李華偉 王洪榮 王夢(mèng)芝 喻禮懷 孫麗莎 陳 青 趙 睿 崔慧慧

(揚(yáng)州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，揚(yáng)州 225009)

膽堿在機(jī)體內(nèi)作為甲基供體，與蛋氨酸、葉酸和維生素B12代謝關(guān)系密切，從飼料途徑獲取膽堿是滿足動(dòng)物生產(chǎn)的重要途徑。飼料中主要是以游離膽堿和磷脂酰膽堿的形式存在，但是含量相對(duì)較少［1］，動(dòng)物小腸吸收的膽堿不足以滿足高效生長(zhǎng)、生產(chǎn)需要，因此飼料中補(bǔ)充膽堿成為一個(gè)重要的飼養(yǎng)技術(shù)。反芻動(dòng)物的瘤胃能夠大量降解飼料中的膽堿類物質(zhì)，使得到達(dá)小腸的膽堿極少，需要以過瘤胃保護(hù)的形式補(bǔ)充膽堿［2］，相應(yīng)的產(chǎn)品也得到了開發(fā)，過瘤胃保護(hù)膽堿(rumen protected choline，RPC)在反芻動(dòng)物生產(chǎn)中的應(yīng)用逐漸受到關(guān)注。

機(jī)體對(duì)膽堿的需要量是以克為計(jì)量單位，在生產(chǎn)中的添加量較大。目前 RPC 在牛［3－6］、山羊［7－9］生產(chǎn)中發(fā)現(xiàn)添加RPC能夠提高平均日增重(ADG)，促進(jìn)生長(zhǎng)，但是對(duì)于料重比(F/G)、屠宰性能方面的報(bào)道不盡一致［10－12］。我國(guó)南方地區(qū)的湖羊飼養(yǎng)多采用舍飼、慢速育肥的生產(chǎn)模式。添加RPC將提高到達(dá)小腸的膽堿供應(yīng)量，提供甲基，節(jié)約機(jī)體內(nèi)有限的蛋氨酸資源，促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)，同時(shí)以卵磷脂的形式參與機(jī)體內(nèi)細(xì)胞膜的組成，具有調(diào)控肉品質(zhì)的潛在價(jià)值。研究表明山羊生產(chǎn)中分別添加RPC 0.5、10 g/d，均起到改善生長(zhǎng)，降低料重比的效果［8－9］，但是關(guān)于 RPC 對(duì)肉品質(zhì)的研究鮮有報(bào)道。隨著消費(fèi)者對(duì)肉品質(zhì)的重視，對(duì)肉品質(zhì)的改善效果成為評(píng)定飼料添加劑應(yīng)用的重要參考，探索營(yíng)養(yǎng)添加劑對(duì)肉羊生長(zhǎng)及肉品質(zhì)調(diào)控的研究，成為目前的研究熱點(diǎn)。本試驗(yàn)旨在研究添加RPC對(duì)杜湖雜交羊生長(zhǎng)、消化、血清相關(guān)指標(biāo)以及肉品質(zhì)的影響，為RPC在肉羊生產(chǎn)中的應(yīng)用提供理論和應(yīng)用方面的參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物與飼糧

試驗(yàn)羊?yàn)?4只3月齡杜泊湖羊雜交1代公羔，平均體重為(20.1±2.3)kg。采用單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)，將試驗(yàn)羊隨機(jī)分成4組，每組6只。試驗(yàn)飼糧的配制參照NRC(2007)中體重20 kg、ADG 100 g/d的羊營(yíng)養(yǎng)需要量，其組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。添加的RPC中膽堿有效含量≥50%，包被壁材(氫化植物油、石蠟和表面活性劑)≤50%;RPC安全過瘤胃率≥85%，由意大利亞士可公司提供。對(duì)照組，試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ組分別在基礎(chǔ)飼糧中添加0、0.25%、0.50%、0.75%RPC。RPC 預(yù)混入精料中進(jìn)行添加。每日的精料、粗料都進(jìn)行稱重獨(dú)立包裝后進(jìn)行準(zhǔn)確飼喂。試驗(yàn)過程中，采用先喂少量粗料，再投喂精料，精料采食完畢后補(bǔ)齊剩余粗料的方式進(jìn)行飼喂。每天收集并稱重剩余粗料樣，根據(jù)采食情況每隔15 d進(jìn)行1次喂料量調(diào)整。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet(DM basis) %

1.2 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)羊購(gòu)自江蘇省泰州市海倫羊業(yè)有限責(zé)任公司，在揚(yáng)州大學(xué)農(nóng)牧場(chǎng)進(jìn)行飼養(yǎng)及屠宰試驗(yàn)。試驗(yàn)羊每天飼喂2次，07:00、17:00各1次。試驗(yàn)期間自由飲水，不清糞，單欄飼養(yǎng)。預(yù)試期15 d，正試期60 d。在試驗(yàn)過程中，每隔2周從每組挑選4只試驗(yàn)羊，分別在正試期的第9、24、39和54天，進(jìn)行消化代謝試驗(yàn)，代謝試驗(yàn)適應(yīng)期3 d，連續(xù)采樣3 d。收樣期每隔6 h收集糞樣(按照糞樣重的10%加入10%稀硫酸進(jìn)行固氮后凍存)，將24 h樣品混合后凍存待測(cè)。

1.3 指標(biāo)測(cè)定

1.3.1 采食量及表觀消化率測(cè)定

試驗(yàn)過程中，每天收集并稱重剩余粗料樣，收集10 d的剩余粗料樣后，混合取樣。每隔15 d測(cè)定采食量，連續(xù)測(cè)定3 d。將試驗(yàn)收集到的飼糧、剩余粗料、糞樣進(jìn)行干物質(zhì)(DM)、粗蛋白質(zhì)(CP)、中性洗滌纖維(NDF)、酸性洗滌纖維(ADF)含量測(cè)定，方法參照張麗英［14］。

1.3.2 生長(zhǎng)性能測(cè)定

分別在試驗(yàn)開始和結(jié)束時(shí)，測(cè)定試驗(yàn)羊的初重和末重，計(jì)算平均凈增重(ANG)、ADG和料重比。

1.3.3 血清生化指標(biāo)的測(cè)定

試驗(yàn)期間，每隔10 d采集1次血樣，于晨飼前空腹采集頸靜脈血樣10 mL，3 861×g離心10 min，分離血清，立即進(jìn)行相關(guān)指標(biāo)的測(cè)定。血清指標(biāo)的測(cè)定采用DH－364型全自動(dòng)生化分析儀(南京神州英諾華醫(yī)療科技有限公司)，相應(yīng)試劑盒［總蛋白(TP)定量測(cè)試盒，A045-2;尿素氮(UN)測(cè)試盒，C013-2;肌酐(Cr)定試劑盒，C011-2;肌酸激酶(CK)，A032］均購(gòu)自南京建成生物工程研究所。

1.3.4 肉品質(zhì)指標(biāo)的測(cè)定

根據(jù)試驗(yàn)期肉羊ANG的試驗(yàn)統(tǒng)計(jì)結(jié)果和RPC的量效關(guān)系，選擇差異性較為顯著的對(duì)照組、試驗(yàn)Ⅰ、Ⅲ組進(jìn)行屠宰，每組6只進(jìn)行屠宰率測(cè)定。取12、13脊椎間背最長(zhǎng)肌樣品，測(cè)定宰后12 h pH、失水率和剪切力，測(cè)定參照侯鵬霞［15］的方法。

1.4 試驗(yàn)數(shù)據(jù)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)經(jīng)Excel 2007初步整理后，采用SPSS 18.0軟件中的單因素方差分析(one-way ANOVA)，使用Duncan氏法多重比較，結(jié)果以平均值和標(biāo)準(zhǔn)誤表示，以P＜0.05和P＜0.01作為差異顯著和極顯著的判斷標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 RPC對(duì)肉羊采食量及表觀消化率的影響

從表2可知，添加 RPC對(duì)肉羊 DM、CP、NDF、ADF采食量都有一定程度的提高，但是并沒有達(dá)到顯著水平(P＞0.05)，其中試驗(yàn)Ⅰ組肉羊各采食指標(biāo)較對(duì)照組提高幅度最大。隨著添加水平的提高，RPC促進(jìn)采食的效果有所下降。與對(duì)照組相比，補(bǔ)飼RPC提高了試驗(yàn)組DM、CP、NDF和ADF的表觀消化率。試驗(yàn)組的DM、OM表觀消化率顯著或極顯著高于對(duì)照組(P ＜0.05 或 P ＜0.01)。試驗(yàn)組 CP、NDF、ADF表觀消化率均顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)，并且隨RPC添加量的增加，表觀消化率呈現(xiàn)升高趨勢(shì)。試驗(yàn)Ⅲ組較對(duì)照組的CP、NDF和ADF表觀消化率分別提高了25.11%、46.36%和28.10%。

表2 RPC對(duì)肉羊采食量及表觀消化率的影響Table 2 Effects of RPC on feed intake and nutrient apparent digestibility of lambs

2.2 RPC對(duì)肉羊生長(zhǎng)性能的影響

從表3可知，試驗(yàn)Ⅰ組的ADG和ANG顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)，而試驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ組較對(duì)照組差異不顯著(P＞0.05)。試驗(yàn)Ⅰ組較對(duì)照組料重比降低了14.51%(P ＜0.05)，對(duì)照組，試驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ組料重比差異不顯著(P ＞0.05)。

2.3 RPC對(duì)肉羊蛋白質(zhì)代謝相關(guān)血清生化指標(biāo)的影響

從表4可知，試驗(yàn)組較對(duì)照組降低了血清UN含量，試驗(yàn)Ⅰ組與對(duì)照組差異顯著(P＜0.05)，隨著RPC添加水平的升高，血清UN含量相應(yīng)升高，試驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ組與對(duì)照組差異不顯著(P＞0.05)。添加RPC后，血清TP、Cr含量和CK活性在各組之 間差異不顯著(P＞0.05)。

表3 RPC對(duì)肉羊生長(zhǎng)性能的影響Table 3 Effects of RPC on growth performance of lambs

表4 RPC對(duì)肉羊蛋白質(zhì)代謝相關(guān)血清生化指標(biāo)的影響Table 4 Effects of RPC on serum biochemical indices associated with protein metabolism of lambs

2.4 RPC對(duì)肉羊屠宰性能及肉品質(zhì)的影響

從表5可知，添加RPC減緩了羊肉的pH下降速度，其中試驗(yàn)Ⅰ組最為明顯，宰后12 h的pH顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)，pH與RPC添加水平不存在量效關(guān)系。隨著RPC添加水平升高，羊肉失水率逐漸下降，其中試驗(yàn)Ⅲ組顯著低于對(duì)照組和試驗(yàn)Ⅰ組(P＜0.05)，試驗(yàn)Ⅰ組較對(duì)照組降低了2.17%(P＞0.05)。試驗(yàn)Ⅰ、Ⅲ組羊肉剪切力極顯著低于對(duì)照組(P＜0.01)，試驗(yàn)組間差異不顯著(P ＞0.05)。

表5 RPC對(duì)肉羊屠宰性能及肉品質(zhì)的影響Table 5 Effects of RPC on slaughter performance and carcass quality of lambs

3 討論

3.1 RPC對(duì)杜湖雜交羊采食量及表觀消化率的影響

膽堿對(duì)動(dòng)物采食量的影響受其純度、添加量、保護(hù)形式及動(dòng)物機(jī)體狀態(tài)等多種因素的影響。當(dāng)膽堿中混入三甲胺時(shí)(22 g/kg)，引起動(dòng)物采食量的下降［16］。對(duì)于反芻動(dòng)物，游離膽堿在瘤胃內(nèi)被大量降解，生成三甲胺，進(jìn)而以氧化三甲銨的形式排出，僅有極少量的游離膽堿實(shí)現(xiàn)過瘤胃。研究發(fā)現(xiàn)，添加未保護(hù)膽堿達(dá)到282 g/d時(shí)，采食量下降，添加159 g/d時(shí)，對(duì)反芻動(dòng)物采食量不產(chǎn)生影響［17］。以 RPC的形式進(jìn)行補(bǔ)充，添加 60 g/d(25%氯化膽堿含量)即可達(dá)到相似效果［18］。這說明動(dòng)物對(duì)膽堿的添加量有著較寬的耐受范圍，可能與膽堿本來就是動(dòng)物膽鹽的重要組分有關(guān)。RPC的添加并沒有對(duì)DM采食量產(chǎn)生負(fù)面的效果，促進(jìn)采食方面也沒有達(dá)到顯著水平，僅能提高肉牛、肉羊采食量的 10.53% 和 1.15%［8－9］。添加RPC能夠顯著提高圍產(chǎn)期奶牛(體況評(píng)分≥4.0)的食欲［19］，說明膽堿具有通過改善機(jī)體代謝提高動(dòng)物采食量的潛力。本試驗(yàn)中各試驗(yàn)組基礎(chǔ)飼糧組成相同，試驗(yàn)過程中模擬了南方地區(qū)的肉羊育肥模式和育肥水平，結(jié)果顯示添加RPC能夠提高DM采食量，但是并沒有達(dá)到顯著水平，這可能與RPC的添加改善肉羊機(jī)體代謝有關(guān)，進(jìn)而有限促進(jìn)了采食量的提高。

膽堿是機(jī)體內(nèi)的堿性物質(zhì)，參與體內(nèi)膽汁的組成，主要以卵磷脂的形式被機(jī)體吸收。RPC的添加，將有助于機(jī)體內(nèi)膽汁的分泌，膽汁有乳化脂肪微粒，促進(jìn)乳糜微粒吸收，同時(shí)促進(jìn)脂溶性維生素的吸收。膽堿的具有促進(jìn)機(jī)體血液循環(huán)的作用，這與膽堿及其次級(jí)代謝物在體內(nèi)發(fā)揮重要的信使調(diào)節(jié)作用有關(guān)。試驗(yàn)證明，膽堿進(jìn)入體內(nèi)后，以乙酰膽堿和鞘磷脂的形式參與體內(nèi)的神經(jīng)沖動(dòng)傳導(dǎo)。乳化脂肪、促進(jìn)脂溶性維生素吸收、加快營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)傳遞是膽堿促進(jìn)消化吸收的生理基礎(chǔ)。生產(chǎn)中以飼糧中添加和皺胃灌注的方式均可提高CP、NDF 和 ADF 的表觀消化率［20－21］。蛋氨酸是反芻動(dòng)物機(jī)體的限制性氨基酸，膽堿的添加對(duì)蛋氨酸具有一定的節(jié)約效應(yīng)，這在低蛋白質(zhì)和氨基酸不平衡飼糧中效果更為顯著。本試驗(yàn)中12%蛋白質(zhì)水平下，試驗(yàn)組較對(duì)照組的CP、NDF和ADF表觀消化率都有所提高，以試驗(yàn)Ⅲ組的效果最為顯著，這說明膽堿具有促進(jìn)消化吸收的功能，其促進(jìn)作用是通過多途徑而發(fā)揮。

3.2 添加RPC對(duì)杜湖雜交羊血清指標(biāo)及生長(zhǎng)性能的影響

添加膽堿能夠促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)，以蛋氨酸節(jié)約，促進(jìn)機(jī)體氨基酸平衡為主要途徑。膽堿作為體內(nèi)的不穩(wěn)定甲基源，在酯轉(zhuǎn)化過程中發(fā)揮重要作用，參與肌肉代謝相關(guān)指標(biāo)的合成，在血清中主要反映在TP、UN、Cr和CK等指標(biāo)上。攝入蛋白質(zhì)水平的升高，伴隨著血漿蛋白質(zhì)水平的升高［22］。UN反映了動(dòng)物體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝和飼糧氨基酸的平衡狀況［23］，是食入蛋白質(zhì)、機(jī)體蛋白質(zhì)動(dòng)員和排出綜合作用的結(jié)果［24］。Cr是肌肉代謝的產(chǎn)物，其含量與肌肉總量密切相關(guān)。CK存在于機(jī)體內(nèi)多種組織和器官中，以骨骼肌中含量最多。在肌營(yíng)養(yǎng)性不良、運(yùn)動(dòng)缺氧、代謝物積累以及功能不足時(shí)，肌纖維膜的通透性升高、破損時(shí)，引起CK活性的升高，作為肌纖維功能正常與否的一個(gè)重要參考。

本試驗(yàn)中，試驗(yàn)飼糧的蛋白質(zhì)水平為12%，屬于中低水平。添加膽堿，有助于節(jié)約蛋氨酸。其中0.25%添加水平下，ADG較對(duì)照組提高了24%，以往報(bào)道中也表現(xiàn)出了RPC的促生長(zhǎng)效果［11，25］，這與降低單位畜產(chǎn)品完全可消化養(yǎng)分、可消化粗蛋白質(zhì)消耗量［20］、提高飼料轉(zhuǎn)化效率有關(guān)，但是在高蛋白質(zhì)水平條件下，添加膽堿的促生長(zhǎng)效果不明顯［21］。添加RPC提高動(dòng)物生產(chǎn)水平，與血清胰島素、降低胰高血糖素和瘦素含量有關(guān)［26］，進(jìn)一步說明了膽堿在機(jī)體內(nèi)發(fā)揮著廣泛的調(diào)節(jié)作用，對(duì)動(dòng)物生長(zhǎng)的調(diào)節(jié)存在復(fù)雜機(jī)制。添加RPC，除試驗(yàn)Ⅰ組的血清UN含量顯著降低外，其他指標(biāo)無顯著變化。在采食蛋白質(zhì)水平差異不顯著情況下，試驗(yàn)Ⅰ組ADG顯著高于其他各組，試驗(yàn)Ⅰ組的血清UN含量顯著降低，這與膽堿促進(jìn)機(jī)體合成代謝類固醇、加快蛋白質(zhì)沉積有關(guān)，但是其機(jī)制有待深入研究。由于基礎(chǔ)飼糧的蛋白質(zhì)水平相同，采食量差異不顯著，造成動(dòng)物血清TP含量差異不顯著。但是RPC的添加，相對(duì)提高了試驗(yàn)組的血清Cr含量和CK活性，高水平添加組并沒有提高試驗(yàn)羊的血清Cr含量和CK活性，說明添加適當(dāng)水平RPC對(duì)動(dòng)物機(jī)體的肌肉代謝產(chǎn)生調(diào)節(jié)作用。膽堿的作用受其含量的限制，例如胎兒體內(nèi)低含量的膽堿，主要是用于合成磷脂酰乙醇胺，而高含量游離膽堿則主要用于氧化生成甜菜堿，調(diào)控DNA甲基化反應(yīng)。在肉羊飼糧中添加高濃度膽堿是否遵循不同的調(diào)控途徑及作用機(jī)制，有待深入研究。

3.3 添加RPC對(duì)杜湖雜交羊肉品質(zhì)的影響

膽堿以磷脂酰膽堿的形式參與細(xì)胞膜的組成，以參與肌酸合成的形式參與肌肉的代謝，同時(shí)其代謝產(chǎn)物在體內(nèi)發(fā)揮著第二信使的作用，參與細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)傳導(dǎo)和調(diào)節(jié)。膽堿的添加，增加了體內(nèi)卵磷脂、二酰甘油和磷脂酸的含量，這些代謝物作為第二信使，參與有絲分裂活化生長(zhǎng)因子組成，激活rasraf-1－絲裂原活化蛋白級(jí)聯(lián)反應(yīng)和蛋白激酶C通路，加速細(xì)胞的生長(zhǎng)。膽堿以卵磷脂的形式參與細(xì)胞膜的組成，有助于提高細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)完整性，對(duì)于保持肉品質(zhì)具有重要作用。RPC添加促進(jìn)肌纖維的快速生長(zhǎng)，調(diào)控肌纖維類型由Ⅰ型向Ⅱ型發(fā)生轉(zhuǎn)變，進(jìn)而降低細(xì)胞內(nèi)糖原的含量，是系列肉品質(zhì)改變的基礎(chǔ)。

添加RPC減緩了12 h羊肉pH下降速度、降低了失水率和剪切力。羊肉的pH在5.8～6.2之間屬于一級(jí)鮮度，試驗(yàn)Ⅰ、Ⅲ組的羊肉12 h時(shí)仍然保持一級(jí)鮮度的狀態(tài)。宰后24 h內(nèi)，肉品質(zhì)的pH呈現(xiàn)快速下降，并且下降過程主要在宰后12 h內(nèi)［27］。pH的下降是由于糖原降解所致，試驗(yàn)Ⅰ、Ⅲ組的pH下降較為緩慢，意味著細(xì)胞內(nèi)的糖原含量較少。另外試驗(yàn)Ⅰ、Ⅲ組的失水率較對(duì)照組有所降低，這主要是由于膽堿參與細(xì)胞膜組成，提高線粒體膜的完整性，同時(shí)提高了細(xì)胞的抗氧化能力所致。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)中速育肥條件下，在3～5月齡羔羊飼糧中添加0.25%的RPC有降低料重比，提高養(yǎng)分消化率，改善氮利用效率和羊肉品質(zhì)的效果。

致謝:

感謝意大利亞士可公司反芻產(chǎn)品部經(jīng)理李輝博士提供試驗(yàn)材料及試驗(yàn)過程中的關(guān)心和幫助。

［1］ ERDMAN R A，SHARMA B K.Effect of dietary rumen-protected choline in lactating dairy cows［J］.Journal of Dairy Science，1991，74(5):1641 －1647.

［2］ ATKINS K B，ERDMAN R A，VANDERSALL J H.Dietary choline effects on milk yield and duodenal choline flow in dairy cattle［J］.Journal of Dairy Science，1988，71(1):109 －116.

［3］ HARTWELL J R，CECAVA M J，DONKIN S S.Impact of dietary rumen undegradable protein and rumenprotected choline on intake，peripartum liver triacylglyceride，plasma metabolites and milk production in transition dairy cows［J］.Journal of Dairy Science，2000，83(12):2907 －2917.

［4］ ZOM R L G，VAN BAAL J，GOSELINK R M A，et al.Effect of rumen-protected choline on performance，blood metabolites，and hepatic triacylglycerols of periparturient dairy cattle［J］.Journal of Dairy Science，2011，94(8):4016 －4027.

［5］ GOSELINK R M A，VAN BAAL J，WIDJAJA H C A，et al.Effect of rumen-protected choline supplementation on liver and adipose gene expression during the transition period in dairy cattle［J］.Journal of Dairy Science，2013，96(2):1102 －1116.

［6］ SALES J，HOMOLKA P，KOUKOLOVA V，et al.Effect of dietary rumen-protected choline on milk production of dairy cows:a meta-analysis［J］.Journal of Dairy Science，2010，93(8):3746 －3754.

［7］ SAVOINI G，AGAZZI A，INVERNIZZI G，et al.Polyunsaturated fatty acids and choline in dairy goats nutrition:production and health benefits［J］.Small Ruminant Research，2010，88(2/3):135 －144.

［8］ 田興舟，韋濟(jì)友，李明忠，等.過瘤胃膽堿對(duì)黔北麻羊羔羊生長(zhǎng)性能及血漿生化指標(biāo)的影響［J］.動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào)，2014，26(9):2857 －2865.

［9］ 陳東東.過瘤胃保護(hù)膽堿的研究和開發(fā)［D］.碩士學(xué)位論文.武漢:武漢工業(yè)學(xué)院，2008:39－40.

［10］ BINDEL D J，DROUILLARD J S，TITGEMEYER E C，et al.Effects of ruminally protected choline and dietary fat on performance and blood metabolites of finishing heifers［J］.Journal of Animal Science，2000，78(10):2497－2503.

［11］ BRYANT T C，RIVERA JD，GALYEAN M L，et al.Effects of dietary level of ruminally protected choline on performance and carcass characteristics of finishing beef steers and on growth and serum metabolites in lambs［J］.Journal of Animal Science，1999，77(11):2893－2903.

［12］ PINOTTI L，PALTANIN C，CAMPAGNOLI A，et al.Rumen protected choline supplementation in beef cattle:effect on growth performance［J］.Italian Journal of Animal Science，2010，8(Suppl.2):322 －324.

［13］ 張紅平.綿羊標(biāo)準(zhǔn)化規(guī)模養(yǎng)殖圖冊(cè)［M］.北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2013:133.

［14］ 張麗英.飼料分析及飼料質(zhì)量檢測(cè)技術(shù)［M］.3版.北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社，2003:49－78.

［15］ 侯鵬霞.灘羊羔羊早期補(bǔ)飼以及不同體重階段羊肉品質(zhì)的研究［D］.碩士學(xué)位論文.銀川:寧夏大學(xué)，2014:20－21.

［16］ 王海峰，劉強(qiáng).氯化膽堿中三甲胺超標(biāo)對(duì)斷奶仔豬采食量的影響［J］.畜牧與獸醫(yī)，2012，44(5):14 －16.

［17］ SHARMA B K，ERDMAN R A.Abomasal infusion of choline and methionine with or without 2-amino-2-methyl-1-propanol for lactating dairy cows［J］.Journal of Dairy Science，1988，71(9):2406 －2411.

［18］ GURETZKY N A J，CARLSON D B，GARRETT J E，et al.Lipid metabolite profiles and milk production for Holstein and Jersey cows fed rumen-protected choline during the periparturient period［J］.Journal of Dairy Science，2006，89(1):188 －200.

［19］ ZAHRA L C，DUFFIELD T F，LESLIE K E，et al.Effects of rumen-protected choline and monensin on milk production and metabolism of periparturient dairy cows［J］.Journal of Dairy Science，2006，89(12):4808－4818.

［20］ MOHSEN M K，GAAFAR H M A，KHALAFALLA M M，et al.Effect of rumen protected choline supplementation on digestibility，rumen activity and milk yield in lactating Friesian cows［J］.Slovak Journal of Animal Science，2011，44(1):13 －20.

［21］ PUCHALA R，BANSKALIEVA V，GOETSCH A L，et al.Effect of dietary protein and ruminally protected betaine or choline on productivity of Angora doelings［C］//Proceedings of the Seventh International Conference on Goats，Tours:Institut de L’elevage，2000，105:15－21.

［22］ 王麗，張英杰，劉月琴，等.飼糧白酒糟添加水平對(duì)山羊生產(chǎn)性能、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率及血清生化指標(biāo)的影響［J］.動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào)，2014，26(2):519 －525.

［23］ STANLEY C C，WILLIAMS C C，JENNY B F，et al.Effects of feeding milk replacer once versus twice daily on glucose metabolism in Holstein and Jersey calves［J］.Journal of Dairy Science，2002，85(9):2335 －2343.

［24］ 王洪榮，馮宗慈，盧德勛，等.應(yīng)用瘤胃液氨氮、揮發(fā)性脂肪酸和血漿尿素氮水平檢測(cè)放牧綿羊營(yíng)養(yǎng)狀況的研究［J］.內(nèi)蒙古畜牧科學(xué)，1997(S1):132－137.

［25］ 鄭家三，夏成，張洪友，等.過瘤胃膽堿對(duì)圍產(chǎn)期奶牛生產(chǎn)性能和能量代謝的影響［J］.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2012，17(3):114 －120.

［26］ 劉翔.過瘤胃膽堿對(duì)圍產(chǎn)期奶牛肝臟脂肪代謝調(diào)控及泌乳性能影響的研究［D］.碩士學(xué)位論文.大慶:黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)，2014:24－28.

［27］ 李永鵬.宰后成熟對(duì)藏羊肉肉用品質(zhì)及揮發(fā)性化合物的影響［D］.碩士學(xué)位論文.蘭州:甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)，2011:12.