劉鳴韜+田雪亮

摘要：采用菌絲生長(zhǎng)速率法測(cè)定了40%嘧霉胺懸浮劑對(duì)河南地區(qū)黃瓜灰霉病菌的室內(nèi)毒力，并評(píng)價(jià)其對(duì)黃瓜灰霉病的田間防效。結(jié)果表明， 40%嘧霉胺懸浮劑對(duì)黃瓜灰霉病菌的EC50為0.58 μg/mL；當(dāng)田間噴藥量分別為4.17、6.25 g/hm2時(shí)，對(duì)黃瓜灰霉病的防治效果均可達(dá)到78%以上。

關(guān)鍵詞：嘧霉胺；黃瓜灰霉病；毒力；防效

中圖分類號(hào)：S432.4+4 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2015）20-5022-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.20.024

Toxicity and Efficiency of Pyrimethanil against Grey

Mould of Cucumber in Henan Province

LIU Ming-tao， TIAN Xue-liang

（Henan Institute of Science and Technology， Xinxiang 453003，Henan， China）

Abstract： The toxicity of pyrimethanil 40% SC against Botrytis cinerea were measured according to inhibition of mycelia growth velocity. Meanwhile， the efficacy of the fungicide against grey mould of cucumber was tested in the field. The result showed that the EC50 of pyrimethanil was 0.58 μg/mL. The control efficacy of pyrimethanil was all above 78% at concentration of 4.17、6.25 g/hm2.

Key words： pyrimethanil； grey mould of cucumber； toxicity； efficiency

蔬菜灰霉病由灰葡萄孢（Botrytis cinerea）引起，主要為害黃瓜、番茄、辣椒、豇豆和茄子等蔬菜作物。隨著中國(guó)設(shè)施蔬菜的迅猛發(fā)展，在20世紀(jì)70年代后期灰霉病危害日趨嚴(yán)重，目前已經(jīng)成為中國(guó)設(shè)施蔬菜生產(chǎn)上的主要病害。黃瓜是中國(guó)設(shè)施蔬菜的主要作物之一，而黃瓜灰霉病在設(shè)施黃瓜生產(chǎn)上普遍發(fā)生，可造成黃瓜減產(chǎn)20%～30%，甚至高達(dá)50%左右。

嘧啶胺類化合物是一類具有良好生物活性的雜環(huán)化合物，因其在生物體內(nèi)有很重要的生理作用而被廣泛應(yīng)用于合成醫(yī)藥及農(nóng)藥[1]。嘧霉胺[N-（4，6-二甲基嘧啶-2-基）苯胺]是嘧啶胺類化合物的代表性品種，可抑制植物病原真菌蛋白酶的分泌，降低某些水解酶的含量，從而降低植物病原真菌對(duì)植物的侵染率[2]。嘧霉胺與現(xiàn)有的殺菌劑無(wú)交互抗性，對(duì)敏感性、抗性植物病原真菌有特效，主要用于防治蘋(píng)果黑星病、斑點(diǎn)落葉病、桃灰星病等病害[3]。為了明確嘧霉胺對(duì)河南地區(qū)黃瓜灰霉病的藥效和對(duì)黃瓜的安全性，本研究采用40%嘧霉胺懸浮劑對(duì)黃瓜灰霉病進(jìn)行了室內(nèi)毒力測(cè)定和田間防效試驗(yàn)，以期為防治黃瓜灰霉病奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)藥劑和菌種

供試藥劑為40%嘧霉胺懸浮劑（河南省銀田精細(xì)化工有限公司），對(duì)照藥劑為50%多菌靈WP（江蘇寶靈化工有限公司）?；颐咕杉诤幽闲锣l(xiāng)周邊大棚黃瓜，分離純化后保存于河南科技學(xué)院植物病理實(shí)驗(yàn)室。

1.2 室內(nèi)毒力測(cè)定

采用菌絲生長(zhǎng)速率法測(cè)定嘧霉胺對(duì)灰霉菌的毒力[4]。在無(wú)菌條件下，用直徑為0.5 cm的打孔器在培養(yǎng)2 d的黃瓜灰霉病菌落邊緣打取菌餅，將菌餅接種到含有嘧霉胺有效成分為0.1、0.5、1.0、5.0、10.0、50.0、100.0 μg/mL的PDA培養(yǎng)基上，無(wú)菌水作對(duì)照（CK1），多菌靈作為藥劑對(duì)照（CK2），每個(gè)處理重復(fù)4次。25 ℃培養(yǎng)，待對(duì)照中菌落長(zhǎng)滿平皿時(shí)，采用十字交叉法測(cè)量對(duì)照和處理的菌落直徑，求得菌落直徑平均值。按下列公式計(jì)算菌絲生長(zhǎng)抑制率。

菌絲生長(zhǎng)抑制率=[（對(duì)照菌落直徑-處理菌落直徑）/（對(duì)照菌落直徑-接種菌餅直徑）]×100%

采用SPSS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，計(jì)算嘧霉胺和多菌靈對(duì)灰霉菌絲生長(zhǎng)抑制的毒力回歸方程和EC50。

1.3 田間防效試驗(yàn)

試驗(yàn)在河南科技學(xué)院試驗(yàn)田進(jìn)行，地塊土壤肥沃，排灌條件較好，土質(zhì)為兩合土。黃瓜品種為新世紀(jì)，播前催芽，8月10日直播。常規(guī)管理。

供試藥劑40%嘧霉胺懸浮劑設(shè)2.50、4.17、6.25 g/hm2 3個(gè)施藥量，對(duì)照藥劑多菌靈10.0 g/hm2進(jìn)行常量噴霧。試驗(yàn)設(shè)5個(gè)處理，每個(gè)處理4次重復(fù)，共20個(gè)小區(qū)，每個(gè)小區(qū)面積為15 m2，隨機(jī)排列。于發(fā)病初期第1次用藥。噴藥時(shí)只有零星病葉，藥前摘除。以后每隔7 d用藥1次，連續(xù)施藥3次。藥后連續(xù)觀察藥劑對(duì)黃瓜生長(zhǎng)的影響，第3次用藥后10 d進(jìn)行病情調(diào)查，每小區(qū)采取5點(diǎn)取樣，每點(diǎn)隨機(jī)取3株，每株在上、中、下部各取3片葉，以葉為單位記載病情嚴(yán)重度級(jí)別。病情分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)如下。

0級(jí)，無(wú)病斑；1級(jí)，單片葉有病斑3個(gè)以下；3級(jí)，單葉片有病斑4～6個(gè)；5級(jí)，單片葉有病斑7～10個(gè)；7級(jí)，單片葉有病斑11～20個(gè)，部分密集成片；9級(jí)，單片葉病斑密集，占葉面積1/4以上。

計(jì)算公式如下：

病情指數(shù)=■×100%

防治效果=■×62.5%

2 結(jié)果與分析

2.1 40%嘧霉胺懸浮劑對(duì)灰霉菌的室內(nèi)毒力endprint

室內(nèi)毒力測(cè)定結(jié)果（表1）表明，40%嘧霉胺懸浮劑對(duì)灰霉菌具有較高的抑制活性，菌絲生長(zhǎng)抑制的EC50為0.58 μg/mL。對(duì)照處理菌落的菌絲疏松，生長(zhǎng)較快，而藥劑處理的菌絲生長(zhǎng)較慢，菌絲較細(xì)密。多菌靈WP的EC50為2.26 μg/mL，高于40%嘧霉胺懸浮劑。結(jié)果表明，40%嘧霉胺懸浮劑比多菌靈WP對(duì)灰霉菌生長(zhǎng)的抑制效果好。

2.2 40%嘧霉胺懸浮劑對(duì)黃瓜灰霉病的田間防效

40%嘧霉胺懸浮劑對(duì)黃瓜灰霉病的田間防效見(jiàn)表2，從表2中可以看出，各施藥處理對(duì)黃瓜灰霉病均有控制作用。從防治效果看，40%嘧霉胺懸浮劑6.25 g/hm2的效果最好，平均防效為82.44%；對(duì)照藥劑多菌靈WP（CK2）與40%嘧霉胺懸浮劑4.17 g/hm2，平均防效分別為79.39%和78.90%，差異不顯著，但均極顯著高于40%嘧霉胺懸浮劑2.50 g/hm2。40%嘧霉胺懸浮劑2.50 g/hm2處理的平均防效僅為68.03%，效果最差，與其他各施藥處理相比差異均達(dá)極顯著水平。

2.3 40%嘧霉胺懸浮劑對(duì)黃瓜生長(zhǎng)的影響

施藥后5～7 d，40%嘧霉胺懸浮劑2.50 g/hm2和4.17 g/hm2處理，均未對(duì)黃瓜造成影響，而6.25 g/hm2處理，黃瓜葉片邊緣出現(xiàn)輕微失水狀，但對(duì)植株生長(zhǎng)無(wú)影響。田間試驗(yàn)結(jié)果表明，40%嘧霉胺懸浮劑安全施藥量可以達(dá)到6.25 g/hm2。

3 小結(jié)與討論

當(dāng)前防治黃瓜灰霉病的殺菌劑類型較多，如多菌靈和甲基硫菌靈屬于苯并咪唑類；腐霉利、異菌脲和速克靈屬于二甲酰亞胺類；乙霉威屬于N-苯氨基甲酸酯類。灰霉菌遺傳變異快、產(chǎn)孢量大和生態(tài)適應(yīng)強(qiáng)的特點(diǎn)使得灰霉菌對(duì)殺菌劑產(chǎn)生抗藥性及交互抗性的速度快于其他真菌[5]?；颐咕鷮?duì)苯并咪唑類、二甲酰亞胺類、苯氨基甲酸酯類、苯胺基嘧啶類殺菌劑已產(chǎn)生一定程度的抗藥性[6，7]。因此在黃瓜灰霉病防治中應(yīng)科學(xué)合理地輪換使用殺菌劑，避免長(zhǎng)期使用同類藥劑，才能延緩抗藥性的產(chǎn)生。

嘧霉胺的蒸氣壓為2.2×10-3Pa（25 ℃），易揮發(fā)，持久性較差[8]。因此在使用時(shí)要縮短2次用藥的間隔時(shí)間。嘧霉胺既有保護(hù)和治療作用，又兼有內(nèi)吸和熏蒸作用，作用方式全面。在培養(yǎng)條件下，嘧霉胺能夠抑制灰霉菌絲生長(zhǎng)和分化，菌落較小。嘧霉胺作用機(jī)理是抑制真菌的芽管伸長(zhǎng)和菌絲生長(zhǎng)[9]。因此在毒力測(cè)定時(shí)，對(duì)灰霉菌的菌落抑制效果較好，嘧霉胺濃度越高抑制活性越強(qiáng)。40%嘧霉胺懸浮劑EC50為0.58 μg /mL，多菌靈WP的EC50為2.26 μg/mL，表明40%嘧霉胺懸浮劑對(duì)灰霉菌的毒力強(qiáng)于多菌靈WP。

田間防效表明，40%嘧霉胺懸浮劑6.25 g/hm2平均防效為82.44%，高于多菌靈WP （CK2）10 g/hm2和40% 嘧霉胺懸浮劑4.17 g/hm2的防治效果。40%嘧霉胺懸浮劑2.50 g/hm2處理的平均防效為68.03%，顯著低于其他處理，因此建議不使用該劑量。

黃啟良等[10]測(cè)定了嘧霉胺對(duì)山東和河北地區(qū)黃瓜灰霉病的防效，并未發(fā)現(xiàn)藥害反應(yīng)。本研究40%嘧霉胺懸浮劑6.25 g/hm2用量對(duì)黃瓜葉片有輕微藥害反應(yīng)，但對(duì)黃瓜生長(zhǎng)無(wú)影響。建議在生產(chǎn)中應(yīng)用時(shí)，嚴(yán)格控制40%嘧霉胺懸浮劑濃度和劑量。

綜合來(lái)看，40%嘧霉胺對(duì)黃瓜灰霉病具有較好的防治效果，在河南地區(qū)防治黃瓜灰霉病的推薦用量為4.17～6.25 g/hm2。

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