李勇，李莉，祁春梅，刁軍，武維恒，馮建啟

臨床研究

急性ST段抬高型心肌梗死患者血清結(jié)締組織生長因子表達(dá)的研究

李勇，李莉，祁春梅，刁軍，武維恒，馮建啟

目的：檢測急性ST段抬高型心肌梗死患者血清中結(jié)締組織生長因子（CTGF）表達(dá)的變化及其與肌酸激酶同工酶（CK-MB）酶活性峰值的相關(guān)性。

方法：選擇2013-07至2014-06入院的急性ST段抬高型心肌梗死患者（心肌梗死組）及不穩(wěn)定性心絞痛患者（心絞痛組）各50例。酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）分別檢測ST段抬高型心肌梗死組發(fā)病1、2、7、14天及心絞痛組入院后24 h內(nèi)血清CTGF蛋白濃度，免疫抑制法檢測心肌梗死組患者CK-MB酶活性峰值。

結(jié)果：心絞痛組血清CTGF蛋白濃度為（10.34±2.00）ng/ml；心肌梗死組患者入院后1、2、7、14天血清CTGF蛋白濃度分別為（16.76±3.17）ng/ml、（29.87±4.90）ng/ml、（45.02±8.35）ng/ml、（31.61±4.40）ng/ml；心肌梗死組患者發(fā)病后各時間段血清CTGF蛋白濃度較心絞痛組患者高，且差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）；心肌梗死組患者發(fā)病后血清CTGF蛋白濃度1～7天逐漸升高，后逐漸下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）；7天時血清CTGF蛋白濃度與CK-MB酶活性峰值呈正相關(guān)關(guān)系（r=0.859，P=0.000）。

結(jié)論：本研究中急性ST段抬高型心肌梗死患者CTGF表達(dá)上調(diào)，可能與心肌梗死后心肌纖維化相關(guān)；CTGF濃度與心肌梗死面積存在相關(guān)性，對于預(yù)測心肌梗死面積有一定的臨床意義。

結(jié)締組織生長因子；心肌梗死

Methods: Our research included 2 groups of patients: STEMI group and unstable angina (UA) group. All patients were treated in our hospital from 2013-07 to 2014-06, n=50 in each group. In STEMI group, the serum levels of CTGF were examined by ELISA at 24h, 2, 7, 14 days of onset, and in UA group, CTGF level was examined at 24h of onset. The CK-MB activity levels were measured in STEMI group at the same time points by immunosuppression method.

Results: The serum level of CTGF in UA patients at 24 h of onset was (10.34 ± 2.00) ng/mL, and in STEMI patients were (16.76 ± 3.17) ng/mL at 24h, (29.87 ± 4.90) ng/mL at 2d, (45.02 ± 8.35) ng/mL at 7d and (31.61 ± 4.40) at 14d. The CTGF levels in STEMI group at different time points were all higher than UA group at 24h of onset, P＜0.01. In STEMI group, the CTGF levels were increasing from 24h to 7d, then decreasing at 14d, all P＜0.01. In STEMI group, the highest protein concentration of CTGF was positively related to the maximal activity of CK-MB at 7 days of onset (r=0.859, P=0.000).

Conclusion: CTGF expression has been up-regulated in STEMI patients which might be related to myocardial fibrosis. The protein level of CTGF is related to MI size, it shows certain predictive value in relevant patients.

(Chinese Circulation Journal, 2015,30:540.)

結(jié)締組織生長因子（CTGF）由Bradham等[1]最先于1991年從人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞互補 DNA（cDNA）文庫中克隆得到的。CTGF具有多樣的生物學(xué)活性，目前認(rèn)為其可以促進(jìn)細(xì)胞增殖、細(xì)胞外基質(zhì)沉積及細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化，介導(dǎo)細(xì)胞黏附，刺激細(xì)胞遷移，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，促進(jìn)血管形成等[2-4]。與心血管病相關(guān)的方面，CTGF可以促進(jìn)動脈粥樣斑塊的形成，參與心肌梗死時的炎癥反應(yīng)[5]，介導(dǎo)高血壓病時左心室心肌肥厚[6]，促進(jìn)慢性心力衰竭時心肌纖維化[7]。本研究測定不穩(wěn)定性心絞痛及心肌梗死患者發(fā)病后不同時間段CTGF水平的變化，并研究CTGF水平與肌酸激酶同工酶（CK-MB）酶活性峰值的相關(guān)性，探討了CTGF水平在心肌梗死后心肌纖維化中的意義及與心肌梗死范圍的相關(guān)性。

1 資料與方法

對象：選擇2013-07至2014-06因初次急性ST段抬高型心肌梗死住我院治療且無直接經(jīng)皮冠狀動脈介入治療（PCI）及溶栓指征的患者50例（心肌梗死組）。排除標(biāo)準(zhǔn)：既往嚴(yán)重瓣膜病、心肌病，嚴(yán)重慢性心功能不全以及持續(xù)性心房顫動者。50例患者中大范圍心肌梗死16例（包括急性廣泛前壁心肌梗死13例，下壁合并右心室心肌梗死2例，下壁合并正后壁心肌梗死1例）；中等范圍心肌梗死18例（均為前壁心肌梗死）；小范圍心肌梗死16例（包括前間壁心肌梗死11例，下壁心肌梗死3例，局限前壁心肌梗死2例）?；颊呷朐汉缶粗改辖邮艹Ｒ?guī)強化藥物治療及擇期PCI。50例患者胸痛發(fā)作至梗死相關(guān)動脈（IRA）首次球囊擴(kuò)張時間為（278.3±43.2）h。同時收集因不穩(wěn)定性心絞痛住院患者50例（心絞痛組），排除標(biāo)準(zhǔn)：既往嚴(yán)重瓣膜病、心肌病、嚴(yán)重慢性心功能不全、持續(xù)性心房顫動、結(jié)締組織病、各種慢性炎癥性疾病等?；颊呷朐汉缶粗改辖邮芩幬镏委熁驌衿赑CI。

標(biāo)本采集：心肌梗死組分別在發(fā)病1、2、7、14天抽取肘靜脈血5 ml，檢測CTGF蛋白濃度。心絞痛組于入院時抽取肘靜脈血5 ml，檢測血清CTGF蛋白濃度。心肌梗死組入院后每2 h抽取肘靜脈血5 ml，檢測CK-MB酶活性，獲取CK-MB酶活性峰值。

實驗室測定方法： （1）血清CTGF蛋白濃度測定：將一定量樣本（＜3個月）行預(yù)研究確定最佳稀釋比例。然后統(tǒng)一用酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）檢測血清CTGF蛋白濃度。ELISA試劑盒購于美國PeproTech公司，操作均嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行，質(zhì)量控制和定標(biāo)結(jié)果均在要求范圍內(nèi)。（2）CK-MB酶活性水平測定：采用免疫抑制法，使用羅氏全自動生化分析儀檢測血清CK-MB酶活性水平，參考值0～25 U/L，試劑購自羅氏公司。

2 結(jié)果

心絞痛組及心肌梗死組患者基線資料比較（表1）：兩組患者在年齡、性別、合并癥及血肌酐水平差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。

表1 兩組患者一般臨床資料比較

表1 兩組患者一般臨床資料比較

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血清CTGF蛋白濃度檢測結(jié)果:心絞痛組CTGF蛋白濃度為（10.34±2.00）ng/ml，心肌梗死組CTGF蛋白濃度發(fā)病1天（16. 76±3.17）ng/ml、2天（29.87±4.90）ng/ml、7天（45.02±8.35）ng/ml、14天（31.61±4.40）ng/ml，與心絞痛組比較，心肌梗死組發(fā)病1、2、7、14天CTGF蛋白濃度均明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。與心肌梗死組發(fā)病1天比較，心肌梗死組CTGF蛋白濃度發(fā)病2、7、14天明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01），且發(fā)病7天較發(fā)病2天CTGF蛋白濃度明顯升高，發(fā)病14天較發(fā)病7天CTGF蛋白濃度下降，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。

血清CTGF蛋白濃度與CK-MB酶活性峰值相關(guān)性:CK-MB酶活性峰值為（187.10±57.43）U/L。心肌梗死組不同時間段血清CTGF蛋白濃度與CK-MB酶活性峰值Pearson相關(guān)性檢驗提示：發(fā)病1天（r=-0.071，P=0.625）、2天（r=-0.103，P=0.477）、14天（r=0.227，P=0.113 ）時血清CTGF蛋白濃度與CK-MB酶活性峰值相關(guān)性不佳，發(fā)病7天（r=0.859，P=0.000） 時血清CTGF蛋白濃度與CK-MB酶活性峰值呈正相關(guān)關(guān)系。

3 討論

CTGF是一種C端富含半胱氨酸的分泌多肽，含349個氨基酸，相對分子量為38 000，屬于高度保守的CCN（CTGF、Cef10/cyr61和Nov的縮寫）多肽家族中的成員[8]。廣泛存在于多種組織器官中，如心、腦、腎、肺、肝、胎盤、胰腺和結(jié)締組織等。生理情況下，機(jī)體多種組織及細(xì)胞可有基礎(chǔ)量CTGF分泌；病理情況下，它與皮膚瘢痕、動脈粥樣硬化、器官纖維化、創(chuàng)傷修復(fù)等疾病密切相關(guān)[9]。有研究表明，CTGF與心肌纖維化有密切關(guān)系，而心肌纖維化在心肌梗死后的心肌重構(gòu)中起重要作用[10]。

有文獻(xiàn)報道血清CTGF蛋白濃度和腎功能有關(guān)[11]，本試驗中，兩組患者肌酐差異無統(tǒng)計學(xué)意義。心肌梗死組發(fā)病1天血清中CTGF蛋白濃度與心絞痛組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01），且明顯升高，表明心肌梗死后引發(fā)的炎癥反應(yīng)促使局部心肌組織立即釋放大量包括CTGF在內(nèi)的多種炎癥介質(zhì)及細(xì)胞因子[12，13]。心肌梗死組發(fā)病1 、2、7天血清CTGF蛋白濃度差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01），且逐漸升高，發(fā)病14天較7天CTGF水平下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01），但發(fā)病14天CTGF水平仍較心絞痛組高，且差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01），說明心肌梗死后誘發(fā)CTGF的高表達(dá)從心肌梗死后持續(xù)到心肌梗死后較晚的重構(gòu)階段。CTGF參與組織損傷后的修復(fù)過程，同時CTGF又可以促進(jìn)心臟成纖維細(xì)胞向肌成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化，CTGF 能刺激成纖維細(xì)胞增殖。CTGF能誘導(dǎo)心臟成纖維細(xì)胞分泌表達(dá)膠原和纖黏蛋白，并能增加心肌梗死部位膠原和纖黏蛋白的表達(dá)量[14]。CTGF的此種作用導(dǎo)致心肌纖維化，心肌重構(gòu)，引起心肌梗死后心功能下降。

本研究中，相關(guān)性分析表明，CK-MB酶活性峰值和發(fā)病7天時CTGF呈正相關(guān)（r=0.859，P＜0.000），而與其他時間段相關(guān)性不佳，提示心肌梗死后血清CTGF蛋白濃度峰值和CK-MB酶活性峰相關(guān)，而CK-MB酶活性峰值與心肌梗死范圍呈正相關(guān)[15]，因此，CTGF峰值也可能與心肌梗死范圍相關(guān)，心肌梗死范圍越大，梗死心肌組織中CTGF表達(dá)越多，心肌重構(gòu)更明顯，心功能受影響也就越大。CTGF在組織損傷修復(fù)過程中均可高表達(dá)，因此其影響因素較多，特異性欠缺。另外，本研究中，未長期隨訪患者心功能情況，尚不能明確CTGF是否和心肌梗死后患者心功能呈負(fù)相關(guān)。

本研究表明，CTGF與心肌梗死后心肌重塑可能有關(guān)，但其在心肌梗死的確切作用及機(jī)制、與心肌梗死后其它神經(jīng)內(nèi)分泌激活的關(guān)系有待于進(jìn)一步深入研究。CTGF可能作為心肌梗死的早期診斷指標(biāo)之一及治療靶點，以阻止心肌梗死后心肌重塑，防止發(fā)展成難治性心力衰竭。

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Expression of Connective Tissue Growth Factor in Patients With ST-segment Elevation Myocardial Infarction

LI Yong, LI Li, QI Chun-mei, DIAO Jun, WU Wei-heng, FENG Jian-qi.
Department of Cardiology, The Second Affiliated Hospital of Xuzhou Medical College, Xuzhou (221006), Jiangsu, China

Objective: To detect the changes of serum level of connective tissue growth factor (CTGF) in patients with ST-segment elevation myocardial infarction (STEMI) and to study the correlation between CTGF level and the maximal activity of creatine kinase-MB (CK-MB).

Connective tissue growth factor; Myocardial infarction

2014-08-20）

（編輯：汪碧蓉）

221006 江蘇省徐州市,徐州醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院 心內(nèi)科

李勇 主治醫(yī)師 碩士 研究方向：冠心病的診治 Email： liyongmyzone@126.com

馮建啟 Email：Dr_jqf@163.com

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1000-3614（ 2015 ）06-0540-03

10.3969/ j. issn. 1000-3614. 2015.06.007