孫晶晶 凌 珊

頭孢呋辛鈉在Beagle犬體內(nèi)的毒代動(dòng)力學(xué)研究

孫晶晶 凌 珊

目的 探討頭孢呋辛鈉在Beagle犬體內(nèi)的毒代動(dòng)力學(xué)，為臨床用藥提供參考。方法 選取Beagle犬7只，隨機(jī)分為陰性對(duì)照組和注射用頭孢呋辛鈉（1.65 g/kg）組，以靜脈滴注方式給藥。血漿樣品采用反相高效液相色譜法測(cè)定頭孢呋辛濃度，用DAS計(jì)算毒代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。結(jié)果 頭孢呋辛鈉在Beagle犬體內(nèi)的毒代動(dòng)力學(xué)主要參數(shù)為：血漿藥時(shí)曲線下面積（AUC0-t）為（4 745±1 607）mg（L·h），峰濃度（Cmax）為（2520±407）mg/L，平均滯留時(shí)間（MRT0-t）為（1.8±0.3）h，清除率（CL）為（0.38±0.16）L（h/kg），分布容積（Vd）為（0.56±0.15）L/kg。結(jié)論 頭孢呋辛在Beagle犬體內(nèi)消除較快，基本分布于血漿，提示應(yīng)無明顯毒性蓄積。

頭孢呋辛；毒代動(dòng)力學(xué)；Beagle犬

頭孢呋辛鈉（cefuroxime）為半合成第 2代頭孢類抗菌素，可抵抗大多數(shù)的β-內(nèi)酰胺酶，并對(duì)多種革蘭陽性和革蘭陰性細(xì)菌有效，在臨床中應(yīng)用廣泛。頭孢呋辛鈉在胃腸道吸收不佳[1]，故臨床常采用肌內(nèi)注射、靜脈注射或靜脈滴注的方式給藥。本研究依照相關(guān)規(guī)范[2]，測(cè)定注射用頭孢呋辛鈉在Beagle犬體內(nèi)的單次給藥血藥濃度，研究注射用頭孢呋辛鈉在毒性劑量下的藥代動(dòng)力學(xué)特征，為進(jìn)一步闡明其毒性結(jié)果提供參考，為臨床試驗(yàn)設(shè)計(jì)提供有力的依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 受試物與試劑 注射用頭孢呋辛鈉（廣州白云山天心制藥股份有限公司，批號(hào)：130493-201105），對(duì)照品：頭孢呋辛、頭孢唑啉（內(nèi)標(biāo)）（廣州白云山天心制藥股份有限公司提供）；乙腈（OCEANPAK Sequence），三水合乙酸鈉（廣州化學(xué)試劑廠，批號(hào)：20100401-2），0.9%氯化鈉注射液（紫光古漢集團(tuán)衡陽制藥有限公司，批號(hào)：1305064-01）。

1.2 儀器與色譜條件 Waters高效液相色譜儀；色譜柱 Diamonsil C18（4.6×200，5 μm）；流動(dòng)相為0.05 mol/L醋酸鈉溶液（磷酸調(diào)pH為2.69）：乙腈（83:17，v/v）；流速1.0 ml/min；柱溫為室溫；檢測(cè)波長273 nm。

1.3 動(dòng)物實(shí)驗(yàn) 選取5～6月齡Beagle犬7只，4只雌性，3只雄性，體質(zhì)量7～10 kg，由廣州醫(yī)藥研究總院有限公司實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究開發(fā)中心提供。按1.65 g/kg靜脈滴注給藥，于給藥前，給藥開始后5 min、15 min、30 min及給藥結(jié)束時(shí)，給藥結(jié)束后5 min、15 min、30 min、1 h、2 h、3 h、4 h、6 h、8 h、12 h、24 h采集靜脈血2.0 ml。血樣用12 μl肝素鈉抗凝，4 000 r/min、離心15 min（離心半徑30 cm），取血漿置于－20 ℃左右保存待檢。

1.4 血樣處理[3]精密移取血漿180 μl，加入10 μl內(nèi)標(biāo)溶液和10 μl超純水渦旋1 min后，加400 μl乙腈沉淀蛋白，超聲5 min，渦旋混合4 min；13 000 r/min離心10 min，移取上清液300 μl在50 ℃氮?dú)饬飨麓蹈?；吹干的離心管加醋酸鈉溶液200 μl復(fù)溶，超聲2 min，渦旋2 min，13 000r/min離心8 min（離心半徑5 cm），移取上清液進(jìn)樣分析。

1.5 參數(shù)計(jì)算及統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用Excel軟件對(duì)待測(cè)樣品進(jìn)行定量處理，采用藥代動(dòng)力學(xué)軟件DAS 2.0對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。

2 結(jié)果

2.1 血漿測(cè)定方法的建立 Beagle犬血漿樣品色譜圖見圖 1。頭孢呋辛和內(nèi)標(biāo)頭孢唑啉在該色譜條件下無雜質(zhì)干擾，得到良好分離。標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍為2.5～150.0 μg/ml，定量下限為2.5 μg/ml。頭孢呋辛第1天低、中、高濃度的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）分別為7.19%、2.21%、3.27%；第2天低、中、高濃度的RSD分別為10.89%、5.72%、7.85%；第3天低、中、高濃度的RSD分別為5.62%、3.34%、2.41%，均小于 15%，批內(nèi)精密度和批間精密度結(jié)果符合要求[4]；頭孢呋辛低、中、高濃度的回收率的RSD分別為4.96%、4.48%、3.26%，均小于15%；頭孢呋辛低、中、高濃度凍融穩(wěn)定性結(jié)果的RSD分別為 13.25%、5.22%、8.29%，均小于 15%，符合要求。

2.2 毒代動(dòng)力學(xué)研究 經(jīng) DAS軟件自動(dòng)進(jìn)行算法、模型、權(quán)重選擇，選擇最佳條件進(jìn)行血藥濃度-時(shí)間曲線的擬合（圖 2），并給出毒代謝動(dòng)力學(xué)參數(shù)（表1）。Beagle犬以1.65 g/kg單次靜脈滴注給予注射用頭孢呋辛鈉后，其血漿藥時(shí)曲線下面積（AUC0-t）為（4 745±1 607）mg/（L·h），峰濃度（Cmax）為（2 520±407）mg/L，平均滯留時(shí)間（MRT0-t）為（1.8±0.3）h，清除率（CL）為（0.38±0.16）L/（h·kg），分布容積（Vd）為（0.56±0.15）L/kg。

3 討論

圖1 高效液相色譜法測(cè)得Beagle犬血漿中頭孢呋辛專屬性研究

圖2 擬合的血藥濃度-時(shí)間曲線

表1 注射用頭孢呋辛鈉單次給藥頭孢呋辛毒代動(dòng)力學(xué)參數(shù)

毒代動(dòng)力學(xué)主要是研究在毒性劑量下，藥物進(jìn)

入體內(nèi)后的吸收、分布及代謝排泄的全過程。在這一過程中，藥物都將通過多種生物膜屏障系統(tǒng)進(jìn)入組織和細(xì)胞，產(chǎn)生各種毒性反應(yīng)，其與藥物動(dòng)力學(xué)的區(qū)別重點(diǎn)在于劑量。本實(shí)驗(yàn)藥物劑量參考正常人的常用劑量，推算毒性劑量，在此劑量下研究該藥物的毒代動(dòng)力學(xué)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，注射用頭孢呋辛鈉給藥后t1/2值為1.093 h，表明其在Beagle犬體內(nèi)消除較快；MRT0-t為1.771 h，表明其在Beagle犬體內(nèi)平均駐留時(shí)間較短。Vd為（0.56±0.15）L/kg，相對(duì)較小，表明該藥物大部分分布于血漿。根據(jù)注射用頭孢呋辛鈉急毒伴隨毒代試驗(yàn)結(jié)果可知，注射用頭孢呋辛鈉單次給藥在Beagle犬體內(nèi)消除較快，藥物大部分分布于血漿，單次給藥無明顯毒性蓄積。由結(jié)果可知，試驗(yàn)所得毒代參數(shù)t1/2值和Vd值與頭孢呋辛藥代動(dòng)力學(xué)文獻(xiàn)參考值基本一致[5]。得出結(jié)論：在此毒性劑量下，頭孢呋辛在Beagle犬體內(nèi)分布消除動(dòng)力學(xué)特征無明顯改變。

[1]鄭映,鮑仕慧,李菁.頭孢呋辛與氧氟沙星治療下尿路感染的成本-效果分析[J].實(shí)用藥物與臨床,2008,11(2):115-117.

[2]中華人民共和國國家藥品食品監(jiān)督管理局.藥物毒代動(dòng)力學(xué)研究技術(shù)指導(dǎo)原則[S].北京,2014.

[3]王萍,胡曉,李文.RP-HPLC用于人血漿中頭孢呋辛濃度的測(cè)定及其藥代動(dòng)力學(xué)的研究[J].江西醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2009,49(7):25-27.

[4]中華人民共和國國家藥品食品監(jiān)督管理局.化學(xué)藥物非臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究技術(shù)指導(dǎo)原則[S].北京,2014.

[5]姜芳,徐海燕,徐萍蔚.頭孢呋辛鈉與頭孢呋辛鈉復(fù)方制劑在Beagle犬體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)考察[J].沈陽藥科大學(xué)學(xué)報(bào),2011,59(1):65-68.

Toxicokinetics of Cefuroxime sodium in Beagle dogs

Sun Jingjing Ling Shan

Objective In order to study the toxicokinetics of cefuroxime sodium in Beagle dogs,and provide scientific basis for clinical use.Methods The concentrations of plasma cefuroxime in Beagle dogs after single intravenous infusion in dose of 1.65 g/kg were determined by HPLC-UV.The toxicokinetic parameters were computed by using DAS program.Results The main toxicokinetic parameters were as follows:AUC0-t=(4745±1607)mg/（L·h）,Cmax= (2520±407)mg/L,MRT0-t=(1.8±0.3)h,CL=(0.38±0.16)L/（h·kg）,Vd=(0.56±0.15)L/kg.Conclusion Cefuroxime is rapidly eliminated and distributed mainly in plasma.The result shows no obviously accumulation toxicity.

Cefuroxime;Toxicokinetics;Beagle dog

R965

A

1673-5846(2015)07-0014-03

廣州醫(yī)藥研究總院有限公司藥物非臨床評(píng)價(jià)研究中心，廣東廣州 510240