曾怡 史夢(mèng)琪 楊歡 何萍 王有為 杜俊蓉

·論著·

除濕止癢軟膏抗炎及止癢作用研究

曾怡 史夢(mèng)琪 楊歡 何萍 王有為 杜俊蓉

目的 探討除濕止癢軟膏的抗炎及止癢作用。方法 用2，4-二硝基氟苯（DNFB）腹部致敏和背部反復(fù)激發(fā)建立BALB/c小鼠特應(yīng)性皮炎模型。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為正常對(duì)照組（未致敏也未治療）、模型對(duì)照組（致敏但未治療）、氫化可的松乳膏組（致敏+氫化可的松）、除濕止癢軟膏組（致敏+除濕止癢軟膏）。連續(xù)用藥14 d，末次給藥12 h后取背部皮膚，測(cè)定皮膚厚度及質(zhì)量，進(jìn)行HE染色和甲苯胺藍(lán)染色，ELISA法檢測(cè)皮損組織中干擾素（IFN）γ、腫瘤壞死因子（TNF）α、白細(xì)胞介素（IL）-4、IL-5含量。利用磷酸組胺誘發(fā)Hartley豚鼠局部皮膚瘙癢模型，觀察除濕止癢軟膏對(duì)豚鼠致癢閾的影響。結(jié)果 用藥后第15天，與模型對(duì)照組相比，氫化可的松乳膏和除濕止癢軟膏均可明顯減少小鼠的背部皮膚厚度和質(zhì)量（P<0.01），減少淋巴細(xì)胞和肥大細(xì)胞浸潤(rùn)（P<0.01）以及降低皮損組織中IFN-γ、TNF-α、IL-4及IL-5水平（P<0.05或P<0.01）。與正常對(duì)照組相比，氫化可的松乳膏組小鼠背部皮膚厚度和質(zhì)量減?。≒<0.01），除濕止癢軟膏組無(wú)明顯變化。此外，除濕止癢軟膏也可顯著提高豚鼠耐受磷酸組胺的致癢閾（P<0.01）。結(jié)論 除濕止癢軟膏可明顯抑制DNFB引起的小鼠特應(yīng)性皮炎，其抗炎機(jī)制可能與恢復(fù)體內(nèi)Th1/Th2型細(xì)胞因子平衡有關(guān)。除濕止癢軟膏可明顯減輕磷酸組胺所致豚鼠皮膚瘙癢反應(yīng)。

皮炎，特應(yīng)性；抗炎藥（中藥）；止癢藥；組胺；除濕止癢軟膏

作者單位：610041成都，四川大學(xué)華西藥學(xué)院藥理系（曾怡、史夢(mèng)琪、楊歡、何萍、杜俊蓉）；四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院、四川省人民醫(yī)院皮膚病性病研究所（王有為）

目前臨床上治療特應(yīng)性皮炎（atopic dermatitis，AD）以外用糖皮質(zhì)激素和口服抗組胺藥為主，長(zhǎng)期使用不良反應(yīng)明顯。除濕止癢軟膏由蛇床子、苦參、黃連、黃柏、白鮮皮、虎杖、紫花地丁、地膚子、萹蓄、茵陳、蒼術(shù)、花椒、冰片十三味中藥組成，有清熱除濕、祛風(fēng)止癢功效，臨床上已用于治療濕疹［1-2］。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)2，4-二硝基氟苯（DNFB）誘導(dǎo)小鼠AD模型和磷酸組胺誘發(fā)豚鼠局部瘙癢模型，評(píng)價(jià)除濕止癢軟膏的抗炎及止癢作用。

資料與方法

一、材料

1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：Hartley豚鼠24只，雌雄各半，體重（222.6±26.1）g，由成都彭縣養(yǎng)殖場(chǎng)提供，合格證號(hào)0007476。SPF級(jí)8周齡BALB/c雄鼠40只，體重（22.9±1.5）g，由成都達(dá)碩生物科技有限公司提供，合格證號(hào)0003282。

2.實(shí)驗(yàn)藥品：除濕止癢軟膏（規(guī)格0.777 g生藥/g膏，成都明日制藥有限公司，批號(hào)140803）；氫化可的松乳膏（10 g∶10 mg，天津金耀藥業(yè)有限公司，批號(hào) 12041337）；賽庚啶乳膏（10 g∶50 mg，湖南五洲通藥業(yè)有限責(zé)任公司，批號(hào)130630）；DNFB（成都格雷西亞化學(xué)技術(shù)有限公司，批號(hào)D16877），溶于丙酮橄欖油溶液（4∶1）中配成0.15%DNFB溶液；磷酸組胺（成都科龍化工試劑廠，批號(hào)201312）；Na2S·9H2O（成都市科龍化工試劑廠，批號(hào)20130844），脫毛劑配方：8 g Na2S·9H2O用溫水60 ml溶解后，加入40 ml 75%乙醇配制而成。

3.主要試劑及設(shè)備：小鼠IL-5ELISA試劑盒（美國(guó)RB公司），小鼠IL-4、小鼠IFN-γ、小鼠TNF-α ELISA試劑盒（上海西唐生物科技有限公司）；Bradford蛋白濃度測(cè)定試劑盒（上海碧云天生物技術(shù)有限公司）；外徑千分尺（青海量具刃具有限責(zé)任公司），全波長(zhǎng)多功能酶標(biāo)儀（美國(guó)ThermoFisher公司）。

二、小鼠 AD 模型實(shí)驗(yàn)［3-4］

1.實(shí)驗(yàn)分組及小鼠AD模型建立：將40只BALB/c小鼠按體重分為正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、氫化可的松乳膏組、除濕止癢軟膏組，每組10只。實(shí)驗(yàn)前1天均剃除并脫去小鼠腹部毛發(fā)，面積約2 cm×3 cm；第1天，實(shí)驗(yàn)組小鼠均于腹部脫毛處外涂100μl 0.15%DNFB致敏，正常對(duì)照組外涂100 μl丙酮橄欖油溶液；第3天均剃除并脫去小鼠背部毛發(fā)，面積約2 cm×3 cm；第7天，實(shí)驗(yàn)組小鼠于背部脫毛處涂100 μl 0.15%DNFB激發(fā)，正常對(duì)照組外涂100 μl丙酮橄欖油溶液，每周激發(fā)2次，連續(xù)4周。共激發(fā)9次。

2.給藥方案：造模成功24 h后開(kāi)始給藥，給藥時(shí)程為14 d。除濕止癢軟膏每天3次（9：00/15：00/21：00），每次 0.04 g；氫化可的松乳膏每天 2 次（9：00/21：00），每次0.04 g；模型對(duì)照組和正常對(duì)照組同時(shí)給予100 μl生理氯化鈉液，每天3次。用藥第8天給予100 μl 0.15%DNFB進(jìn)行第10次激發(fā)。

3.觀察指標(biāo)：末次給藥12 h后，小鼠斷頸處死并作以下處理：①選取小鼠背部皮膚3個(gè)不同固定部位，用8 mm金屬打孔器打孔，去除皮下脂肪組織后立即用外徑千分尺測(cè)量厚度，分析天平稱重；②背部皮膚標(biāo)本制成10%組織勻漿，ELISA法測(cè)定上清液中 IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-5含量，以 1 g/L 勻漿組織中細(xì)胞因子含量作為相對(duì)細(xì)胞因子含量［5］；③背部皮膚標(biāo)本4%甲醛固定、石蠟包埋、切片，HE染色和甲苯胺藍(lán)染色，高倍鏡（×400）下取10個(gè)HE染色切片無(wú)重疊視野計(jì)數(shù)淋巴細(xì)胞，100倍鏡下取5個(gè)甲苯胺藍(lán)染色切片無(wú)重疊視野計(jì)數(shù)肥大細(xì)胞。

三、局部瘙癢模型實(shí)驗(yàn)［6］

將24只Hartley豚鼠按體重隨機(jī)分為模型對(duì)照組、賽庚啶乳膏組、除濕止癢軟膏組，每組8只。實(shí)驗(yàn)前1天將豚鼠右后足背剪毛并脫毛，面積約1 cm×1 cm，并在脫毛處涂藥1次，0.03 g/只。實(shí)驗(yàn)當(dāng)日將脫毛處皮膚用細(xì)砂紙輕輕擦傷，使之發(fā)紅，但以不出血為度，再給藥1次。10 min后開(kāi)始在創(chuàng)面處滴0.01%磷酸組胺溶液，以后每隔3 min以0.02%、0.03%、0.04%……遞增濃度，每次 30 μl，直至豚鼠回頭舔右后足，以此時(shí)給予的磷酸組胺總量為致癢閾，比較各組致癢閾差異。

四、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

結(jié) 果

一、藥物對(duì)各組小鼠皮膚厚度及質(zhì)量的影響

用藥后第15天，氫化可的松乳膏組皮膚萎縮，皮膚厚度和質(zhì)量均減小，與正常對(duì)照組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。除濕止癢軟膏組小鼠皮膚質(zhì)量和厚度均已恢復(fù)至正常，與正常對(duì)照組相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見(jiàn)表1。

二、藥物對(duì)各組小鼠皮膚組織結(jié)構(gòu)的影響

小鼠AD模型建立后，背部皮膚出現(xiàn)增厚、紅斑、水腫、厚痂（圖1A）。用藥后第7天，模型對(duì)照組部分痂皮脫落，有鱗屑、中度紅斑及水腫（圖1B）；氫化可的松軟膏組背部有輕度紅斑，水腫消去（圖1C）；除濕止癢軟膏組仍有輕度紅斑及水腫，無(wú)明顯痂皮（圖1D）。用藥后第15天，模型對(duì)照組背部皮損程度（圖1F）基本同第7天，HE染色可見(jiàn)表皮突下延，表皮細(xì)胞中度水腫，棘層、顆粒層肥厚，角化過(guò)度伴角化不全；真皮層大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，以淋巴細(xì)胞為主（圖2B），可見(jiàn)肥大細(xì)胞。氫化可的松乳膏組紅斑水腫消失，皮膚變薄皺縮（圖1G），真皮層細(xì)胞層數(shù)減少，與模型對(duì)照相比，淋巴細(xì)胞（圖2C）和肥大細(xì)胞浸潤(rùn)均減輕（P＜0.01）。除濕止癢軟膏組輕度紅斑，水腫消失，表皮增厚不明顯（圖1H），與模型對(duì)照相比，真皮層淋巴細(xì)胞（圖2D）和肥大細(xì)胞浸潤(rùn)均減輕（P＜0.01）。淋巴細(xì)胞和肥大細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果見(jiàn)表1。

三、藥物對(duì)各組小鼠皮損組織勻漿細(xì)胞因子水平的影響

與正常對(duì)照組相比，模型對(duì)照組 IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-5 水平均升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01或P＜0.05）；氫化可的松乳膏和除濕止癢軟膏組4類(lèi)細(xì)胞因子恢復(fù)正常，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。與模型對(duì)照組相比，氫化可的松乳膏和除濕止癢軟膏均可明顯抑制這4類(lèi)細(xì)胞因子水平升高（P＜0.01或P＜0.05），且氫化可的松乳膏對(duì)TNF-α抑制作用強(qiáng)于除濕止癢軟膏（P＜0.05）。見(jiàn)表2。

表1 用藥后第15天對(duì)特應(yīng)性皮炎小鼠皮膚質(zhì)量及厚度、皮損淋巴細(xì)胞及肥大細(xì)胞的影響（±s）

表1 用藥后第15天對(duì)特應(yīng)性皮炎小鼠皮膚質(zhì)量及厚度、皮損淋巴細(xì)胞及肥大細(xì)胞的影響（±s）

注：組間多重比較，a：與正常對(duì)照組相比，P＜0.01；b：與模型對(duì)照組相比，P＜0.01

組別 只數(shù)正常對(duì)照組 10模型對(duì)照組 10氫化可的松乳膏組 10除濕止癢軟膏組 10 F 藥物（P 值）F 區(qū)組（P 值）肥大細(xì)胞（個(gè)/mm2）23.04±1.11 0.677±0.025 128.3±17.2 7.5±0.6 39.06±1.90a 1.073±0.040a 488.6±43.8a 42.9±1.1a 13.52±0.44ab 0.293±0.011ab 205.6±11.4ab 18.7±2.5ab 25.02±1.25b 0.748±0.036b 252.9±13.7ab 22.8±2.5ab 66.040（0.000） 108.189（0.000） 25.763（0.000） 50.808（0.000）0.932（0.660） 0.845（0.626） 0.782（0.684） 1.580（0.160）皮膚質(zhì)量（mg）皮膚厚度（mm）淋巴細(xì)胞（個(gè)/mm2）

表2 用藥后第15天對(duì)特應(yīng)性皮炎小鼠組織勻漿相對(duì)細(xì)胞因子含量的影響（±s） ng/L

表2 用藥后第15天對(duì)特應(yīng)性皮炎小鼠組織勻漿相對(duì)細(xì)胞因子含量的影響（±s） ng/L

注：a：與正常對(duì)照組相比，P ＜ 0.05；b：與正常對(duì)照組相比，P ＜ 0.01；c：與模型對(duì)照組相比，P ＜ 0.01；d：與模型對(duì)照組相比，P ＜ 0.05；e：與氫化可的松乳膏相比，P ＜ 0.05

干擾素γ 腫瘤壞死因子α 白細(xì)胞介素4 白細(xì)胞介素5 22.98±3.39 332.03±52.59 44.48±5.86 10.58±1.58 57.22±9.09a 617.25±48.45b 77.62±5.96b 14.84±1.12a 17.26±2.38c 255.48±64.65c 38.40±10.74d 8.03±1.01c 25.96±2.68d 415.11±49.01de 52.05±2.09c 9.77±0.58c 6.470（0.003） 6.899（0.002） 4.741（0.007） 5.599（0.003）0.806（0.655） 0.911（0.589） 0.560（0.885） 1.052（0.430）組別 只數(shù)正常對(duì)照組 10模型對(duì)照組 10氫化可的松乳膏組 10除濕止癢軟膏組 10 F 藥物（P 值）F 區(qū)組（P 值）

圖1 小鼠特應(yīng)性皮炎模型皮損及用藥后第7、15天各組小鼠皮損情況 1A：建模后小鼠背部出現(xiàn)增厚、潮紅、水腫、厚痂；1B：模型對(duì)照組第7天痂皮脫落，有鱗屑，中度紅斑及水腫；1C：氫化可的松乳膏組第7天小鼠背部有輕度紅斑，水腫消去；1D：除濕止癢軟膏組第7天仍有輕度紅斑及水腫，無(wú)明顯痂皮；1E：正常對(duì)照組第15天；1F：模型對(duì)照組第15天背部皮損程度基本同第7天；1G：氫化可的松乳膏組第15天紅斑水腫消失，皮膚變薄皺縮；1H：除濕止癢軟膏組第15天輕度紅斑，水腫消失，表皮增厚不明顯

圖2 用藥后第15天各組小鼠皮損HE染色（×100） 2A：正常對(duì)照組；2B：模型對(duì)照組表皮增厚明顯，大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)；2C：氫化可的松乳膏組炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)減少；2D：除濕止癢軟膏組炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)減少

四、藥物對(duì)磷酸組胺誘發(fā)豚鼠局部瘙癢的影響

與模型對(duì)照組相比，除濕止癢軟膏和賽庚啶乳膏均可明顯提高豚鼠耐受磷酸組胺的致癢閾（P<0.01或P<0.05）。見(jiàn)表3。

表3 除濕止癢軟膏對(duì)磷酸組胺所致豚鼠瘙癢反應(yīng)的影響（±s）

表3 除濕止癢軟膏對(duì)磷酸組胺所致豚鼠瘙癢反應(yīng)的影響（±s）

注：與模型對(duì)照組相比，a：P<0.05；b：P<0.01

組別 只數(shù)模型對(duì)照組 8賽庚啶乳膏組 8除濕止癢軟膏組 8 F 藥物（P 值）F 區(qū)組（P 值）致癢閾（μg） 涂抹次數(shù)21.3±6.5 2.9±0.5 134.3±50.6a 7.5±1.4a 201.3±44.2b 9.8±1.3b 4.895（0.022） 7.820（0.004）0.374（0.931） 0.379（0.929）

討 論

中醫(yī)認(rèn)為AD是先天稟性不耐而素體熱耐；或后天脾失健運(yùn)或營(yíng)血不足，復(fù)感風(fēng)濕熱邪，風(fēng)燥濕熱郁結(jié)于肌膚而發(fā)?。?］。近年來(lái)，Th1/Th2失衡學(xué)說(shuō)成為該病發(fā)病機(jī)制研究熱點(diǎn)。一般認(rèn)為急性階段以Th2型免疫反應(yīng)為主，細(xì)胞因子如IL-4、IL-5表達(dá)增加，隨著病程發(fā)展，逐漸轉(zhuǎn)以Th1型免疫反應(yīng)為主，且搔抓可誘導(dǎo)這一過(guò)程的轉(zhuǎn)化［8-9］。抗原種類(lèi)，接觸劑量、頻率、劑量和途徑等均可影響Th1/Th2平衡偏倚方向［10］。本研究建立的小鼠AD模型具有潮紅、結(jié)痂和鱗屑、肥厚、苔蘚化、浸潤(rùn)等特點(diǎn)，被認(rèn)為處于亞急性階段。AD模型對(duì)照組皮損組織IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-5 水平均增加，呈現(xiàn) Th1、Th2 混合型變態(tài)反應(yīng)，與已有文獻(xiàn)［4］結(jié)果一致。有文獻(xiàn)［2］報(bào)道，該模型細(xì)胞因子表達(dá)呈Th2優(yōu)勢(shì)型，我們認(rèn)為可能與本實(shí)驗(yàn)中使用的DNFB激發(fā)劑量更大有關(guān)。用藥后第15天后，除濕止癢軟膏和氫化可的松乳膏均可明顯減輕小鼠的皮膚水腫和炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，不同程度恢復(fù)皮損組織中上述4類(lèi)細(xì)胞因子水平，提示其抗炎作用可能與糾正Th1/Th2平衡相關(guān)。與氫化可的松乳膏不同的是，除濕止癢軟膏并未引起皮膚萎縮，且對(duì)TNF-α抑制作用弱于氫化可的松乳膏。對(duì)TNF-α抑制作用的差異可能是兩種藥物治療強(qiáng)度不同的原因之一，其具體機(jī)制有待進(jìn)一步探討。

瘙癢是各類(lèi)皮炎濕疹的一個(gè)重要特征，也是影響患者生活質(zhì)量的關(guān)鍵所在。組胺是最早發(fā)現(xiàn)的瘙癢介質(zhì)之一。在小鼠AD模型中，除濕止癢軟膏可減少皮損組織肥大細(xì)胞浸潤(rùn)，提示該藥還可能抑制組胺釋放。因此，本實(shí)驗(yàn)建立外源性磷酸組胺誘發(fā)豚鼠局部瘙癢模型，結(jié)果證實(shí)除濕止癢軟膏確可顯著抑制磷酸組胺所致豚鼠皮膚的局部瘙癢。

本文結(jié)果表明，除濕止癢軟膏對(duì)DNFB誘導(dǎo)小鼠AD模型及磷酸組胺誘導(dǎo)豚鼠局部瘙癢模型具有良好的治療作用，值得進(jìn)一步分析其抗炎止癢有效成分、考察量效關(guān)系，進(jìn)而優(yōu)化配方及開(kāi)發(fā)新劑型，以發(fā)揮更大的臨床應(yīng)用價(jià)值。

聲明 本研究由成都明日制藥有限公司資助

［1］饒瑛.除濕止癢軟膏治療濕疹療效觀察［J］.中華皮膚科雜志,2010,43（7）:459.

［2］吳曉金,于小兵,沈惠良.除濕止癢軟膏治療陰囊濕疹療效觀察［J］.中華皮膚科雜志,2010,43（7）:496.

［3］李園園,李鄰峰.青鵬軟膏對(duì)小鼠特應(yīng)性皮炎模型的影響及機(jī)制研究［J］.中華皮膚科雜志,2013,46（1）:24-28.

［4］Shah MM,Miyamoto Y,Yamada Y,et al.Orally supplemented Lactobacillus acidophilus strain L-92 inhibits passive and active cutaneous anaphylaxis as well as 2,4-dinitroflurobenzene and mite fecal antigen induced atopic dermatitis-like skin lesions in mice［J］.Microbiol Immunol,2010,54（9）:523-533.

［5］Ayush O,Lee CH,Kim HK,et al.Glutamine suppresses DNFB-induced contact dermatitis by deactivating p38 mitogen-activated protein kinase via induction of MAPK phosphatase-1［J］.J Invest Dermatol,2013,133（3）:723-731.

［6］郭青云,潘成軍,林清,等.復(fù)方黃倍軟膏抗過(guò)敏及止癢作用的實(shí)驗(yàn)研究［J］.解放軍藥學(xué)學(xué)報(bào),2013,29（1）:39-41.

［7］中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)皮膚科專(zhuān)業(yè)委員會(huì).特應(yīng)性皮炎中醫(yī)診療方案專(zhuān)家共識(shí)［J］.中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)雜志,2013,12（1）:60-61.

［8］Leung DY,Boguniewicz M,Howell MD,et al.New insights into atopic dermatitis［J］.J Clin Invest,2004,113（5）:651-657.

［9］Matsushima H,Hayashi S,Shimada S.Skin scratching switches immune responses from Th2 to Th1 type in epicutaneously immunized mice［J］.J Dermatol Sci,2003,32（3）:223-230.

［10］Ulrich P,Grenet O,Bluemel J,et al.Cytokine expression profiles during murine contact allergy:T helper 2 cytokines are expressed irrespective of the type of contact allergen［J］.Arch Toxicol,2001,75（8）:470-479.

·讀者·作者·編者·

本刊2016年重點(diǎn)號(hào)征稿啟事

2016年《中華皮膚科雜志》初步計(jì)劃組織免疫性皮膚病重點(diǎn)號(hào)（第1期），銀屑病重點(diǎn)號(hào)（第4期），性傳播疾病重點(diǎn)號(hào)（第5期），真菌病專(zhuān)刊（第8期），設(shè)述評(píng)、專(zhuān)家論壇、專(zhuān)家筆談、指南與共識(shí)、論著、綜述、病例報(bào)告、來(lái)信、臨床病例診治經(jīng)驗(yàn)及討論等欄目，特向全國(guó)各醫(yī)院皮膚性病科及相關(guān)學(xué)科臨床及科研人員征稿，各欄目文稿要求見(jiàn)本刊稿約。歡迎投稿。

Anti-inflammatory and antipruritic effects ofChushizhiyangointment

Zeng Yi*,Shi Mengqi,Yang Huan,He Ping,Wang Youwei,Du Junrong.*Department of Pharmacology,West China School of Pharmacy,Sichuan University,Chengdu 610041,China

ObjectiveTo explore the anti-inflammatory and antipruritic effects ofChushizhiyangointment in a mouse model.MethodsA total of 40 male 8-week-old BALB/c mice were included in this study,and randomly and equally divided into 4 groups.A mouse model of atopic dermatitis（AD）was established in three groups of mice by repeated application of 2,4-dinitroflurobenzene（DNFB）to shaved abdominal skin for sensitization and to shaved dorsal skin for stimulation.After establishment of the AD model,the three groups were topically treated with sodium chloride physiological solution （model group）,hydrocortisone cream （hydrocortisone group）andChushizhiyangointment（Chushizhiyanggroup）respectively for 14 consecutive days.The remaining group receiving no sensitization or treatment served as the normal control group.All the mice were sacrificed 12 hours after the final treatment,and the dorsal skin of mice was resected followed by the determination of skin thickness and weight as well as hematoxylin-eosin（HE）staining and toluidine blue staining for the counting of leukocytes and mast cells respectively.Moreover,enzyme-linked immunosorbent assay（ELISA）was performed to measure the levels of interferon-gamma（IFN-γ）,tumor necrosis factor alpha（TNF-α）,interleukin 4（IL-4）and IL-5 in dorsal skin lesions.In addition,a local skin itching model was induced by histamine phosphate in Hartley guinea pigs,which was used to explore the effect ofChushizhiyangointment on itch thresholds.ResultsCompared with the model group,both theChushizhiyanggroup and hydrocortisone group showed reduced thickness and weight of dorsal skin in mice （allP<0.01）,numbers of infiltrating lymphocytes and mast cells（allP<0.01）and levels of IFN-γ,TNF-α,IL-4 and IL-5 in skin lesions （P<0.05 or 0.01）on day 15 after the start of treatment.The thickness and weight of dorsal skin in mice were significantly decreased in the hydrocortisone group（P<0.01）,but experienced no significant changes in theChushizhiyanggroup compared with the normal control group.Additionally,Chushizhiyangointment could significantly increase itch thresholds in guinea pigs induced by histamine phosphate（P<0.01）.ConclusionsChushizhiyangointment can significantly inhibit DNFB-induced AD in mice,likely by restoring the balance between Th1 and Th2 type cytokines.Moreover,Chushizhiyangointment could markedly relieve itching induced by histamine phosphate in guinea pigs.

Dermatitis,atopic;Anti-inflammatory drugs （TCD）;Antipruritics;Histamine;Chushizhiyang ointment

s:Wang Youwei,Email:wangyouwei2000@163.com;Du Junrong,Email:dujr_1@163.com

10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2015.08.011

王有為，Email：wangyouwei2000@163.com；杜俊蓉，Email：dujr_1@163.com

2015-02-12）

（本文編輯：吳曉初）