李鳳鳴 雒秋江 牛越峰 潘 榕 李維東

(新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室，烏魯木齊 830052)

新生反芻幼畜消化機(jī)能的發(fā)育是其食性變化的基礎(chǔ)，無(wú)論飼喂母乳還是代乳，或配制合適的代乳，或早期斷奶，都需根據(jù)反芻幼畜胃腸消化機(jī)能的發(fā)育程度來(lái)確定。了解羔羊出生后消化機(jī)能的發(fā)育，特別是瘤胃消化代謝的發(fā)育過(guò)程，對(duì)于羔羊的飼養(yǎng)管理、代乳和開食料的開發(fā)都是必要的。羔羊?qū)εＤ谭鄞?milk powder substitute，MS)有很高的消化利用性［1－2］;而羔羊?qū)σ贼~粉為蛋白質(zhì)來(lái)源的魚粉代乳(fish meal substitute，F(xiàn)S)存在著消化障礙［1－3］。本文是以牛奶粉代乳飼喂羔羊作為消化發(fā)育正常的羔羊，以魚粉代乳飼喂羔羊作為消化發(fā)育障礙的羔羊，研究羔羊日齡、飼喂魚粉代乳和開食料對(duì)羔羊瘤胃及其微生物群落發(fā)育的影響，以了解1～35日齡羔羊消化機(jī)能發(fā)育的特點(diǎn)，為羔羊早期斷奶和代乳的配制提供試驗(yàn)基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與試驗(yàn)動(dòng)物

選取初生重(3 380±328)g的小尾寒羊公羔共56只，分別飼喂牛奶粉代乳(28只)和魚粉代乳(28只)。羔羊在1～3日齡(出生當(dāng)天計(jì)為0日齡)均由母乳哺育，并喂牛奶粉代乳或魚粉代乳。從4日齡起全部喂牛奶粉代乳或魚粉代乳直到20日齡，期間羔羊自由采食開食料。在21日齡隨機(jī)選取飼喂2種代乳的羔羊各8只停止飼喂代乳，改為僅喂開食料。試驗(yàn)設(shè)計(jì)及屠宰羔羊的日齡和數(shù)量見表1。

1.2 試驗(yàn)飼糧與飼養(yǎng)管理

牛奶粉代乳和魚粉代乳的制備參照鐘濤等［2］的方法進(jìn)行。液狀牛奶粉代乳的干物質(zhì)含量為14.12%。魚粉代乳的干物質(zhì)含量為14.46%。牛奶粉代乳和魚粉代乳的營(yíng)養(yǎng)水平見表2。

表1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及屠宰羔羊的日齡和數(shù)量Table 1 Experimental designand and the arragement of the days of age and number of slaughter lamb

表2 牛奶粉代乳和魚粉代乳的營(yíng)養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))Table 2 Nutrient levels of MS and FS(DM basis) %

羔羊1～3日齡跟隨母羊哺乳并補(bǔ)喂牛奶粉代乳或者魚粉代乳，1、2、3 日齡分別補(bǔ)喂 1、2、3次。4日齡時(shí)羔羊全部改為飼喂代乳，代乳每天喂4 次，分別在09:00、14:00、19:00、24:00 飼喂。每次飼喂根據(jù)羔羊意愿自由采食，直至羔羊喝飽無(wú)吮吸行為止。在進(jìn)行試驗(yàn)時(shí)，若羔羊發(fā)生腹瀉，則適當(dāng)減少代乳飼喂量。從1日齡起，即提供開食料，保證羔羊自由舔食。開食料組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表3。

表3 開食料組成及營(yíng)養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))Table 3 Composition and nutrient levels of the starter(DM basis) %

1.3 樣品的收集與處理保存

在7、14、21、28和35日齡，分別取各組羔羊4只進(jìn)行屠宰。在早上飼喂后3 h，將羔羊放血致死，立即打開腹腔，分別在食管與瘤胃、網(wǎng)胃與瓣胃處雙道結(jié)扎，將瘤網(wǎng)胃取出，切開，將胃液取出混勻后取5 mL到凍存管，放入液氮中保存，用于瘤胃液真菌數(shù)量的測(cè)定，其余瘤胃液用Cyberscan 510型pH計(jì)測(cè)定并記錄，再用4層紗布過(guò)濾瘤胃液，取50 mL加1～2滴飽和氯化汞，搖勻后分裝于6支10 mL離心管中，加蓋密封保存于－20℃冰箱，用于測(cè)定瘤胃液揮發(fā)性脂肪酸(VFA)和氨態(tài)氮(NH3-N)濃度，并進(jìn)行瘤胃液細(xì)菌和原蟲的分類計(jì)數(shù)。

瘤胃液取出后，迅速在瘤胃背盲囊和腹盲囊處各取2處樣，取樣面積約為1 cm×2 cm，用硬的小紙片鋪平、鋪展，在液氮中速凍30 s，裝入5 mL凍存管后再放入液氮中保存，運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室后于－70℃保存，以備測(cè)定瘤胃乳頭長(zhǎng)度和寬度。

1.4 樣品測(cè)定方法

瘤胃液細(xì)菌和原蟲顯微鏡分類計(jì)數(shù)參照朱文濤等［4］和周封文等［5］的方法。采用實(shí)時(shí)定量 PCR法檢測(cè)定瘤胃液真菌數(shù)量［6］，由生工生物工程(上海)股份有限公司測(cè)定完成。

瘤胃液N-NH3濃度測(cè)定采用氧化鎂蒸餾法。瘤胃液VFA濃度測(cè)定采用氣相色譜(GC)法［7］，取1.0 mL瘤胃液進(jìn)行樣品前處理，使用島津GC2010型氣相色譜儀測(cè)定。以巴豆酸為內(nèi)標(biāo)，采用程序升溫，升溫程序?yàn)閺?5℃，以13℃/min升溫到200℃，保持0.5 min結(jié)束。

用顯微鏡法測(cè)定瘤胃上皮乳頭長(zhǎng)度和寬度［8］。瘤胃組織樣品切片經(jīng)蘇木精－伊紅(HE)染色后，在40倍光鏡(Motic BA200)下觀測(cè)其形態(tài)結(jié)構(gòu)，并利用Motic Images Advanced 3.2軟件測(cè)量瘤胃乳頭長(zhǎng)度、乳頭寬度。每個(gè)樣本觀察4個(gè)非連續(xù)切片，每張切片選取2個(gè)視野，每個(gè)視野分別測(cè)定3組數(shù)據(jù)，其平均值作為1個(gè)測(cè)定結(jié)果。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)運(yùn)用Excel 2007進(jìn)行整理，采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件中的獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)以及單因素方差分析進(jìn)行數(shù)據(jù)處理;試驗(yàn)結(jié)果均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，差異顯著和極顯著標(biāo)準(zhǔn)分別設(shè)定為P ＜0.05和 P＜0.01水平。

2 結(jié)果與分析

2.1 瘤胃液細(xì)菌數(shù)量

如表4所示，飼喂牛奶粉代乳時(shí)羔羊在7日齡瘤胃內(nèi)即有較多細(xì)菌，且主要為瘤胃球菌，占97.4%，而反芻月形單胞菌和大纖維桿菌幾乎沒有;瘤胃液細(xì)菌總數(shù)隨日齡不斷增加，其中大纖維桿菌數(shù)也不斷增加，但始終沒有出現(xiàn)反芻月形單胞菌。飼喂魚粉代乳時(shí)羔羊瘤胃液細(xì)菌數(shù)量變化情況與飼喂牛奶粉代乳時(shí)相似，但在7日齡時(shí)細(xì)菌總數(shù)較少。從21日齡起改喂開食料，28日齡時(shí)細(xì)菌數(shù)量較原先飼喂牛奶粉代乳和魚粉代乳的羔羊分別增加49.7%(P ＜0.01)和21.1%(P ＞0.05)，之后均開始減少，與飼喂代乳羔羊的瘤胃液細(xì)菌總數(shù)無(wú)顯著差異(P＞0.05)。

表4 不同代乳條件下1～35日齡羔羊瘤胃液細(xì)菌數(shù)量的變化Table 4 The changes of bacteria number in rumen fluid of 1 to 35 days’lambs under the condition of different milk replacers 109個(gè)/mL

2.2 瘤胃液原蟲數(shù)量

如表5所示，羔羊在7日齡瘤胃內(nèi)即有原蟲存在，之后隨日齡增加不斷增加。在7日齡飼喂魚粉代乳羔羊的瘤胃液原蟲總數(shù)比飼喂牛奶粉代乳的低27.3%(P＞0.05)。瘤胃內(nèi)原蟲主要為等毛蟲、內(nèi)毛蟲和雙毛蟲，在飼喂牛奶粉代乳的羔羊瘤胃中，分別占原蟲總數(shù)的44.5%、40.9%和14.5%，在飼喂牛魚粉代乳的羔羊瘤胃中，分別約占原蟲總數(shù)的31.3%、58.8%和 10.0%。羔羊在 21日齡改喂開食料，28日齡時(shí)原蟲總數(shù)較原先飼喂牛奶粉代乳和魚粉代乳的羔羊均極顯著減少(P＜0.01)，之后回升。

表5 不同代乳條件下1～35日齡羔羊瘤胃液原蟲數(shù)量的變化Table 5 The changes of protozoa number in rumen fluid of lambs at 1 to 35 days of 1 to 35 days’lambs under the condition of different milk replacers 105個(gè)/mL

2.3 瘤胃液真菌數(shù)量

如表6所示，飼喂牛奶粉代乳羔羊7日齡瘤胃液真菌數(shù)量較少，直到35日齡時(shí)才較多。飼喂魚粉代乳羔羊7日齡時(shí)瘤胃內(nèi)有一定量的真菌，但之后減少，直到35日齡仍無(wú)大量真菌出現(xiàn)。羔羊在21日齡改喂開食料，原來(lái)飼喂牛奶粉代乳的羔羊瘤胃液真菌數(shù)量在35日齡時(shí)顯著增加(P＜0.05)，而原先飼喂魚粉代乳的羔羊瘤胃仍幾乎沒有真菌存在。

表6 不同代乳條件下1～35日齡羔羊瘤胃液真菌數(shù)量的變化Table 6 The changes of fungi number in rumen fluid of 1 to 35 days’lambs under the condition of different milk replacers 103個(gè)/mL

2.4 瘤胃特性參數(shù)

如表7所示，飼喂牛奶粉代乳羔羊7日齡時(shí)瘤胃內(nèi)即有VFA，且主要為乙酸，之后隨日齡增加TVFA濃度不斷升高，在35日齡時(shí)為72.7 mmol/L。飼喂魚粉代乳時(shí)羔羊瘤胃液TVFA濃度也隨日齡增加而總體呈升高趨勢(shì)，但存在波動(dòng)，在14日齡有1個(gè)發(fā)酵高峰。飼喂牛奶粉代乳羔羊轉(zhuǎn)喂開食料28日齡羔羊瘤胃液TVFA濃度升高158.8%(P＜0.01)，而飼喂魚粉代乳羔羊轉(zhuǎn)喂開食料28日齡瘤胃液TVFA濃度變化不顯著(P ＞0.05)。

飼喂牛奶粉代乳羔羊7日齡時(shí)就有較高得瘤胃液氨態(tài)氮濃度，之后隨日齡逐漸升高，飼喂魚粉代乳羔羊瘤胃液氨態(tài)氮濃度在14日齡很高，為67.9 mg/dL，之后逐漸降低。飼喂牛奶粉代乳羔羊轉(zhuǎn)喂開食料瘤胃液氨態(tài)氮濃度變化不顯著(P＞0.05)，但飼喂魚粉代乳羔羊轉(zhuǎn)喂開食料瘤胃液氨態(tài)氮濃度降低 49.1%(28日齡，P＜0.05)和 9.5%(35日齡，P ＞0.05)。

表7 不同代乳條件下1～35日齡羔羊瘤胃特性參數(shù)的變化Table 7 The changes of ruminal characteristic parameters of 1 to 35 days’lambs under the condition of different milk replacers

2.5 瘤網(wǎng)胃重量和結(jié)構(gòu)形態(tài)

如表8所示，飼喂牛奶粉代乳和魚粉代乳羔羊瘤網(wǎng)胃重量均隨日齡不斷增加，且2組之間差異不顯著(P＞0.05)。飼喂牛奶粉代乳和魚粉代乳羔羊轉(zhuǎn)喂開食料，對(duì)瘤網(wǎng)胃重量變化無(wú)顯著影響(P ＞0.05)。

飼喂牛奶粉代乳和魚粉代乳羔羊瘤胃乳頭長(zhǎng)度均隨日齡增加而增加，但飼喂魚粉代乳羔羊增加程度低于飼喂牛奶粉代乳羔羊，7和35日齡時(shí)飼喂魚粉代乳羔羊瘤胃乳頭長(zhǎng)度分別極顯著和顯著低于飼喂牛奶粉代乳羔羊(P＜0.01和P＜0.05)。飼喂牛奶粉代乳羔羊轉(zhuǎn)喂開食料，28和35日齡瘤胃乳頭長(zhǎng)度顯著或極顯著變短(P＜0.05或P＜0.01)，飼喂魚粉代乳羔羊轉(zhuǎn)喂開食料乳頭長(zhǎng)度雖也顯著變短(28日齡，P＜0.05)，但很快恢復(fù)。

飼喂牛奶粉代乳羔羊瘤胃乳頭寬度隨日齡增加而增加，飼喂魚粉代乳羔羊的也隨日齡增加，并且顯著或極顯著寬于飼喂牛奶粉代乳羔的羊瘤胃乳頭寬度(P＜0.05或 P ＜0.01，35日齡除外)。飼喂牛奶粉代乳羔羊轉(zhuǎn)喂開食料28日齡乳頭寬度極顯著增加(P＜0.01)，但飼喂魚粉代乳羔羊轉(zhuǎn)喂開食料乳頭寬度有所變窄(P＞0.05)。

表8 不同代乳條件下1～35日齡羔羊瘤網(wǎng)胃重量和結(jié)構(gòu)形態(tài)的變化Table 8 The changes of the weight and morphological structure of rumen-reticulum of 1 to 35 days’lambs under the condition of different milk replacers

3 討論

3.1 羔羊瘤胃微生物群落的發(fā)育

羔羊出生時(shí)瘤胃體積較小，約 9.10 g［9］，沒有微生物駐足［10］。細(xì)菌是最早出現(xiàn)在瘤胃內(nèi)的微生物，動(dòng)物出生24 h后其瘤胃壁即有兼性厭氧細(xì)菌存在［10］。本試驗(yàn)表明，羔羊在7日齡時(shí)，瘤胃液中即有較多細(xì)菌存在，總數(shù)約為成年羊的36.5%［4］，其中主要為瘤胃球菌。朱文濤等［11］曾報(bào)道45日齡羔羊單位瘤胃液中細(xì)菌總數(shù)即與成年羊的相近，羔羊與成年羊瘤胃細(xì)菌的差別主要是在瘤胃液體積上。研究表明羔羊出生時(shí)瘤胃中沒有原蟲［12］，反芻幼畜主要是通過(guò)與成年動(dòng)物直接接觸獲得原蟲，此后羔羊瘤胃液原蟲總數(shù)將持續(xù)增長(zhǎng)至2 月齡(瘤胃液中 5.7 ×105個(gè)/mL)［13］。本試驗(yàn)結(jié)果表明，7、14、21、28和35日齡瘤胃液原蟲總數(shù)分別為 1.10 ×105、1.29 ×105、1.83 ×105、3.12×105和3.55×105個(gè)/mL，分別約為成年綿羊的11.3% 、13.3% 、18.8% 、3.1% 和 36.5%［4］，表明羔羊瘤胃液原蟲總數(shù)是一逐漸增長(zhǎng)的過(guò)程。Fonty等［13］研究表明2周齡羔羊瘤胃存在較多厭氧真菌，并且數(shù)量隨日齡緩慢增加。瘤胃液真菌在羔羊10日齡就可以檢測(cè)到，但在6～8周齡時(shí)才達(dá)到成年羊水平［14］。在本試驗(yàn)，羔羊瘤胃液真菌數(shù)量較少，直到35日齡時(shí)才較多，約為成年羊的75%［5］，結(jié)論與已有文獻(xiàn)的相似。從本試驗(yàn)和有關(guān)文獻(xiàn)看，可以認(rèn)為羔羊瘤胃液細(xì)菌總數(shù)增加最快，35日齡可以達(dá)到成年羊的97%，其中以瘤胃球菌為主，而反芻月形單胞菌出現(xiàn)較晚;真菌數(shù)量增加慢于細(xì)菌;而瘤胃液原蟲總數(shù)要達(dá)到成年動(dòng)物水平約需2個(gè)月。

3.2 羔羊瘤胃特性參數(shù)發(fā)育

3日齡羔羊瘤胃內(nèi)容物中即有乙酸、丙酸、丁酸存在，分別為 11.0、3.6、0.43 mmol/L［15］，而在本試驗(yàn)7日齡時(shí)，羔羊瘤胃液的乙酸、丙酸、丁酸濃度分別為19.9、4.1 和1.7 mmol/L，約為成年綿羊的40.09%［16］，表明瘤胃發(fā)酵在羔羊出生早期即已出現(xiàn)。新生反芻幼畜瘤胃液VFA濃度隨日齡不斷升高［17］，在本試驗(yàn)飼喂牛奶粉代乳的條件下，羔羊瘤胃液TVFA濃度在7、14、21、28和35日齡分別為25.8、32.0、30.3、42.2 和 72.7 mmol/L，因此在 35日齡以后瘤胃液中TVFA濃度才能達(dá)到成年綿羊的水平［16］。

羔羊瘤胃液氨態(tài)氮的濃度在出生后就會(huì)很高，在35日齡以后與成年羊相比并沒有很大的不同［16］。本試驗(yàn)結(jié)果表明羔羊在7日齡瘤胃液氨態(tài)氮濃度就已較高，為33.2 mg/dL，提示代乳蛋白在瘤胃內(nèi)已有降解，羔羊瘤胃液氨態(tài)氮濃度隨日齡變化的趨勢(shì)并不明顯。

在本試驗(yàn)，羔羊瘤胃液TVFA濃度隨日齡增加不斷升高，而pH也不斷升高，主要與瘤胃液氨態(tài)氮濃度也不斷升高有關(guān)。

3.3 羔羊瘤網(wǎng)胃重量和結(jié)構(gòu)形態(tài)的發(fā)育

在本試驗(yàn)，羔羊瘤網(wǎng)胃重量隨日齡不斷增加，飼喂牛奶粉代乳時(shí)瘤網(wǎng)胃重量(y1)與日齡(x1)呈線性相關(guān):y1=0.409 3x1－ 14.190(R2=0.909，P ＜0.05)。瘤胃乳頭長(zhǎng)度和寬度是影響吸收的重要因素，瘤胃乳頭在羔羊出生后不斷增長(zhǎng)［18］。本試驗(yàn)與已有結(jié)果相似，羔羊瘤胃乳頭的長(zhǎng)度和寬度均隨日齡而不斷增加，飼喂牛奶粉代乳時(shí)分別增長(zhǎng)225和125 μm/d。

瘤胃液VFA濃度可能與瘤胃上皮乳頭發(fā)育有關(guān)。在本試驗(yàn)，瘤胃液TVFA濃度(x2)與瘤胃乳頭長(zhǎng)度(y2)和寬度(y3)呈現(xiàn)顯著相關(guān):y2=7.784 6x2+178.48(R2=0.901 8，P ＜ 0.05);與瘤胃乳頭寬度呈現(xiàn)極顯著相關(guān):y3=2.441 8x2+101.24(R2=0.985，P ＜0.01)，提示 TVFA 濃度決定瘤胃上皮乳頭的發(fā)育。

3.4 魚粉代乳和開食料對(duì)羔羊瘤胃及其微生物群落發(fā)育的影響

關(guān)于飼糧(代乳)對(duì)早期反芻幼畜瘤胃微生物發(fā)育影響的報(bào)道較少。在本試驗(yàn)飼喂魚粉代乳時(shí)羔羊瘤胃液細(xì)菌總數(shù)并無(wú)顯著變化，轉(zhuǎn)喂開食后有增加趨勢(shì)，而原蟲總數(shù)在飼喂魚粉代乳時(shí)有減少趨勢(shì)，特別是在轉(zhuǎn)喂開食料初期，瘤胃液原蟲總數(shù)極顯著減少，表明羔羊飼糧(代乳)類型主要影響瘤胃液原蟲總數(shù)。瘤胃液真菌數(shù)量在本試驗(yàn)中由于測(cè)定變異較大，尚無(wú)確切結(jié)論，但似乎飼喂牛奶粉代乳時(shí)數(shù)量較多。

在本試驗(yàn)，飼喂魚粉代乳對(duì)羔羊瘤胃液TVFA濃度沒有顯著影響，但其隨日齡變化的模式與飼喂牛奶粉代乳的不同，在14日齡有一個(gè)明顯升高再降低的過(guò)程。飼喂魚粉代乳羔羊14日齡時(shí)瘤胃液氨態(tài)氮濃度過(guò)高，提示羔羊已處在氨中毒狀態(tài)［19］。轉(zhuǎn)喂開食料時(shí)原來(lái)喂牛奶粉代乳的羔羊瘤胃液TVFA濃度升高，而原來(lái)飼喂魚粉代乳的卻急劇降低，氨態(tài)氮濃度也降低，之后才恢復(fù)，可能與氮采食量減少有關(guān)。以上說(shuō)明飼喂魚粉代乳羔羊瘤胃液TVFA和氨態(tài)氮的濃度變化隨日齡和飼糧都有其特殊性。

Jud［20］認(rèn)為新生反芻動(dòng)物僅喂乳汁或代乳品，會(huì)延滯瘤胃的發(fā)育，這些動(dòng)物的瘤胃比同齡的正常動(dòng)物小，胃壁較薄，乳頭缺乏正常的發(fā)育和色澤。Krehbiel［21］認(rèn)為飼糧不同會(huì)引起瘤胃乳頭和胃腸黏膜適應(yīng)性改變。在本試驗(yàn)，飼喂魚粉代乳和轉(zhuǎn)喂開食料對(duì)羔羊的瘤網(wǎng)胃重量均無(wú)顯著影響，但是，瘤胃乳頭長(zhǎng)度有減少的趨勢(shì)，而乳頭寬度在飼喂魚粉代乳時(shí)變寬，在飼喂牛奶粉代乳轉(zhuǎn)開食料時(shí)也變寬，提示瘤胃乳頭寬度與長(zhǎng)度對(duì)于瘤胃代謝或吸收可能有不同的意義，較劣質(zhì)的代乳或開食料使瘤胃乳頭變寬。

4 結(jié)論

①飼喂牛奶粉代乳羔羊瘤胃在7日齡即有原蟲和細(xì)菌駐足。瘤胃液原蟲和細(xì)菌總數(shù)隨日齡增加。7日齡羔羊瘤胃液真菌數(shù)量較少，直到35日齡時(shí)才較多。

②羔羊瘤胃在7日齡即有VFA和氨態(tài)氮，并隨日齡增加而增加;羔羊瘤網(wǎng)胃重量、瘤胃乳頭長(zhǎng)度和寬度隨日齡增加而增加。

③飼喂魚粉代乳時(shí)羔羊瘤胃液原蟲和細(xì)菌總數(shù)趨于減少，7日齡時(shí)有一定量的真菌，但之后減少，直到35日齡仍無(wú)較多真菌出現(xiàn)。瘤胃液VFA和氨態(tài)氮濃度變化較為劇烈，瘤網(wǎng)胃重量減少，瘤胃上皮乳頭長(zhǎng)度變短，但寬度增加。

④21日齡斷奶羔羊轉(zhuǎn)喂開食料時(shí)瘤胃液細(xì)菌總數(shù)增加、原蟲總數(shù)減少，而瘤胃液真菌數(shù)量、VFA和氨態(tài)氮濃度變化與原先飼喂的代乳類型有關(guān)。

［1］ ROY JH B，STOBO I JF，SUSAN M，et al.The nutritive value of non-milk proteins for the preruminant calf:the effect of replacement of milk protein by soya-bean flour or fish-protein concentrate［J］.The British Journal of Nutrition，1977，38:167 －187.

［2］ 鐘濤，雒秋江，袁澤湖，等.飼喂魚粉代乳對(duì)9～15日齡小尾寒羊羔羊消化代謝的影響［J］.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2012，35(4):259 －264.

［3］ HUBER J T，SLADE L M.Fish flour as a protein source in calf milk replacers［J］.Journal of Dairy Science，1967，50:1296 －1300.

［4］ 朱文濤，雒秋江，古麗尼沙，等.4種日糧條件下30～150日齡羔羊瘤胃消化代謝功能的變化［J］.畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2005，36(11):1145 －1149.

［5］ 周封文，雒秋江，陳勇，等.飼喂秸稈顆粒日糧對(duì)綿羊瘤胃和整體消化代謝的影響［J］.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2013，(5):345 －351.

［6］ 淡瑞芳.用Real Time PCR和DGGE技術(shù)研究放牧藏系綿羊瘤胃微生物季節(jié)動(dòng)態(tài)［D］.博士學(xué)位論文.蘭州:甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)，2006:41－57.

［7］ 曹慶云，周武藝，朱貴釗，等.氣相色譜測(cè)定羊瘤胃液中揮發(fā)性脂肪酸方法研究［J］.中國(guó)飼料，2006，(24):26－28.

［8］ 寇慧娟，陳玉林，劉敬敏，等.酵母培養(yǎng)物對(duì)羔羊生產(chǎn)性能、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表現(xiàn)消化率及瘤胃發(fā)育的影響［J］.西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版，2011，39(8):45－50.

［9］ 郎俠.歐拉型藏羊消化系統(tǒng)發(fā)育和肌肉H-FABP基因表達(dá)規(guī)律的研究［D］.博士學(xué)位論文.蘭州:甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)，2011:27.

［10］ 馮仰廉.反芻動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)［M］.北京:科學(xué)出版社，2004:349－354.

［11］ 朱文濤，雒秋江，陳勇，等.3種日糧條件下15～60日齡羔羊的采食、消化和瘤胃消化代謝［J］.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2007，30(4):1 －9.

［12］ 斯文森.家畜生理學(xué)［M］.華北農(nóng)業(yè)大學(xué)，譯.北京:科學(xué)出版社，1978:465.

［13］ FONTY G，JOUANY JP，SENAUD J.The evolution of microflora，microfauna and digestion in the rumen of lamb from birth to 4 months［J］.Canadian Journal of Animal Science，1984，64(5)，165 －166.

［14］ HOBSON P N，STEWART C S.The rumen microbial ecosystem［M］.London:Blackie Academic and Professional，1997:216 －217.

［15］ 王彩蓮，郝正里，李發(fā)弟，等.0～56日齡放牧羔羊消化道的解剖特點(diǎn)和瘤胃功能變化［J］.畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2010，41(4):417 －424.

［16］ 沈美英.日糧內(nèi)不同粗飼料品質(zhì)對(duì)綿羊瘤胃發(fā)酵功能和微生物區(qū)系的影響［D］.碩士學(xué)位論文.呼和浩特:內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)，2006:33.

［17］ GODFREY N W.The functional development of the calf Ⅱ:development of rumen function in the calf［J］.The Journal of Agricultural Science，1961，57:177 －183.

［18］ ZITNAN R，BOMBA A，SOMMR A.Development of rumen metabolism and ruminal epithelium in lambs［J］.Arch Tierernahr，1993，44(3):227 －233.

［19］ 劉宗平.動(dòng)物中毒病學(xué)［M］.北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2006:329.

［20］ JUD H.Rumen development in the dairy calf［J］.Advances in Dairy Technology，2005，17:179 －187.

［21］ KREHBIEL C R.Applied nutrition of ruminants:fermentation and digestive physiology［J］.Professional Animal Scientist，2014，30:129 －139.