魏艷紅 曲湘勇* 蔡 超 楊清麗 徐 勛 肖建新 申光榮

(1.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，長(zhǎng)沙 410128;2.湖南益陽(yáng)志德特禽養(yǎng)殖合作社，益陽(yáng) 413041;3.深圳市裕農(nóng)科技股份有限公司，深圳 518052)

研究表明，酸化劑具有促進(jìn)腸道組織發(fā)育，提高機(jī)體免疫力和抗氧化、抗腫瘤等生理功能，是一種高效、無(wú)污染、無(wú)殘留的保健型飼料添加劑，系抗生素替代品之一［1］。適宜水平的酸化劑可防御細(xì)菌對(duì)機(jī)體的侵入，改善肉仔雞的生長(zhǎng)性能［2］。鄒陽(yáng)等［3］、Jia 等［4］研究認(rèn)為，飼料原料和動(dòng)物腸道對(duì)酸化劑有一定的緩沖作用，或因酸化劑添加水平較低，吸收較快，在消化道中停留時(shí)間較短，若對(duì)其包被、微囊化等處理，使其能夠達(dá)到消化道后段，分段釋放，可避免進(jìn)入到胃腸道中的酸化劑被中和。這說(shuō)明包膜酸化劑比普通酸化劑有一定優(yōu)勢(shì)。Bosi等［5］在 21日齡仔豬飼糧中添加3.05%脂肪包被甲酸鈣，可增加小腸相對(duì)長(zhǎng)度和相對(duì)重量。晏家友等［6］在仔豬飼糧中添加復(fù)合緩釋酸化劑，仔豬胃和小腸相對(duì)重量增加，而未包被的酸化劑不能達(dá)到此效果。另外，使用復(fù)合酸化劑可產(chǎn)生協(xié)同效應(yīng)，增強(qiáng)使用效果。雖然酸化劑在家禽上的研究和應(yīng)用已較為廣泛，但使用效果并不穩(wěn)定、一致。本試驗(yàn)通過(guò)研究包膜復(fù)合酸化劑對(duì)地方特色蛋雞生產(chǎn)性能和血清生化指標(biāo)的影響，探討礦物元素在蛋中的沉積及糞中的排放情況，為豐富酸化劑在家禽生產(chǎn)中的應(yīng)用研究提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)于2013年5月7日至2013年6月9日在益陽(yáng)志德特禽養(yǎng)殖合作社蛋雞飼養(yǎng)基地進(jìn)行。選用48周齡、健康東鄉(xiāng)黑羽綠殼蛋雞300羽，隨機(jī)分成5個(gè)組，每組5個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)12羽。試驗(yàn)采用單因素設(shè)計(jì)，在基礎(chǔ)飼糧(表1)中分別添加0(對(duì)照組)、100、250、500和1 000 mg/kg的包膜復(fù)合酸化劑作為各組試驗(yàn)飼糧。試驗(yàn)蛋雞采用3層階梯式籠養(yǎng)。雞舍溫度20～30℃，相對(duì)濕度65% ～85%，試驗(yàn)預(yù)試期7 d，正試期28 d。試驗(yàn)雞按每只80 g/d給料，自由飲水。每日給光16 h，人工補(bǔ)光。常規(guī)程序消毒和免疫。每日清理雞糞和撿蛋，按重復(fù)記錄每天各組產(chǎn)蛋量、蛋重。飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后進(jìn)行代謝試驗(yàn)。每組按重復(fù)隨機(jī)挑選5只雞單籠飼養(yǎng)，每日定時(shí)收糞。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient level of the basal diet(air-dry basis) %

1.2 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)用包膜復(fù)合酸化劑:甲酸≥200 g/kg，乙酸≥200 g/kg，檸檬酸≥200 g/kg，山梨酸≥50 g/kg，延胡索酸≥50 g/kg，蘋(píng)果酸≥20 g/kg。包膜材料由膠原蛋白和硬脂酸單甘酯組成。

1.3 檢測(cè)指標(biāo)

1.3.1 生產(chǎn)性能

試驗(yàn)期間每天按重復(fù)記錄各組試驗(yàn)蛋雞的產(chǎn)蛋數(shù)、軟破蛋數(shù)和總蛋重，計(jì)算平均蛋重、產(chǎn)蛋率和料蛋比。

1.3.2 蛋品質(zhì)

試驗(yàn)第28天，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取2枚雞蛋。測(cè)蛋重、蛋形指數(shù)和蛋黃指數(shù)(蛋黃高度/蛋黃直徑)，使用 Orka Thchnology公司的 Egg Shell Thickness、Egg Analyzer分別測(cè)定蛋殼厚度及蛋黃顏色、蛋白高度和哈氏單位等。

1.3.3 血清生化指標(biāo)

試驗(yàn)第29天08:00空腹采血。每重復(fù)隨機(jī)選取2只雞，使用真空采血管翅靜脈采血4～5 mL/只，傾斜靜置，3 500 r/min離心10 min。取血清，分裝于離心管，置于－20℃冰箱保存。采用邁瑞B(yǎng)S－200全自動(dòng)生化分析儀、邁瑞生物公司生產(chǎn)的配套試劑盒進(jìn)行血清常規(guī)指標(biāo)檢測(cè)，檢測(cè)指標(biāo):白蛋白(ALB)、總蛋白(TP)、球蛋白(GLOB)、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、葡萄糖(GLU)、尿酸(UA)和鈣(Ca)含量。計(jì)算白蛋白/球蛋白(A/G)。

1.3.4 蛋黃與糞中礦物元素含量

試驗(yàn)第28天，在測(cè)定蛋品質(zhì)時(shí)，取出蛋黃于5 mL離心管中，－20℃冰箱保存，用于測(cè)定蛋黃中礦物元素含量。使用全收糞法進(jìn)行代謝試驗(yàn)，將收集的糞樣稱(chēng)重后置于烘箱中，65℃烘24 h至恒重后稱(chēng)重，粉碎過(guò)40目篩，制得風(fēng)干糞樣，用于測(cè)定礦物元素含量。礦物元素含量測(cè)定采用火焰原子吸收分光光譜法，方法參考GB/T 5009.92—2003、GB/T 500.92—2003、GB/T 9695.3—2009、呂緒東［7］、張星海等［8］食品中鐵、鎂、錳含量等測(cè)定。蛋黃預(yù)處理采用濕消化法。取1～1.5 g均勻蛋黃樣與錐形瓶，加入15 mL混酸［V(硝酸，HNO3)∶V(高氯酸，HClO4)=9∶1］，蓋上培養(yǎng)皿，消化過(guò)夜。第2天將錐形瓶至于加熱板加熱消化至溶液澄清，體積約2 mL，冷卻。消化過(guò)程中如果酸過(guò)少要補(bǔ)加混酸，防止碳化。加5 mL濃鹽酸，過(guò)濾，定容至100 mL容量瓶。糞樣預(yù)處理采用干灰化法。稱(chēng)取3 g糞樣于坩堝中，加入10 mL稀鹽酸［V(氯化氫，HCl)∶V(水，H2O)=1∶3］，用電爐小心加熱蒸干，放入馬弗爐先低溫碳化至無(wú)煙，再550℃灰化。冷卻，加少許水潤(rùn)濕，加入15 mL稀鹽酸［V(HCl)∶V(H2O)=1∶3］、1 ～2 mL 混酸［V(HNO3)∶V(HClO4)=9∶1］，加熱煮沸 3 ～5 min，過(guò)濾，定容至100 mL容量瓶。按照火焰原子吸收儀器操作進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)液配制和操作。測(cè)定鎂、錳等含量時(shí)加入1～2 mL 10%的氯化鍶溶液以消除干擾。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)由Excel 2010軟件初步處理后，用SASS 9.0軟件進(jìn)行單因素方差(one-way ANOVN)分析方法和Duncan氏法多重比較檢驗(yàn)。試驗(yàn)各組之間的數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果

2.1 包膜復(fù)合酸化劑對(duì)東鄉(xiāng)綠殼蛋雞生產(chǎn)性能的影響

由表2可知，與對(duì)照組相比，飼糧中添加100、250、500和1 000 mg/kg的酸化劑，分別使蛋雞產(chǎn)蛋率升高了 10.58%(P ＞ 0.05)、7.23%(P ＞0.05)、14.44%(P ＜0.05)和 12.50%(P ＜ 0.05);料蛋比降低了 9.09%(P ＞0.05)、9.76%(P ＞0.05)、13.80%(P ＜0.05)和 14.14%(P ＜ 0.05)，酸化劑組之間差異不顯著(P＞0.05);從表中可看出，酸化劑組的平均蛋重較對(duì)照組略有提高，但未達(dá)到顯著水平(P＞0.05)。

表2 包膜復(fù)合酸化劑對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能的影響Table 2 Effects of coated compound acidifiers on performance of laying hens

2.2 包膜復(fù)合酸化劑對(duì)東鄉(xiāng)綠殼蛋雞蛋品質(zhì)的影響

由表3可知，蛋雞飼糧中添加酸化劑對(duì)蛋形指數(shù)、蛋黃顏色、哈氏單位無(wú)顯著影響(P＞0.05);500 mg/kg組的蛋殼厚度較對(duì)照組提高了6.37%(P＜0.05)，但1 000 mg/kg組蛋殼厚度較對(duì)照組降低了3.71%(P ＜0.05)，250 mg/kg組蛋黃指數(shù)較對(duì)照組提高了7.92%(P＜0.05)，其他各組之間差異不顯著(P＞0.05)。

表3 包膜復(fù)合酸化劑對(duì)綠殼蛋雞蛋品質(zhì)的影響Table 3 Effects of coated compound acidifiers on egg quality of hens eggs

2.3 包膜復(fù)合酸化劑對(duì)東鄉(xiāng)綠殼蛋雞礦物元素含量的影響

由表4可知，與對(duì)照組相比，100 mg/kg組提高了蛋黃鐵含量10.71%(P ＞0.05)，500 mg/kg 組提高了14.76%，但未達(dá)到顯著(P ＞0.05);100、250、500和1 000 mg/kg組分別較對(duì)照組提高了蛋黃中22.72%(P ＜ 0.05)、27.65%(P ＜ 0.05)、34.09%(P ＜0.05)和35.23%(P ＜0.05)銅含量;飼糧中添加250、500和1 000 mg/kg酸化劑，蛋黃中錳含量分別較對(duì)照組提高了 17.07%(P ＞0.05)、59.76%(P ＜0.01)和75.1%(P ＜0.01);蛋黃中鎂、鋅含量組間差異不顯著(P＞0.05)。

由表5可知，不同水平酸化劑使蛋雞糞中銅含量有一定程度的降低，但未達(dá)顯著水平(P＞0.05);1 000 mg/kg組糞中錳含量較對(duì)照組降低了25.07%(P ＜0.01)，500 mg/kg組糞中錳含量較對(duì)照組降低了4.88%(P＞0.05);飼糧中添加酸化劑對(duì)各組糞中鋅含量無(wú)顯著影響(P＞0.05);500和1 000 mg/kg組顯著降低了糞中鈣含量，分別較對(duì)照組降低了 9.05%(P ＜0.05)和 7.64%(P ＜0.05);飼糧中添加250、500和1 000 mg/kg酸化劑極顯著降低了糞中鎂含量(P＜0.01)，分別較對(duì)照組降低了13.10%、20.92% 和 20.00%，100 mg/kg組與對(duì)照組差異不顯著(P＞0.05)。

表4 包膜復(fù)合酸化劑對(duì)蛋黃礦物元素的影響Table 4 Effects of coated compound acidifiers on mineral elements in egg yolk

表5 包膜復(fù)合酸化劑對(duì)糞中礦物元素的影響Table 5 Effects of coated compound acidifiers on mineral elements in manure

2.4 包膜復(fù)合酸化劑對(duì)東鄉(xiāng)綠殼蛋雞血清生化指標(biāo)的影響

由表6可知，飼糧中添加酸化劑提高了蛋雞血清TP含量，100 mg/kg組較對(duì)照組提高了79.28%(P ＜0.01)，250 mg/kg組提高了 31.22%(P ＜0.05);酸化劑組血清ALB含量較對(duì)照組均有提高，100、250和500 mg/kg組分別較對(duì)照組提高了69.04%(P ＜0.05)、31.89%(P ＞0.05)和 32.35%(P＞0.05);100 mg/kg組血清GLOB含量較對(duì)照組升高了18.79%(P＞0.05)，其他組較對(duì)照組稍有降低，各組之間差異不顯著(P ＞0.05);100、250、500和1 000 mg/kg組A/G分別較對(duì)照組升高了25.23%(P ＞0.05)、53.27%(P ＜0.01)和 78.50%(P ＜0.01)、22.43%(P ＞0.05);酸化劑提高了血清UA含量，100、250和500 mg/kg組分別較對(duì)照組提高了 57.21%(P ＞0.05)、103.73%(P ＜0.05)和53.97%(P ＞0.05);100、250 和500 mg/kg 組血清中GLU含量分別較對(duì)照組提高了81.83%(P＜0.05)、44.50%(P ＞ 0.05)、42.17%(P ＞ 0.05);100、250、500和1 000 mg/kg組血清鈣含量分別較對(duì)照組提高了8%(P ＞0.05)、13.43%(P ＞0.05)、9.43%(P ＞0.05)和 29.1%(P ＜0.05);各組間蛋雞血清TG和TC含量差異不顯著(P＞0.05)。

表6 包膜復(fù)合酸化劑對(duì)蛋雞血清生化指標(biāo)的影響Table 6 Effects of coated compound acidifiers on serum biochemical parameters of laying hens

3 討論

3.1 包膜復(fù)合酸化劑對(duì)東鄉(xiāng)綠殼蛋雞生產(chǎn)性能的影響

張雪艷［9］研究表明，蛋雞飼糧中添加丁酸鹽，產(chǎn)蛋率提高了7.35%，料蛋比降低6.73%，對(duì)采食量和蛋重?zé)o顯著影響，經(jīng)濟(jì)效益提高16.51%。Park等［10］報(bào)道，在籠養(yǎng)蛋雞中綜合考慮產(chǎn)蛋率和飼料轉(zhuǎn)換率，0.2%有機(jī)酸與0.3%有效磷合用可得到最佳生產(chǎn)性能。Soltan［11］研究也表明，蛋雞飼糧中添加復(fù)合有機(jī)酸可提高蛋雞活重，780 mg/kg的復(fù)合有機(jī)酸可顯著提高產(chǎn)蛋率5.77%，增加飼料轉(zhuǎn)化率，提高產(chǎn)蛋的持久性，有很好的經(jīng)濟(jì)效益。但也有研究報(bào)道，添加有機(jī)酸對(duì)蛋雞產(chǎn)蛋率、蛋重、采食量等無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異［12］。本試驗(yàn)中，東鄉(xiāng)綠殼蛋雞產(chǎn)蛋率較一般商品蛋雞產(chǎn)蛋率低，但飼糧添加500和1 000 mg/kg包被酸化劑可顯著提高產(chǎn)蛋率，降低料蛋比。這可能與酸化劑提高蛋雞對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化、吸收能力有關(guān)［13］。研究發(fā)現(xiàn)，如果動(dòng)物的胃腸道pH偏高，不僅會(huì)影響小腸中的消化酶活性，還會(huì)引起病原菌增殖，另外，動(dòng)物消化道具有較強(qiáng)的緩沖作用，沒(méi)經(jīng)過(guò)包被處理的酸化劑難以到達(dá)腸道發(fā)揮酸化作用。采用包被技術(shù)將復(fù)合酸化劑保護(hù)起來(lái)，可避免進(jìn)入到胃腸道中的酸化劑被中和［6］。而進(jìn)入腸道的酸化劑可降低動(dòng)物腸道pH［14］，刺激消化酶分泌，提高酶活性［15－16］，同 時(shí)，酸 化 劑 可 調(diào) 節(jié) 腸 道 菌 群 結(jié)構(gòu)［17－19］，促進(jìn)消化道吸收營(yíng)養(yǎng)，為蛋雞產(chǎn)蛋提供了充足的營(yíng)養(yǎng)。

3.2 包膜復(fù)合酸化劑對(duì)東鄉(xiāng)綠殼蛋雞蛋品質(zhì)的影響

Soltan［11］研究表明，780 mg/kg 復(fù)合有機(jī)酸提高了蛋殼質(zhì)量和蛋黃指數(shù)，對(duì)蛋殼鈣含量和蛋白質(zhì)含量無(wú)顯著影響，降低了蛋白質(zhì)指數(shù)。S'wi?tkiewicz等［12］報(bào)道，有機(jī)酸(中鏈脂肪酸)提高了高齡產(chǎn)蛋雞的蛋殼質(zhì)量?？梢?jiàn)，酸化劑對(duì)蛋雞蛋殼品質(zhì)有一定的改善。本試驗(yàn)中100、250和500 mg/kg的酸化劑提高了蛋殼厚度，對(duì)其他蛋品質(zhì)指標(biāo)無(wú)影響。這可能是因?yàn)樗峄瘎┐龠M(jìn)了蛋雞對(duì)鈣的吸收，提高了蛋殼中鈣的沉積［20］。而蛋殼的形成需要足夠的鈣和碳酸根離子。本試驗(yàn)中酸化劑減少了糞中鈣的排放，提高了血清鈣含量，因此可以推斷，酸化劑促進(jìn)了蛋雞對(duì)鈣的吸收和利用，提高了蛋殼中鈣的沉積，從而提高蛋殼厚度。

3.3 包膜復(fù)合酸化劑對(duì)蛋黃及糞中礦物元素含量的影響

酸化劑對(duì)畜禽排泄物的影響研究的較少，劉嘉莉等［21］在肉鴨飼糧中添加丁酸鈉可降低鴨糞中的氮、磷、有 機(jī) 質(zhì)、氨 氮、銅、鋅 含 量，且 以700 mg/kg添加水平效果較好。本試驗(yàn)結(jié)果表明，東鄉(xiāng)綠殼蛋雞飼糧中添加不同水平酸化劑，對(duì)糞中鐵、銅、鋅含量無(wú)顯著影響，但可減少了糞中礦物元素的排放，有利于減輕環(huán)境負(fù)擔(dān)。這可能是因?yàn)榈V物元素在堿性條件下易形成難溶性鹽，難以被吸收，畜禽飼糧中添加酸化劑可降低飼糧和動(dòng)物消化道pH［14］，促使其釋放出來(lái)。檸檬酸、延胡索酸等還可以與鈣離子、錳離子、亞鐵離子、鋅離子等金屬離子形成螯合物，促進(jìn)其吸收［16，22］。另外，酸化劑可提高消化道酶活性［6］，促進(jìn)腸道組織發(fā)育，并且酸性食糜在消化道可降低消化道排空速度，提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率。

雞體內(nèi)礦物元素代謝十分復(fù)雜，不僅受到飼糧影響，還受到非營(yíng)養(yǎng)因素影響。雞蛋中的礦物元素，影響商品蛋營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，也影響種蛋孵化效果和雛禽品質(zhì)［23－24］。本研究表明，不同水平包膜復(fù)合酸化劑組蛋黃中銅、錳含量有顯著改善，對(duì)鐵、鋅含量也有一定的提高效果，但各組差異不顯著，對(duì)常量元素鈣、鎂含量影響較小，提高作用不明顯。

從表4、表5蛋黃中礦物元素和糞中礦物元素含量的對(duì)比可以看出，酸化劑顯著降低了糞中鈣、鎂、錳含量，但對(duì)蛋黃中鈣、鎂含量影響很小，可見(jiàn)機(jī)體對(duì)鈣、鎂的代謝率提高，但沒(méi)有沉積在蛋黃里。從前面酸化劑對(duì)血清鈣含量及蛋殼品質(zhì)的影響的研究我們可以推斷，酸化劑提高了機(jī)體對(duì)鈣的吸收和利用，提高了血清中鈣含量，并部分沉積在蛋殼中，對(duì)蛋黃中鈣沉積影響較小?？赏硗茢啵峄瘎┨岣吡藱C(jī)體對(duì)鎂、錳等吸收和利用，并沉積在機(jī)體不同部位。礦物元素在機(jī)體內(nèi)的代謝十分復(fù)雜，具體機(jī)制還需更加深入的研究。

3.4 包膜復(fù)合酸化劑對(duì)東鄉(xiāng)綠殼蛋雞血清生化指標(biāo)的影響

黃冠慶等［25］研究結(jié)果表明，酸化劑和益生素合用可提高血清TP和ALB含量，但李萬(wàn)軍［26］研究表明，酸化劑降低了雞血清中TP和ALB含量。本試驗(yàn)表明，飼糧中添加酸化劑提高了蛋雞的TP和ALB含量，A/G顯著上升，但對(duì)于血清TP含量，隨著酸化劑添加水平增高而降低。研究認(rèn)為，酸化劑可降低飼糧和動(dòng)物消化道pH，促進(jìn)胃酸分泌［27］，提高蛋白酶和淀粉酶活性，促進(jìn)對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化，從而保證了機(jī)體合成蛋白質(zhì)的供給，提高血清TP和ALB含量。而各試驗(yàn)組之間血清GLOB含量無(wú)顯著差異。

本試驗(yàn)結(jié)果表明，酸化劑顯著提高了血清UA含量，可能是因?yàn)樗峄瘎┰黾恿说鞍踪|(zhì)吸收，血清中TP含量升高，未充分利用部分形成UA排出，增加了UA排出量。酸化劑對(duì)血清GLU含量的影響在肉仔雞中的研究表明，短鏈脂肪酸可降低血清GLU和胰島素含量［14］。本試驗(yàn)中各酸化劑組GLU含量較對(duì)照組均有不同程度提高，100 mg/kg酸化劑組較對(duì)照組提高了81.83%，血清指標(biāo)為禁食12 h后采集測(cè)定，說(shuō)明酸化劑提高了蛋雞空腹時(shí)血清GLU含量，提高了機(jī)體代謝水平。本試驗(yàn)中各試驗(yàn)組血清鈣含量較對(duì)照組都有一定程度的提高，1 000 mg/kg酸化劑組較對(duì)照組升高了29.1%，說(shuō)明酸化劑提高了鈣的利用率，提高了血清鈣含量。血清TG和TC含量反映機(jī)體脂質(zhì)代謝水平，本試驗(yàn)中酸化劑對(duì)蛋雞TG和TC含量無(wú)顯著影響，不影響蛋雞脂質(zhì)代謝。

4 結(jié)論

① 飼糧中添加500、1 000 mg/kg包膜復(fù)合酸化劑可提高東鄉(xiāng)綠殼蛋雞產(chǎn)蛋率，降低料蛋比，提高產(chǎn)蛋性能，且500 mg/kg水平可提高蛋殼厚度。

②飼糧中添加包膜復(fù)合酸化劑可提高東鄉(xiāng)綠殼蛋雞血清TP、ALB、GLO、GLU和血清鈣含量，升高A/G，250和500 mg/kg水平效果較好。

③飼糧中添加包膜復(fù)合酸化劑可提高東鄉(xiāng)綠殼蛋雞蛋黃中銅、錳含量，降低了糞中錳、鈣、鎂的排放。

④為保證東鄉(xiāng)綠殼蛋雞的優(yōu)質(zhì)高效生產(chǎn)，建議飼糧中添加250～500 mg/kg包膜復(fù)合酸化劑。

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