24－25］。酵母硒具有使過氧化物變成羥基化物的作用，保護動物細(xì)胞及其組織不被過氧化物損傷［9］。GOD與酵母硒聯(lián)合使用，能夠改善肉雞生產(chǎn)性能，同時提高屠宰性能。

3.2 混合添加劑對肉雞免疫器官指數(shù)和免疫球蛋白含量的影響

動物免疫功能的高低取決于免疫器官的發(fā)育狀態(tài)及機能的強弱。一般用胸腺、脾臟和法氏囊的相對重量來評價雛雞的免疫狀態(tài)［26］，并認(rèn)為免疫器官重量降低為免疫抑制所致，反之則為免疫增強、生長發(fā)育快［27］。免疫器官迅速成熟，可使肉雞機體免疫機能增加，抵抗各種病原微生物感染的能力和抵抗各種應(yīng)激的能力得到提高［28］。免疫球蛋白是一種抗體蛋白，主要由單核巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，當(dāng)機體循環(huán)抗體含量增加時，血清中球蛋白水平升高，從而提高動物機體抵抗不良環(huán)境和疾病的能力［29］。GOD具有抗氧化作用，可以清除自由基，保護腸道上皮細(xì)胞的完整性，降低大腸桿菌、沙門氏菌等感染畜禽的機會，達到防御病原菌侵襲的目的［30］。有研究表明，金水烏雞飼糧添加GOD可以極顯著降低球蟲引發(fā)的疾病和死亡率［31］;蛋雞飼糧添加0.1% ～0.4%的GOD可以提高血清中球蛋白含量［32］。有研究報道，酵母硒可以顯著提高仔豬［10］、柴雞［33］血清中球蛋白含量，提高機體免疫力。孫春陽等［21］研究表明，飼糧中添加0.2%的GOD和酵母硒混合添加劑可以提高肉雞抗氧化酶活性，有效降低肉雞血清中丙二醛(MDA)含量，即降低了機體脂質(zhì)過氧化程度，改善動物機體的抗氧化應(yīng)激能力，提高機體免疫力。本試驗結(jié)果進一步證實，含有GOD與酵母硒的混合添加劑對肉雞免疫器官的發(fā)育有促進作用，可顯著提高肉雞血清免疫球蛋白含量，這與前人研究結(jié)果基本一致。

3.3 混合添加劑對血清中總蛋白和尿素氮含量的影響

尿素氮是機體內(nèi)氨基酸分解代謝的終產(chǎn)物之一，其含量是反映機體蛋白質(zhì)代謝的重要指標(biāo)［34］，血清總蛋白包括白蛋白和球蛋白，其含量在一定程度上反映機體蛋白質(zhì)的吸收和代謝情況，其含量增加是肝臟合成蛋白質(zhì)能力加強的表現(xiàn)，有利于機體生長和提高飼料轉(zhuǎn)化率［35］。白蛋白是血清含量最多的蛋白質(zhì)，占總蛋白含量的50%以上，具有增加抗體，提高免疫力等作用［36］。

研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加0.4%GOD可以顯著提高蛋雞血清中總蛋白含量，添加0.1%和0.4%的GOD能顯著提高蛋雞血清中白蛋白含量［3］。飼糧中添加0.3、0.5 和1.0 mg/kg 的酵母硒能顯著提高柴雞血清中總蛋白含量，具有提高白蛋白含量的趨勢，并隨著酵母硒含量的增加呈上升趨勢［37］。本試驗結(jié)果表明，飼糧中添加GOD和酵母硒混合添加劑能顯著提高肉雞21日齡血清總蛋白含量;顯著降低21和42日齡血清尿素氮含量。這與前人的研究結(jié)果基本一致，說明GOD和酵母硒混合添加劑，可提高肝臟代謝功能，改善飼糧中營養(yǎng)物質(zhì)的吸收及蛋白質(zhì)與氨基酸的利用率，蛋白質(zhì)合成代謝增強，有利于動物機體的正常生長發(fā)育［3］。

4 結(jié)論

飼糧中添加GOD和酵母硒混合添加劑能夠提高肉雞生產(chǎn)性能，降低死亡率，提高免疫器官指數(shù)，降低血清尿素氮含量。

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