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        燈延顆粒對大鼠心肌缺血的保護(hù)作用

        2015-12-08 08:13:56張宏梅崔佰吉張秀榮
        中成藥 2015年12期
        關(guān)鍵詞:異丙后葉素垂體

        張宏梅, 崔佰吉, 張秀榮

        (吉林醫(yī)藥學(xué)院藥學(xué)院,吉林吉林132013)

        燈延顆粒對大鼠心肌缺血的保護(hù)作用

        張宏梅, 崔佰吉, 張秀榮*

        (吉林醫(yī)藥學(xué)院藥學(xué)院,吉林吉林132013)

        目的 觀察燈延顆粒對心肌缺血的保護(hù)作用及對血液流變學(xué)的影響。方法 將大鼠隨機(jī)分為正常對照組,模型對照組,陽性對照組,燈延顆粒高、中、低劑量組 (3.2、1.6、0.8 g/kg),每組10只。分別采用尾靜脈注射垂體后葉素 (Pit)和多點(diǎn)皮下注射鹽酸異丙腎上腺素 (ISO)的方法制備大鼠急性心肌缺血模型,通過給藥后不同時(shí)間第Ⅱ?qū)?lián)心電圖T波變化以及血清乳酸脫氫酶 (LDH)、肌酸激酶 (CK)的量變化,觀察燈延顆粒對心肌缺血的保護(hù)作用;采用皮下注射腎上腺素兩次,每次0.8 mg/kg,間隔6 h,并在其間進(jìn)行冷刺激 (冰水浸泡5 min)造成血瘀模型,通過血液流變學(xué)改變,觀察燈延顆粒對血瘀大鼠血液流變學(xué)的影響。結(jié)果 燈延顆粒提取物粉末3.2、1.6 g/kg灌胃給藥可明顯改善垂體后葉素以及鹽酸異丙腎上腺素所致急性心肌缺血大鼠的心電圖T波峰值變化百分率;減少血清中LDH、CK的量;3.2、1.6、0.8 g/kg燈延顆粒灌胃給藥可明顯降低血瘀大鼠全血比黏度,對血漿比黏度有一定降低趨勢。結(jié)論 燈延顆粒具有抗大鼠心肌缺血、改善血液流變學(xué)的作用。

        燈延顆粒;心肌缺血;血液流變學(xué)

        燈延顆粒是由燈盞花、延胡索、黃芪3味中藥組成的現(xiàn)代復(fù)方制劑,具有散寒止痛、益氣化瘀功效,主要用于寒凝血瘀型冠心病心絞痛,癥見心痛徹背、胸悶憋氣、遇寒加重、心悸氣短、頭暈?zāi)垦?、舌暗苔白、脈弦細(xì)等癥的治療[1]。本實(shí)驗(yàn)采用垂體后葉素和異丙腎上腺素致大鼠急性心肌缺血模型,觀察燈延顆粒對心肌缺血的影響,觀察其對血瘀大鼠血液流變學(xué)改變的影響,為其防治冠心病、心絞痛提供藥理實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

        1 儀器與試藥

        RM6240B型生理實(shí)驗(yàn)系統(tǒng) (成都儀器廠制造);LD5-10型臺式離心機(jī) (北京醫(yī)用離心機(jī)廠);FASCO-2050A型全自動(dòng)血液流變快測儀 (重慶大學(xué)維多生物工程研究所生產(chǎn));GF-D800型半自動(dòng)生化分析儀 (山東高密彩虹分析儀器有限公司)。

        Wistar大鼠,180~230 g,雌雄各半,每次實(shí)驗(yàn)體質(zhì)量差異不超過30 g,購自吉林大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心,生產(chǎn)許可證號為SCXK(吉)2008-0005,合格證號為0006997。

        燈延顆粒提取物為棕黃色粉末,每克含生藥4 g,為本實(shí)驗(yàn)室自制;復(fù)方丹參滴丸 (批號090917,批準(zhǔn)文號為國家準(zhǔn)字Z10950111,天津天士力制藥股份有限公司生產(chǎn)),上述藥物以蒸餾水配成所需劑量的混懸液,灌胃給藥,正常對照組及模型對照組給予同體積蒸餾水 (20 mL/kg)。

        垂體后葉素注射液 (批號090102,批準(zhǔn)文號為國家準(zhǔn)字H34022977,蚌埠市宏業(yè)生化制藥廠)、鹽酸異丙腎上腺素注射液 (批號 091001,批準(zhǔn)文號為國藥準(zhǔn)字H31021344)、鹽酸腎上腺素注射液 (批號090803,批準(zhǔn)文號為國藥準(zhǔn)字H31021062)、均為上海禾豐制藥有限公司生產(chǎn);乳酸脫氫酶試劑盒 (批號090161)、肌酸激酶試劑盒(批號080391)均為中生北控生物科技股份有限公司生產(chǎn)。

        2 方法

        2.1 動(dòng)物分組、給藥方案 篩選心電圖正常的大鼠,隨機(jī)分為6組,分別為正常對照組,模型對照組,復(fù)方丹參滴丸0.755 g/kg組,燈延顆粒3.2、1.6、0.8 g/kg 3組,每組10只。

        2.2 統(tǒng)計(jì)方法 采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,計(jì)量資料以表示,采用單因素方差分析進(jìn)行多組間顯著性檢驗(yàn),兩組間樣本均數(shù)比較采用t檢驗(yàn)。

        3 結(jié)果

        3.1 對垂體后葉素致大鼠心肌缺血心電圖T波變化及大鼠血清中CK、LDH的影響

        3.1.1 對垂體后葉素致大鼠心肌缺血心電圖T波變化影響

        各組動(dòng)物連續(xù)灌胃給藥6 d,末次給藥后1 h大鼠腹腔注射3%水合氯醛 (300 mg/kg)麻醉,四肢仰臥位固定,記錄正常Ⅱ?qū)?lián)心電圖后,立即尾靜脈注射垂體后葉素0.8 U/kg[2-3],正常對照組給予同體積生理鹽水 (2 mL/kg),記錄給予垂體后葉素后0.5、1、5、10、12、15 minⅡ?qū)?lián)心電圖的變化,以正常心電圖為標(biāo)準(zhǔn),觀察給予垂體后葉素后T波高度變化,計(jì)算給予垂體后葉素后不同時(shí)間T波

        變化百分率,結(jié)果見表1。

        結(jié)果表明,模型對照組給予垂體后葉素后T波顯著抬高,后期可出現(xiàn)低平、雙向或倒置,與正常對照組比較有顯著差異,燈延顆粒3.2、1.6 g/kg及復(fù)方丹參滴丸0.755 g/kg均能顯著改善垂體后葉素引起的大鼠心電圖改變,表明對垂體后葉素所致大鼠心肌缺血有明顯保護(hù)作用。

        表1 各組心電圖T波變化的比較(n=10)

        3.1.2 對垂體后葉素致大鼠心肌缺血大鼠血清中CK、LDH的影響 各組大鼠給予垂體后葉素后4 h,腹腔注射3%水合氯醛 (300 mg/kg)麻醉,腹主動(dòng)脈采血,3 000 r/min離心5 min,取血清,以試劑盒測定血清中LDH、CK的量,結(jié)果見表2。

        表2 各組血清LDH和CK的比較

        注:與正常對照組比較,#P<0.05,##P<0.01;與模型對照組比較,*P<0.05

        結(jié)果表明,同正常對照組比較,模型對照組大鼠血清中LDH、CK的量明顯增高。燈延顆粒3.2、1.6 g/kg可明顯降低垂體后葉素所致心肌缺血大鼠血清中LDH、CK的量,表明對心肌缺血引起的心肌細(xì)胞損傷有明顯保護(hù)作用。

        3.2 對異丙腎上腺素致大鼠心肌缺血心電圖T波變化影響

        各組動(dòng)物連續(xù)灌胃給藥6 d,末次給藥后1 h大鼠腹腔注射3%水合氯醛 (300 mg/kg)麻醉,四肢仰臥位固定,記錄正常Ⅱ?qū)?lián)心電圖,立即多點(diǎn) (5~6點(diǎn))皮下注射鹽酸異丙腎上腺素8 mg/kg[4],正常對照組給予同體積生理鹽水 (20 mL/kg),記錄給予鹽酸異丙腎上腺素后5、10、20、30 minⅡ?qū)?lián)心電圖,以正常心電圖為標(biāo)準(zhǔn),觀察給予異丙腎上腺素后T波高度變化,計(jì)算給予鹽酸異丙腎上腺素后不同時(shí)間T波變化百分率,結(jié)果見表3。

        表3 各組心電圖T波變化的比較

        結(jié)果表明,模型對照組給予異丙腎上腺素后T波高度顯著升高,與正常對照組比較有顯著差異,燈延顆粒3.2 g/kg及復(fù)方丹參滴丸0.755 g/kg在給藥20 min均能顯著改善異丙腎上腺素引起的大鼠心電圖改變,燈延顆粒1.6 g/kg給藥后5 min有明顯對抗作用,后期作用不明顯,表明對異丙腎上腺素所致大鼠心肌缺血有明顯保護(hù)作用。

        3.3 對異丙腎上腺素致大鼠血瘀大鼠血液流變學(xué)的影響

        各實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物連續(xù)灌胃給藥6 d,末次給藥前1 d,除正常對照組外,各組大鼠皮下注射鹽酸腎上腺素0.8 mg/kg 2次,間隔6 h,首次注射3 h后,將大鼠置于0~4℃冰水中刺激5 min[5],末次給藥后1 h,大鼠腹腔注射3%水合氯醛 (300 mg/kg)麻醉,腹主動(dòng)脈采血,肝素抗凝,測定全血比黏度 (高切200/s,中切30/s,低切3/s)、血漿比黏度,結(jié)果見表4。

        結(jié)果表明,與正常對照組比較,模型對照組大鼠全血比黏度、血漿比黏度明顯增高,表明腎上腺素復(fù)合冰水刺激復(fù)制血瘀模型成功。燈延顆粒及復(fù)方丹參滴丸組大鼠全血比黏度明顯降低,血漿比黏度有一定降低趨勢,表明燈延顆粒對血瘀大鼠血液流變學(xué)改變有明顯改善作用。

        表4 對血瘀大鼠全血及血漿比黏度的影響

        4 討論

        本研究分別采用垂體后葉素和異丙腎上腺素進(jìn)行大鼠心肌缺血模型的建立,其中垂體后葉素是強(qiáng)烈的血管收縮劑,內(nèi)含加壓素,能明顯使冠狀動(dòng)脈、毛細(xì)血管、小動(dòng)脈、小靜脈收縮,造成心肌缺血缺氧[6-8];異丙腎上腺素為人工合成的β受體強(qiáng)激動(dòng)劑,能誘導(dǎo)心肌產(chǎn)生不可逆的缺血性損傷模型,其機(jī)制與脂質(zhì)過氧化損傷、膜通透性改變、增加心肌耗氧量、心肌鈣超載等因素有關(guān)[9-10],心肌缺血時(shí)常伴有心電圖的異常變化,如T波高聳,J點(diǎn)的偏移等,因此常將T波和J點(diǎn)變化值作為評價(jià)心肌缺血損傷程度的重要指標(biāo)[11-13]。本研究采用T波變化百分率作為保護(hù)作用的考察指標(biāo),結(jié)果顯示,兩種心肌缺血模型下的燈延顆粒中、高劑量組均有一定的心肌缺血保護(hù)作用。其機(jī)制可能為改善血管血壓、增加血流量,減輕細(xì)胞膜損傷程度,穩(wěn)定細(xì)胞膜,同時(shí)減輕機(jī)體細(xì)胞受自由基攻擊的嚴(yán)重程度,提高機(jī)體清除氧自由基的能力,進(jìn)而增強(qiáng)了機(jī)體抗脂質(zhì)過氧化的能力。

        血液流變學(xué)指標(biāo)的異常是引起缺血性卒中的重要因素,是缺血性卒中重要的病理生理改變,血液流變學(xué)檢測對防治心腦血管病具有重要意義[14-16]。在低切變率時(shí),血液形成紅細(xì)胞聚集體,此時(shí)的全血黏度值,可以反映紅細(xì)胞的聚集程度。高切變率下則可反映紅細(xì)胞的變形程度,高切黏度高,紅細(xì)胞變形性差;高切黏度低時(shí),紅細(xì)胞變形性好。本實(shí)驗(yàn)研究表明,血瘀性腦缺血大鼠全血黏度及血漿黏度均顯著增高,血液流變性出現(xiàn)黏、濃、凝、聚狀態(tài)的改變。燈延顆粒及復(fù)方丹參滴丸組大鼠全血比黏度明顯降低,血漿比黏度有一定降低趨勢。

        本實(shí)驗(yàn)顯示,燈延顆??山档痛贵w后葉素、異丙腎上腺素致大鼠心肌缺血心電圖T波的變化;顯著降低垂體后葉素致大鼠心肌缺血血清中CK、LDH的量;可明顯改善異丙腎上腺素致大鼠血瘀模型的全血比黏度,說明燈延顆粒有明顯的抗心肌缺血的保護(hù)作用,本研究為燈延顆粒的進(jìn)一步開發(fā)提供了實(shí)驗(yàn)支持,但其具體的保護(hù)作用機(jī)制還有待于進(jìn)一步研究。

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        R285.5

        B

        1001-1528(2015)12-2743-04

        10.3969/j.issn.1001-1528.2015.12.036

        2014-04-18

        吉林省科技廳發(fā)展計(jì)劃重點(diǎn)項(xiàng)目 (20120947)

        張宏梅 (1982—),女,碩士生,研究方向?yàn)橹兴幮聞┬团c新技術(shù)。Tel:(0432)64560528,E-mail:33134016@qq.com

        *通信作者:張秀榮 (1959—),女,教授,從事中藥新劑型與制劑研究。Tel:(0432)64560316,E-mail:yxzxr@163.com

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