李麗敏， 毛秀紅， 楊新華， 楊盈盈， 季 申

（上海市食品藥品檢驗(yàn)所，上海201203）

電感耦合等離子原子發(fā)射光譜法測(cè)定膽石利通片和膠囊中的鋁

李麗敏， 毛秀紅， 楊新華， 楊盈盈， 季 申

（上海市食品藥品檢驗(yàn)所，上海201203）

目的 建立膽石利通片 （硝石、白礬、郁金、三棱等）和膠囊中鋁元素的專屬測(cè)定方法。方法 膽石利通片和膠囊加硝酸后微波消解，電感耦合等離子原子發(fā)射光譜法測(cè)定其消解液中鋁元素含有量。結(jié)果 鋁元素在0～20μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系均良好 （r為0.999 6），方法重復(fù)性相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.8%～2.2%，空白和樣品的加樣回收率分別為97.6%和99.6%～101.6%。供試品溶液在3 d內(nèi)穩(wěn)定。結(jié)論 本法比干法灰化后再加酸滴定法專屬性強(qiáng)、簡(jiǎn)便、靈敏、準(zhǔn)確度高。

膽石利通片；膽石利通膠囊；鋁；電感耦合等離子原子發(fā)射光譜法

白礬首載于 《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為上品，原名 “礬石”，白色透明，須經(jīng)煎煉燔制，故稱白礬，

又名明礬。其性寒，味酸澀，歸肺、脾、肝、大腸經(jīng)，具有祛痰、燥濕、止血、止瀉功效［1-2］。

白礬主要成分為十二水硫酸鋁鉀 ［KAl（SO4）2·12H2O］， 《中國(guó)藥典》2010年版一部中白礬的成分測(cè)定方法為絡(luò)合滴定法測(cè)定其鋁元素量［3］，故許多含白礬的中成藥多參考此法進(jìn)行質(zhì)量控制。但由于中成藥含有多種藥材，測(cè)定時(shí)常遇到樣品消化過(guò)程耗時(shí)、難于控制、滴定終點(diǎn)由于干擾而難于判斷等問(wèn)題。電感耦合等離子原子發(fā)射光譜（ICP-OES）具有檢出限低、精密度高、分析速度快、受樣品基體影響小及線性范圍寬等特點(diǎn)，已廣泛應(yīng)用于食品及相關(guān)領(lǐng)域中鋁元素分析［4-6］，但在中藥中的應(yīng)用尚無(wú)報(bào)道。

本實(shí)驗(yàn)以含白礬中成藥膽石利通片及膠囊制劑為研究對(duì)象 （由硝石、白礬、郁金、三棱、豬膽膏、金錢草、陳皮、乳香、沒(méi)藥、大黃、甘草等11味藥組成），研究建立ICP-OES法測(cè)定含白帆中成藥中鋁元素含有量，方法簡(jiǎn)便、專屬性和準(zhǔn)確度高，可為含白礬中成藥的質(zhì)量控制提供參考。

2 試驗(yàn)部分

2.1 儀器與試藥

2.1.1 儀器 5300DV電感耦合等離子原子發(fā)射光譜儀 （ICP-OES）（珀金埃爾默股份有限公司）；CEM Mars xp微波消解儀（美國(guó)CEM公司）。

2.1.2 樣品與試劑 硝酸為優(yōu)級(jí)純（美國(guó)Merck公司）；水為超純水。鋁標(biāo)準(zhǔn)溶液 （1 g/L，批號(hào)120605，上海市計(jì)量測(cè)試研究院）。膽石利通片（批號(hào)分別為100908、100909、1009102）；膽石利通膠囊 （批號(hào)分別為 101001、101002、101003），均由山東步長(zhǎng)藥業(yè)有限公司提供；白礬 （上海試四赫維化工有限公司，批號(hào)100103）。

2.2 試驗(yàn)方法

2.2.1 ICP-OES儀器工作條件 RF功率1 300 W，霧化氣體積流量0.8 L/min，輔助氣體積流量0.2 L/min，等離子氣體積流量15 L/min，溶液提升量15 mL/min，積分時(shí)間1～20 s。鋁元素的分析譜線選擇308.215 nm和396.153 nm進(jìn)行觀測(cè)，軸向觀測(cè)方式。

2.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線 精密吸取鋁標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用5% （V/V）硝酸溶液 （用優(yōu)級(jí)純的硝酸和去離子水制備）制成每1 mL含鋁0、1、2、5、10、20 μg的對(duì)照品溶液。依次將系列標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液經(jīng)蠕動(dòng)泵泵入ICP-OES進(jìn)行測(cè)定，分別以308.215 nm和396.153 nm觀測(cè)譜線的計(jì)數(shù)值為縱坐標(biāo)，質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2.2.2 供試品溶液制備 取膽石利通片10片除去包衣，或取膽石利通膠囊10粒內(nèi)容物，粉碎成細(xì)粉，精密稱取0.1 g，置耐高溫壓力微波消解罐中，加入硝酸5 mL，浸泡1 h，將消解罐密封后，置于高溫壓力微波消解儀中，按照表1所示程序進(jìn)行樣品消解。待消解罐冷卻后，將消解液轉(zhuǎn)移至50 mL量瓶中，去離子水洗滌罐蓋及罐壁數(shù)次，洗液合并入量瓶中，去離子水稀釋至刻度，搖勻，離心（4 000 r/min，5 min），取上清液，即得。

表1 微波消解程序Tab.1 Program ofm icrowave digestion

3 結(jié)果與討論

3.1 檢測(cè)方法的選擇 電感耦合等離子原子發(fā)射光譜法，以等離子體作為離子源，樣品經(jīng)微波消解進(jìn)入等離子體后，基體干擾大大減小，檢測(cè)采用鋁原子的特征譜線，專屬性更強(qiáng)。

由于鋁元素電離能較低，其電離時(shí)易受到鉀、鈉、鈣、鎂等堿性金屬或堿土金屬的影響［7］，若供試品溶液中鋁元素含有量較高，采用軸向觀測(cè)時(shí)，受到電離效應(yīng)和基質(zhì)效應(yīng)影響大，容易造成測(cè)定結(jié)果發(fā)生偏離，因此選擇徑向觀測(cè)方式進(jìn)行。如儀器無(wú)徑向觀測(cè)方式，則可通過(guò)將樣品稀釋，以減少基質(zhì)效應(yīng)和電離效應(yīng)。

3.2 樣品前處理方法的選擇 膽石利通片、膠囊在 《中國(guó)藥典》2010年版一部白礬含量測(cè)定項(xiàng)下的方法為干法灰化后，再加酸洗滌溶解的樣品作為前處理方法，再進(jìn)行滴定。由于膽石利通片、膠囊為含白礬中成藥，其含有的其他藥味使得消化時(shí)間長(zhǎng)、影響因素多，原生產(chǎn)企業(yè)也發(fā)現(xiàn)該法有前處理繁雜、滴定終點(diǎn)不宜判斷等缺點(diǎn)。

微波消解法是元素分析的常用方法，具有加熱速度快，無(wú)溫度梯度，消解能力強(qiáng)，溶劑用量少，元素?fù)p失少等優(yōu)點(diǎn)［8］，但取樣量少使其應(yīng)用受到限制。由于ICP-OES的測(cè)定靈明敏較高，因此選擇該方法測(cè)定鋁元素回收率好，結(jié)果準(zhǔn)確，方法精密度好。

3.3 檢測(cè)譜線的確定 采用ICP-AES檢測(cè)鋁時(shí)，其特征譜線選擇396.153 nm和308.215 nm均可，

研究中同時(shí)采集2條譜線進(jìn)行分析，分別觀察對(duì)照品、樣品中這2條譜線的峰形及干擾情況。結(jié)果表明，396.153 nm譜線靈敏度更高，峰形對(duì)稱 （圖1），而308.215 nm譜線亦無(wú)干擾，但該譜線峰形略前延 （圖2），故選取396.153 nm譜線進(jìn)行檢測(cè)。

圖1 396.153 nm下鋁元素光譜圖Fig.1 Alum inum element spectra at 396.153 nm

圖2 308.215 nm下鋁元素光譜圖Fig.2 Alum inum element spectra at 308.215 nm

3.4 方法學(xué)考察

3.4.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線及線性范圍 按照 “2.2.1”項(xiàng)下方法配制標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行分析，結(jié)果鋁元素在0～20μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，396.153 nm和308.215 nm譜線的線性方程和相關(guān)系數(shù)分別為Y= 2 615X-159.9（r=0.999 96）和Y=369.7X-30.1（r=0.999 95）。

3.4.2 專屬性試驗(yàn) 取缺白礬的膽石利通片和膠囊陰性樣品，按照 “2.2.2”項(xiàng)下方法制備，即得陰性樣品溶液。再按照供試品溶液測(cè)定方法，測(cè)定其中鋁的含有量，進(jìn)行方法專屬性試驗(yàn)。

結(jié)果表明，陰性樣品對(duì)鋁測(cè)定有約7%～12%干擾。由于鋁元素為自然界常見元素，在藥材中含有量較高，且在生產(chǎn)中易引入，故該類干擾即使采用原滴定方法也無(wú)法排除。研究中對(duì)投料用沒(méi)藥、乳香、豬膽粉、金錢草、甘草、硝石等6味藥中鋁元素含有量進(jìn)行研究，結(jié)果表明膽石利通制劑處方中沒(méi)藥、乳香、豬膽膏中鋁含有量相對(duì)較高，而且這3味藥未經(jīng)提取，直接粉碎進(jìn)行制備，故其含鋁量對(duì)樣品中白礬的測(cè)定形成干擾；金錢草和甘草雖然含鋁量也較高，但由于這兩味藥材為提取后入藥，其含鋁量可能大大減少，干擾大大降低。經(jīng)多

次試驗(yàn)，空白樣品中鋁的干擾約10%左右。因此，認(rèn)為其干擾對(duì)定量測(cè)定結(jié)果的影響有限。

3.4.3 檢出限與定量限 按供試品溶液制備方法制備21份空白樣品溶液，測(cè)定空白樣品中鋁元素濃度，計(jì)算空白溶液中鋁元素濃度的SD值，以3SD為最低檢測(cè)限，10SD為最低定量限，代入樣品計(jì)算公式 （取樣0.1 g，定容體積50 m L）計(jì)算最低檢出限和定量限，并按照公式換算為含水硫酸鋁鉀的最低檢出限和定量限。結(jié)果，本法最低檢出限以含水硫酸鋁鉀計(jì)，為0.142 0 mg/g；最低定量限以含水硫酸鋁鉀計(jì)，為0.473 4 mg/g。

3.4.4 重復(fù)性試驗(yàn) 取膽石利通片 （批號(hào)100908）和膽石利通膠囊 （批號(hào) 101001），按“2.2”項(xiàng)下方法制備6份供試品溶液，用于方法重復(fù)性考察。膽石利通片和膽石利通膠囊的RSD分別為1.8%和2.2%，重復(fù)性良好。

3.4.5 準(zhǔn)確度試驗(yàn) 以白礬（主要成分為KAl［SO4］2·12H2O）為加樣標(biāo)準(zhǔn)品，將加入的明礬按照分子質(zhì)量折合為鋁元素，進(jìn)行準(zhǔn)確度計(jì)算。采用含有量空白試劑中加入明礬進(jìn)行空白加樣回收試驗(yàn)，采用已知的樣品中加入明礬進(jìn)行樣品加樣計(jì)算。

3.4.5.1 空白加樣回收試驗(yàn) 精密稱取白礬 （主要成分為 KAl［SO4］2·12H2O）粉末 6、8、10 mg，各3份，置耐高溫壓力微波消解罐中，按“2.2”項(xiàng)下方法制備，即得空白加樣回收試驗(yàn)溶液。分別在2個(gè)檢測(cè)波長(zhǎng)處試驗(yàn)，結(jié)果見表2。

表2 空白加樣回收結(jié)果（396.153 nm）Tab.2 Result of blank recovery（396.153 nm）

結(jié)果表明，鋁元素2條特征譜線測(cè)定的空白加樣回收率本均較好，說(shuō)明方法準(zhǔn)確度好。

3.4.5.2 樣品加樣回收試驗(yàn) 取膽石利通片劑粉末約0.1 g，各9份，置耐高溫壓力微波消解罐中，精密稱取明礬（主要成分為KAl［SO4］2·12H2O）粉末6、8、10 mg，各3份，分別置于上述微波消解罐中，按 “2.2”項(xiàng)下方法制備，即得加樣回收試驗(yàn)溶液。結(jié)果見表3、表4。

表3 膽石利通片加樣回收結(jié)果Tab.3 Recovery result of Danshi Litong Tab lets

表4 膽石利通膠囊加樣回收結(jié)果Tab.4 Recovery result of Danshi Litong Capsules

結(jié)果表明，鋁元素2條特征譜線測(cè)定的樣品加樣回收率在95%～105%之間。本法準(zhǔn)確度高，在方法測(cè)定時(shí)可根據(jù)實(shí)際情況選擇1條測(cè)定譜線，本實(shí)驗(yàn)選擇396.153 nm的特征譜線進(jìn)行樣品測(cè)定。

3.4.6 溶液穩(wěn)定性試驗(yàn) 取膽石利通片、膠囊重復(fù)性項(xiàng)下第1份供試品溶液，分別在0、1、2 d進(jìn)樣，考察溶液穩(wěn)定性。結(jié)果表明，同一溶液放置2 d測(cè)得的RSD分別為1.6%和0.3%，說(shuō)明供試品溶液放置2 d后含鋁量基本穩(wěn)定。

3.4.7 中間精密度試驗(yàn) 由不同試驗(yàn)人員或不同時(shí)間按照既定方法進(jìn)行試驗(yàn)，進(jìn)行中間精密度試驗(yàn)，結(jié)果見表5。由此表明，不同時(shí)間和不同人員采用本方法測(cè)定的結(jié)果接近，方法重現(xiàn)性較好。

表5 中間精密度試驗(yàn)Tab.5 Accuracy of interperson percep tion

3.5 樣品測(cè)定結(jié)果 取不同批號(hào)膽石利通片劑和膠囊的樣品，按既定方法進(jìn)行試驗(yàn)，測(cè)定樣品中含鋁量。3批片劑樣品中含鋁量分別為2.24 mg/片、2.11 mg/片和2.08 mg/片；3批膠囊樣品中含鋁量分別為1.98 mg/粒、1.97 mg/粒和1.96 mg/粒。

3.6 明礬中鋁的限量 鋁為自然界普遍存在的元素，食品標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定面制品中含鋁量應(yīng)不得高于100 mg/kg［9］，膽石利通制劑中含鋁量約4 600 mg/kg，遠(yuǎn)高于食品中鋁的限量。但由于明礬為礦物藥，與其他中藥成分組成復(fù)方，對(duì)某些疾病具有特殊治療作用［10-11］，故不能簡(jiǎn)單以鋁元素總量評(píng)價(jià)其安全性，中藥復(fù)方中含鋁量是否安全，還應(yīng)以其生物吸收量或吸收形態(tài)進(jìn)行科學(xué)評(píng)價(jià)［12］。采用專屬性方法測(cè)定明礬中特征元素含有量，并根據(jù)實(shí)際情況設(shè)定嚴(yán)格的限量范圍，可更好地對(duì)其投料進(jìn)行監(jiān)控，有利于控制產(chǎn)品質(zhì)量。

4 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)采用微波消解法，對(duì)樣品進(jìn)行消化后，以電感耦合等離子原子發(fā)射光譜法測(cè)定含明礬中成藥中的含鋁量，以對(duì)明礬投料進(jìn)行治療控制。該方法更加簡(jiǎn)便，比使用滴定法測(cè)定含白礬中成藥中的含鋁量專屬性強(qiáng)、準(zhǔn)確度高，可用于膽石利通制劑中白礬的質(zhì)量控制，并為其他含白礬中成藥的質(zhì)量控制提供技術(shù)參考。藥出版社，1996.198-199.

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Determ ination of alum inum in Danshi Litong Tablets by ICP-OES

LILi-min， MAO Xiu-hong， YANG Xin-hua， YANG Ying-ying， JIShen

（Shanghai Institute of Food and Drug Control，Shanghai 2O1233，China）

AIM To develop amethod for specifying the aluminum content in Danshi Litong Tablets and Capsules（Nitre，Alunite，Curcuma，Scripus，etc.）.METHODS Samples were added with nitric acid before microwave digestion.Aluminum in Danshi Litong Tablets and Capsuleswere detected by ICP-OES.RESULTS The linearity of aluminum in 0-20μg/mLwas0.999 6.The RSDs of reproducibility for the tablets and capsuleswere 1.8 and 2.2%，respectively.The average recoveries in the blank，tablet sample and capsule sample were 97.6%，99.6%and 101.6%，respectively.The sample solution stayed stable in three days.CONCLUSION Thismethod is simple，accurate and highly sensitive，which is superior to acid-adding titration after dry ashing pretreatment.

Danshi Litong Tablets；Danshi Litong Capsules；aluminum；ICP-OES

R927.2

A

1001-1528（2015）12-2664-05

10.3969/j.issn.1001-1528.2015.12.020

2014-12-19

李麗敏 （1975—），女，碩士，副主任藥師，研究方向?yàn)橹兴庂|(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。Tel：13788965965，E-mail：chinalilymin@ yahoo.com