賀春玲，曹 磊，李 夢(mèng)

(河南科技大學(xué)林學(xué)院，河南洛陽(yáng) 471003)

長(zhǎng)木蜂Xylocopa tranquebarorum(Swederus)屬于膜翅目Hymenoptera 蜜蜂科Apidae 木蜂亞科Xylocopina 木蜂屬Xylocopa 的雙月木蜂亞屬Biluna Maa(吳燕如，2000;Michener，2007)。國(guó)內(nèi)主要分布于江蘇、浙江、安徽、江西、湖北、湖南、福建、廣東、海南、廣西、四川、云南、河南、新疆、香港、臺(tái)灣等地區(qū)，國(guó)外分布于印度、瓜哇島(印尼)、老撾等地區(qū)(吳燕如，2000;Ascher and Pickering，2011;賀春玲等，2011;劉宗才等，2011)。在南京地區(qū)長(zhǎng)木蜂1年發(fā)生1 代，主要于竹中筑巢，少數(shù)在蘆葦中筑巢。成蜂訪(fǎng)花季節(jié)時(shí)間長(zhǎng)，訪(fǎng)花植物種類(lèi)多樣(賀春玲等，2009，2011)。長(zhǎng)木蜂以成蟲(chóng)在巢室內(nèi)越冬，翌年的三月下旬成蟲(chóng)開(kāi)始外出活動(dòng)，越冬雌蜂擔(dān)負(fù)筑巢、采集粉蜜和產(chǎn)卵的任務(wù)。卵孵化以后幼蟲(chóng)在巢室內(nèi)取食親代雌蜂釀制的蜂糧(賀春玲等，2009;Maeta et al.，1985，1996)。對(duì)于幼蟲(chóng)形態(tài)和生長(zhǎng)發(fā)育的描述在賀春玲等(2011)和吳燕如(2000)文獻(xiàn)中有記述，但有關(guān)幼蟲(chóng)的齡期劃分不清楚。幼蟲(chóng)齡期的確定是進(jìn)一步研究發(fā)生規(guī)律和生物學(xué)習(xí)性以及保護(hù)木蜂資源的基礎(chǔ)。本文通過(guò)統(tǒng)計(jì)測(cè)量的方法，對(duì)南京地區(qū)長(zhǎng)木蜂幼蟲(chóng)的齡期進(jìn)行了系統(tǒng)的研究。

1 材料與方法

1.1 幼蟲(chóng)標(biāo)本采集

將帶有長(zhǎng)木蜂巢口的枯竹預(yù)先放置在洛陽(yáng)牡丹基因庫(kù)、牡丹研究院和洛陽(yáng)牡丹苗圃園。在長(zhǎng)木蜂釀貯蜂糧盛期，于2013年5月4日至20日每周2 次到各研究地點(diǎn)采集帶有長(zhǎng)木蜂的巢口，剖開(kāi)巢室，將幼蟲(chóng)連同蜂糧一起放入培養(yǎng)皿中，帶回實(shí)驗(yàn)室備用(樣本數(shù)206 頭)。1 齡幼蟲(chóng)是將采集到的卵在室內(nèi)飼養(yǎng)獲得的。

1.2 幼蟲(chóng)分齡指標(biāo)的選擇

長(zhǎng)木蜂幼蟲(chóng)靠取食親代雌蜂釀貯的蜂糧生活，在巢室內(nèi)，親代雌蜂提供的蜂糧塊是一定的，并且幼蟲(chóng)活動(dòng)量很小。假設(shè)幼蟲(chóng)的齡期與其體長(zhǎng)和體重具有相關(guān)性。在幼蟲(chóng)分齡指標(biāo)上，除按照傳統(tǒng)的測(cè)定幼蟲(chóng)頭殼寬度指標(biāo)外，還選擇了幼蟲(chóng)不同時(shí)期的體長(zhǎng)和體重2個(gè)指標(biāo)。

1.3 分齡指標(biāo)測(cè)量方法

將待測(cè)長(zhǎng)木蜂幼蟲(chóng)(活的)平置在白紙上，放到ZOOM645 連續(xù)體式顯微鏡載物臺(tái)上調(diào)整目鏡放大倍數(shù)，調(diào)整光圈，調(diào)整準(zhǔn)角螺旋，待觀(guān)測(cè)圖像清晰后，等待幼蟲(chóng)蠕動(dòng)到身體自然舒展，用NV-130c 軟件的照相功能抓拍圖片，保存并用軟件的測(cè)量功能測(cè)出一個(gè)值，按倍數(shù)換算出體長(zhǎng)實(shí)際值，建立體長(zhǎng)分布圖，從而歸納長(zhǎng)木蜂的齡期。采用梅特勒萬(wàn)分之一電子天平(AB104-S)測(cè)量不同齡期幼蟲(chóng)的體重。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

采用Excel 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 幼蟲(chóng)頭殼寬度

幼蟲(chóng)頭殼寬度的測(cè)定結(jié)果，最小值為1.19 mm，最大值為2.33 mm。將幼蟲(chóng)頭殼寬度測(cè)定值分別按組距0.03 mm 間隔，整理成由小到大排列的次數(shù)分布(圖1)。由圖1 數(shù)據(jù)顯示，長(zhǎng)木蜂幼蟲(chóng)頭殼寬度在1.73-1.79 mm、1.97-2.03 mm、2.06-2.12 mm、2.18-2.24 mm 出現(xiàn)的頻數(shù)較多。由圖1 數(shù)據(jù)可以看出，幼蟲(chóng)有4個(gè)分布集中區(qū)，據(jù)此推斷，長(zhǎng)木蜂幼蟲(chóng)有4 齡。

由原始數(shù)據(jù)和幼蟲(chóng)頭殼寬的次數(shù)分布數(shù)據(jù)分別算出各齡幼蟲(chóng)頭殼寬的平均值及其變異范圍(表1)，根據(jù)表1 的數(shù)據(jù)，統(tǒng)計(jì)分析得出回歸直線(xiàn)y=0.2836x+1.1715(y:蟲(chóng)齡，x:頭殼寬度)，相關(guān)系數(shù)R2=0.9724，大于R0.01(0.874)，為非常顯著直線(xiàn)相關(guān)，證明推斷結(jié)果是可靠的(圖2)。

圖1 長(zhǎng)木蜂幼蟲(chóng)頭殼寬度測(cè)量數(shù)據(jù)次數(shù)分布Fig.1 Frenquency histograms of width of head capsules of larvae of Xylocopa tranquebarorum

表1 長(zhǎng)木蜂各齡幼蟲(chóng)的頭殼寬度Table1 The width of head capsules of larvae of Xylocop a tranquebarorum

圖2 長(zhǎng)木蜂幼蟲(chóng)頭殼寬度和蟲(chóng)齡的關(guān)系Fig.2 The relationship ofwidth of head capsules and larvae instar of Xylocopa tranquebarorum

2.2 幼蟲(chóng)體長(zhǎng)

長(zhǎng)木蜂幼蟲(chóng)體長(zhǎng)的測(cè)定結(jié)果，最小值為6.28 mm，最大值為29.65 mm。將幼蟲(chóng)長(zhǎng)度測(cè)定值分別按組距0.6 mm 間隔整理成由小到大排列的次數(shù)分布(圖3)。從圖3 中可以直觀(guān)的看出幼蟲(chóng)體長(zhǎng)出現(xiàn)頻次較高的區(qū)域是8.4-9.0 mm，12.0-14.4 mm，15.0-19.2 mm 和23.0-27.4 mm。幼蟲(chóng)有4個(gè)分布集中區(qū)，據(jù)此推斷，長(zhǎng)木蜂幼蟲(chóng)有4 齡。

圖3 長(zhǎng)木蜂幼蟲(chóng)體長(zhǎng)測(cè)量數(shù)據(jù)的次數(shù)分布圖Fig.3 Frenquency histograms of body length of larvae of Xylocopa tranquebarorum

由原始數(shù)據(jù)和表2 數(shù)據(jù)分別算出各齡幼蟲(chóng)體長(zhǎng)的平均值及其變異范圍(表2)。根據(jù)表2 的數(shù)據(jù)，經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析得回歸直線(xiàn)y=5.608x+1.91(y-蟲(chóng)齡，x-體長(zhǎng))，相關(guān)系數(shù)R2=0.9867，大于R0.01(0.874)，為非常顯著直線(xiàn)相關(guān)，證明推斷結(jié)果是可靠的(圖4)。

表2 長(zhǎng)木蜂各齡幼蟲(chóng)體長(zhǎng)Table 2 Body length of larvae of Xylocopa tranquebarorum

圖4 長(zhǎng)木蜂幼蟲(chóng)體長(zhǎng)和蟲(chóng)齡的關(guān)系Fig.4 The relationship of body length and larvae instar of Xylocopa tranquebarorum

2.3 幼蟲(chóng)的體重

長(zhǎng)木蜂幼蟲(chóng)體重的測(cè)定結(jié)果，最小值為0.011 g，最大值為0.672 g。將幼蟲(chóng)體重的測(cè)定值分別按組距0.018 g 間隔整理成由小到大排列的次數(shù)分布(圖5)。由圖5 數(shù)據(jù)可以看出，體重為0.028-0.064 g、0.082-0.154 g、，0.262-0.316 g和0.406-0.496 g 時(shí)幼蟲(chóng)出現(xiàn)次數(shù)較高，可以看出體重有4個(gè)分布集中區(qū)，據(jù)此推斷，長(zhǎng)木蜂幼蟲(chóng)有4 齡。

由原始數(shù)據(jù)和表3 數(shù)據(jù)分別算出各齡幼蟲(chóng)體重的平均值及其變異范圍(表3)。根據(jù)表3 的數(shù)據(jù)，經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析得回歸直線(xiàn)y=0.1419x-0.123(y-蟲(chóng)齡，x-體重)，相關(guān)系數(shù)R2=0.978，大于R0.01(0.874)，為非常顯著直線(xiàn)相關(guān)，證明推斷結(jié)果是可靠的(圖6)。

圖5 長(zhǎng)木蜂幼蟲(chóng)體重次數(shù)分布圖Fig.5 Frenquency histograms of body weigth of larvae of Xylocopa tranquebarorum

表3 長(zhǎng)木蜂各齡期幼蟲(chóng)的體重Table 3 Body weigth of larvae of Xylocopa tranquebarorum

圖6 長(zhǎng)木蜂幼蟲(chóng)體重和蟲(chóng)齡的關(guān)系Fig.6 The relationship of body weigth and larvae instar of Xylocopa tranquebarorum

3 結(jié)論與討論

Dyar 早在1890年通過(guò)對(duì)28種鱗翅目幼蟲(chóng)頭殼寬度的測(cè)量，揭示昆蟲(chóng)幼蟲(chóng)期的生長(zhǎng)速率具有一定的周期性特點(diǎn)，各齡間頭寬是按一定的幾何級(jí)數(shù)增長(zhǎng)，幫助我們從不連續(xù)或不完整的蛻皮材料中推斷出某種昆蟲(chóng)的實(shí)際蛻皮次數(shù)，但Dyar 定律不能適應(yīng)所有種類(lèi)(彩萬(wàn)志等，2011)。近年來(lái)，為更加準(zhǔn)確地推測(cè)不同種類(lèi)的幼蟲(chóng)齡期，不同物種又對(duì)其他指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定。如:川硬皮腫腿蜂Sclerderma sichuanensis 幼蟲(chóng)齡期的測(cè)定指標(biāo)有頭殼長(zhǎng)度(胡霞等，2005);鞘翅目的柑桔爆皮蟲(chóng)Agrilus auriventris 各齡幼蟲(chóng)測(cè)定，采用了幼蟲(chóng)頭部口上片最大寬度、尾部鉗狀突最大寬度、鉗狀突最大長(zhǎng)度、鉗狀突左側(cè)側(cè)緣最大長(zhǎng)度等4個(gè)形態(tài)特征，推測(cè)柑桔爆皮蟲(chóng)幼蟲(chóng)分為5 齡(魏書(shū)軍等，2006);沙棘木蠹蛾Holcoeerus hippophaecolus 幼蟲(chóng)的頭殼寬、體長(zhǎng)、體寬、上顎長(zhǎng)和寬等指標(biāo)，確定其幼蟲(chóng)共有16 齡(宗世祥等，2006);張海濱等(2011)通過(guò)星天牛幼蟲(chóng)上唇基寬度、額寬(頭殼上觸角窩間的最短距離)、“凸”形寬(位于前胸背板上小微刺組成的形似中文字“凸”的結(jié)構(gòu))、上顎長(zhǎng)、上顎寬、觸角窩直徑、前胸氣門(mén)長(zhǎng)、前胸氣門(mén)寬、下唇須末節(jié)長(zhǎng)的9個(gè)形態(tài)結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析，推測(cè)星天牛幼蟲(chóng)分5 齡，其額寬是最佳的分齡結(jié)構(gòu)，其次是上顎長(zhǎng)和上顎寬。本文通過(guò)長(zhǎng)木蜂的頭殼寬、體長(zhǎng)和體重3個(gè)指標(biāo)初步推測(cè)其幼蟲(chóng)為4 齡。長(zhǎng)木蜂屬野生蜂類(lèi)，其幼蟲(chóng)主要取食雌蜂釀貯的蜂糧逐漸發(fā)育成熟，雌蜂采集花粉釀貯蜂糧的量一定，幼蟲(chóng)在巢室中取食蜂糧其受外界影響較小，研究的結(jié)果初步表明其具有一定的可靠性。但在采集幼蟲(chóng)的過(guò)程中，為了在一個(gè)巢室中能采集到更多的幼蟲(chóng)，在長(zhǎng)木蜂釀貯蜂糧的盛期進(jìn)行，卵和初齡幼蟲(chóng)相對(duì)較少，另外卵孵化為幼蟲(chóng)能看到留下的卵殼，幼蟲(chóng)在整個(gè)蛻皮過(guò)程中看不到蛻，因此很難進(jìn)一步驗(yàn)證齡期。截止目前，木蜂幼蟲(chóng)齡期的研究未見(jiàn)報(bào)道，Prager(2008)在研究Xylocopa virginica 木蜂巢內(nèi)發(fā)育個(gè)過(guò)程是，將幼蟲(chóng)的發(fā)育階段分為極小(very small)，小(small)，中(medium)，大(large)和成熟幼蟲(chóng)(fully-grown larvae)5個(gè)指標(biāo)。我們觀(guān)察和解剖不同發(fā)育過(guò)程中的長(zhǎng)木蜂木蜂幼蟲(chóng)，明確長(zhǎng)木蜂具有預(yù)蛹期，其形態(tài)與幼蟲(chóng)相似，但體內(nèi)已經(jīng)發(fā)生變化，在Prager(2008)的研究中所指的成熟幼蟲(chóng)是不是預(yù)蛹，還有待證實(shí)。總之，研究木蜂的幼蟲(chóng)齡期對(duì)進(jìn)一步研究木蜂的巢室行為提供方便，并且對(duì)明確木蜂的生物學(xué)和保護(hù)木蜂資源均具有重要意義。

References)

Ascher JS，Pickering J.Discover Life's bee species guide and world checklist，2011.http://www.discoverlife.org/mp/20q?guide=Apoidea_species＆flags=HAS.

Cai WZ，Pang XF，Hua BZ，et al.General Entomology［M］.Beijing:China Agricultural University Press，2011，230.［彩萬(wàn)志，龐雄飛，花保禎，等.普通昆蟲(chóng)學(xué)［M］.北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社，2011，230］

He CL，Ji BZ，Liu SW.Nesting，foraging and food storing behavior of Xylocopa tranquebarorum(Swederus)(Hymenoptera:Apidae)［J］.Acta Entomologica Sinica，2009，52(9):984-993.［賀春玲，嵇保中，劉曙雯.長(zhǎng)木蜂筑巢和采粉貯糧行為［J］.昆蟲(chóng)學(xué)報(bào)，2009，52(9):984-993］

He CL，Ji BZ，Liu SW.Morphology and biology observation of Xylocopa tranquebarorum［J］.Chinese Journal of Applied Entomology，2011，48(6):1751-1758.［賀春玲，嵇保中，劉曙雯.長(zhǎng)木蜂的形態(tài)和生物學(xué)觀(guān)察［J］.應(yīng)用昆蟲(chóng)學(xué)報(bào)，2011，48(6):1751-1758］

Hu X，Zhou ZJ，Jiang XJ，et al.Classification on larvae instars of Sclerderma sichuanensis［J］.Sichuan Journal of Zoology，2005，24(4):537-539.［胡霞，周祖基，蔣學(xué)建，等.川硬皮腫腿蜂幼蟲(chóng)齡期的劃分［J］.四川動(dòng)物，2005，24(4):537-539］

Liu ZC，Jiao ZJ，Dong XS，et al.Floral syndrome and breeding system of Iris tectorum［J］.Acta Horticulturae Sinica，2011，38(7):1333-1340.［劉宗才，焦鑄錦，董旭升，等.鳶尾的花部結(jié)構(gòu)及繁育系統(tǒng)特征［J］.園藝學(xué)報(bào)，2011，38(7):1333-1340］

MaetaY，Sakagam SF，Shiokawa M.Observation of a nest aggregation of the Taiwanese bamboo carpenter bee，Xylocopa(Biluna)tranquebarorm(Hymenoptera，Anthophoridae)［J］.J.Kansas Entomol.，1985，58:36-41.

Matea Y，Miyanaga R，Sugiura N.Addition notes on the habits of the Taiwanese bamboo carpenter bee［J］.Jap.J.Entomol.，1996，64(3):669-680.

Michener CD.The Bees of the World(2ndedition)［M］.Baltimore:The John Hopkins University Press，2007:587-611.

Stephen WP，Bohart GE，Torchio PF，The Biology and External Morphology of Bees［M］.Oregon:Agricultural Experiment Station and Department of Printing，1969.

Wei SJ，Zheng HH，HuangFu WG，et al.Division of larval instars of the citrus borer，Agrilus auriventris Saunders(Coleoptera:Buprestidae)［J］.Acta Entomologica Sinica，2006，49(2):302-309.［魏書(shū)軍，鄭宏海，皇甫偉國(guó)，等.柑桔爆皮蟲(chóng)幼蟲(chóng)齡期的劃分［J］.昆蟲(chóng)學(xué)報(bào)，2006，49(2):302-309］

Wu YR.Fauna Sinica.Insecta，Vol.20，Hymenoptera:Melittiae Apidae［M］.Beijing:Science Press，2000，106-141.［吳燕如.中國(guó)動(dòng)物志(昆蟲(chóng)綱，第二十卷，膜翅目，準(zhǔn)蜂科，蜜蜂科)［M］.北京:科學(xué)出版社，2000，106-141］

Zhang HB，Wang JW，Zhu XF，et al.Determination of larval instars of citrus long-horned beetle，Anoplophora chinensis(Coleoptera:Cerambycidae)［J］.Chinese Journal of Applied Entomology，2011，48(3):688-694.［張海濱，王建偉，朱小峰，等.星天牛幼蟲(chóng)齡期的劃分［J］.應(yīng)用昆蟲(chóng)學(xué)報(bào)，2011，48(3):688-694］

Zong SX，Luo YQ，Xu ZC，et al.Preliminary study on different larval instars of seabuckthorn carpenter moth，Holcocerus hippophaecolus［J］.Chinese Bulletin of Entomology，2006，43(5):626-631.［宗世祥，駱有慶，許志春，等.沙棘木蠹蛾幼蟲(chóng)齡期的初步研究［J］.昆蟲(chóng)知識(shí)，2006，43(5):626-631］