徐琦 亢文華 汪葆 李曉霞 翟新驗/中國動物疫病預(yù)防控制中心
豬輪狀病毒感染主要是由豬輪狀病毒引起的一種急性腸道傳染病,主要發(fā)生于仔豬。臨床上表現(xiàn)為厭食、嘔吐、下??;種豬和大豬以隱性感染為特點。該病在我國和世界各養(yǎng)豬國家普遍存在,多發(fā)生于晚秋、冬季和早春,呈地方性流行。
北京市某規(guī)模化豬場仔豬群出現(xiàn)厭食、嘔吐、下痢、脫水等癥狀,病死率100%,經(jīng)流行病學(xué)調(diào)查、臨床癥狀、剖檢變化、實驗室診斷確診為豬A群輪狀病毒感染。
豬場存欄基礎(chǔ)母豬180頭,采用自繁自養(yǎng)生產(chǎn)方式,曾防疫豬瘟、口蹄疫、偽狂犬、藍耳病、流行性腹瀉等疫苗。此次發(fā)病主要感染3日齡仔豬,連續(xù)發(fā)病5窩,病程1~2 d,病死率100%,種豬和商品豬無癥狀。
發(fā)病初期,病豬精神沉郁,食欲不振,不愿走動,有些乳豬吃奶后發(fā)生嘔吐,繼而腹瀉,糞便呈水樣、糊狀或似乳清樣液體,糞便呈黃色。發(fā)病后期,病豬出現(xiàn)脫水、消瘦和體重下降,隨后出現(xiàn)死亡。
1. 特征性病變。主要局限于胃腸道,胃壁遲緩,胃擴張、膨大,胃內(nèi)充滿凝乳塊和乳汁。腸道臌氣,小腸壁變薄,呈半透明狀, 有時見小腸發(fā)生彌漫性出血,腸內(nèi)容物呈漿性或水樣,灰白或灰黑色,小腸的下2/3處即空腸、回腸處最明顯,絨毛變短變平,隱窩細胞增生,若用解剖鏡或放大鏡看得非常清楚,腸系膜淋巴結(jié)水腫,膽囊腫大。其他器官常發(fā)生不同程度的變性。
2. 組織學(xué)變化。組織學(xué)檢查病變主要局限在絨毛部,絨毛頂端柱狀上皮由于病毒感染、增殖,導(dǎo)致上皮細胞脫落或壞死溶解。絨毛變短,隱窩上皮未分化成熟就移向發(fā)病感染的絨毛頂部上皮的位置, 所以在絨毛頂部常被未分化成熟的立方上皮所覆蓋,固有層可見有淋巴細胞、單核細胞和多形核粒細胞浸潤。
將病死仔豬的腸道1∶5加入PBS勻漿后,提取核酸,以A群輪狀病毒結(jié)構(gòu)蛋白VP4為模板,設(shè)計一對引物,上游引物:GACGGTA CCATGGCTTCGCTCATTTATAG ACAA,下游引物:ATTTCTAGA AGCTCTTGTGTGCACTATCTCT CT,進行PCR試驗。反應(yīng)條件為:95℃預(yù)變性5 min后進入PCR循環(huán),95℃變性 1 min,55℃退火 1min,72℃延伸10 min,30個循環(huán),最后72℃延伸10 min。瓊脂糖凝膠電泳、測序后獲得756 bp 的目的基因片段。
同時做流行性腹瀉病毒和傳染性胃腸炎病毒的PCR擴增,均為陰性,正式本次發(fā)病的病原為A群輪狀病毒。
1. 加強豬群飼養(yǎng)管理,使用營養(yǎng)均衡飼料,提高豬群的自然抵抗力。此病的發(fā)生與飼養(yǎng)環(huán)境有密切的關(guān)系,加強衛(wèi)生管理和消毒工作,酚類、堿類、次氯酸鹽、季胺等消毒劑對豬丹毒桿菌都有效,用消毒藥徹底沖刷圈舍,糞便深埋發(fā)酵處理。改善飼養(yǎng)環(huán)境,保持清潔、干燥、適宜的溫度、良好的通風(fēng)、合理的飼養(yǎng)密度,以減少感染的機會。
加強飲水消毒和管理,防止病從口入,特別是使用自然水和淺表水的養(yǎng)殖戶,注意飼料的清潔和衛(wèi)生,確保飼料無丹毒污染,盡量不用濕料喂豬。
2.對本病的治療沒有特效藥。一旦發(fā)病,應(yīng)采取對癥治療措施,同時防止繼發(fā)感染。腹腔注射5%~10%葡萄糖氯化鈉+慶大霉素+5% NaHCO3或葡萄糖甘氨酸溶液(葡萄糖 43.2 g,氯化鈉 9.2 g,甘氨酸 6.6 g,檸檬酸 0.52 g,檸檬酸鉀 0.13 g,無水磷酸鉀 4.35 g,溶于2 L水中)。也可采用口服補液鹽溶液灌服。
每頭仔豬磺胺脒2片,鞣酸蛋白2片,壓碎加蜂蜜調(diào)和抹于豬的舌面吞服,3次/d。
1. 病豬和帶菌豬是本病的主要傳染源,豬場應(yīng)實行全進全出制度,嚴禁從疫區(qū)引進生豬,必須進入時,應(yīng)隔離檢疫一個月。天氣的突變,豬場的環(huán)境衛(wèi)生差,糞便處理不當和保暖降溫設(shè)施差均可造成機體免疫力下降,導(dǎo)致本病的發(fā)生。所以加強飼養(yǎng)管理和改善飼養(yǎng)條件,特別是控制豬場因藍耳病病毒和圓環(huán)病毒感染引起的免疫抑制是防止本病發(fā)生的重要措施。
2. 引起豬腹瀉的原因很多,在自然病例中,往往發(fā)現(xiàn)有輪狀病毒與冠狀病毒或大腸桿菌的混合感染,使診斷復(fù)雜化。因此,必須通過實驗室檢查才能確診。本病實驗室確診的方法有:電鏡法、病毒分離鑒定、ELISA、PCR等,其中PCR方法快速準確、簡便易行,易于在基層實驗室推廣應(yīng)用。
3. 輪狀病毒在環(huán)境中有很強的生存力,對許多化學(xué)消毒劑以及防腐劑不敏感,這也是輪狀病毒流行的原因之一。目前,國內(nèi)市場尚未出現(xiàn)預(yù)防豬輪狀病毒的疫苗,僅僅用常規(guī)的治療方法如抗生素、抗內(nèi)分泌藥物、吸附劑以及液體電解質(zhì)等進行治療,但疫情突襲時,僅治標不治本。因此加快研發(fā)豬輪狀病毒的疫苗勢在必行。