肖　巍

（開封市疾病預(yù)防控制中心，河南開封　475000）

論食品微生物檢驗(yàn)中培養(yǎng)基的質(zhì)量控制

肖巍

（開封市疾病預(yù)防控制中心，河南開封475000）

在食品微生物檢驗(yàn)過程中，由于操作過程相對復(fù)雜，影響食品檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的因素較多，培養(yǎng)基的質(zhì)量在食品微生物檢測中起著決定性的作用。有效的對培養(yǎng)基進(jìn)行質(zhì)量控制，也是提高微生物檢驗(yàn)質(zhì)量的重要環(huán)節(jié)。做好食品微生物檢驗(yàn)培養(yǎng)基的質(zhì)量控制工作，必須從培養(yǎng)基的制備、驗(yàn)收、質(zhì)量控制方法、培養(yǎng)基的性能測試入手，在提高檢驗(yàn)人員水平素質(zhì)的基礎(chǔ)上嚴(yán)格實(shí)施實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量控制措施，保證培養(yǎng)基和試劑的質(zhì)量，真正意義上實(shí)現(xiàn)食品檢驗(yàn)的高質(zhì)量、高水準(zhǔn)目標(biāo)。本文就如何在食品檢測過程中對培養(yǎng)基進(jìn)行有效的質(zhì)量控制作簡要闡述

微生物檢驗(yàn)培養(yǎng)基質(zhì)量控制

培養(yǎng)基是食品微生物檢測實(shí)驗(yàn)室重要檢測試劑之一，其自身質(zhì)量優(yōu)劣、保存是否得當(dāng)、配制使用是否正確、產(chǎn)品性能是否符合標(biāo)準(zhǔn)要求等都直接關(guān)系到分離培養(yǎng)的成敗。培養(yǎng)基的質(zhì)量由基礎(chǔ)成分的質(zhì)量、制備過程的控制、微生物污染的消除、性能測試及包裝和儲(chǔ)存條件等因素決定。供應(yīng)商和制備者應(yīng)確保培養(yǎng)基的理化特性滿足相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的要求。

1　培養(yǎng)基的質(zhì)量保證

1.1證明文件

（1）生產(chǎn)企業(yè)提供的文件生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)提供以下資料：培養(yǎng)基的各種成分、添加成分名稱及產(chǎn)品編號(hào)；批號(hào)；最終PH；儲(chǔ)存信息和有效期；標(biāo)準(zhǔn)要求質(zhì)控報(bào)告；必要的安全和（或）危害數(shù)據(jù)。（2）產(chǎn)品的交貨驗(yàn)收對每批產(chǎn)品應(yīng)記錄接收日期，并檢查產(chǎn)品合格證明、包裝的完整性、產(chǎn)品的有效期、文件的提供，并記錄培養(yǎng)基的名稱、數(shù)量、批號(hào)、保質(zhì)期等，做好登記入庫工作。

1.2貯存要根據(jù)日常的工作需要制定計(jì)劃

（1）脫水合成的培養(yǎng)基，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)保存有效的培養(yǎng)基目錄清單，清單應(yīng)包括容器密封性檢查。（2）即用型培養(yǎng)基應(yīng)嚴(yán)格按照供應(yīng)商提供的貯存條件、有效期和使用方法進(jìn)行保存和使用。（3）實(shí)驗(yàn)室自制的培養(yǎng)基應(yīng)在規(guī)定的環(huán)境中儲(chǔ)存，平板不超過2-4周，瓶裝及試管裝培養(yǎng)基不超過3-6個(gè)月。在使用前應(yīng)觀察是否有顏色變化、蒸發(fā)（脫水）或微生物生長情況，當(dāng)培養(yǎng)基發(fā)生這類變化時(shí)，應(yīng)禁止使用。開封日期、內(nèi)容物的感官檢查等內(nèi)容。

1.3培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)室制備

（1）一般要求正確制備培養(yǎng)基是微生物檢驗(yàn)的最基礎(chǔ)步驟之一，應(yīng)按照配方準(zhǔn)確配置并記錄相關(guān)信息，如；培養(yǎng)基的名稱和類型、制造商、批號(hào)、重量（體積）、PH制備日期、滅菌條件無菌措施、配置日期、人員等，以便溯源。（2）實(shí)驗(yàn)用水實(shí)驗(yàn)用水的電導(dǎo)率在25℃時(shí)不應(yīng)超過25uS/cm，水的微生物污染不應(yīng)超過103CFU/ml。（3）PH的測定和調(diào)整用PH計(jì)測定，必要時(shí)在滅菌前進(jìn)行調(diào)整，滅菌后冷卻至25℃時(shí)測定的PH，允許偏差士0.2%。（4）滅菌要定期用多種方法對高壓鍋的壓力是否達(dá)到要求進(jìn)行測試，以保證滅菌質(zhì)量。每周用嗜熱芽胞桿菌生物監(jiān)測管，每次用化學(xué)指示卡方法來進(jìn)行檢測滅菌效果。（5）平板的制備和儲(chǔ)存皿厚度至少3mm，直徑90mm的平皿通常加18-20m1培養(yǎng)基，培養(yǎng)時(shí)間或培養(yǎng)溫度增加時(shí)，要適當(dāng)增加厚度，凝固后的培養(yǎng)基應(yīng)立即放入密封的袋子中冷藏保存，并做好標(biāo)記，內(nèi)容包括名稱、制備日期和有效期。

2　培養(yǎng)基質(zhì)量控制方法

2.1培養(yǎng)基的采購

購買培養(yǎng)基時(shí)，要盡量選擇通過ISO 9000認(rèn)證的生產(chǎn)廠家。購買到培養(yǎng)基后應(yīng)有相關(guān)工作人員做好驗(yàn)收工作，使用之前先對外觀，批號(hào)，pH值等方而進(jìn)行初步的評估。首先仔細(xì)審核生產(chǎn)廠家提供的培養(yǎng)基的相關(guān)信息，然后專業(yè)檢測人員對培養(yǎng)基進(jìn)行相關(guān)的檢測工作，檢測達(dá)到相關(guān)質(zhì)量要求后的產(chǎn)品方可使用。

2.2培養(yǎng)基的儲(chǔ)存

干粉培養(yǎng)基應(yīng)在陰涼干燥處進(jìn)行儲(chǔ)存，避免陽光直射，應(yīng)在6個(gè)月內(nèi)使用完畢，注意防潮。對儲(chǔ)存中的培養(yǎng)基應(yīng)定期做好常規(guī)檢查，如首次開封的日期、容器密閉情況、內(nèi)容物的外觀等，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基變質(zhì)的跡象，應(yīng)禁止使用。

3　培養(yǎng)基的性能測試方法

（1）生長率定量測試方法將同一稀釋度的目標(biāo)菌分別涂布于測試培養(yǎng)基和參考培養(yǎng)基，經(jīng)培養(yǎng)后，計(jì)算RP，RP=SN/ON

NS：待測培養(yǎng)基平板上得到的菌落總數(shù)。

NO：參考培養(yǎng)基平板上獲得的菌落總數(shù)，應(yīng)≥100cfu

要求：非選擇性培養(yǎng)基上目標(biāo)菌的生長率最低應(yīng)為0.7，該類培養(yǎng)基應(yīng)易于目標(biāo)菌生長；選擇性培養(yǎng)基上目標(biāo)菌的生長率最低應(yīng)為0.l。

（2）生長率半定量測試方法用接種環(huán)在平板上劃線，計(jì)算生長指數(shù)G，每條有菌落生長的劃線記作1分，每個(gè)僅一半的線有菌落生長記作0.5分，沒有菌落生長或生長量少于劃線的一半，則記作0，將該值與已知的測定值或參考培養(yǎng)基的G值相比較，確保變化范圍不超過標(biāo)準(zhǔn)要求。

（3）選擇性定量測試方法為定量評價(jià)培養(yǎng)基的選擇性，應(yīng)按規(guī)定以適當(dāng)器具將適量測試菌株的工作培養(yǎng)物接種至選擇性培養(yǎng)基和參考培養(yǎng)基，計(jì)算選擇因子SF，培養(yǎng)基的選擇性應(yīng)達(dá)到規(guī)定值。

DO：能在參考培養(yǎng)基上生長至少10個(gè)菌落的最高稀釋度。

DS：能在測試培養(yǎng)基上顯示生長的最高稀釋度非目標(biāo)菌在選擇性培養(yǎng)基上的SF至少為2。半定量和定量法中，非目標(biāo)菌應(yīng)部分或全部被抑制。

4　討論

食品安全問題已成為全社會(huì)廣泛關(guān)注的熱點(diǎn)問題，食品檢測機(jī)構(gòu)只有定期對市場上的食品開展風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測和評估工作才能使消費(fèi)者的健康和生命安全得到有效保障，因此食品檢驗(yàn)就成為確保食品安全的重中之重。微生物實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量控制是一項(xiàng)長期、艱苦、細(xì)致而又繁瑣的工作，質(zhì)量控制貫穿于從樣品生成到最終檢驗(yàn)報(bào)告發(fā)出的整個(gè)過程。只有保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性、安全性才能真正意義上實(shí)現(xiàn)民眾對食品安全的期望。

［1］呂蠅凱.NCCLB關(guān)于商品微生物培養(yǎng)基的保證［J］.上海醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志，2010（02）：117-118.

［2］劉楊.提高食品檢驗(yàn)準(zhǔn)確性的控制因素探析［J］.中國新技術(shù)新產(chǎn)品，2012（20）：95.

肖巍（1985—），男，河南開封人，本科，畢業(yè)于平頂山工學(xué)院，微生物檢驗(yàn)技師，現(xiàn)就職于開封市疾病預(yù)防控制中心。